Universidad de San Carlos de Guatemala Facultad de Ciencias Quimicas Y Farmacia

Descargar como pdf o txt
Descargar como pdf o txt
Está en la página 1de 117

UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y FARMACIA

Identificación y cuantificación de los componentes principales del aceite


esencial del flavedo (cáscara) de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus
reticulata (Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina
(Mandarina Dancy) por medio de Cromatografía de Gases acoplada a
Espectrometría de Masas.

JORGE ARTURO MAZARIEGOS MONTERROSO

QUÍMICO

Guatemala, Octubre 2008


2

UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA


FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y FARMACIA

Identificación y cuantificación de los componentes principales del aceite


esencial del flavedo (cáscara) de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus
reticulata (Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina
(Mandarina Dancy) por medio de Cromatografía de Gases acoplada a
Espectrometría de Masas.

INFORME FINAL DE TESIS

Presentado por:

JORGE ARTURO MAZARIEGOS MONTERROSO

Para optar al título de:

QUÍMICO

Guatemala, Octubre 2008


3

JUNTA DIRECTIVA DE LA FACULTAD


DE CIENCIAS QUIMICAS Y FARMACIA

Oscar Cóbar Pinto, Ph.D. Decano

Lic. Pablo Ernesto Oliva Soto Secretario

Licda. Lillian Raquel Irving Antillón, M.A. Vocal I

Licda. Liliana Vides de Urízar Vocal II

Licda. Beatriz Eugenia Batres de Jiménez Vocal III

Br. Andrea Alejandra Alvarado Álvarez Vocal IV

Br. Aníbal Rodrigo Sevillanos Cambronero Vocal V


4

DEDICATORIA

A Dios.
Por derramar tantas bendiciones sobre mí.

A mis Padres.
Jorge Rubén Mazariegos Lizama y Miriam Marissa Monterroso Orozco, por creer
en mí, por su inmenso amor, por su incondicional apoyo y guía durante mi vida.

A mi Abuelita.
Eddy Aurora Pardo, por brindarme su incondicional apoyo y amor.

A mi Hermana y Cuñado.
Cristina y Guillermo, por su amor e incondicional apoyo durante los años de mi
carrera.

A mis queridos amigos.


Carmen Garnica, Esmeralda Orantes, Ellen Aguilar, Rodrigo Sacahuí, Pedro
Ordóñez, Claudia Arreaga y Jorge Torres por su incondicional apoyo durante los
años de la carrera.

A mi amada Martita.
Por su incondicional apoyo en la culminación de este trabajo de investigación.
5

AGRADECIMIENTOS

A la Licda. Diana Pinagel y M. Sc. Silvia Echeverría por su asesoría


durante la elaboración de este trabajo de investigación. Por obsequiarme su
amistad, su confianza, sus conocimientos y experiencia invaluable durante mi
formación profesional.

A la Licda. María del Carmen Arroyo y Licda. Fabiola de Micheo por


brindarme su amistad, confianza y apoyo durante la elaboración de este trabajo
de investigación.

A el M. Sc. Ricardo Velíz por sus consejos y colaboración durante la


elaboración de este trabajo de investigación.

Al Laboratorio de Toxicología de la Facultad de Ciencias Químicas y


Farmacia de la Universidad de San Carlos de Guatemala por su colaboración
durante la elaboración de este trabajo de investigación.

Al Laboratorio de Productos Naturales de la Facultad de Ciencias


Químicas y Farmacia por su apoyo durante la elaboración de este trabajo de
investigación.

A la Unidad de Análisis Instrumental y al Departamento de Química


Orgánica por su apoyo y colaboración durante la elaboración de este trabajo de
investigación.
6

INDICE

I. Resumen. 11
II. Introducción. 12
III. Antecedentes. 14
A. Investigaciones previas de la composición del aceite esencial
de mandarina. 14
B. Mandarinas o Tangerinas. 24
1. Nombre científico. 25
2. Familia. 25
3. Nombre común. 26
4. Descripción botánica. 26
5. Hábitat. 26
6. Agricultura. 26
a. Requerimientos climáticos y edáficos. 26
C. Uso de extractos y de aceites esenciales de la mandarina. 27
1. Usos medicinales. 27
2. Farmacología. 28
3. Composición química. 28
4 Farmacognosia. 29
5. Toxicología. 29
D. Aceites Esenciales. 29
1. Definición. 29
2. Clasificación de los aceites esenciales. 30
3. Distribución y estado natural. 31
4. Componentes principales del aceite esencial de cítricos. 32
a. Generalidades. 32
E. Métodos para la extracción de aceites esenciales. 34
1. Prensado (Expresión). 34
2. Destilación por arrastre con vapor de agua. 34
3. Extracción con disolventes. 35
5. Enflorado. 35
6. Extracción con fluidos supercríticos. 35
F. Cromatografía de Gases. 36
1. Fundamentos y principios básicos. 36
a. Cromatografía gas-sólido (GSC). 36
b. Cromatografía gas-líquido (GLC). 36
2. Instrumentación. 37
a. Gas portador. 37
b. Sistema de inyección de muestra. 37
c. Columnas y sistemas de control de temperatura. 37
d. Detectores. 38
7

i) Detector de ionización de llama . 38


ii) Detector de conductividad térmica. 38
iii) Detector termoiónico. 38
iv) Detector de captura de electrones. 39
v) Detector de emisión atómica. 39
e. Columnas. 39
i) Columnas de relleno. 39
ii) Columnas capilares. 39
f. Fase estacionaria. 40
G. La Espectrometría de Masas (EM) como complemento de la
Cromatografía de Gases (CG). 40
H. Cromatografía de Gases acoplada a Espectrometría de Masas
y su papel en el estudio de aceites esenciales. 40
IV. Justificación. 42
V. Objetivos. 44
VI. Hipótesis. 45
VII. Materiales y Métodos. 46
VIII. Resultados. 54
IX. Discusión de Resultados. 64
X. Conclusiones. 68
XI. Recomendación. 70
XII. Referencias. 71
XIII. Anexos. 74
8

INDICE DE TABLAS

Tabla No. Contenido Página

1 Propiedades fisicoquímicas del aceite esencial


de mandarina italiana determinadas por
Gildemeister y Hoffman. 15
2 Propiedades fisicoquímicas del aceite esencial
de mandarina italiana determinadas por los
laboratorios Fritzsche Brothers, Inc. 15
3 Propiedades fisicoquímicas del aceite esencial
de mandarina brasileña determinadas por los
laboratorios Fritzsche Brothers, Inc. 16
4 Propiedades fisicoquímicas del aceite esencial de
dos variedades de mandarina cultivas en
Florida, Estados Unidos. 17
5 Propiedades físicas del aceite esencial de Limón
(Citrus aurantifolia), Mandarina (Citrus reticulata
Blanco) y Naranja Amarga (Citrus aurantium L.) 20
6 Propiedades químicas del aceite esencial de
Limón (Citrus aurantifolia), Mandarina (Citrus
reticulata Blanco) y Naranja Amarga
(Citrus aurantium L.). 20
7 Rendimiento de extracción promedio del aceite
esencial del flavedo de Citrus reshni (Mandarina
Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común)
y Citrus reticulata Blanco ó Citrus tangerina
(Mandarina Dancy). 54
8 Componentes principales cuantificados en el
aceite esencial del flavedo de Citrus reshni
(Mandarina Cleopatra). 55
9 Componentes principales cuantificados en el
aceite esencial del flavedo de Citrus reticulata
(Mandarina Común). 57
10 Componentes principales cuantificados en el
aceite esencial del flavedo de Citrus reticulata
Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy). 59
11 Componentes principales cuantificados en
Sabor de Mandarina No. 100. 61
9

Tabla No. Contenido Página

12 Componentes traza identificados en el aceite


esencial del flavedo de Citrus reshni
(Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata
(Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco
ó Citrus tangerina (Mandarina Dancy). 63
13 Algunas fases estacionarias comunes en
cromatografía de gases. 76
14 Listado de nombres y estructuras químicas
de los componentes volátiles de los aceites esenciales
presentes en la mandarina. 77
15 Tiempos de retención y algunas propiedades
físicas de los principales componentes del aceite
esencial de mandarina. 90
16 Rendimiento de extracción del aceite esencial del
flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra),
Citrus reticulata (Mandarina común) y Citrus
reticulata Blanco ó Citrus tangerina (Mandarina Dancy). 117
10

INDICE DE FIGURAS

Figura No. Contenido Página


1 Cromatograma del aceite
esencial del flavedo de Citrus reshni
(Mandarina Cleopatra). 56
2 Cromatograma del aceite
esencial del flavedo de Citrus reticulata
(Mandarina Común). 58
3 Cromatograma del aceite
esencial del flavedo de Citrus reticulata.
Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy). 60
4 Cromatograma de la muestra del Sabor
de Mandarina No. 100. 62
5 Aparato para destilación por Arrastre con vapor
de agua Clevenger (hidrodestilación). 74
6 Columna para la obtención de aceites esenciales
tipo clevenger. 75
7 Citrus reshni (Mandarina Cleopatra). 91
8 Citrus reticulata (Mandarina Común). 91
9 Citrus Reticulata Blanco ó Citrus Tangerina
(Mandarina Dancy). 92
11

I. RESUMEN

En Guatemala es limitada la información que existe acerca de


investigaciones sobre la composición química de los aceites esenciales de cítricos,
con esta investigación se caracterizó la composición química del aceite esencial
extraído de las variedades de mandarina Citrus reshni (Mandarina Cleopatra),
Citrus reticulata (Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina
(Mandarina Dancy), variedades de mandarina que se producen en Guatemala.
Para realizar la separación, identificación y cuantificación de los
principales componentes de los aceites esenciales se realizaron análisis mediante
cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas, esta técnica
instrumental permitió establecer que los aceites esenciales poseían al menos 28
componentes, 7 de los cuales se encontraban presentes en las tres variedades de
mandarina investigadas.
Las tres variedades de mandarina presentan altas concentraciones
relativas del hidrocarburo monoterpénico limoneno seguido del γ-terpinoleno y
en menor concentración relativa, el α-terpineol y β-pineno.
La cromatografía de gases acoplada a la espectrometría de masas permitió
establecer también los tiempos de retención, así como la concentración relativa
para cada uno de los componentes y más importante aún, esta técnica
instrumental permitió identificar a cada uno de los componentes principales
presentes en cada variedad, incluso los que se encontraban a niveles traza, tal es
el caso del acetato 9-decenílico, el sabineno, el α-terpineno, el 1-octanol, el
Z-citral y el (+)-2-careno. La identificación de cada componente se realizó
mediante la comparación del espectro de masas obtenido experimentalmente
para cada componente contra el espectro de masas de referencia de la base de
datos espectral Wiley275 (ver anexos 5 al 16 y 20 al 41), estableciéndose de esa
manera la identidad y concentración relativa de los componentes presentes en las
variedades de mandarina investigadas.
12

II. INTRODUCCIÓN

Los diferentes microclimas y suelos de Guatemala hacen posible una


extraordinaria biodiversidad de productos de origen vegetal de los cuales pocos
son explotados y una gran cantidad no ha sido descubierta. Un grupo particular
de productos o metabolitos son los aceites esenciales, producidos por algunas
plantas, entre éstas, la familia de las rutáceas se caracteriza por llevar a cabo la
producción biosintética de estos metabolitos que son substancias olorosas que,
por regla general, se consideran como productos biosintetizados por la ruta de la
acetilcoenzima a través de un intermediario denominado ácido mevalónico.
La familia de las rutáceas lleva a cabo la producción de aceites esenciales
tanto en frutos, hojas, flores, corteza y raíces, pero la concentración de los
componentes del aceite esencial puede variar dependiendo de la parte de la
planta (1). Los aceites esenciales se extraen de los tejidos en los que se
desarrollan y la biosíntesis de estas sustancias se encuentra relacionada
estrechamente con el metabolismo, la fertilización y protección contra enemigos
naturales, siendo también utilizados por el hombre en múltiples formas. Por
ejemplo, los aceites esenciales de las flores de jazmín, clavel y rosas confieren
olores agradables a perfumes, jabones, desodorantes, cosméticos e incienso y el
aceite esencial de citronela es un ingrediente corriente en jabones y perfumes (1).
En Guatemala se cultivan algunas variedades de mandarina, esto
representa una gran oportunidad para nuestro país en el mercado de los
productos forestales no maderables como: aceites esenciales y oleorresinas,
gomas y resinas, colorantes, pigmentos y tintas naturales, hierbas y especias,
plantas medicinales y fitofarmacéuticos; no obstante, estas variedades de
mandarina no son aprovechadas industrialmente. Dentro de éstas se encuentran
las variedades de mandarina Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata
(Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina
Dancy), las cuales se adaptan a las condiciones agroecológicas del departamento
13

de Suchitepéquez. Recientemente del flavedo de la mandarina Citrus reticulata


Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy) se ha extraído el aceite esencial para
efectuar pruebas fitofarmacéuticas, comprobando que este aceite esencial
presentaba capacidad inhibitoria hacia el crecimiento de bacterias tales como:
Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa,
Helycobacter pilori y Salmonella que resultan ser patógenas para el hombre (13,21).
Los aceites esenciales cítricos han sido estudiados (naranja, pomelo,
limón, mandarina, etc.) y se ha determinado su composición química, lo cual ha
permitido establecer usos y valor comercial de los mismos, convirtiendo a los
aceites esenciales cítricos en el sector más grande de la producción mundial de
aceites esenciales. La alta concentración de compuestos como d-limoneno,
citronelal, linalool y citral hacen que estos aceites sean muy atractivos para la
industria del aroma y sabor. La mandarina Cleopatra, Común y Dancy dentro
de su clasificación taxonómica son cítricos, sin embargo, es limitada la
información que se ha publicado acerca de las mismas, tales como aspectos
agronómicos, composición química, usos industriales, etc. A diferencia de
Guatemala, en otros países la industria de los aceites esenciales está muy
desarrollada y encuentra gran aplicación en la medicina, la industria cosmética,
de alimentos y de variados productos obtenidos mediante la industria química
(19).
Sin embargo, Guatemala a pesar de su potencial en biodiversidad es un
gran importador de este tipo de cítricos. Este trabajo de investigación permitió
determinar cuales son los principales componentes del aceite esencial del flavedo
de las variedades de mandarina Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus
reticulata (Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina
(Mandarina Dancy) por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de
masas (CG-EM), lo cual permitió posteriormente mediante estudios
complementarios determinar la calidad de los mismos, el valor comercial y sus
posibles usos industriales.
14

III. ANTECEDENTES

A. INVESTIGACIONES PREVIAS REFERENTES A LA COMPOSICIÓN


QUÍMICA DEL ACEITE ESENCIAL DE LA MANDARINA.
El primer trabajo del que se tiene conocimiento fue realizado por
Gildemeister y Stephan en 1897, el estudio consistió en determinar e identificar el
componente principal del aceite esencial de mandarina italiana, su investigación
concluyo que efectivamente el d-limoneno era el componente principal. La
identificación consistió en la preparación de un derivado bromado que poseía un
punto de fusión con los valores siguientes, 104-105 oC, de acuerdo al intervalo de
fusión se pudo sustentar la pureza de la sustancia derivada del d-limoneno y así
corroborar su identidad indirectamente (3).
Walbaum descubre que el N-Metilantranilato de metilo es el constituyente
más importante del aceite esencial de la mandarina italiana, estableciendo que
menos del 1 % del éster esta presente en el aceite esencial y que es el responsable
de proporcionarle su peculiar aroma al aceite esencial de mandarina italiana (4).
Durante las primeras tres décadas del siglo 20 se establece una
metodología completa para la clasificación de las variedades de mandarina que
existían, esta metodología estableció cuales eran los distintos patrones que se
cultivaban a nivel mundial, dando esto lugar a la caracterización de las
variedades de mandarina y a sus aceites esenciales a nivel mundial (5,6,7).
Así mismo en el año de 1934, Nelson realizó un estudio de la composición
química del aceite esencial de distintas variedades de mandarina que se
cultivaban en Florida, Estados Unidos. Nelson extrae los aceites esenciales al
comprimir el flavedo (cáscara), su estudio determina que variedades similares
de mandarina poseían aceites esenciales con diferencias en su composición
química.
Concluyó también que la razón principal de las diferencias en cuanto a
composición química se debía a la calidad del suelo donde se cultivaban las
15

variedades de mandarina así como también a las diferencias climáticas presentes


en la localidad de cultivo (8).
Gildemeister y Hoffman en 1940 realizaron un estudio de las propiedades
fisicoquímicas del aceite esencial de mandarina italiana determinando las
siguientes propiedades:

Tabla No. 1. Propiedades fisicoquímicas del aceite esencial de mandarina


italiana determinadas por Gildemeister y Hoffman.
Parámetro Valor calculado
Gravedad específica a 15º/15º 0.854 a 0.859
Rotación óptica 65º 0’ a +75º 0’, usualmente no menor a +70º 0’
Indice de refracción a 20 ºC 1.475 a 1.478
pH 2.7
Índice de Esterificación 5.0 a 11.0; en algunos casos mayor a 18.7.
Residuo de evaporación 2.4 a 3.5 %.
Solubilidad Soluble en alcohol al 90 %, presentando
turbiedad.
Fuente: Die Atherischen Ole. 3d. Ed. Vol. III

Análogo a este estudio los laboratorios Fritzsche Brothers, Inc. de New


York establecen también las propiedades fisicoquímicas del aceite esencial
extraído de mandarina italiana, siendo los siguientes.

Tabla No. 2. Propiedades fisicoquímicas del aceite esencial de mandarina


italiana determinadas por los laboratorios Fritzsche Brothers, Inc.
Parámetro Valor calculado
Gravedad específica a 15º/15º 0.855 a 0.857
Rotación óptica a temperatura 69º 36’ a +73º 15’
ambiente
Índice de refracción a 20 ºC 1.4750 a 1.4759
Índice de Esterificación 7.5 a 8.8
Residuo de evaporación 2.4 a 3.2 %.
Solubilidad Completamente insoluble en alcohol al 90%.
Color Amarillento
Fuente: Die Atherischen Ole. 3d. Ed. Vol. III
16

Durante los años de la Segunda Guerra Mundial el aceite esencial de


mandarina proveniente de Italia no estaba disponible, Brazil entonces comienza
a exportar de manera limitada su producción de aceite esencial de mandarina a
los Estados Unidos, siendo analizados los embarques de aceite esencial de
mandarina brasileña por los laboratorios Fritzsche Brothers Inc. de New York,
establecen los siguientes parámetros de calidad para el aceite esencial de
mandarina brasileña.

Tabla No. 3. Propiedades fisicoquímicas del aceite esencial de mandarina


brasileña determinadas por los laboratorios Fritzsche Brothers, Inc.
Parámetro Valor calculado
Gravedad específica a 15º/15º 0.854 a 0.858
Rotación óptica a temperatura 63º 55’ a +74º 42’
ambiente
Índice de refracción a 20 ºC 1.4745 a 1.4763
Contenido de ésteres, calculado 1.5 a 3.5 %
como Acetato de Linalílo.
Contenido de Aldehído, 0.4 a 1.5 %
calculado como aldehído
decílico (Método de Clorhidrato
de hidroxilamina).
Residuo de evaporación 3.4 a 4.7 %.
Solubilidad Completamente insoluble en alcohol al 90%.
Color Verde
Fuente: Die Atherischen Ole. 3d. Ed. Vol. III

Los laboratorios Fritzsche Brothers realizan también una comparación


entre el aceite esencial extraído de mandarina italiana y brasileña, descubriendo
que el aceite esencial extraído de la mandarina italiana poseía un color, olor y
sabor de mejor calidad que el aceite esencial extraído de la mandarina brasileña,
debiéndose esto a la presencia del N-metilantranilato de metilo. Nelson realiza
un segundo estudio en 1934, en su investigación compara la mandarina italiana
con mandarina cultivada en Florida, Estados Unidos, y determina que las
17

diferencias se deben a la presencia del ácido metilantranílico en la mandarina


italiana, siendo este componente el responsable de impartirle una mayor
fluorescencia y olor al aceite esencial de la mandarina cultivada en Sicilia, Italia.
Nelson confirma la existencia de d-limoneno en el aceite esencial de
mandarina italiana como lo habían descubierto Gildemeister y Stephan en 1897,
la diferencia radicaba en que Nelson aísla al d-limoneno y establece de manera
experimental un punto de ebullición para este compuesto, 175 ºC - 177 ºC (8).
En 1948, Kesterson y McDuff investigan dos tipos de aceites esenciales
extraídos de dos variedades distintas de mandarina, las mandarinas eran
cultivadas en Florida, Estados Unidos. Kesterson y McDuff realizan la
extracción de los aceites esenciales variando el método de obtención, para ello al
flavedo de una variedad de mandarina le realizan compresión en frío y para la
otra realizan una destilación por arrastre con vapor de agua, de su estudio
derivan los siguientes resultados:

Tabla No.4. Propiedades fisicoquímicas del aceite esencial de dos variedades


de mandarina cultivas en Florida, Estados Unidos.
Parámetro Valor calculado para Valor calculado para el
el aceite esencial aceite esencial obtenido
obtenido por mediante destilación
compresión del por arrastre con vapor
flavedo en frío de agua.
Gravedad específica a 25º/25º 0.856 0.8407
Rotación óptica a 25º C +91.18º +93.67º
Rotación óptica del 10% del +92.68º No determinado
producto destilado.
Rotación óptica del 10% del +92.68º No determinado
producto destilado.
Índice de Refracción a 20 º C 1.4734 1.4720
Rotación óptica del 10% del +92.68º No determinado
producto destilado.
Índice de Refracción a 20 º C 1.4734 1.4720
Contenido de ésteres 0.34 % 0.25 %
18

Parámetro Valor calculado para Valor calculado para el


el aceite esencial aceite esencial obtenido
obtenido por mediante destilación
compresión del por arrastre con vapor
flavedo en frío de agua.
Índice de refracción a 20 º C del 1.4711 No determinado
10% destilado.
Contenido de aldehídos, 1.08 % 1.24 %
calculado como aldehído
decílico.
Residuo de Evaporación 4.53 % 0.20 %
Fuente: Method and Seeker and Kirby. 1932. U.S. Dept. Agr. Tech. Bull. No. 241. Pp. 30.

Así mismo Nelson investigador de American Perfumer en 1934, estudia la


química de la mandarina Dancy que se cultivaba en Florida, identifica los
siguientes compuestos como constituyentes principales del aceite esencial de esta
variedad:
d-limoneno, constituyente principal del aceite esencial con un porcentaje
cercano al 95.75 %, estableciendo también la rotación óptica del d-limoneno puro
en un valor igual a +94º 30’.
Aldehído octílico, el cual separa como compuesto de bisulfito e identifica
como oximas lo que resulta en un punto de fusión experimental entre 57-58 ºC.
Establece la presencia del aldehído octílico realizando una oxidación del
aldehído a ácido octílico con plata y analizando las sales formadas.
Aldehído decílico, el cual aísla como compuestos de bisulfito, identificado
como una oxima con un intervalo de fusión entre 66-67 ºC. Establece la
presencia de aldehído decílico oxidándolo a ácido decílico con plata y
analizando las sales formadas (8).
Nelson y Mottern establecen que el aceite esencial de mandarina Dancy
posee menor concentración de aldehído octílico y decílico que el aceite esencial
de toronja que se obtiene de las variedades cultivadas en Florida (9).
Linalool y citronelol, identificados como feniluretanos, para el
feniluretano derivado del linalool se obtuvo un intervalo de fusión igual a
19

61 º - 62ºC. El linalol puro se trato con ácido sulfúrico al 5%, resultando esto en la
formación de un hidrato terpenico con intervalo de fusión igual a
116 º - 117 º C.
Goldsworthy y Robinson investigan la identidad de una sustancia de color
amarillo que se formaba en los aceites esenciales almacenados durante algún
tiempo a una temperatura de 4º C, estos cristales de color amarillo se habían
separado principalmente del aceite esencial extraído de las variedades de
mandarina cultivadas en Florida, Nelson la llamo tangeritina, pero luego de las
investigaciones de Goldsworthy y Robinson se determino que la identidad de la
sustancia era la 3,5,6,7,4’-pentametoxiflavona con un punto de fusión
experimental de 154 º C (10).
En 1982, Leonor R. de Vottero realiza un estudio de los componentes del
aceite esencial de Limón (Citrus aurantifolia), Mandarina (Citrus reticulata Blanco)
y Naranja Amarga (Citrus aurantium L.). Su investigación determino las
siguientes propiedades químicas de los aceites esenciales extraídos: a) contenido
de aldehídos expresados como citral (aceite esencial de Limón) y como decanal
(aceites esenciales de cítricos restantes); b) contenido de ésteres; c) índice de
ácido; d) contenido de alcoholes.
20

Tabla No. 5 Propiedades físicas del aceite esencial de Limón (Citrus


aurantifolia), Mandarina (Citrus reticulata Blanco) y Naranja Amarga (Citrus
aurantium L.)
Tipo de Cítrico
Propiedades físicas Limón Mandarina Naranja
Peso específico 20 oC 0.8589 0.8560 0.8460

Rotación óptica 20 oC +62.3º +73.6º +96.0º


Ind. Refracción 20 oC 1.4742 1.4765 1.4738
Residuo evap. % 3.15 % 4.95 % 2.35 %
Sol. En alcohol al 95 % Soluble Soluble Soluble
Densidad del 10% destilado 20 oC 1.4718 1.4740 1.4718
Rot. óptica del 10 % del destilado +67.3º +74.7º +96.8º
Giacomo, A. Di. Retamar J.A. 1982. Aceites esenciales de Especies Vegetales, Diversidad de sus
Productos Químicos. Vol. I. IPNAYS Co. Argentina. Pp. 154.

Tabla No. 6 Propiedades químicas del aceite esencial de Limón (Citrus


aurantifolia), Mandarina (Citrus reticulata Blanco) y Naranja Amarga (Citrus
aurantium L.)
Tipo de Cítrico
Propiedades químicas Limón Mandarina Naranja
Aldehídos, como citral (aceite esencial de 2.63 1.21 1.50
limón) como decanal (aceite esencial de
mandarina y naranja amarga).

Indice de acidez 1.81 1.68 1.42


Indice de ésteres No 5.60 2.07
determinado
Porcentaje de ésteres 3.20 1.96 0.73
Porcentaje de Alcoholes 1.20 11.86 11.68
Giacomo, A. Di. Retamar J.A. 1982. Aceites esenciales de Especies Vegetales, Diversidad de sus
Productos Químicos. Vol. I. IPNAYS Co. Argentina. Pp. 154.
21

Para determinar la fracción de hidrocarburos monoterpenicos Retamar y


Vottero realizan un tratamiento con sodio metálico y redestilando a presión
reducida el aceite esencial de limón, determinaron luego su composición
porcentual por cromatografía gaseosa, obtienen los siguientes resultados
porcentuales: α-pineno 2.7%, β-pineno 10.1%, sabineno 1.2%, mirceno 1.8%,
limoneno 73.7%, γ-terpineno 9.7%, p-cimeno (11).
Luego de haber realizado el análisis del aceite esencial extraído del
flavedo de limón, mandarina y naranja amarga Retamar y Vottero realizan la
identificación de los componentes principales de petitgrains de las hojas de
Limón, Mandarina y Naranja amarga mediante cromatografía de gases, los
resultados que obtuvieron son los siguientes:

a) Limón. Citrus Aurantifolia.


Componentes identificados: α-pineno, β-pineno, mirceno, limoneno,
p-cimeno, citronelal, linalol, neral, α-terpineol, geranial, acetato de geranilo,
citronelol, geraniol.

b) Mandarina. Citrus Aurantifolia Citrus reticulata Blanco.


Componentes identificados: α-pineno, β-pineno, mirceno, limoneno,
p-cimeno, γ-terpineno, linalol, acetato de linalilo, α-terpineol, citronelol, acetato
de geranilo, N-metilantranilato de metilo.

c) Naranja amarga. Citrus aurantium L.


Componentes identificados: α-pineno, β-pineno, mirceno, limoneno,
aldehído octílico, p-cimeno, γ-terpineno, linalol, acetato de linalilo, α-terpineol,
acetato de citronelilo, acetato de terpinilo, acetato de geranilo, nerol, geraniol
(12).
22

Un estudio mas reciente sobre la investigación de la composición de los


aceites esenciales de cítricos y aplicaciones lo plantea Bergonzelli et. al. en 2003.
En su estudio sobre la caracterización de los componentes del aceite
esencial de cítricos establece que el componente mayoritario de algunos cítricos
como la Lima, el Limón y la Toronja es el d-limoneno, también encuentra
pequeños porcentajes de monoterpenos como el α-pineno, entre otros. La
identificación del componente principal de estos cítricos lo llevo a cabo mediante
cromatografía de gases, su estudio determino que el d-limoneno presentaba una
gran capacidad inhibitoria de crecimiento bacteriano en los alimentos,
principalmente sobre las bacterias gram (+), también establece el α-pineno puede
inhibir el crecimiento de Helicobacter pylori que es asociado con gastritis severas;
además de incrementar la capacidad de conservación del benzoato de sodio en
los alimentos (13).
Los aceites esenciales de cítricos son de interés universal, y en particular
en Argentina, primer productor mundial de aceite esencial de Limón (Citrus
limonum), por sus numerosas aplicaciones en productos alimenticios. Viturro de
Galli, en 2004 realiza la evaluación de la calidad del aceite esencial obtenido
mediante prensado en frío del flavedo de Citrus Limonum (Limón), Citrus
reticulata blanco (Mandarina), Citrus sinensis (Naranja) y Citrus paradisi (Pomelo
blanco y rosado). Estudia la composición de cada aceite esencial mediante
cromatografía gaseosa capilar acoplada a espectrometría de masas, identificando
el 97% de los compuestos constituyentes. El aceite esencial extraído del flavedo
de la mandarina presento altos contenidos de citral, decanal y undecanal así
como un bajo porcentaje de γ-terpineno. Determina además de los componentes
comunes, el α-tuyeno (0.56%), generalmente no informado, así como
sesquiterpenos tales como el germacreno D, β-bisaboleno, (E)-α-farnesano y
perilaldehído. El aceite esencial extraído del flavedo de Citrus paradisi (Pomelo
blanco y rosado) sin desecar presentaron porcentajes levemente superiores de
aldehídos y menores de limoneno que el descerado. Viturro de Galli concluye
23

que en general la mayoría de los aceites esenciales extraídos mediante prensado


en frío del flavedo presentan bajos niveles de α-pineno, β-pineno, sabineno y
terpinoleno (14).
Es importante reconocer que la información publicada acerca de la
composición química del aceite esencial extraído del flavedo de la mandarina es
limitada a nivel internacional y nacional, con base en este hecho se puede
mencionar cuales son los componentes de Citrus sinensis (Naranja) y Citrus
Swinglea glutinosa (Limón) así como los porcentajes encontrados para cada uno
de esos componentes, esto con el fin de establecer parámetros de comparación
entre los aceites esenciales ya estudiados y los de esta investigación. Yanez, en
2007 estudia el aceite esencial extraído del flavedo de Citrus sinensis (Naranja,
variedad Valenciana) mediante hidrodestilación, establece mediante
cromatografía de gases de alta resolución que el componente volátil de mayor
porcentaje era el monoterpeno oxigenado limoneno con un 90.93%. Determina
también la presencia de monoterpenos oxigenados tales como el
trans-dihidrocarvona (1.78%), de fórmula molecular C10H14O2, así como también
porcentajes menores de trans-p-mentano (1.66%), canfeno (1.62%), p-menta-1,8-
dieno (0.69%), dihidromircenol (0.45%), y el isocitroneleno (0.43%) (15).
Arrazola, en 2007 realiza la caracterización del aceite esencial de la corteza
del Citrus Swinglea glutinosa (Limón) por cromatografía de gases acoplada a
espectrometría de masas. El análisis de los componentes volátiles permitió la
identificación de 14 componentes dentro de los cuales se destacaron por su
abundancia los siguientes: β-cubebeno (26.48-28.74%), β-pineno (4.44-6.67%),
elixeno (10.13-11.03%), β-cariofileno (6.30-9.55%), β-felandreno (5.99-7.86%),
α-pineno (4.44-6.67%), d-limoneno (4.45-5.38%) y anozol (1.45-4.38%) (16).
24

B. MANDARINAS O TANGERINAS.
Las mandarinas o tangerinas se conocen en inglés como mandarins o
tangerins, japonés como mikanen, en la India como suntura o sangtra, en italiano
como mandarino, en Tailandia como som khiep wan, y en francés como mandarine
(17).
Las mandarinas son claramente el principal cítrico en Asia y son también
importantes en otras partes del mundo. Las características de las mandarinas
son muy variables y muchas variedades se consideran frutos exóticos. Las
mandarinas se caracterizan por tener una corteza suelta y fácil de pelar, un
núcleo abierto y un color naranja más intenso que el de la mayoría de los otros
cítricos. El sabor de las mandarinas es también característico y más intenso que
el de la mayoría de las variedades de cítricos. A nivel mundial, las mandarinas
son el cítrico más importante después de las naranjas y son más resistentes al frío
que otros cítricos, pero se pueden producir severos daños al fruto por
congelación debido a la característica holgura de la cáscara. La mandarina
Satsuma sufre daños por congelación alrededor de los 8 oC bajo cero, mientras
que otras variedades de mandarinas únicamente soportan temperaturas de
alrededor de 5 a 6 oC bajo cero, que son, en todo caso, temperaturas mas bajas
que las que soportan otros cítricos. Las altas temperaturas durante la última
parte de la temporada dan lugar a un zumo suave, con una acidez más baja (17).
En Japón, se procesa alrededor del 15% de la cosecha de mandarinas, pero
en otros países el zumo de mandarina tiene menor importancia y se utiliza
principalmente para mejorar el color en zumos de naranja cuyo color no es
suficientemente intenso. Un ejemplo de esto es que en los Estados Unidos se
añade hasta un 10% de zumo de mandarina al zumo de naranja para mejorar sus
condiciones organolépticas (18).
En Guatemala la mandarina se ha convertido en una de las frutas que
goza de la preferencia de los guatemaltecos por su sabor y color. Según un
estudio de la empresa Sistemas de Información de Mercados dedicada al análisis
25

estadístico, los habitantes de la región metropolitana son los que más consumen
el fruto con un 33.20%, mientras que en la región norte el consumo es de 25.10%
y en Petén, territorio con condiciones ideales para el cultivo de esta fruta, se
consume el 1.4% (19).
La empresa Sistemas de Información de Mercados basó el resultado en
una muestra de 303 mil 307 hogares a lo largo y ancho del país. Las cifras
indican que de este total, el 47% de la muestra prefiere comprar las mandarinas
en los mercados o plazas, el 30% la obtiene directamente de sus cultivos,
mientras que 12% las adquiere en casas particulares (personas que tienen algún
puesto de venta), otro 10.7% la compra en tiendas de barrio y 1.3% la adquiere en
supermercados. Datos del Proyecto de Desarrollo de la Fruticultura y
Agroindustria (PROFRUTA) del Ministerio de Agricultura (MAGA), argumentan
que actualmente se siembra en 450 hectáreas en diferentes zonas del país. Según
el Proyecto de Desarrollo de la Fruticultura y Agroindustria (PROFRUTA), existe
un mercado creciente tanto a nivel nacional como centroamericano, y sin
importar que Guatemala también importa el fruto, se considera una buena
opción para la diversificación agrícola. De acuerdo con información del Banco
de Guatemala las importaciones a noviembre de 2004 sumaron 211 mil 991
kilogramos provenientes de Estados Unidos, Chile, Perú, El Salvador y España,
mientras tanto se exportó un total de 32 mil 136 kilogramos hacia Honduras y El
Salvador ese mismo año (19). A continuación se describen las variedades de
mandarina que se cultivan en el país y que se seleccionaron para realizar el
estudio de sus respectivos aceites esenciales:

1. Nombre científico: Citrus reshni, Citrus reticulata y Citrus reticulata Blanco o


Citrus tangerina (20).

2. Familia: Rutáceas.
26

3. Nombre común: Mandarina Cleopatra, Mandarina común y Mandarina


Dancy.

4. Descripción botánica.
Son árboles pequeños, hojas unifoliadas, pecíolos con pequeñas alas y
articulados con la vaina de la hoja; las flores son de color blanca, simples y
ubicadas en las axilas de las hojas, ovario generalmente de 10 a 14 partes; el fruto
es un tipo especial de baya (hesperidio), las semillas pueden ser
monoembriónicas y poliembriónicas; la raíz pivotante con muchas raíces
secundarias (21).

5. Hábitat.
Nativos del sudeste asiático; ampliamente cultivado en forma comercial
en los trópicos y subtrópicos de ambos hemisferios. En Guatemala se cultiva de
forma comercial en Escuintla y Suchitepéquez (21).

6. Agricultura.

a) Requerimientos climáticos y edáficos.


En el cultivo de Mandarina, la temperatura es el factor climático limitante
que afecta el período comprendido entre la floración y la cosecha, la calidad del
fruto y la adaptación de cada una de las variedades. Los cítricos necesitan de
unos 1,200 milímetros de lluvia por año, sin embargo precipitaciones mayores no
son problema siempre que haya un buen drenaje del suelo. Precipitaciones bajas
afectan el cultivo, en esos casos el riego es fundamental como complemento de
las necesidades hídricas del cultivo. La humedad relativa influye sobre la
calidad de la fruta de modo que la mandarina en regiones donde la humedad
relativa es alta tiende a tener cáscara delgada y suave, mayor cantidad de jugo y
27

de mejor calidad pero la baja humedad favorece una mejor coloración de la fruta
(21).
El rango adecuado de humedad relativa puede considerarse entre 60 y
70%. Fuertes vientos provocan caída de frutos, deshidratación, roturas de ramas,
caída de flores, lo cual hace necesario seleccionar bien el terreno de siembra,
localizándolo en áreas con protección natural o el establecimiento de barreras
rompevientos desde la siembra del cultivo. Las altitudes aptas para el cultivo de
mandarina oscilan entre los 400 a l300msnm. En este amplio rango hay que
seleccionar la variedad más adecuada para cada zona. Los cítricos se adaptan a
una gran diversidad de suelos, la profundidad es muy importante, ya que la
parte activa del sistema radicular puede llegar hasta una profundidad de
1.5 metros, además el buen drenaje es muy importante para la productividad del
cultivo prefiriéndose suelos con pH entre 5.5 a 7.0 (22).

C. USOS DE EXTRACTOS Y DE ACEITES ESENCIALES DE LA


MANDARINA.

1. Usos medicinales.
Las infusiones de las hojas se pueden usar para tratar infecciones
digestivas (cólico, dispepsia, gastralgia, indigestión, hipo, nausea), respiratorias
(asma, bronquitis, gripe, resfrío, tos, tosferina), nerviosas (cefalea,
desvanecimientos, epilepsia, excitación nerviosa, insomnio, palpitaciones),
cardiacas y urinarias, hipertensión y fiebre. Las flores en jarabe o infusión se usan
para tratar afecciones nerviosas (excitación, insomnio). La tintura del epicardio
se usa para afecciones nerviosas. El jugo de la mandarina también puede
utilizarse para tratar afecciones digestivas (diarrea, flatulencia, gastritis, tifoidea)
y respiratorias (catarro, inflamación de la garganta, fiebre, resfrió, tos) y
reumatismo. La decocción de cáscaras se usa para aliviar la flatulencia. El aceite
28

se usa en el tratamiento de bronquitis crónica, ya que no irrita los riñones y tiene


buen sabor (21).
El jugo de la mandarina también puede utilizarse como tratamiento tópico
de heridas, magulladuras, raspones, úlceras, tumores; en fricciones se usa para
tratar reumatismo; la cáscara o corteza machacadas se aplican en cataplasma
para tratar raspones y magulladuras, hemorroides y erisipela; con las flores se
prepara un ungüento para afecciones de la piel (21).

2. Farmacología.
Estudios antibacterianos demuestran que el aceite esencial de mandarina
es activo contra Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus subtilis, Pseudomonas
aeruginosa, Helicobacter pilori y Salmonella. El aceite esencial de hojas tiene
actividad fungicida contra Colletotrichum acutatum causante de la caída
prematura del fruto. Estudios farmacológicos demuestran que la decocción del
fruto tiene actividad antihemorragica sobre el sistema gastrointestinal, muestra
efecto de relajación sobre el útero de rata y efecto espasmolítico de ileon de
cobayo (21).
Las flores tienen actividad espasmolítica, el epicardio del fruto es un
tónico amargo; ambos aumentan la contractibilidad cardiaca, mejoran la
circulación coronaria y el flujo de sangre cerebral e inhiben las contracciones del
músculo liso intestinal.

3. Composición química.
Toda la planta contiene aceite esencial y principios amargos (flavonoides),
las hojas maduras pueden contener alcaloides, taninos y monoterpenos. Las
flores contienen además glucósidos y cumarinas. La el flavedo (cáscara) del
fruto contiene α-pineno, β-pineno, mirceno, limoneno, p-cimeno, γ-terpineno,
linanol, acetato de linalilo, α-terpineol, citronelol, acetato de geranilo, N-metil
antranilato de metilo, entre otros componentes (21).
29

4. Farmacognosia.
El aceite del epicarpio (aceite de Citrus) es un líquido amarillo pálido,
transparente o amarillo-verdoso, olor agradable a fruta, soluble en etanol al 90%
(1:2), reacción neutra (pH 7), densidad 0.850-0.859, índice de refracción
1.473-1.477, el residuo al evaporarse es 2-5%, contiene compuestos carbonílicos
en un rango de 0.4-1.8% (21).

5. Toxicología.
El contacto con el zumo y posterior exposición al sol puede desencadenar
fenómenos de fotosensibilidad. Los extractos acuoso y etanolico de hojas,
corteza y raíz (500 mg/kg) no son tóxicos a peces del genero Mollinesia (21).

D. ACEITES ESENCIALES.

1. Definición.
Los componentes volátiles provenientes de plantas han atraído la atención
del hombre desde la antigüedad como principios aromáticos o especies de gran
complejidad en su composición. El estudio de los aceites esenciales como
materias primas básicas para la industria de fragancias y sabores se ha
transformado en una de las áreas de investigación y desarrollo más importantes
para muchos países. Inicialmente considerados como material de deshecho del
metabolismo de las plantas, la importancia biológica de los aceites esenciales ha
sido reconocida sólo recientemente (23).
Los aceites esenciales son las fracciones líquidas volátiles, generalmente
destilables por arrastre con vapor de agua, que contienen las sustancias
responsables del aroma de las plantas y que son importantes en la industria de
alimentos (condimentos y saborizantes), cosmética (perfumes y aromatizantes) y
30

farmacéutica. Los aceites esenciales generalmente son mezclas complejas de


hasta más de 100 componentes que pueden tener la siguiente naturaleza química:

a) Compuestos alifáticos de bajo peso molecular (alcanos, alcoholes,


aldehídos, cetonas, ésteres y ácidos),
b) Monoterpenos,
c) Sesquiterpenos, y
d) Fenilpropanos (23).

En su gran mayoría son de olor agradable, aunque existen algunos de olor


relativamente desagradable como por ejemplo los componentes que forman
parte de la fracción aromática del ajo y la cebolla, los cuales contienen
compuestos azufrados. Los aceites pueden estar asociados formando mezclas
con otros productos naturales como es el caso de las resinas y productos
relacionados (23).

2. Clasificación de los aceites esenciales.


Los aceites esenciales se clasifican con base en diferentes criterios:
consistencia, origen y naturaleza química de los componentes mayoritarios.
De acuerdo con su consistencia los aceites esenciales se clasifican en
esencias fluidas, bálsamos y oleorresinas. Las esencias fluidas son líquidos
volátiles a temperatura ambiente. Los bálsamos son de consistencia más espesa,
son poco volátiles y propensos a sufrir reacciones de polimerización, son
ejemplos el bálsamo de copaiba, el bálsamo del Perú, Benjuí, bálsamo de Tolú,
Estoraque, etc. Las oleorresinas tienen el aroma de las plantas en forma
concentrada y son típicamente líquidos muy viscosos o sustancias semisólidas
(caucho, gutapercha, chicle, oleorresina de paprika, de pimienta negra, de
clavero, etc.) (23).
31

De acuerdo a su origen los aceites esenciales se clasifican como naturales,


artificiales y sintéticos. Los naturales se obtienen directamente de la planta y no
sufren modificaciones físicas ni químicas posteriores, y debido a su rendimiento
tan bajo son muy costosos. Los artificiales se obtienen a través de procesos de
enriquecimiento de la misma esencia con uno o varios de sus componentes, por
ejemplo, la mezcla de esencias de rosa, geranio y jazmín enriquecidas con
linalool, o la esencia de anís enriquecida con anetol. Los aceites esenciales
sintéticos como su nombre lo indica son los producidos por la combinación de
sus componentes, los cuales son la mayoría de las veces producidos por procesos
de síntesis química. Estos son más económicos y por lo tanto son mucho más
utilizados como aromatizantes y saborizantes (esencias de vainilla, limón,
frutilla, etc.) (23).
Desde el punto de vista químico y a pesar de su composición compleja los
aceites esenciales se pueden clasificar de acuerdo con los componentes
mayoritarios. Según esto los aceites esenciales ricos en monoterpenos se
denominan aceites esenciales monoterpénicos (por ej. hierbabuena, albahaca,
salvia, etc.). Los ricos en sesquiterpenos son los aceites esenciales
sesquiterpénicos (por ej. copaiba, pino, junípero, etc.). Los ricos en fenilpropanos
son los aceites esenciales fenilpropanoides (por ej. clavo, canela, anís, etc.) (23).
Aunque esta clasificación es muy general resulta útil para estudiar
algunos aspectos fitoquímicos de los monoterpenos, los sesquiterpenos y los
fenilpropanos. Sin embargo, existen clasificaciones más complejas que tienen en
cuenta otros aspectos químicos (23).

3. Distribución y estado natural.


Los aceites esenciales se encuentran ampliamente distribuidos en plantas
que incluyen las Compuestas, Labiadas, Lauráceas, Mirtáceas, Pináceas,
Rosáceas, Rutáceas, Umbelíferas, etc. Se les puede encontrar en diferentes partes
de la planta: en las hojas (ajenjo, albahaca, eucalipto, hierbabuena, mejorana,
32

menta, pachulí, romero, salvia, etc.), en las raíces (angélica, cúrcuma, jengibre,
sándalo, sasafrás, valeriana, vetiver, etc.), en el pericarpio del fruto (cítricos como
limón, mandarina, naranja, etc.), en las semillas (anís, cardamomo, hinojo,
comino, etc.), en el tallo (canela, etc.), en las flores (lavanda, manzanilla, piretro,
tomillo, rosa, etc.) y en los frutos (nuez moscada, perejil, pimienta, etc.). Aunque
en los aceites esenciales tanto los monoterpenos, los sesquiterpenos y los
fenilpropanos se les encuentran en forma libre, más recientemente se han
investigado los que están ligados a carbohidratos, ya que se considera que son
los precursores inmediatos del aceite esencial como tal (23).

4. Componentes principales del aceite esencial de cítricos.


a) Generalidades.
Existen marcadas diferencias en la composición de los aceites esenciales
cítricos provenientes de las distintas partes de la planta; así, del naranjo amargo
se obtiene el petitgrain de las hojas, constituido casi totalmente de compuestos
oxigenados y en donde predomina el acetato de linalilo; el aceite esencial de las
flores, cuyos componentes oxigenados de mayor proporción son los alcoholes
monoterpénicos, y el aceite esencial de la cáscara de los cítricos, donde los
hidrocarburos terpénicos sobrepasan el 90% y el valor olfativo esta ligado a la
pequeña fracción en la que participan aldehídos y ésteres. Del mandarino la
industria extrae dos aceites esencial diferentes: el petitgrain de las hojas,
caracterizado por el alto contenido de N-metilantranilato de metilo, y el aceite
esencial de la cáscara con elevado contenido de hidrocarburos terpénicos y su
grupo odorante formado por la asociación de aldehídos, alcoholes y ésteres,
incluyendo una pequeña cantidad de N-metilantranilato de metilo (24).
La calidad de estos aceites esenciales cítricos es particularmente apreciada
por su contenido en componentes oxigenados dado que ellos confieren el sabor y
cualidad olfativa característica, estimándose precisamente su valor comercial por
la riqueza de estos constituyentes (aldehídos, alcoholes y ésteres monoterpénicos,
33

principalmente), que han repercutido en la perfumería y cosmética, donde la


nota específica no solo esta dominada por los compuestos más abundantes sino
también por los constituyentes menores que participan en la armonía olfativa del
conjunto (25).
Los aceites de cítricos se encuentran principalmente en sacos ovalados
presentes en el flavedo o parte coloreada de la cáscara y actúan como barrera
tóxica natural para muchos microorganismos e insectos. Más del 90% del aceite
esencial de cítricos lo compone el d-limoneno, un sesquiterpeno, y se encuentran
cantidades traza de otros monoterpenos y sesquiterpenos como el mirceno. En
los aceites esenciales de naranja se han encontrado 111 constituyentes volátiles,
incluidos 5 ácidos, 26 alcoholes, 25 aldehídos, 16 ésteres, 6 cetonas y 31
hidrocarburos. Los componentes no volátiles representan alrededor del 1.5% de
los aceites de naranja, entre los que se encuentran las ceras, cumarinas,
flavonoides, carotenoides, tocoferoles, ácidos grasos y esteroles. El aceite de
pomelo se caracteriza por la presencia de nootkatona, que proporciona al pomelo
su sabor y aroma característico. Este aceite esencial esta constituido por
20 alcoholes, 14 aldehídos, 13 ésteres, 3 cetonas, 14 monoterpenos y
sesquiterpenos.
La concentración de nootkatona aumenta conforme madura la fruta. La
fracción no volátil del aceite esencial de pomelo representa alrededor del 7% del
mismo e incluye cumarinas, flavonoides, tocoferoles y ceras. Se cree que los
aceites de limón contienen alrededor de un 2% de compuestos no volátiles,
principalmente en forma de cumarinas, así como 18 alcoholes, 16 aldehídos,
11 ésteres, 3 cetonas, 4 ácidos y 23 hidrocarburos. En los aceites de lima se han
encontrado 12 alcoholes, 7 aldehídos, 4 ésteres, 1 cetona y 22 hidrocarburos, así
como un 7% de compuestos no volátiles, principalmente cumarinas (26).
Los aceites esenciales de mandarinas contienen cantidades significativas
(4%) de un compuesto no volátil distintivo llamado tangeritina, así como 24
alcoholes, 11 aldehídos, 4 ésteres, 2 cetonas, 7 ácidos, 24 hidrocarburos y 2 éteres.
34

Estudios mas detallados utilizando cromatografía de gases han


demostrado que el aceite esencial de mandarina posee los siguientes compuestos
como componentes mayoritarios: α-pineno, β-pineno, mirceno, limoneno,
p-cimeno, γ-terpineno, linalol, acetato de linalilo, α-terpineol, citronelol,
acetato de geranilo, N-metil antranilato de metilo (26).

E. MÉTODOS PARA LA EXTRACCIÓN DE ACEITES ESENCIALES.

Los aceites esenciales se pueden extraer de las muestras vegetales


mediante diferentes métodos como: prensado (expresión), destilación por
arrastre con vapor de agua, extracción con disolventes volátiles, enflorado y con
fluidos supercríticos.

1. Prensado (Expresión). En la aplicación de este método el material vegetal es


exprimido mecánicamente para liberar el aceite, recolectándose y filtrándolo para
su purificación. Este método es utilizado comúnmente para la extracción de
aceites esenciales de cítricos (23).

2. Destilación por arrastre con vapor de agua. En la aplicación de este método


la muestra vegetal generalmente fresca y cortada en trozos pequeños, se coloca
en un recipiente cerrado y sometida a una corriente de vapor de agua
sobrecalentado, el aceite esencial así es arrastrado y posteriormente condensado,
recolectado y separado de la fracción acuosa. Esta técnica es muy utilizada
especialmente para aceites esenciales fluidos tales como los de cítricos, siendo
este el método preferido para obtener materia prima para la industria de
perfumería, alimentos, pesticidas, etc. Su selección se hace en base a que es un
35

método económico que permite la obtención de un aceite esencial con alta pureza
y muy importante porque no requiere tecnología sofisticada (27).

3. Extracción con disolventes volátiles. En el método de extracción con


disolventes volátiles, la muestra seca y molida se coloca en contacto con
disolventes tales como etanol absoluto, cloroformo, éter etílico, etc. Estos
disolventes solubilizan el aceite esencial pero también solubilizan y extraen otras
sustancias tales como grasas y ceras, obteniéndose al final un aceite esencial
impuro. Se utiliza a escala de laboratorio pues a nivel industrial resulta costoso
por el valor comercial de los disolventes y porque se obtienen aceites esenciales
impuros, como ya se menciono, además del riesgo de explosión e incendio de los
disolventes orgánicos volátiles cuando se usan en grandes volúmenes (28).

4. Enflorado. En este método el material vegetal (generalmente flores) es puesto


en contacto con una grasa. El aceite esencial se solubiliza en la grasa que actúa
como vehículo extractor, obteniéndose inicialmente una mezcla (concreto) de
aceite esencial y grasa la cual es separada posteriormente por otros medios
fisicoquímicos. En general se recurre a agregar etanol absoluto caliente a la
mezcla y su posterior enfriamiento para separar la grasa (insoluble) y el extracto
aromático puro (absoluto). Esta técnica es empleada para la obtención de
esencias florales (rosa, jazmín, azahar, etc.), pero su bajo rendimiento y la difícil
separación del aceite extractor la hacen costosa, siendo esta la principal
desventaja para su utilización (23).

5. Extracción con fluidos supercríticos. En la aplicación de este método el


material vegetal cortado en trozos pequeños, licuado o molido, se empaca en una
cámara de acero inoxidable y se hace circular a través de la muestra un fluido en
estado supercrítico (por ejemplo CO2), los aceites esenciales así solubilizados son
arrastrados por el fluido supercrítico que actúa como disolvente extractor, la
36

presión del sistema se elimina por descompresión progresiva hasta alcanzar la


presión y temperatura ambiente, obteniéndose un aceite esencial cuyo grado de
pureza depende de las condiciones de extracción. Aunque presenta varias
ventajas tales como un rendimiento alto de extracción, es inocuo para el medio
ambiente, el disolvente se elimina fácilmente e inclusive se puede reciclar así
como las bajas temperaturas utilizadas para la extracción no cambian
químicamente los componentes del aceite esencial, el equipo requerido es
relativamente costoso ya que se requieren bombas de alta presión y sistemas de
extracción también resistentes a las altas presiones (29).

F. CROMATOGRAFÍA DE GASES.

1. Fundamentos y principios básicos.


La idea de esta técnica se basa en la volatilización de la muestra y su
posterior inyección en la cabeza de una columna cromatográfica. Para la elución
de la muestra se usa un gas inerte como fase móvil, de esta manera la fase móvil
no interacciona con las moléculas del analito, simplemente transporta el analito a
través de la columna (30).
Existen dos tipos de cromatografía de gases (GC):

a. Cromatografía gas-sólido (GSC): la fase estacionaria es sólida y la retención


de los analitos se produce mediante adsorción. En la cromatografía gas-sólido la
fase estacionaria es sólida y la retención de los analitos en ella se produce
mediante el proceso de adsorción. Precisamente este proceso de adsorción, que
no es lineal, es el que ha provocado que este tipo de cromatografía tenga
aplicación limitada, ya que la retención del analito sobre la superficie es
semipermanente y se obtienen picos de elución con colas. Su única aplicación es
la separación de especies gaseosas de bajo peso molecular (30).
37

b. Cromatografía gas-líquido (GLC): la fase estacionaria son moléculas de


líquido inmovilizadas sobre la superficie de un gas inerte. Esta es la que se usa
más ampliamente. La GC es un sistema compuesto de gas portador, sistema de
inyección de muestra, columna (generalmente dentro de un horno), y detector
(30).

2. Instrumentación.

a. Gas portador: debe ser un gas inerte para evitar que reaccione con el analito o
con la columna. Los gases de uso mas común son helio, nitrógeno, hidrogeno o
argón. Se controla su entrada en el sistema mediante manómetros para
garantizar un flujo constante y estable. Las presiones de entrada son desde
10 a 25 psi.

b. Sistema de inyección de muestra: el analito se inyecta usando una


microjeringa o un automuestrador en una cámara de vaporización instantánea
sellada por una junta de silicona (Septum). El analito debe ser introducido en
pequeñas cantidades para asegurar el mejor análisis, si la columna es ordinaria el
volumen es de unos 20 microlitros; si la columna es capilar el volumen es menor
de 10-3 microlitros. Se usan divisores de flujo a la entrada de la columna para
desechar analito hasta alcanzar estos volúmenes. Las muestra sólidas deben
introducirse en forma de disolución, el disolvente se pierde en la cámara de
vaporización y así no interfiere en la elución (30).

c. Columnas y sistemas de control de temperatura: la longitud de las columnas


es de 2 a 50 metros, de acero inoxidable, vidrio, sílice o teflón. Las columnas se
enrollan de forma helicoidal para encajar en el horno. La temperatura influye
directamente sobre la separación de los analitos, se necesita una precisión de
décimas de grado. La temperatura depende del punto de ebullición del analito,
38

así pues se ajusta la temperatura un poco por encima del punto de ebullición. Si
son varios analitos se debe ajustar la rampa de temperatura, que consiste en
aumentar la temperatura de forma gradual o por etapas hasta separar los
analitos. El problema de subir demasiado la temperatura es que aumenta la
velocidad de elución y también aumenta el riesgo de descomposición del analito.

Existen dos tipos de columnas:


- Empaquetadas o de relleno.
- Tubulares abiertas o capilares (mas eficaces y rápidas) (30).

d. Detectores:

i) Detector de ionización de llama: es un quemador de


hidrógeno/oxígeno donde se mezcla el eluyente con hidrógeno. En esta cámara
se produce una chispa para causar ignición, los compuestos orgánicos al
quemarse se pirolizan y producen iones y electrones, aprovechando que se
convierte en conductor se induce una corriente eléctrica, para detectar iones
desprendidos. Es un detector de masa, puesto que aproximadamente el numero
de iones desprendidos es igual al numero de carbonos transformados (30).

ii) Detector de conductividad térmica: se basa en el calentamiento de


una resistencia mediante el uso de una corriente eléctrica. Esta resistencia tiene
una temperatura que depende del gas circundante. La resistencia es un hilo que
puede ser de tungsteno, platino u oro (30).

iii) Detector termoiónico: Se usa para compuestos fosforados y


nitrogenados, su funcionamiento es parecido al detector de ionización de llama,
el eluyente se mezcla con hidrógeno y se quema. El gas se pasa alrededor de una
esfera de rubidio calentado a 600º C y sometida a 180 V, creando un plasma en el
39

cual se forman gran cantidad de iones que producen una corriente medible, la
intensidad es proporcional al número de iones formados y así se determina la
concentración o porcentaje del analito (30).

iv) Detector de captura de electrones: se basa en la emisión de una


partícula β por parte de átomos como el 63Ni o tritio, el electrón emitido ioniza el
gas portador y emite una ráfaga de electrones, esta ráfaga es sensible a una
corriente eléctrica que se puede medir. En el caso de especies orgánicas los
electrones son absorbidos, disminuyendo la intensidad de la corriente (30).

v) Detector de emisión atómica: el gas se introduce en un plasma de


helio inducido por microondas, la alta temperatura ioniza toda la muestra y se
miden los espectros de emisión mediante un espectrofotómetro acoplado al
sistema (30).

e. Columnas:

i) Columnas de relleno: Son tubos de vidrio, metal inerte o teflón de


2 o 3 metros de longitud y 2 a 4 milimetros de diámetro interno el material de
relleno del interior consiste en partículas esféricas para interaccionar con el
analito.
Normalmente se usan diatomeas puesto que es un material ideal para la
adsorción.

ii) Columnas capilares:

WCOT: Pared recubierta: son tubos capilares donde la pared interna esta
recubierta con una fina capa de fase estacionaria.
40

SCOT (soporte recubierto): tienen una capa en su lado interno de


superficie adsorbente donde se acopla la fase estacionaria. Tienen mayor
capacidad de carga (30).

f. Fase estacionaria: Una fase estacionaria liquida inmovilizada requiere:


- Características de reparto,
- Baja volatilidad,
- Baja reactividad, y
- Estabilidad térmica (30).

G. LA ESPECTROMETRÍA DE MASAS (EM) COMO COMPLEMENTO DE


LA CROMATOGRAFÍA DE GASES (CG).
La cromatografía de gases en si, es esencialmente una técnica de
separación. Sin embargo, puede convertirse en un instrumento analítico con el
auxilio de la espectrometría de masas. El punto de acoplamiento de ambas
técnicas esta en utilizar el espectrómetro de masas como un tipo de detector muy
selectivo en el cromatógrafo de gases. De tal manera que no solamente se
obtiene una separación de los componentes de la mezcla sino además, para cada
una de ellas, se tiene información referente a su peso molecular y un patrón de
fragmentación estructural característico de cada componente (31).

H. CROMATOGRAFÍA DE GASES ACOPLADA A ESPECTROMETRÍA DE


MASAS Y SU PAPEL EN EL ESTUDIO DE ACEITES ESENCIALES.
En relación con el estudio de aceites esenciales, el acoplamiento de la
Cromatografía de Gases a la Espectrometría de Masa (CG-MS) es el que ha
recibido mayor atención desde su introducción ya que permite obtener el
espectro de masas de cada componente eluído. Se obtiene el dato de su peso
molecular e información estructural. Existen bases de datos con los espectros de
masas de muchos componentes, por lo cual el índice de Kovats (determinado en
41

dos columnas de diferente polaridad) y el espectro de masas son criterios para la


identificación química de muchos de los componentes de un aceite esencial, sean
monoterpenos u otros tipos de sustancias características de dichos aceites. En el
acoplamiento de la cromatografía de gases a la espectrometría de masas, la
técnica de ionización más utilizada es la de impacto electrónico (EI). Sin
embargo, la técnica de ionización química (CI) tiene cada vez más aplicaciones,
por la mayor información que permite obtener. Un ejemplo de esto lo presenta la
identificación de fenilpropanos ya que por la presencia de su anillo aromático
presentan espectros de masa con iones moleculares intensos, lo que facilita la
determinación de su peso molecular. En el caso de compuestos con grupos
carboxilo e hidroxilo es conveniente derivatizarlos para obtener sustancias más
volatilizables y térmicamente más estables, ya que esto facilita por ejemplo su
análisis en mezclas mediante cromatografía de gases o cromatografía de gases
acoplada a espectrometría de masas (32).
42

IV. JUSTIFICACIÓN

La industria de los cítricos en Guatemala se encuentra en constante


crecimiento debido principalmente a la demanda de limón, naranja, toronja y
recientemente de mandarina. En Guatemala se cultivan algunas variedades de
mandarina, entre las cuales destacan las variedades Citrus reshni (Mandarina
Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus
tangerina (Mandarina Dancy). Teniendo en cuenta que en general el flavedo de la
mandarina se desecha, existe la posibilidad de viabilizar de manera comercial la
extracción del aceite esencial del mismo mediante arrastre con vapor de agua.
La importancia de llevar a cabo la extracción del aceite esencial del flavedo de las
variedades de mandarina mencionadas, radica en la amplia gama de aplicaciones
que estos aceites pueden tener en la industria de Guatemala. Entre las
aplicaciones más importantes se pueden mencionar: la industria alimenticia, la
industria médica, además de contar con aplicabilidad en la industria de
perfumería y cosméticos.
En la industria alimenticia los aceites esenciales extraídos del flavedo de
las variedades de la mandarina son importantes, ya que pueden ser utilizados
como agentes antimicrobianos, actuando al mismo tiempo como saborizantes y
preservantes contra la descomposición bacteriana. Así mismo también puede
utilizárseles en el sector de la salud, ya que pueden ser desarrolladas
formulaciones que permitan la fabricación de medicamentos genéricos de bajo
costo con eficientes actividades contra microorganismos patógenos para el ser
humano, siendo esto un beneficio para la población guatemalteca. Un ejemplo de
esto es que el aceite esencial extraído del flavedo de la mandarina puede ser
utilizado como agente antibacteriano contra algunas cepas patógenas para el ser
43

humano, entre las cepas bacterianas que pueden mencionarse están las
siguientes: Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus subtilis, Pseudomonas
aeruginosa, Helycobacter pilori y Salmonella (13,21).
Existe también la posibilidad de fraccionar los componentes del aceite
esencial extraído del flavedo de la mandarina para utilizarlos como materia
prima para la obtención de otras sustancias importantes, tal es el caso de la
utilización del d-limoneno y p-cimeno para la síntesis de pesticidas que pueden
controlan el crecimiento de larvas de insectos dañinos para cultivos del país,
teniendo estos pesticidas la ventaja de ser de origen natural y por lo tanto
totalmente biodegradables.
También es importante reconocer que el desarrollo industrial de la
extracción del aceite esencial del flavedo de la mandarina cultivada en
Guatemala, podría establecer fuentes de trabajo e ingresos económicos para un
sector de la población.
44

V. OBJETIVOS

A. General.
Identificar y cuantificar de forma relativa los componentes principales del
aceite esencial del flavedo (cáscara) de las variedades de mandarina Citrus reshni
(Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y Citrus reticulata
Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy) por medio de Cromatografía de
Gases acoplada a Espectrometría de Masas.

B. Específicos.

1. Obtener muestras frescas de las variedades de mandarina Citrus reshni


(Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y Citrus reticulata
Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).

2. Obtener muestras frescas del flavedo de las variedades de mandarina Citrus


reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y Citrus
reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).

3. Obtener el aceite esencial del flavedo de las variedades de mandarina Citrus


reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y Citrus
reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy) por medio de destilación
por arrastre con vapor de agua (hidrodestilación).

4. Separación, identificación y cuantificación relativa de los componentes del


aceite esencial del flavedo de las variedades de mandarina Citrus reshni
(Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y Citrus reticulata
Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy) por medio de Cromatografía de
Gases acoplada a Espectrometría de Masas.
45

VI. HIPÓTESIS

No se platea hipótesis debido a que es un estudio exploratorio de la


cantidad de aceite esencial que posee el flavedo de las variedades de mandarina
Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y
Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy) así como la
identidad y concentración relativa de los principales componentes del aceite
esencial de cada una de las variedades de mandarina seleccionadas para el
estudio.
46

VII. MATERIALES Y MÉTODOS


A. Universo de trabajo.
1. Población.
Variedades de mandarina Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus
reticulata (Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina
(Mandarina Dancy) cultivadas en la Finca La Providencia ubicada en el
municipio de Río Bravo, del Departamento de Suchitepéquez a una altitud de
460 metros sobre el nivel del mar.

2. Muestra.
125g de flavedo fresco de las variedades de mandarina Citrus reshni
(Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y Citrus reticulata
Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy) cultivadas en la Finca La
Providencia ubicada en el municipio de Río Bravo, del Departamento de
Suchitepéquez a una altitud de 460 metros sobre el nivel del mar.

B. Recursos.
1. Materiales.
a) Reactivos.

Reactivo Cantidad Calidad Concentración


Etanol 1L A.C.S. 99.9 %
Acetona 1L A.C.S. 95.0 %
Pentano 1L A.C.S. 99.0 %
2-bromoclobenceno 1.0 g A.C.S. 99.0 %
47

b) Estándares primarios.

Estándar Cantidad Calidad Concentración


α-pineno 0.001 L A.C.S. > 99.0 %
β-pineno 0.001 L A.C.S. > 99.0 %
Mirceno 0.001 L A.C.S. > 99.0 %
Limoneno 0.001 L A.C.S. > 99.0 %
p-cimeno 0.001 L A.C.S. > 99.0 %
γ-terpineno 0.001 L A.C.S. > 99.0 %
Linalol 0.001 L A.C.S. > 99.0 %
acetato de linalilo 0.001 L A.C.S. > 99.0 %
α-terpineol 0.001 L A.C.S. > 99.0 %
Citronelol 0.001 L A.C.S. > 99.0 %
acetato de geranilo 0.001 L A.C.S. > 99.0 %
N-metilantranilato de metilo 0.001 L A.C.S. > 99.0 %

c) Cristalería.
1 balón corning de 500 ml y condensador 24/40 esmerilado.
1 agitador de Vidrio.
21 viales de 1mL color ámbar.
3 beacker de 25mL.
1 columna para extracción de aceites esenciales (ver anexo No. 2).

d) Equipo.
1 rotavapor.
1 balanza electrónica (0.0001 g) Marca Perkin Elmer 9200.
1 manta de calentamiento.

e) Equipo instrumental.
Cromatógrafo de gases marca Hewlett-Packard F & M, modelo 770.
Columna, diámetro interior 4mm, longitud 1.20m.
Soporte, cromosorb C silanizado, malla 100/120.
48

Fase estacionaria FFAP, 5%.


Gas acarreador, nitrógeno.
Flujo, 5 ml/min.
Temperaturas, horno 90 oC, bloque de inyección 170 oC, detector 200 oC.
Espectrómetro de masas Hewlett-Packard JL234.
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 70 eV.
Temperatura de interfase: 280 oC.
Temperatura de fuente: 200 oC.
Calibrante: Perfluorotributilamina PTBFDA (FC-43)
m/z: 69 (100%), 219 (50%) y 502 (2.5%).

2. Humanos.
a) Estudiante: Jorge Arturo Mazariegos Monterroso.
b) Asesores de Tesis: Licda. Diana Pinagel Cifuentes.
M. Sc. Silvia Echeverría.

C. Método.
1. Diseño de investigación.
Se realizó un muestreo probabilístico de las variedades de mandarina
Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y
Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy), cultivadas en la
Finca La Providencia ubicada en el municipio de Río Bravo, del Departamento de
Suchitepéquez a una altitud de 460 metros sobre el nivel del mar. El muestreo
consistió en la recolección de frutos en completo estado de madurez de cada una
de las variedades de mandarina bajo estudio, luego se extrajo mediante
hidrodestilación el aceite esencial del flavedo fresco de cada una de ellas,
cuantificando el porcentaje de aceite esencial obtenido. El aceite esencial
extraído de cada variedad de mandarina se analizó en duplicado por medio de
49

cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas lo que permitió,


separar, identificar y cuantificar los componentes principales de los mismos.

a) Muestra (materia prima).


Para realizar el estudio de composición química del aceite esencial de
Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y
Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy) se seleccionó como
muestra el flavedo fresco de cada una de las variedades de mandarina
cultivadas en la Finca La Providencia ubicada en el municipio de Río Bravo, del
Departamento de Suchitepéquez a una altitud de 460 metros sobre el nivel del
mar.

b) Variables de interés.
Componentes principales del aceite esencial del flavedo fresco de Citrus
reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y Citrus
reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Las condiciones de separación y cuantificación de los componentes
principales están sujetas a ser modificadas en caso la metodología teórica no sea
la óptima para separar, identificar y cuantificar los principales componentes
presentes en cada uno de los aceites esenciales extraídos de las variedades de
mandarina bajo estudio.

c) Análisis de resultados.

i) Identificación de los componentes principales del aceite esencial del


flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina
común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Los componentes del aceite esencial de cada una de las variedades de
mandarina fueron identificados por medio de cromatografía de gases acoplada a
50

espectrometría de masas, estableciendo así los tiempos de retención y espectros


de masas de los principales componentes presentes en cada variedad de
mandarina y comparándolos con los tiempos de retención y los espectros de
masas de cada uno de los estándares o patrones utilizados, también se realizó la
respectiva comparación del espectro de masas de cada componente identificado
con el de referencia de la base datos Wiley275.
Para el estudio se utilizarán los siguientes estándares: α-pineno, β-pineno,
mirceno, limoneno, p-cimeno, γ-terpineno, linalol, acetato de linalilo, α-terpineol,
citronelol, acetato de geranilo y N-metil antranilato de metilo con un mínimo de
pureza del 99%.

ii) Cuantificación del aceite esencial del flavedo de Citrus reshni


(Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y Citrus
reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Cuantificación del contenido de aceite esencial de cada una de las
variedades de mandarina. Esto se realizó utilizando la siguiente expresión:

C = (PA / PP) 100% (Ecuación 1)


Donde:
C: contenido de aceite esencial (% p/p ).
PA: Masa de aceite esencial extraído (g).
PP: Masa del flavedo fresco de mandarina (g).

D. Procedimiento.

1. Recolección de las variedades de mandarina cultivadas en la Finca La


Providencia ubicada en el municipio de Río Bravo, del Departamento de
Suchitepéquez a una altitud de 460 metros sobre el nivel del mar por el Proyecto
51

de Desarrollo de la Fruticultura y Agroindustria (PROFRUTA) del Ministerio de


Agricultura (MAGA).

2. Molienda del flavedo fresco de cada una de las variedades de


mandarina: utilizando una cuchilla esterilizada para pelar cada una de las
mandarinas y disponer del mismo en trozos pequeños, luego en un molino de
aspas disminuir el tamaño del flavedo hasta aproximadamente 1mm.

a) Extracción del aceite esencial.

1. Se pesan 125g de flavedo fresco de mandarina.


2. Se colocan los 125g de flavedo fresco de mandarina previamente molido
en un balón de 1000mL y se adicionan aproximadamente 600mL de agua
destilada con algunos núcleos de ebullición.
3. Armar el aparato para hidrodestilación como se muestra en el
Anexo No. 1.
4. Se calienta la mezcla hasta ebullición y se mantiene de esa manera
durante 4 horas.
5. El aceite esencial extraído de cada una de las variedades de mandarina
se cuantifica mediante la ecuación 1 y se procede a almacenarlo en la
refrigeradora a 4 oC en viales de vidrio color ámbar con tapón de rosca. El aceite
esencial puede ser almacenado durante 6 meses (12) siempre y cuando el viale se
encuentre bien cerrado y a 4 oC (33).

b) Determinación de los componentes del aceite esencial del flavedo de Citrus


reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y Citrus
reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy) por medio de
Cromatografía de Gases acoplada a Espectrometría de Masas.
52

1. Elaborar disoluciones patrón de cada uno de los estándares de interés,


pesando 0.0250g de cada patrón con un mínimo de pureza del 99% en un balón
de 25mL y luego aforando con etanol absoluto. Agite vigorosamente cada
disolución patrón para homogeneizarla. Almacene a 4 oC.
2. Vierta 5mL de cada disolución patrón elaborada en el inciso anterior y
agregue a la misma 0.0250g de 2-bromoclorobenceno (BCB) como patrón interno
en un balón de 100mL, afore la mezcla de estándares con etanol absoluto, esta
mezcla servirá para establecer el perfil cromatográfico de referencia con el cual
será comparado el aceite esencial extraído de cada una de las variedades de
mandarina. La mezcla elaborada debe poseer los 12 estándares de interés.
3. Realizar la calibración del sistema de detección llevando a cabo la
determinación del intervalo de linealidad para los patrones de los compuestos
bajo estudio.
4. Inyectar por duplicado cada una de las disoluciones patrón elaboradas a
partir de cada uno de los estándares puros, con esto se establecerán los tiempos
de retención y espectros de masa de referencia para cada uno de los estándares o
patrones.
4. Inyectar por duplicado cada uno de los aceites esenciales extraídos del
flavedo las variedades de mandarina y establezca los tiempos de retención para
cada uno de los componentes mayoritarios.
5. Establezca los espectros de masas para cada uno de los componentes
mayoritarios en cada uno de los aceites esenciales extraídos mediante un barrido
completo en un intervalo de masas entre 40 y 250 u.m.a. a una velocidad de
1,2 scaneos/s.
6. Para realizar la separación, identificación y cuantificación relativa de los
componentes de Citrus reshni, Citrus reticulata y Citrus reticulata Blanco o Citrus
tangerina se miden 0.2μL de aceite esencial y se diluyen en 1mL de
diclorometano, de esta dilución se inyecta 0.6μL al cromatógrafo (HP 5890)
acoplado a un espectrómetro de masas (HP 5890 II) con las siguientes
53

condiciones de operación: Columna (HP 1, capilaridad 30m x 0.25mm diámetro


interno x 0.25 μm espesor, se utilizó Helio como gas portador, a flujo constante
de 1mL/min, presión de 14 libras por pulgada cuadrada, y una velocidad lineal
de 19cm/s. La temperatura inicial fue de 50oC durante 3 minutos, con una rampa
de 20oC/min. hasta 280oC y 15 min. a 280oC, temperatura del inyector 250oC,
temperatura de interfase del inyector 280oC. Tiempo de corrida 60 minutos.
54

VIII. RESULTADOS

Tabla No. 7. Rendimiento de extracción promedio del aceite esencial del


flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina
común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).

Muestra Tiempo Peso muestra Peso de Rendimiento


(min) flavedo aceite de extracción
fresco (g)* esencial (g)* (%)*
Citrus Reshni
(Mandarina 180 127.5±3.54 1.0401±0.036 0.82±0.0059
Cleopatra)
Citrus reticulata
(Mandarina 180 133.25±2.47 0.9430±0.0076 0.71±0.0074
Común)
Citrus reticulata
Blanco o Citrus 180 123.0±0 0.8941±0.077 0.66±0.021
tangerina
(Mandarina Dancy)

Fuente: Resultados experimentales obtenidos del arrastre con vapor de agua


(hidrodestilación Neoclevenger) del flavedo fresco de las variedades de mandarina bajo
estudio. –LIPRONAT-

* Los valores de peso muestra flavedo fresco (g), peso de aceite esencial (g) y el
rendimiento de extracción (%) incluyen el valor de la media ± la desviación
estándar
55

Tabla No. 8. Componentes principales cuantificados en el aceite esencial del


flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra).
Número Componente Tiempo de Concentración
de Pico retención (Rt) relativa
Minutos ± 0.05 (%)
1 α-pineno 9.80 0.20
2 β-pineno 11.53 0.15
3 β-mirceno 11.99 2.23
4 n-octanal 12.55 1.70
5 Limoneno 13.60 36.03
6 l-limoneno 13.76 38.07
7 γ-terpineno 14.79 8.46
8 α-terpinoleno 15.52 0.70
9 linalool 16.45 7.20
10 4-terpineol 19.65 0.61
11 α-terpineol 20.21 1.80
12 n-decanal 20.45 0.42
13 citronelol 21.36 0.35
14 perilaldehído 23.33 0.46
15 carvacrol 23.93 1.30
- p-cimeno No detectado No detectado
- acetato de Linalilo No detectado No detectado
- acetato de geranilo No detectado No detectado
- N-metilantranilato de metilo No detectado No detectado
Fuente: Base de datos Wiley275.
56

Abundancia

1.1e+07

1e+07 5

9000000

8000000

7000000

6000000

5000000

4000000
9
3000000 7

2000000
11
15
1000000 1 234 8 12 14
10 13
0
Tempo de retención 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 50.00 55.00

Figura No. 1. Cromatograma del aceite esencial del flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra).
57

Tabla No. 9. Componentes principales cuantificados en el aceite esencial del


flavedo de Citrus reticulata (Mandarina Común).
Número Componente Tiempo de Concentración
de Pico retención (Rt) relativa
Minutos ± 0.05 (%)
1 α-pineno 9.79 0.30
2 β-pineno 11.53 0.25
3 β-mirceno 11.99 1.43
4 limoneno 13.60 79.07
5 γ-terpineno 14.78 16.03
6 4-terpineol 19.65 0.52
7 α-terpineol 20.21 1.45
8 n-decanal 20.45 0.31
- l-limoneno No detectado No detectado
- citronelol No detectado No detectado
- perilaldehído No detectado No detectado
- carvacrol No detectado No detectado
- n-octanal No detectado No detectado
- p-cimeno No detectado No detectado
- acetato de Linalilo No detectado No detectado
- linalool No detectado No detectado
- acetato de geranilo No detectado No detectado
- N-metilantranilato de metilo No detectado No detectado
Fuente: Base de datos Wiley275.
58

Abundancia

600000

550000

500000

450000

400000

350000

300000

250000

200000 5
150000

100000

50000 1 23 6 78

0
Tiempo de retención 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 50.00 55.00

Figura No. 2. Cromatograma del aceite esencial del flavedo de Citrus reticulata (Mandarina Común).
59

Tabla No. 10. Componentes principales cuantificados en el aceite esencial del


flavedo de Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Número Componente Tiempo de Concentración
de Pico retención (Rt) relativa
Minutos ± 0.05 (%)
1 α-pineno 9.82 0.20
2 β-pineno 11.53 0.15
3 β-mirceno 11.96 2.20
4 n-octanal 12.55 0.60
5 limoneno 13.62 30.63
6 l-limoneno 13.79 40.62
7 γ-terpineno 14.79 5.69
8 α-terpinoleno 15.32 0.20
9 linalool 16.50 14.43
10 4-terpineol 19.65 0.50
11 α-terpineol 20.21 1.85
12 n-decanal 20.45 0.42
13 citronelol 21.36 0.62
14 perilaldehído 23.33 0.35
15 carvacrol 23.93 0.96
- p-cimeno No detectado No detectado
- acetato de Linalilo No detectado No detectado
- acetato de geranilo No detectado No detectado
- N-metilantranilato de metilo No detectado No detectado
Fuente: Base de datos Wiley275.
60
Abundancia

6
1.3e+07

1.2e+07

1.1e+07

1e+07

9000000

8000000

7000000
5
6000000

5000000 9

4000000

3000000
7
2000000

1000000 11
1 3 4 12 14 15
2 10 13
0
10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 50.00 55.00
Tiempo de retención
Figura No. 3. Cromatograma del aceite esencial del flavedo de Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina
Dancy).
61

Tabla No. 11. Componentes principales cuantificados en muestra de Sabor de


Mandarina No. 100.
Número Componente Tiempo de Concentración
de Pico retención (Rt) relativa
Minutos ± 0.05 (%)
1 α-pineno 9.80 1.76
2 β-pineno 11.53 1.65
3 β-mirceno 11.63 1.16
4 p-cimeno 13.06 2.66
5 limoneno 13.24 74.38
6 γ-terpineno 14.40 16.82
7 α-terpinoleno 15.53 0.72
8 N-metilantranilato de metilo 27.60 0.82
- l-limoneno No detectado No detectado
- 4-terpineol No detectado No detectado
- α-terpineol No detectado No detectado
- n-octenal No detectado No detectado
- n-decanal No detectado No detectado
- citronelol No detectado No detectado
- perilaldehído No detectado No detectado
- carvacrol No detectado No detectado
- p-cimeno No detectado No detectado
- acetato de Linalilo No detectado No detectado
- acetato de geranilo No detectado No detectado
- linalool No detectado No detectado
Fuente: Base de datos Wiley275.
62

Abundancia

5
7000000

6000000

5000000

4000000

3000000
6
2000000

1000000
1 234 7 8
0
Tiempo de retención 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 50.00 55.00

Figura No. 4. Cromatograma del aceite esencial del Sabor de Mandarina No. 100.
63

Tabla No. 12. Componentes traza identificados en el aceite esencial del flavedo
de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y
Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Componente Tiempo de Concentración relativa
retención (Rt)
(%)
Minutos ± 0.05
Citrus Citrus Citrus
reshni reticulata Tangerina
acetato 9-decenilico 11.10 0.08 0.06 0.09
Sabineno 11.50 0.02 0.04 0.05
α-terpineno 13.11 0.05 0.07 0.03
1-octanol 15.28 0.03 0.07 0.04
(+)-2-careno 15.93 0.22 0.28 0.23
l-linalool 16.59 0.06 0.08 0.05
6-octenal 18.49 0.02 0.03 0.12
[Citronela]
6-octen-1-ol 21.37 0.10 0.11 0.05
2,6-octadienal 21.86 0.09 0.07 0.10
[Z-Citral]
2-ciclohexen-1-ona 22.13 0.05 0.07 0.04
2,6-octadien-1-ol 22.32 0.03 0.02 0.04
[trans-Geraniol]
α-citral 22.96 0.09 0.07 0.08
[Geranial]
δ-elemeno 25.37 0.10 0.06 0.10
Fuente: Base de datos Wiley275.
64

IX. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

La extracción del aceite esencial del flavedo fresco de las variedades de


mandarina Citrus reshni, Citrus reticulata y Citrus reticulata Blanco o Citrus
tangerina se realizó en duplicado por medio de destilación por arrastre con vapor
de agua (hidrodestilación) durante 3 horas. Los aceites esenciales fueron
recibidos durante la destilación en pentano, la selección de este disolvente
respondió a la facilidad con la que es separado del aceite esencial mediante
rotavapor a 30oC. Al obtener el aceite esencial de cada variedad de mandarina se
pudo observar un aceite esencial incoloro y de aroma característico. Después de
esto, los aceites esenciales extraídos fueron almacenados en viales ámbar y
refrigerados a 4oC para garantizar de ese modo su estabilidad química hasta
realizar el análisis mediante cromatografía de gases acoplada a espectrometría de
masas.
Los rendimientos de extracción del aceite esencial del flavedo fresco de las
variedades de mandarina bajo estudio presentaron valores por encima de los
valores reportados en estudios anteriores a aceites esenciales de cítricos, siendo
los valores promedio de extracción los siguientes; para Citrus reshni
0.82±0.0059% p/p, para Citrus reticulata 0.71±0.0074% p/p y 0.66±0.021% p/p
para Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina. En estudios de cítricos efectuados
con anterioridad se obtuvieron rendimientos de extracción para el aceite esencial
de Limón (Citrus Aurantifolia), mandarina común (Citrus reticulata) y naranja
amarga (Citrus aurantium L.) con un porcentaje entre de 0.2 y 0.5% p/p (12). Los
altos porcentajes de extracción se deben a que las mandarinas de cada variedad
seleccionadas para el estudio se encontraban en completo estado de madurez y a
que el método de extracción del aceite esencial de mandarina fue
fundamentalmente diferente, ya que para esta investigación el método de
extracción consistió en una destilación por arrastre con vapor de agua
(hidrodestilación) y en los estudios anteriores el método aplicado fue el
65

prensado en frío. Los altos rendimientos de extracción también pueden deberse


al completo estado de madurez, este hecho encuentra justificación en un estudio
efectuado al limón (Citrus Swinglea) en el 2005, en este estudio se pudo establecer
mediante análisis cromatográficos de alta resolución que las diferentes etapas de
maduración influyen en la cantidad y calidad del aceite esencial que se puede
extraer de cítricos (37).
Los resultados de los análisis cromatográficos de los aceites esenciales
extraídos del flavedo fresco de Citrus reshni, Citrus reticulata y Citrus reticulata
Blanco o Citrus tangerina se muestran en las tablas 8, 9 y 10, respectivamente, así
como los cromatogramas en las figuras 1, 2 y 3. Se observaron algunas
variaciones en la composición de volátiles de los aceites esenciales extraídos,
estos resultados muestran la presencia de 28 componentes, 7 de los cuales se
encuentran en todas la variedades de mandarina, siendo estos los siguientes; (α-
pineno, β-pineno, limoneno, γ-terpineno, 4-terpineol, α-terpineol y n-decanal),
los cuales se pueden considerar como mayoritarios.
Entre estos componentes destacan los siguientes hidrocarburos
monoterpénicos por su abundancia, el limoneno con 79.07% en Citrus reticulata,
36.16% en Citrus reshni y 30.63% en Citrus reticulata Blanco, también el
γ-terpineno con 16.03% en Citrus reticulata, 8.46% en Citrus reshni y 5.69% en
Citrus reticulata Blanco, por último el derivado oxigenado (alcohol) α-terpineol
con 1.85% en Citrus reticulata Blanco, 1.80% en Citrus reshni y 1.45% en Citrus
reticulata.
Se debe mencionar también que para la cuantificación de los componentes
principales de los aceites esenciales de las variedades de mandarina investigadas
no fue necesaria la elaboración de curvas de calibración con estándares de alta
pureza, ya que la cromatografía de gases acoplada a la espectrometría de masas
permitió establecer los tiempos de retención, así como la concentración relativa
para cada uno de los componentes y más importante aún, esta técnica
instrumental permitió establecer la identidad de cada uno de los componentes
66

principales, incluso los que se encontraban a niveles traza, esto mediante la


comparación del espectro de masas obtenido experimentalmente para cada
componente versus el espectro de masas de referencia de la base de datos
Wiley275 (ver anexos 5 al 16 y 20 al 43), estableciéndose de esa manera la
identidad y concentración relativa de cada uno de los componentes presentes en
las variedades de mandarina investigadas.
El análisis cromatográfico permitió establecer una comparación entre la
composición de las diferentes variedades de mandarina analizadas, se estableció
que algunos componentes se encuentran ausentes en Citrus reticulata, tal es el
caso del n-octanol, l-limoneno, α-terpinoleno, linalool, citronelol, perilaldehído y
carvacrol, también se encontró que en las tres variedades de mandarina
estudiadas las concentraciones relativas de α-pineno y β-pineno (0.20%-0.30% y
0.15%-0.25% respectivamente) son menores que las reportadas en otras
variedades de cítricos, tal es el caso del estudio realizado por Díaz et. al. donde se
caracterizó el aceite esencial de Citrus Swinglea, reportando el estudio
concentraciones relativas mayores al 24% para el α-pineno y β-pineno, este hecho
es de importancia ya que estos componentes son de interés comercial (37).
También se llevo a cabo el análisis de una muestra del Sabor de Mandarina
No. 100, se encontraron algunas diferencias en cuanto a composición ya que al
comparar la identidad de los componentes presentes en la muestra del Sabor de
Mandarina No. 100 con respecto a la composición de los aceites esenciales de las
variedades Citrus reshni, Citrus reticulata y Citrus reticulata Blanco o Citrus
tangerina, los resultados indican diferencias en la concentración relativa del
α-pineno y β-pineno ya que el Sabor de Mandarina No. 100 presentó
concentraciones relativas mas elevadas de estos componentes que el aceite
esencial de las variedades de mandarina. En el Sabor de Mandarina No. 100
también se encontró una concentración relativa de N-metilantranilato de metilo
igual a 0.82%, este componente volátil no se encontró en ninguna de las
variedades de mandarina caracterizadas, esto es relevante ya que este
67

componente volátil es considerado como un parámetro de calidad de los aceites


esenciales provenientes de variedades de cítricos.
En las variedades de mandarina Citrus reshni, Citrus reticulata, Citrus
reticulata Blanco o Citrus tangerina y muestra de Sabor de Mandarina No. 100
existen algunos componentes que no fue posible detectar, tal es caso del acetato
de linalilo y acetato de geranilo, pero se detectó la presencia de algunos
componentes a niveles tan bajos que puede catalogárseles como trazas, siendo
éstos los siguientes; acetato 9-decenílico, sabineno, α-terpineno, 1-octanol,
(+)-2-careno, l-linalool, 6-octenal (Citronela), 6-octen-1-ol,
2,6-octadienal (Z-Citral), 2-ciclohexen-1-ona, 2,6-octadien-1-ol, (trans-geraniol),
α-citral (Geranial) y δ-elemeno. Estos compuestos oxigenados (aldehídos,
cetonas, ésteres y alcoholes) y sus bajas concentraciones relativas pueden
ocasionar las diferencias sutiles en el aroma del aceite esencial de cada variedad
de mandarina estudiada, ya que cada uno de los aceites esenciales extraídos
presentaba un aroma ligeramente diferente. Al haber identificado y cuantificado
los componentes mayoritarios y minoritarios del aceite esencial de Citrus reshni,
Citrus reticulata y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina se puede argumentar
que éstos representan un recurso natural renovable y que aun no se explota en
Guatemala, siendo también una gran oportunidad para el país en el mercado de
los productos forestales no maderables, ya que al fraccionar los aceites esenciales
se puede obtener limoneno, linalool, α-terpineol y citronelol que pueden ser
usados como aromatizantes en la industria alimenticia, farmacéutica y cosmética
del país; en la agronomía como pesticidas; en la industria de agentes de limpieza
como desinfectantes y en la industria farmacéutica como principios activos y
como saborizantes en la industria alimenticia, entonces al explotar este recurso
natural del país se pueden establecer fuentes de investigación y desarrollo.
68

X. CONCLUSIONES

1. Se obtuvieron altos rendimientos de extracción para los aceites esenciales


de Citrus reshni, Citrus reticulata y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina,
ya que normalmente los rendimientos de extracción se encuentran entre
0.2 y 0.5% p/p y los valores de extracción experimentales son de
0.82±0.0059% p/p, 0.71±0.0074% p/p y 0.66±0.021% p/p
respectivamente.
2. Los altos porcentajes de extracción en los aceites esenciales se debieron a
que las mandarinas seleccionadas se encontraban en completo estado de
madurez y a que se utilizó el flavedo fresco.
3. Los aceites esenciales extraídos del flavedo fresco de Citrus reshni, Citrus
reticulata y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina tienen en común la
presencia de 7 componentes; α-pineno, β-pineno, limoneno, γ-terpineno,
4-terpineol, α-terpineol y n-decanal, los cuales debido a su abundancia se
pueden considerar como mayoritarios.
4. Los hidrocarburos monoterpénicos con concentraciones relativas
mayoritarias son el Limoneno con 79.07% en Citrus reticulata, 36.16% en
Citrus reshni y 30.63% en Citrus reticulata Blanco, así como el γ-terpineno
con 16.03% en Citrus reticulata, 8.46% en Citrus reshni y 5.69% en Citrus
reticulata Blanco, y el derivado oxigenado α-terpineol con 1.85% en Citrus
reticulata Blanco, 1.80% en Citrus reshni y 1.45% en Citrus reticulata.
5. En la variedad de mandarina Citrus reticulata no se detectó concentración
relativa de n-octanol, l-limoneno, α-terpinoleno, linalool, citronelol,
perilaldehído y carvacrol.
6. Se comprobó que los aceites esenciales de Citrus reshni, Citrus reticulata y
Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina son ricos en algunos componentes
tales como el limoneno, γ-terpineno y α-terpineol entre otros, esto permite
considerar a los aceites esenciales extraídos como un ingrediente básico
69

para la industria de alimentos como saborizantes, en farmacéutica como


principios activos y en productos limpieza como desinfectantes.
7. En los aceites esenciales de las variedades de mandarina investigadas se
detecto e identificó la presencia de algunos componentes a niveles tan
bajos que puede catalogárseles como trazas, siendo éstos los siguientes;
acetato 9-decenilico, sabineno, α-terpineno, 1-octanol, (+)-2-careno,
l-linalool, 6-octenal (Citronela), 6-octen-1-ol, 2,6-octadienal (Z-Citral),
2-ciclohexen-1-ona, 2,6-octadien-1-ol, (trans-Geraniol), α-Citral (Geranial)
y δ-elemeno, estos componentes volátiles presentaron una pequeña
variación en cuanto a concentración relativa para cada una de las
variedades de mandarina lo que puede contribuir directamente al aroma
característico de cada aceite esencial.
70

XI. RECOMENDACIÓN

1. Bergonzelli et. al. en 2003 caracteriza los aceites esenciales de cítricos tales
como la lima, el limón y la toronja en estos aceites esenciales encuentra
que el componente mayoritario era el d-limoneno, también cuantifica
pequeños porcentajes de monoterpenos como el α-pineno que presentaba
actividad inhibitoria contra las cepa bacteria Helycobacter pilori, ya que esta
cepa es patógenas para el ser humano se plantea utilizar los aceites
esenciales extraídos de Citrus reshni, Citrus reticulata y Citrus reticulata
Blanco o Citrus tangerina para realizar pruebas antibacterianas contra las
cepas Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus subtilis, Pseudomonas
aeruginos y Salmonella para establecer su actividad antimicrobiana.
71

XII. REFERENCIAS

1. K. P., Adam, Zapp J. 1998. Phytochemistry. 48 (6). Pp 953.


2. Fuller, J. Harry. 1974. Botánica. Quinta Edición. Nueva Editorial
Interamericana S. A. de C. V. México. Pp 470.
3. Arch. Pharmaceutical. 1897. Vol 235. Pp. 583.
4. J. Prakt. Chemical. (1900). 62. Pp. 135.
5. Citrus and Related Genera. 1914-1917. Bailey Standard Cyclopedia of
Horticultura. The Macmillan Co. New York.
6. Tanaka, Cf. Principal Citrus Fruit of the World. 1924. Vol 1. Kyushu Imp.
Univ. Dep. Arg. Bull. Pp 20.
7. Webber and Barchelor. 1943. Citrus Industry. Vol. 1 Univ. Calif. Press. Pp 999.
8. American Perfumer. 1934. Vol. 29. Pp. 347.
9. Method and Seeker and Kirby. 1932. United States Dept. Agr. Tech. Bull. No.
241. Pp.1-30.
10. Ind. Eng. Chem. 1934. Vol 26. Pp 636.
11. Guenther, Ernest. 1949. The Essential Oils, Individual Essential Oils of the
Plants Families Rutaceae and Labiatae. D. Van Nostrand Company, Inc. Vol. III
New York. Pp. 333-344.
12. Giacomo, A. Di. Retamar J.A. 1982. Aceites esenciales de Especies Vegetales,
Diversidad de sus Productos Químicos. Vol. I. IPNAYS Co. Argentina. Pp. 149-
162.
13. Bergonzelli G.E, Donnicola D., Porta N y Corthésy-Theulaz., 2003, Essential
oils as components of diet-based approach to management of Helicobacter
Infection. AAC. Vol. 47, Pp 3240-3246.
14. http://www.tesisenxarxa.net/TESIS_UV/AVAILABLE/0301107-141814
15. http://www.portales.unipamplona.edu.co/unipamplona/hermesoft/
16. http://www.unicordoba.edu.co/revistas/rta/documentos/
72

17. Herman, José. 1982. Farmacotecnia Teórica y Práctica. 1ra. Edición. Tomo V.
Compañía Editorial Continental, S.A. de C.V. México. Pp 1474-1475.
18. Austín. T., George. 1988. Manual de Procesos Químicos en la Industria.
Quinta Edición, Primera edición en español. Tomo II. McGraw
Hill/Interamericana de México, S.A. de C.V. Pp 573-578.
19. http://www.profruta.gob.gt/
20. http://variedadesdemandarina/CITRUS_RETICULATA.htm
21. Cáceres, Armando. 1996. Plantas de Uso Medicinal en Guatemala. Primera
Edición. Editorial Universitario. Universidad de San Carlos de Guatemala. Pp
150-155, 228-230, 283-286.
22. Centro de Comercio Internacional UNCTAD/GATT. 1988. Aceites esenciales
y oleorresinas: estudio de distintos productores y de mercados importantes.
Ginebra. Pp 23-25.
23. Martínez M. Alejandro. 2001. Aceites Esenciales. Facultad de Química
Farmacéutica. Medellín. Universidad de Antioquia. Pp. 1-12.
24. F. La Face. 1968. Ess. Deriv. Agrum. 38. Pp 191-192
25. Vottero, Leonor. 1978. Essential Deriv. Agrum. 48. Pp. 150-156.
26. Kimball, Dan A. 2002. Procesado de Cítricos. 1ra. Edición. Editorial Acribia
S.A. España. Pp 234.
27. J. Chem. Educ. 1980. 57. Pp. 138.
28. J. Chem. Educ. 1991. 68. Pp. 946.
29. Yonei, Y and col. Journal of Supercritic Fluids. 1995. 8. Pp. 156-156.
30. Skoog, Douglas A. 2001. Análisis Instrumental. Quinta Edición, McGraw
Hill/Interamericana de España S.A. Páginas consultadas 759-782.
31. Gasco, Luis. 1969. Teoría y Práctica de la Cromatografía en Fase Gaseosa.
Ediciones J.E.N. España. Pp 234.
32. Crippen, Raymond C. 1973. Identification of Organic Compounds with Aid of
Gas Chromatography. Mc Graw-Hill. USA. Pp 123.
73

33. Freeman, R.R. 1979. Teoría y Práctica de la Cromatografía en Fase Gaseosa.


Ediciones J.E.N. España. Pp. 234
34. http://webbook.nist.gov/chemistry
35. http://www.aist.go.jp/RIODB/SDBS/cgi-bin/cre_index.cgi
36. http://www.tesisenxarxa.net/TESIS_UV/226107-100108
37. Díaz, Carlos, et. al. 2005. Caracterización del aceite esencial de la corteza del
Limón Swinglea por medio de CG-EM. Temas Agrarios Vol. 10:(1). Pp 22-28.
74

XIII. ANEXOS

ANEXO No. 1

Figura No. 5
APARATO PARA DESTILACIÓN POR ARRASTRE CON VAPOR DE AGUA
CLEVENGER.
Fuente: Laboratorio de Investigación de Productos Naturales –LIPRONAT-.
Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia Universidad de San Carlos de
Guatemala.
75

ANEXO No. 2

Figura No. 6
COLUMNA PARA LA OBTENCIÓN DE ACEITES ESENCIALES TIPO
CLEVENGER.
76

ANEXO No. 3

Tabla No. 13

ALGUNAS FASES ESTACIONARIAS COMUNES EN CROMATOGRAFÍA DE


GASES
FASE NOMBRE TEMPERATURA APLICACIONES
ESTACIONARIA COMERCIAL MAXIMA
oC

Polidimetilsiloxano OV-1, 350 Hidrocarburos; aromáticos


SE-30 polinucleares, esteroides.
Poli(fenilmetildifenil)si OV-3, 350 Esteres metílicos de ácidos
loxano SE-52 grasos, alcaloides; drogas,
compuestos halogenados.
Poli(fenilmetil)siloxano OV-17 250 Drogas; esteroides, pesticidas,
glicoles.
Poli(trifluoropropildim OV-210 200 Aromáticos clorados;
etil)siloxano nitrocompuestos aromáticos,
alquilsustituidos.
Polietilenglicol Carbowax 250 Acidos libres; alcoholes,
esteres, aceites esenciales,
glicoles.
Poli(dicianoalildimetil) OV-275 240 Acidos grasos.
siloxano
Fuente: Skoog, Douglas A. 2001. Análisis Instrumental. Cuarta edición, McGraw
Hill/Interamericana de España S.A. Página consultada 774.
77

ANEXO No. 4

Tabla No. 14

LISTADO DE NOMBRES Y ESTRUCTURAS QUÍMICAS DE LOS


COMPONENTES VOLATILES DE LOS ACEITES ESENCIALES PRESENTES EN
LA MANDARINA
No. Nombre Común CAS No.
1 α-pineno 80−56−8
2 β-pineno 127−91−3
3 Mirceno 123-35-3
4 (+)-Limoneno 5989-27-5
5 p-cimeno 99-87-6
6 γ-terpineno 99−85−4
7 Linalol 78-70-6
8 acetato de linalilo 115-95-7
9 α-terpineol 8006−39−1
10 Citronelol 106-22-9
11 aetato de geranilo 105-87-3
12 N-metilantranilato de metilo. 85-91-6
CH2 CH3 CH3

H3C H2C

CH2

H3C CH3 H3C CH3


H3C CH3 H3C CH2 H3C CH3
1. 2. 3. 4. 5.

CH3 CH3 CH3


H3C OH H3C OCOCH3

CH2 CH2 CH2OH

H3C CH3 H3C CH3 H3C CH3 H3C CH3 H3C CH3
OH
6. 7. 8. 9. 10.

CH3 CH3 O CH3


O
CH3
H3C O
NH
11.
CH3
12.
78

ANEXO No. 5
Espectro No.1
Espectro de masas de α-pineno

Fuente: http://webbook.nist.gov/chemistry (34)


Fecha de consulta: 8/Mayo/2007. Hora de consulta: 17:25:00.
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 70 eV.
Temperatura de interfase: 280oC.
Temperatura de fuente: 200oC.
79

ANEXO No. 6

Espectro No.2
Espectro de masas del β-pineno

Fuente: http://webbook.nist.gov/chemistry (34)


Fecha de consulta: 8/Mayo/2007. Hora de consulta: 17:25:00.
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 70 eV.
Temperatura de interfase: 280oC.
Temperatura de fuente: 200oC.
80

ANEXO No.7

Espectro No. 3.
Espectro de masas del mirceno.

Fuente: http://www.aist.go.jp/RIODB/SDBS/cgi-bin/cre_index.cgi (35)


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 19:50:00
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 75 eV.
Temperatura de la muestra: 140oC.
Temperatura de fuente: 260oC.
81

ANEXO No. 8
Espectro No. 4
Espectro de masas del d-limoneno.

Fuente: http://webbook.nist.gov/chemistry (34)


Fecha de consulta: 8/Mayo/2007. Hora de consulta: 17:25:00.
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 70 eV.
Temperatura de interfase: 280oC.
Temperatura de fuente: 200oC.
82

ANEXO No. 9
Espectro No.5
Espectro de masas del p-cimeno.

Fuente: http://webbook.nist.gov/chemistry (34)


Fecha de consulta: 8/Mayo/2007. Hora de consulta: 17:25:00.
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 70 eV.
Temperatura de interfase: 280oC.
Temperatura de fuente: 200oC.
83

ANEXO No. 10
Espectro No. 6
Espectro de masas del γ-terpineno.

Fuente: http://www.aist.go.jp/RIODB/SDBS/cgi-bin/cre_index.cgi (35)


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 19:50:00
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 75 eV.
Temperatura de interfase: 150oC.
Temperatura de fuente: 260oC.
84

ANEXO No. 11

Espectro No. 7
Espectro de masas del linalool.

Fuente: http://webbook.nist.gov/chemistry (34)


Fecha de consulta: 8/Mayo/2007. Hora de consulta: 17:25:00.
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 70 eV.
Temperatura de interfase: 280oC.
Temperatura de fuente: 200oC.
85

ANEXO No. 12

Espectro No.8
Espectro de masas del α-terpineol

Fuente: http://www.aist.go.jp/RIODB/SDBS/cgi-bin/cre_index.cgi (35)


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 19:50:00
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 75 eV.
Temperatura de la muestra: 75oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
86

ANEXO No. 13

Espectro No. 9
Espectro de masas del acetato de linalilo.

Fuente: http://webbook.nist.gov/chemistry (34)


Fecha de consulta: 8/Mayo/2007. Hora de consulta: 17:25:00.
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 70 eV.
Temperatura de interfase: 280oC.
Temperatura de fuente: 200oC.
87

ANEXO No. 14.

Espectro No. 10.


Espectro de masas del citronelol.

Fuente: http://www.aist.go.jp/RIODB/SDBS/cgi-bin/cre_index.cgi (35)


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 19:50:00
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 75 eV.
Temperatura de la muestra: 150oC.
Temperatura de fuente: 200oC.
88

ANEXO No. 15
Espectro No. 11.
Espectro de masas del acetato de geranilo.

Fuente: http://www.aist.go.jp/RIODB/SDBS/cgi-bin/cre_index.cgi (35)


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 19:50:00
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 75 eV.
Temperatura de muestra: 160oC.
Temperatura de fuente: 220oC.
89

ANEXO No. 16
Espectro No. 12.
Espectro de masas del N-metil antranilato de metilo

Fuente: http://www.aist.go.jp/RIODB/SDBS/cgi-bin/cre_index.cgi (35)


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 19:50:00
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 75 eV.
Temperatura de la muestra 180oC.
Temperatura de fuente: 240oC.
90

ANEXO No. 17

Tabla No. 15
TIEMPOS DE RETENCIÓN Y ALGUNAS PROPIEDADES FÍSICAS DE LOS
PRINCIPALES COMPONENTES DEL ACEITE ESENCIAL DE MANDARINA.

Punto ebullición (oC) Solubilidad

Componente Rt 700 mm 400 mm 40 mm H2O Hexano


Hg Hg Hg
α-pineno 13.52 156.2 132.3 66.8 - +

β-pineno 15.79 164.6 136.1 71.5 - ≈

mirceno 16.48 171.5 148.3 82.6 - ≈

(+)-limoneno 18.74 178 151.4 84.3 - +

p-cimeno 19.62 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D

γ-terpineno 20.27 183 N.D. N.D. - ≈

linalol 22.50 198 175.6 109.9 - ≈

α-terpineol 27.49 220.8 194.3 126 ≈

citronelol 29.36 244.4 201 137.2 - +

acetato de linalilo 30.82 220 196.2 127.7 - ≈

acetato de geranilo 37.13 243.3 219.8 150 - ≈

N-metilantranilato N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.


de metilo

+ = soluble; - = insoluble, ≈ = Parcialmente soluble. N.D. = no disponible.


Fuente: http://www.tesisenxarva.net/TESIS_UM/AVAILABLE/TDR-0226107-
100108/ (36)
Fecha de consulta: 15/Mayo/2007. Hora: 20:25:00
91

ANEXO No. 18
Identificación de las variedades de mandarina Citrus reshni (Mandarina
Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina Común) y Citrus reticulata Blanco o
Citrus tangerina (Mandarina Dancy)

Figura No. 7. Citrus reshni (Mandarina Cleopatra)


Fuente: Proyecto de Desarrollo de la Fruticultura y Agroindustria –PROFRUTA-.

Figura No. 8. Citrus reticulata (Mandarina Común)


92

Fuente: Proyecto de Desarrollo de la Fruticultura y Agroindustria –PROFRUTA-.


ANEXO No.19

Figura No. 9. Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy)


Fuente: Proyecto de Desarrollo de la Fruticultura y Agroindustria –PROFRUTA-.
93

ANEXO No. 20
Espectro de masas del α-pineno identificado y cuantificado en el aceite
esencial del flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata
(Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina
Dancy).
Abundance

Scan 433 (9.773 min): 3214.D


93
9000

8000

7000

6000

5000

4000

3000

2000
53 121
1000
74 166 191 262 363 417 447
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450
m/z-->
Abundance

#25392: .alpha.-PINENE
93
9000

8000

7000

6000

5000

4000

3000
39
2000
67 121
1000

0
50 100 150 200 250 300 350 400 450
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
94

ANEXO No. 21
Espectro de masas del β-mirceno identificado y cuantificado en el aceite
esencial del flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata
(Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina
Dancy).
Abundance

Scan 634 (11.975 min): 3214.D


93
9000 69
8000
7000
6000
5000
4000
3000
2000
1000
50 136
115 176 207 245 281 316335 377 438 500
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->
Abundance

#25355: MYRCENE
93
9000
8000 69

7000
6000
5000
4000
3000
2000
1000
121
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
95

ANEXO No. 22
Espectro de masas del n-octanal identificado y cuantificado en el aceite
esencial del flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata
(Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina
Dancy).
Abundance

Scan 686 (12.545 min): 3214.D


56
9000
8000 84
7000
6000
5000
4000
3000
2000
1000
110136157
216 354 407 496 529
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->
Abundance

#19693: OCTYL ALDEHYDE


56
9000
8000
7000 84

6000
5000
4000
3000
2000
110
1000
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
96

ANEXO No. 23
Espectro de masas del limoneno identificado y cuantificado en el aceite
esencial del flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata
(Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina
Dancy).
Abundance

Scan 784 (13.619 min): 3214.D


68 93
9000

8000

7000

6000

5000

4000

3000 136

2000
51
1000
119
196 243 416
0
40 60 80 100120140160180200220240260280300320340360380400420
m/z-->
Abundance

#25367: LIMONENE
68
9000 93

8000

7000

6000

5000

4000

3000 39 136

2000

1000
119
0
40 60 80 100120140160180200220240260280300320340360380400420
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
97

ANEXO No. 24
Espectro de masas del l-limoneno identificado y cuantificado en el aceite
esencial del flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata
(Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina
Dancy).
Abundance

Scan 847 (14.309 min): 3214.D


93
67
9000

8000

7000

6000

5000

4000

3000 121
2000

1000 50
207 242 291 433
0
40 60 80 100120140160180200220240260280300320340360380400420
m/z-->
Abundance

#25371: l-LIMONENE
68
9000

8000
93
7000

6000

5000

4000

3000 39

2000 121

1000
138
0
40 60 80 100120140160180200220240260280300320340360380400420
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
98

ANEXO No. 25
Espectro de masas del γ-terpineno identificado y cuantificado en el aceite
esencial del flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata
(Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina
Dancy).
Abundance

Scan 891 (14.791 min): 3214.D


93
9000
8000
7000
6000
5000
4000
136
3000
2000
1000 65
162 209 238 294 334 411 513540
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->
Abundance

#25031: .gamma.-Terpinene $$ 1,4-Cyclohexadiene, 1-methyl-4


93
9000
8000
7000
6000
5000
4000
136
3000
43
2000
1000 65
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250 oC.
Temperatura de fuente: 280 oC.
99

ANEXO No. 26
Espectro de masas del 4-terpineol identificado y cuantificado en el aceite
esencial del flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata
(Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina
Dancy).
Abundance

Scan 381 (9.370 min): MANDA3.D


71
9000

8000

7000

6000

5000
93
111
4000

3000

2000
53 136154
1000
185 207 281 304 327 354 442
0
40 60 80 100120140160180200220240260280300320340360380400420440
m/z-->
Abundance

#40552: TERPINEN-4-OL
71
9000

8000

7000

6000

5000 93 111

4000

3000

2000
53 154
136
1000

0
40 60 80 100120140160180200220240260280300320340360380400420440
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
100

ANEXO No. 27
Espectro de masas del α-terpinoleno identificado y cuantificado en el
aceite esencial del flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus
reticulata (Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina
(Mandarina Dancy).
Abundance

Scan 992 (15.897 min): 3214.D


121
136
93
9000

8000

7000

6000
77
5000

4000

3000

53
2000

1000
240 281 312 334 363380
0
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380
m/z-->
Abundance

#25090: .alpha.-terpinolene $$ Cyclohexene, 1-methyl-4-(1-m


93 121

9000

8000
136
7000

6000

5000

4000
77
3000 41

2000

1000

0
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
101

ANEXO No. 28
Espectro de masas del α-terpineol identificado y cuantificado en el aceite
esencial del flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata
(Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina
Dancy).
Abundance

Scan 1386 (20.214 min): 3214.D


59
9000

8000

7000

6000

5000
93
4000
121
3000

2000

1000 139
162181 209 243 439
0
40 60 80 100120140160180200220240260280300320340360380400420440
m/z-->
Abundance

#40197: l-.alpha.-Terpineol $$ 3-Cyclohexene-1-methanol, .a


59
9000

8000

7000

6000

5000

4000
93
3000
41
2000 121

1000
139
0
40 60 80 100120140160180200220240260280300320340360380400420440
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
102

ANEXO No. 29
Espectro de masas del linalool identificado y cuantificado en el aceite
esencial del flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata
(Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina
Dancy).
Abundance

Scan 1047 (16.500 min): 3214.D


71

8000
93
6000
55
4000

2000 121
107 136
154 181 207 232 253267 338
0
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340
m/z-->
Abundance

#40045: Linalool $$ 1,6-Octadien-3-ol, 3,7-dimethyl- (CAS)


71
41
8000

6000 55 93

4000
27
2000 121
107 136
154
0
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
103

ANEXO No. 30
Espectro de masas del n-decanal identificado y cuantificado en el aceite
esencial del flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata
(Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina
Dancy).
Abundance

Scan 1416 (20.542 min): 3214.D


57
9000
8000
7000
6000
5000
82
4000
3000 112

2000
1000
136 191215 267 296 416 520545
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550
m/z-->
Abundance

#42667: DECYL ALDEHYDE


57
9000
8000
7000
6000
5000
82
4000
3000
2000 112
1000
138
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
104

ANEXO No. 31
Espectro de masas del acetato 9-decenilico identificado en el aceite
esencial del flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata
(Mandarina común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina
Dancy).
Abundance

Scan 539 (11.101 min): MANDA3.D


57
9000
8000
81
7000
6000
5000
4000
3000 161
135
2000 110
1000 189
208 277 354 472
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450
m/z-->
Abundance

#83128: 9-decenyl acetate


43 68
9000
8000
7000
6000
5000 96
4000
3000
2000
1000 138
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
105

ANEXO No. 32
Espectro de masas del sabineno identificado en el aceite esencial del
flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina
común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Abundance

Scan 591 (11.504 min): 3214.D


93
9000
8000
7000
6000
5000
4000 69
3000
2000
281
136
1000 207
178 429 517
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->
Abundance

#25186: Sabinene $$ Bicyclo[3.1.0]hexane, 4-methylene-1-(1-


93
9000
8000
7000
6000
5000
4000
3000
2000 41
69 136
1000
115
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
106

ANEXO No. 33
Espectro de masas del α-terpineno identificado en el aceite esencial del
flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina
común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Abundance

Scan 738 (13.115 min): 3214.D


93
9000

8000
121
7000

6000

5000

4000

3000

2000 55
207
1000 173
151 430
241
0
20 40 60 80 100120140160180200220240260280300320340360380400420
m/z-->
Abundance

#25321: .Alpha.-Terpinene
93
9000 121

8000

7000

6000

5000

4000

3000
41
2000

1000 65
23
139
0
20 40 60 80 100120140160180200220240260280300320340360380400420
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
107

ANEXO No. 34
Espectro de masas del 1-octanol identificado en el aceite esencial del
flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina
común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Abundance

Scan 936 (15.284 min): 3214.D


56
9000
8000
7000

6000
5000 83
4000

3000
2000
1000 136
108 189209 262 387 414 471
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450
m/z-->
Abundance

#21053: 1-Octanol (CAS) $$ Octilin $$ Alfol 8 $$ Sipol L8 $


56
9000
8000
7000

6000
5000
4000 28

3000 84

2000
1000
112
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
108

ANEXO No. 35
Espectro de masas del (+)-2-careno identificado en el aceite esencial del
flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina
común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Abundance

Scan 995 (15.930 min): 3214.D


93
9000 121

8000

7000

6000

5000

4000

3000
68
2000 51
1000
151 189207 236 288 402
434
0
40 60 80 100120140160180200220240260280300320340360380400420
m/z-->
Abundance

#25433: (+)-2-Carene
93
9000 121

8000

7000

6000

5000

4000

3000

2000 41

1000 67
138
0
40 60 80 100120140160180200220240260280300320340360380400420
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
109

ANEXO No. 36
Espectro de masas del l-linalool identificado en el aceite esencial del
flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina
común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Abundance

Scan 1056 (16.598 min): 3214.D


55
9000

8000

7000

6000

5000
93
4000

3000

2000 121

1000
74 165184 265 287 335 399 468
0
40 60 80 100120140160180200220240260280300320340360380400420440460
m/z-->
Abundance

#40608: L-LINALOOL
71
9000

8000

7000
93
6000

5000

4000

3000

2000 121
53
1000
139
0
40 60 80 100120140160180200220240260280300320340360380400420440460
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
110

ANEXO No. 37
Espectro de masas del 6-octenal identificado en el aceite esencial del
flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina
común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Abundance

Scan 1229 (18.494 min): 3214.D


69
9000

8000

7000

6000

5000 55 95
4000

3000
111
2000
79 121
1000
136 154 181 213
0
20 30 40 50 60 70 80 90 100110120130140150160170180190200210
m/z-->
Abundance

#39940: CITRONELLA $$ 6-Octenal, 3,7-dimethyl- (CAS) $$ Cit


69
9000
41
8000

7000
95
6000

5000
55
4000

3000 121
111
81
2000
29 154
136
1000
145
0
20 30 40 50 60 70 80 90 100110120130140150160170180190200210
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
111

ANEXO No. 38
Espectro de masas del 6-octen-1-ol identificado en el aceite esencial del
flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina
común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Abundance

Scan 1492 (21.375 min): 3214.D


69
9000
8000
7000
6000
5000
4000
3000
2000 95
123
1000 156
207233 291 352 411 470 531
0
0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->
Abundance

#42735: 6-Octen-1-ol, 3,7-dimethyl-, (R)- $$ (R)-(+)-.beta.


69
9000 41
8000
7000
6000
5000
4000 95
3000
2000 123
1000
15 156
0
0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
112

ANEXO No. 39
Espectro de masas del 2,6-octadienal identificado en el aceite esencial del
flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina
común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Abundance

Scan 1537 (21.868 min): 3214.D


69
9000
8000
7000
6000
5000
4000
3000 94
2000
1000 119
150 177 207230 409 535
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->
Abundance

#37679: Z-Citral $$ 2,6-Octadienal, 3,7-dimethyl-, (Z)- (CA


41
9000
8000
7000
6000 69

5000
4000
3000
2000
94
1000 119
152
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
113

ANEXO No. 40
Espectro de masas del 2-ciclohexen-1-ona identificado en el aceite esencial
del flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina
común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Abundance

Scan 1561 (22.131 min): 3214.D


82

8000

6000

54
4000
108
2000 67
133 223 327
150 186 258272
0
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320
m/z-->
Abundance

#35865: 2-Cyclohexen-1-one, 2-methyl-5-(1-methylethenyl)- (


82

8000

6000
54
4000
108

2000
39
67 150
95 122135
0
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
114

ANEXO No. 41
Espectro de masas del 2,6-octadien-1-ol identificado en el aceite esencial
del flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina
común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Abundance

Scan 1579 (22.328 min): 3214.D


69
9000
8000
7000
6000
5000
4000
3000
2000
93 205 437
1000 164
137 316 384 540
0
0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->
Abundance

#40027: trans-Geraniol $$ 2,6-Octadien-1-ol, 3,7-dimethyl-,


41 69
9000
8000
7000
6000
5000
4000
3000
2000
93 123
1000 154
15
0
0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
115

ANEXO No. 42
Espectro de masas del α-citral identificado en el aceite esencial del flavedo
de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y
Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Abundance

Scan 1637 (22.963 min): 3214.D


69
9000

8000

7000

6000

5000

4000

3000

2000 94

1000 137
50 115 160 185 243 285 446 481
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450
m/z-->
Abundance

#37863: .alpha.-citral $$ geranial


41
9000 69
8000

7000

6000

5000

4000

3000

2000

1000 94
123 152
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
116

ANEXO No. 43
Espectro de masas del δ-elemeno identificado en el aceite esencial del
flavedo de Citrus reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina
común) y Citrus reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).
Abundance

Scan 1857 (25.373 min): 3214.D


121
9000 93
8000
7000
6000
5000
4000
161
3000 53
2000
1000 204
183 333 380 408 466 504
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->
Abundance

#89173: .delta.-Elemene $$ Cyclohexene, 4-ethenyl-4-methyl-


121
9000 93
8000
7000
6000
5000
4000
41 161
3000
2000
1000 67 204
0
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
m/z-->

Fuente: Base de datos Wiley275.


Fecha de consulta: 8/mayo/2007. Hora: 11:07:47
Ionización: Ionización electrónica. Energía de ionización 19.41 eV.
Temperatura de la muestra: 250oC.
Temperatura de fuente: 280oC.
117

ANEXO No. 44
Tabla No. 16. Rendimiento de extracción del aceite esencial del flavedo de Citrus
reshni (Mandarina Cleopatra), Citrus reticulata (Mandarina común) y Citrus
reticulata Blanco o Citrus tangerina (Mandarina Dancy).

Muestra Peso muestra Peso de aceite Rendimiento de


flavedo fresco esencial (g) extracción (%)
(g)
Citrus Reshni 125.0 1.0143 0.8114
(Mandarina Cleopatra)
Citrus Reshni 130.0 1.0658 0.8198
(Mandarina Cleopatra)
Citrus reticulata 135.0 0.9484 0.7025
(Mandarina Común)
Citrus reticulata 131.5 0.9376 0.7130
(Mandarina Común)
Citrus reticulata Blanco o 123.0 0.9484 0.6415
Citrus tangerina
(Mandarina Dancy)
Citrus reticulata Blanco o 123.0 0.8398 0.6718
Citrus tangerina
(Mandarina Dancy)
Fuente: Resultados experimentales obtenidos del arrastre con vapor de agua
(hidrodestilación Neoclevenger) del flavedo fresco de las variedades de
mandarina bajo estudio. –LIPRONAT-

También podría gustarte