INFORME DE LABORATORIO DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL

PRÁCTICA:

POLARIMETRÍA

PRESENTADO POR:

ALEXANDRA UBAQUE BEDOYA

CÓD. 1088328582
EDGAR ANDRÉS CARDONA DUQUE
CÓD. 1088334064

GRUPO 1

DOCENTE:

MARIBEL MONTOYA GARCÍA

UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA DE PEREIRA

FACULTAD DE TECNOLOGÍAS

PROGRAMA DE TECNOLOGÍA QUÍMICA

JUNIO 2015
INTRODUCCIÓN

La polarimetría es una técnica que se basa en la medición de la rotación óptica

producida sobre un haz de luz polarizada al pasar por una sustancia ópticamente
activa. La actividad óptica rotatoria de una sustancia, tiene su origen en la
asimetría estructural de las moléculas. Es una técnica no destructiva consistente
en medir la actividad (rotación) óptica de compuestos tanto orgánicos como
inorgánicos. Un compuesto es considerado ópticamente activo si la luz linealmente
polarizada sufre una rotación cuando pasa a través de una muestra de dicho
compuesto. La rotación óptica viene determinada por la estructura molecular y la
concentración de moléculas quirales. Cada sustancia ópticamente activa tiene su
propia rotación específica.

El polarímetro es el instrumento con el cual se mide el ángulo de giro de la luz

polarizada en grados angulares. En esta práctica de laboratorio lo que se pretende
es aprender a distinguir y a manejar un polarímetro, medir los ángulos de giro de
diferentes sustancias para su posterior análisis e identificación.

La Polarimetría se usa en control de calidad, control de procesos e investigación

en la industria farmacéutica, química, aceites esenciales, alimentación y aromas.
Se utilizara la polarimetría para hallar la concentración de ácido tartárico en la sal
de frutas.

OBJETIVOS

Reconocimiento de los diferentes modelos de polarímetros y de sus partes

externas e internas, distinguir los componentes básicos de un polarímetro y su
función. Calibrar y manejar correctamente el polarímetro. Determinar valores de la
rotación específica en sustancias ópticamente activas para su identificación.
Deducir algunos factores que afectan la rotación específica.

Elaborar gráficas de calibración y analizarlas con relación a los fundamentos

teóricos para determinar la concentración de sustancias ópticamente activas en
solución.

Aplicar la polarimetría en el estudio cinético de algunas reacciones; Aplicar la

técnica polarimétrica en el control de calidad de: Jarabes, soluciones de sacarosa,
glucosa, fructosa, jugos de frutas, Almíbar, y otros carbohidratos en diferentes
productos.
EQUIPOS MATERIALES Y REACTIVOS

 1 Polarímetro.
 2 Tubos de observación para el polarímetro de longitud conocida.
 1 Sistema Termostático
 10 matraces aforados de 25 mL.
 1 frasco lavador de polietileno
 1 pipeta volumétrica de 5 mL.
 1 pipeta graduada de 10 mL.
 1bureta de 25 mL graduación 1/20
 2 matraces aforados de 50 mL.
 1 Probeta de 25 mL
 1 cronómetro.
 Solución de una sustancia ópticamente activa (P1) de concentración
conocida y nombre desconocido.
 Solución de una sustancia ópticamente activa (Dextrógira) (P2) de nombre y
concentración conocida.
 Solución problema de la sustancia dextrógira (P2).
 Solución de una sustancia ópticamente activa (Levógira) (P3) de nombre y
concentración conocida.
 Solución problema de la sustancia levógira (P3).
 Solución de sacarosa al 20% m/v
 Agua destilada, algodón o papel suave absorbente, etanol del 95 %, ácido
clorhídrico 6 N y ácido clorhídrico 4N.
PROCEDIMIENTO

Reconocimiento del equipo:

Figura 1. Polarímetro Aus Jena

Las características del polarímetro con que se trabajará son las siguientes:

 Polarímetro de círculo sobre columna y pie, marca Aus-Jena, de tres

campos con lámpara espectral de sodio.
 Tubos de porcelana, longitud 2 dm
 Graduación de escala bilateral: de 0 a 180º
 Valor de la graduación: 1º
 Lectura de los nonios: 0,05º (precisión)
 Longitud de onda de la luz de medición: 589,3 mµ
 Campo luminoso: circular, tripartito

Calibración

Se procedió a limpiar las lentes del polarímetro con algodón humedecido con
etanol. Se lavó el tubo de observación con agua destilada y luego se llenó con la
misma para medirle su ángulo de giro, el cual debe ser 0. Al medirlo se obtuvo que
si era 0. No hubo que hacer corrección a los datos medidos posteriormente.

Determinación del ángulo de giro β y la rotación especifica en una sustancia

problema: (Problema 1)

β=3°

𝛽 3º
𝜷 = 𝜶𝑳𝑪 𝛼= = = 30
𝐿𝐶 5𝑔
2𝑑𝑚 ∗ 100𝑚𝐿
Posible sustancia según tabla 3.7.9

Sustancia α Sustancia α
Galactosa + 79 - 81 Sacarosa +66.5
Maltosa +131 Acido Tartárico +13.4
Lactosa +52.4 Tartrato de sodio y potasio +29.8
Glucosa +52 Acido L-glutámico +31.2
Fructuosa -93 Acido L-aspártico +24.6
Tabla 1. Lista de posibles sustancias para identificar la muestra problema.

Identificación de la concentración de una sustancia ópticamente activa

(Levógira) (P3) de nombre (Fructosa) y concentración conocida (8%).

Preparación de patrones:

Se prepararon 8 patrones a partir de una solución de fructosa 8%m/v en matraces

de 25 mL. Se hicieron los cálculos correspondientes para realizar las diluciones y
obtener las diferentes concentraciones:

Patrón Volumen de solución Volumen de agua Concentración del

de Fructosa 8% (mL) destilada (mL) patrón (%)

1 3,125 21,875 1
2 6,25 18,75 2
3 9,375 15,625 3
4 12,5 12,5 4
5 15.625 9,375 5
6 18,75 6,25 6
7 21,875 3,125 7
8 25 0 8
Tabla 2. Volúmenes de solución de fructosa y agua destilada necesarios para preparar los patrones

Patrones Concentración Β

1 1% 178,60
2 2% 177,35
3 3% 176,20
4 4% 173,60
5 5% 173,10
6 6% 171,25
7 7% 169,60
8 8% 168,35
Muestra Problema X 165,35
Muestra diluida X 173,15
Tabla 3. Ángulos de giro y concentración de los patrones de la sustancia levógira (Fructosa)
 Patrones
180
178 y = -1,4982x + 180,25
176
174
β

172 Patrones
170 Lineal (Patrones)
168
166
0 2 4 6 8 10
Concentracion %

Figura 2. Curva de calibración para determinar concentración de Fructosa

La ecuación 𝑦 = −1,4982𝑥 + 180,25, se puede representar como:

𝛽 = −1,4982𝐶 + 180,25, despejando,

(𝛽 − 180,75)
𝐶=
−1,4982

 En esta última para hallar la concentración de la muestra problema donde

β=173,15 (el ángulo de giro).

(173,15 − 180,75)
𝐶= = 5,0728%
−1,4982

Se obtiene que la concentración (C) de la muestra problema levógira del grupo

1, es de 5,0728%. La concentración real es 10%.

 Porcentaje de error:

10,1456 − 10
%𝐸𝑟𝑟𝑜𝑟 = ∗ 100 = 1,456%
10

 Sensibilidad se deduce de la ecuación de la recta, que corresponde a la

pendiente:
𝑆 = 1,104

 El límite de detección se obtiene a partir de :

(𝛽 − 180,75)
𝐶=
−1,4982
Donde β=178,60 obteniéndose que la mínima concentración que se puede
detectar es:
(178,60 − 180,75)
𝐿. 𝐷 = = 1,4350%
−1,4982

 El límite de cuantificación es :
𝐿. 𝐶 = 𝐿. 𝐷 ∗ 10
 𝐿. 𝐶 = 1,4350 ∗ 10 = 14,350

 Error instrumental:

𝑑𝛽
%𝐸𝐼 = ∗ 100
𝛽

Donde, dβ =error polarimetrico=0.05ºA, β=angulo de giro medido para la

muestra problema.

En la ecuación anterior β=173,15 obteniendo así un porcentaje de error

instrumental:

0.05
%𝐸𝐼 = ∗ 100 = 0.02887%
173.15

Identificación de la concentración de una sustancia ópticamente activa

(Dextrógira) (P2) de nombre (Glucosa) y concentración (15%) conocida

Preparación de patrones:

Se prepararon 8 patrones a partir de una solución de glucosa 15 %m/v en

matraces de 25 mL. Se hicieron los cálculos correspondientes para realizar las
diluciones y obtener las diferentes concentraciones:

Patrón Volumen de solución Volumen de agua Concentración del

de Glucosa 15 % destilada (mL) patrón (%)
(mL)
1 3,333 21,667 2
2 6,667 18.333 4
3 10 15 6
4 13,333 11,667 8
5 16,667 8.333 10
6 20 5 12
7 23,333 1,667 14
8 25 0 15
Tabla 4. Volúmenes de solución de glucosa y agua destilada necesarios para preparar los patrones

Patrones Concentración Β

1 2% 2,6
2 4% 3,3
3 6% 6,9
4 8% 8,5
5 10% 10,6
6 12% 12,8
 7 14% 15,7
8 15% 16,3
Muestra Problema X 10,8
Tabla 5. Ángulos de giro y concentración de los patrones de la muestra de la sustancia Dextrógira
(Glucosa)

Patrones
18 y = 1,104x - 0,2108
16
14
12
10
β

8 Patrones
6
Lineal (Patrones)
4
2
0
0 5 10 15 20
Concentracion %

Figura 3. Curva de calibración para determinar concentración de Glucosa

La ecuación 𝑦 = 1,104𝑥 − 0,2108, se puede representar como:

𝛽 = 1,104𝐶 − 0,2108, despejando,

(𝛽 + 0,2108)
𝐶=
1,104

 En esta última para hallar la concentración de la muestra problema donde

β=173,15 (el ángulo de giro).

(10,8 + 0,2108)
𝐶= = 9,9735%
1,104

Se obtiene que la concentración (C) de la muestra problema levógira del grupo

1, es de 5,0728%. La concentración real es 10%.

 Porcentaje de error:
10 − 9,9735
%𝐸𝑟𝑟𝑜𝑟 = ∗ 100 = 0,265%
10

 Sensibilidad se deduce de la ecuación de la recta, que corresponde a la

pendiente:
𝑆 = 1,104

 El límite de detección se obtiene a partir de :

(𝛽 + 0,2108)
𝐶=
1,104
 Donde β=0 obteniéndose que la mínima concentración que se puede detectar
es:
(2,6 + 0,2108)
𝐿. 𝐷 = = 2,5460%
1,104

 El límite de cuantificación es :
𝐿. 𝐶 = 𝐿. 𝐷 ∗ 10
𝐿. 𝐶 = 2,5460 ∗ 10 = 25,560

 Error instrumental:

𝑑𝛽
%𝐸𝐼 = ∗ 100
𝛽

Donde, dβ = error polarimétrico= 0.05ºA, β = ángulo de giro medido para la

muestra problema.

En la ecuación anterior β=10,8 obteniendo así un porcentaje de error

instrumental:

0.05
%𝐸𝐼 = ∗ 100 = 0.4629%
10,8

Determinación de la constante K de velocidad de la reacción de hidrólisis de

la sacarosa

Se tomaron 25 mL de solución de sacarosa al 20 %m/v y se aforaron en un matraz

de 50 mL con ácido clorhídrico HCl 4N y se procedió de la misma manera pero con
HCl 6N. Se tomó el tiempo de inicio de la reacción y se llenaron 4 tubos de
observación, dos con solución de sacarosa/HCl 4N y dos con solución de
sacarosa/HCl 6N. Se llevaron 1 tubo de cada solución al baño termostático y se
dejaron allí por dos horas. A los otros dos tubos se les midió su ángulo de giro
cada 4 minutos. Después de las dos horas, se tomaron los otros dos tubos y se les
midió su ángulo de giro, se dejaron enfriar y nuevamente se les midió su ángulo de
giro y se comparó si era igual al que se midió cuando se sacaron del baño
termostático. Si no eran iguales, se medía otra vez hasta que este ángulo no
cambiara.

Se obtuvieron los β∞ de las dos soluciones:

β∞ de la solución de sacarosa/HCl 6N: 176.3 = -3,7

β∞ de la solución de sacarosa/HCl 4N: 175,7= -4,3

Se obtuvieron los βt de las dos soluciones en los diferentes t y se calculó log(βt -β∞)
para construir las gráficas de log(βt - β∞) Vs t para hallar β0 y con ésta poder
calcular las K de cada t.
 β β
Solución de Tiempo log(βt - β∞) Solución de Tiempo log(βt - β∞)
sacarosa (s) sacarosa (s)
con HCl 6N con HCl 4N
(º) (º)
1,70 4 0,7324 6,4 4 1,0294
0,65 8 0,6385 5,2 8 0,9777
178,0 o -2 12 0,2304 3,2 12 0,8751
177,4 o -2,6 16 0,0414 1,7 16 0,7781
176,7 o -3,3 20 -0,3979 0,7 20 0,699
176,6 o -3,4 24 -0,5229 179,8 o -0,2 24 0,6128
176,4 o -3,6 28 -1 179,2 o -0,8 28 0,5441
----------------- ----------------- ----------- 178.3 o -1,7 32 0,415
----------------- ----------------- ----------- 178 o -2 36 0,3617
----------------- ----------------- ----------- 177,4 o -2,6 40 0,2304
----------------- ----------------- ----------- 177,3 o -2,7 44 0,204
----------------- ----------------- ----------- 176,7 o -3,3 48 0
Tabla 6. Ángulos de giro para cada 4 minutos

Gráfica para calcular βo

y = -0,0728x + 1,1243

1
0,5
Gráfica para
0 calcular Bo
0 10 20 30
-0,5 Lineal (Gráfica
para calcular Bo)
-1
-1,5

Figura 4. Gráfica para calcular β0 de la solución con HCl 6N

La ecuación y = -0,0728x + 1,1243 se puede representar como:

log(βt - β∞) = -0,0728 t + 1,1243

Se calcula log(βt - β∞) para t=0

log(β0 - β∞) = -0,0728 (0) + 1,1243

log(β0 - β∞) = 1,1243

Se despeja β0

β0 = 10ᴧ(1,1243) + β∞

β0 = 10ᴧ(1,1243) + (-3,7)

β0 = 9,6137
 Gráfica para calcular βo
1,2 y = -0,0226x + 1,147

1
0,8
Gráfica para
0,6 calcular Bo

0,4 Lineal (Gráfica para

calcular Bo)
0,2
0
0 20 40 60

Figura 5. Gráfica para calcular β0 de la solución con HCl 4N

La ecuación y = -0,0226x + 1,147 se puede representar como:

log(βt - β∞) = -0,0226 t + 1,147

Se calcula log(βt - β∞) para t=0

log(β0 - β∞) = -0,0226 (0) + 1,147

log(β0 - β∞) = 1,147

Se despeja β0

β0 = 10ᴧ(1,147) + β∞

β0 = 10ᴧ(1,1243) + (-4,3)

β0 = 9,7281

Ahora con el valor de β0 se procedió a calcular las K para cada t con la ecuación:

β β
Solución de Tiempo K Solución de Tiempo K
sacarosa (s) sacarosa (s)
con HCl 6N con HCl 4N
(º) (º)
β0 = 9,6137 0 ----------- β0 = 9,7281 0 -----------
1,70 4 0,2253 6,4 4 0,0676
0,65 8 0,1397 5,2 8 0,0487
178,0 o -2 12 0,1713 3,2 12 0,0521
177,4 o -2,6 16 0,1557 1,7 16 0,0530
176,7 o -3,3 20 0,1751 0,7 20 0,0515
176,6 o -3,4 24 0,1579 179,8 o -0,2 24 0,0439
176,4 o -3,6 28 0,1745 179,2 o -0,8 28 0,0495
----------------- ----------------- ----------- 178.3 o -1,7 32 0,0601
----------------- ----------------- ----------- 178 o -2 36 0,0753
----------------- ----------------- ----------- 177,4 o -2,6 40 0,0753
----------------- ----------------- ----------- 177,3 o -2,7 44 0,0775
----------------- ----------------- ----------- 176,7 o -3,3 48 0,0942
----------------- K promedio 0,1714 ----------------- K promedio 0,0624
Tabla 7. Constantes de velocidad para cada par de β-t

APLICACIÓN

Se hizo el control de calidad del suero Pedialyte 30 de Coco para determinarle la

concentración de glucosa.
Se usaron los datos de los patrones de glucosa preparados para la identificación
de la sustancia dextrógira. Ver Tabla5.

Patrones Concentración β

1 2% 2,6
2 4% 3,3
3 6% 6,9
4 8% 8,5
5 10% 10,6
6 12% 12,8
7 14% 15,7
8 15% 16,3
Suero X 5
Tabla 8. Ángulos de giro y concentración de los patrones de glucosa de la muestra de suero

Patrones
18 y = 1,104x - 0,2108
16
14
12
10
β

8 Patrones
6
Lineal (Patrones)
4
2
0
0 5 10 15 20
Concentracion %

Figura 3. Curva de calibración para determinar la concentración de Glucosa

La ecuación 𝑦 = 1,104𝑥 − 0,2108, se puede representar como:

𝛽 = 1,104𝐶 − 0,2108, despejando,

(𝛽 + 0,2108)
𝐶=
1,104

 En esta última para hallar la concentración de la muestra problema donde

β=173,15 (el ángulo de giro).

(5 + 0,2108)
𝐶= = 4,7199%
1,104

Se obtiene que la concentración (C) de la muestra problema levógira del grupo

1, es de 5,0728%. La concentración real es 10%.

 Porcentaje de error:
5 − 4,7199
%𝐸𝑟𝑟𝑜𝑟 = ∗ 100 = 5,602%
5

 Sensibilidad se deduce de la ecuación de la recta, que corresponde a la

pendiente:
𝑆 = 1,104

 El límite de detección se obtiene a partir de :

(𝛽 + 0,2108)
𝐶=
1,104
Donde β=2,6 obteniéndose que la mínima concentración que se puede
detectar es:
(2,6 + 0,2108)
𝐿. 𝐷 = = 2,5460%
1,104

 El límite de cuantificación es :
𝐿. 𝐶 = 𝐿. 𝐷 ∗ 10
𝐿. 𝐶 = 2,5460 ∗ 10 = 25,560

 Error instrumental:

𝑑𝛽
%𝐸𝐼 = ∗ 100
𝛽

Donde, dβ =error polarimetrico=0.05ºA, β=angulo de giro medido para la

muestra problema.

En la ecuación anterior β=4,7199 obteniendo así un porcentaje de error

instrumental:

0.05
%𝐸𝐼 = ∗ 100 = 1.0593%
4,7199
 REFLEXIONES

 ¿Qué factores afectaron las medidas del ángulo de giro β?

La magnitud del ángulo de giro depende del espesor de la capa de solución

atravesada por la luz, de la concentración de la sustancia ópticamente
activa en la solución y del poder rotatorio característico de la sustancia (ley
de Biot):

β=αLC

β= Ángulo de giro medido en grados angulares.

α= Rotación específica de la sustancia.

L= Espesor de la capa de la solución medida en decímetros.

C= Concentración de la solución en gramos de sustancia por mililitro de

solución; es igual a la densidad cuando se trata de un líquido puro.

 ¿Qué factores afectan la medida de la rotación específica?

La rotación especifica α depende, de la naturaleza de la sustancia, de la

longitud de onda de la luz utilizada, de la temperatura, de la concentración y
del solvente utilizado.

 ¿Cómo puede determinar la confianza en los resultados analíticos

obtenidos?

Se calcularía de la siguiente manera:

En general se emplean intervalos de confianza de 95 %.

Mediciones: 7,75 - 4,75 - 2,75 - 1,15 - 0,25. El número de observaciones es

n=5.

El límite inferior del intervalo de confianza es:

El límite superior del intervalo es:

Intervalo de confianza: (-2.67; 9.33).

  ¿Cómo puede adaptar la técnica polarimétrica para el control de
calidad y controlar algunos procesos industriales?

Se puede adaptar en las aplicaciones por ejemplo, investigación y

desarrollo, puede que sea necesario que el usuario conozca bien los
principios y que esté en posición de investigar las propiedades ópticas de

A través de esta medida se puede hallar la concentración, contenido y

pureza de la sustancia. La polarimetría es empleada en control de calidad,
control de procesos e investigación farmacéutica y química, en aceites
esenciales, saborizantes e industria alimenticia. Separación de isómeros
ópticos.

Dentro de la investigación es frecuente el uso para, aislamiento de

cristalizados, evaluar y caracterizar compuestos ópticamente activos,
reacciones cinéticas, monitorización y cambios de concentración así como
actividades.

En el campo del control de calidad y control de procesos la polarimetría se

usa las más diferentes ramas, como farmacéutica (aminoácidos,
analgésicos, cocaína, dextrosa, codeína, antibióticos,…), alimentación
(carbohidratos, glucosa, maltosa, monosacáridos naturales), química
(biopolímeros, polímeros sintéticos, polímeros naturales…), etc.

 ¿Consultar en qué consiste la Escala Internacional del Azúcar?

En la industria del azúcar, la rotación se expresa sobre una escala

diferente, llamada Escala Internacional del Azúcar (ISS en sus siglas
inglesas), que se denota como ºZ. Los polarímetros que se han diseñado
para su uso específicamente en la industria del azúcar se conocen como
sacarímetros.

CONCLUSIONES
 La polarimetría es una técnica que se basa en la medición de la rotación
óptica producida sobre un haz de luz polarizada al pasar por una sustancia
ópticamente activa. La actividad óptica rotatoria de una sustancia, tiene su
origen en la asimetría estructural de las moléculas. Por tanto la medida de
la rotación específica es una propiedad física que permite ayudar a la
identificación de una sustancia desconocida.

 La polarimetría es una técnica fuertemente utilizada en las industrias para

determinar concentración de sustancias azucaradas o compuestos
ópticamente activos en soluciones.

 En el transcurso de la práctica se observó experimentalmente algunos usos

de la técnica polarimétrica como es la determinación de sacarosa en algún
producto industrial que es de gran uso por las personas, también la
determinación de la constante de la ración de sacarosa con ácido
clorhídrico.
  Al parecer la concentración y el ángulo de giro inicial β0, tienen una relación
inversa, pues según los datos obtenidos el β0 de la solución de sacarosa
con HCl 4N es mayor que el β0 de la solución de sacarosa con HCl 6N.

BIBLIOGRAFÍA

Federmán Castro E, Análisis instrumental l, manual de prácticas de laboratorio,

Cámara colombiana del libro, Colombia 2014.

Federmán Castro E, Análisis instrumental Algunos métodos fotométricos y

espectrométricos, Apuntes de clase, Colombia.

http://www.aulavirtual-
exactas.dyndns.org/claroline/backends/download.php?url=LzNfUFJBQ1RJQ09TL1
BPTEFSSU1FVFJPX0VxdWlwby5wZGY%3D&cidReset=true&cidReq=FISDOS

http://www.fao.org/docrep/010/ah833s/ah833s15.htm.

https://books.google.com.co/books?isbn=8476842511.
www.bs-ltd.com/general_pdfs/P001E.pdf.