Ingeniería en tecnología ambiental

Ingeniería en Bioprocesos

“Práctica 2: Biorreactores”

Facilitador: Dr. Luis Alberto Ordaz Diaz

Alumna: Monroy González María Fernanda

Cuatrimestre; Mayo-Agosto
Grupo:8°A

PRACTICA 2
 “Biorreactores”
Objetivo
El alumno conocerá y distinguirá por sus características los diferentes tipos de
reactores
utilizados en bioprocesos.
Fundamento teórico
Un biorreactor es un recipiente o sistema que mantiene un ambiente
biológicamente activo. En algunos casos, un biorreactor es un recipiente en el que
se lleva a cabo un proceso químico que involucra organismos o sustancias
bioquímicamente activas derivadas de dichos organismos. Este proceso puede
ser aeróbico o anaerobio. Estos biorreactores son comúnmente cilíndricos,
variando en tamaño desde algunos mililitros hasta metros cúbicos y son
usualmente fabricados en acero inoxidable.
Materiales y Métodos
• Medios electrónicos (internet, etc.)
• Fuentes bibliográficas
• Videos
Procedimiento
1. Para la sesión de introducción de esta práctica el alumno deberá haber
consultado en todas
las fuentes posibles el tipo de biorreactores que se emplean a nivel laboratorio,
planta piloto y
nivel industrial.
2. Para el reporte de la práctica, se deberán considerar los siguientes puntos para
cada uno de los reactores identificados:
• Tipo de reactor.
• Capacidad.
• Características geométricas (incluyendo esquema del biorreactor)
• Sistema de carga y descarga.
• Sistema de agitación del líquido de reacción.
• Patrones de flujo
• Sistema de aireación.
• Sistema de control (incluyendo sistema de enfriamiento)
• Método o forma de esterilización de:
Medios de cultivo
Reactor (incluyendo la limpieza)
Aire
Aditivos de fermentación (ácidos, álcalis, antiespumante, etc.)
Métodos de cultivo que se lleve a cabo en el biorreactor:

Resultados y su discusión

¿Qué es un biorreactor?
Un biorreactor es un recipiente o sistema que mantiene un ambiente
biológicamente activo. En algunos casos, un biorreactor es un recipiente en el que
se lleva a cabo un proceso químico que involucra organismos o sustancias
bioquímicamente activas derivadas de dichos organismos. Este proceso puede ser
aeróbico o anaerobio. Estos biorreactores son comúnmente cilíndricos, variando
en tamaño desde algunos mililitros hasta metros cúbicos y son usualmente
fabricados en acero inoxidable (Mora,2015)
Un biorreactor puede ser también un dispositivo o sistema empleado para hacer
crecer células o tejidos en operaciones de cultivo. Estos dispositivos se
encuentran en desarrollo para su uso en ingeniería de tejidos. En términos
generales, un biorreactor busca mantener ciertas condiciones ambientales
propicias (pH, temperatura, concentración de oxígeno, etcétera) al organismo o
sustancia química que se cultiva. El diseño de los biorreactores es una tarea
deingenieríarelativamente compleja y difícil. Losmicroorganismoso células son
capaces de realizar su función deseada con gran eficiencia bajo condiciones
óptimas. Las condiciones ambientales de un biorreactor tales como flujo de gases
(por ejemplo, oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono, etc.), temperatura, pH,
oxígeno disuelto y velocidad de agitación o circulación, deben ser cuidadosamente
monitoreadas y controladas (Mora,2015).
Algunos de los biorreactores utilizados a escala laboratorio son cajas Petri y
matraces Erlenmeyer. Estos son utilizados por su simplicidad, los cuales no
operan con aeración ni agitación forzada, en ellos solamente es controlada la
temperatura del cuarto de incubación
Dentro de los procesos de fermentación en medio sólido existen actualmente dos
categorías: a escala laboratorio en las cuales se utilizan pequeñas cantidades de
medio sólido hasta pocos kilogramos, y el otro que es a escala piloto y escala
industrial en donde se utilizan desde kilogramos hasta toneladas. En la primera
categoría existen muchos diseños de biorreactores, los cuales llegan a ser muy
sofisticados, mientras que en la segunda categoría es poca la variedad de
biorreactores utilizados, solo algunos de los biorreactores a nivel industrial pueden
operar en condiciones estériles (Ruiz-Leza et al., 2007).
Los biorreactores a escala laboratorio son:
 Columna: Uno de los más importantes sistemas para FMS a nivel
laboratorio, fue el desarrollado y patentado por el grupo del Instituto para la
Investigación y Desarrollo (IRD) en Francia, entre 1975 y 1980, compuesto
por pequeñas columnas de cuatro centímetros de diámetro y veinte
centímetros de altura, el cual es llenado con un medio previamente
inoculado y puesto en un baño de agua termorregulada. El sistema puede
conectarse a un cromatógrafo de gases para el monitoreo de la producción
de CO2, resultado de la respiración del microorganismo y de sus
reacciones metabólicas. La geometría y diseño de las columnas permite
que sea un equipo barato, debido a que son elaboradas a base de vidrio,
por lo que la remoción del calor liberado durante la fermentación, se lleva a
cabo de manera eficiente. Las columnas requieren poca cantidad de medio
de cultivo y la fácil adaptación del equipo a sistemas más rudimentarios en
cuanto a equipamiento y cuantificación de productos.
 Columna estéril: Diseñado por un grupo del Instituto Nacional de la
Investigación Agronómica (INRA) en Francia, tomando como base el
biorreactor en columna. Este biorreactor trabaja con un volumen de un litro,
 cuenta con un muestreador de humedad relativa y un sistema de
calefacción en la cabeza de la columna. En el circuito de operación se
encuentra un sistema de enfriamiento que utiliza agua fría, como
refrigerante. Dichas modificaciones permiten una mejor regulación del
contenido de agua durante el proceso
 Columna charola: Este diseño se realizó en el Departamento de
Investigación en Alimentos de la Universidad Autónoma de Coahuila, el cual
consiste de una columna de 13 pulgadas de altura y un diámetro de 10
pulgadas. En su interior se encuentran ocho charolas perforadas, las cuales
tienen una capacidad de 140 ml cada una. La transferencia del oxígeno es
por burbujeo a través de un distribuidor de aire, permitiendo la transferencia
a un flujo de 194 ml/min. La temperatura es regulada por una chaqueta de
enfriamiento y/o calentamiento, por lo que es posible controlar y medir los
cambios de temperatura. Bajo este sistema se permite una mejor
distribución de oxígeno por aireación hacia las charolas.
 Growtek: Consiste de una columna de 13 pulgadas de altura y un diámetro
de 10 pulgadas. En su interior se encuentran ocho charolas perforadas, las
cuales tienen una capacidad de 140 ml cada una. La transferencia del
oxígeno es por burbujeo a través de un distribuidor de aire, permitiendo la
transferencia a un flujo de 194 ml/min. La temperatura es regulada por una
chaqueta de enfriamiento y/o calentamiento, por lo que es posible controlar
y medir los cambios de temperatura. Bajo este sistema se permite una
mejor distribución de oxígeno por aireación hacia las charolas.
 Tambor horizontal: El biorreactor de tambor horizontal es uno de los más
utilizados para FMS, el cual se ha diseñado de varias formas: como un
contenedor rotatorio, perforado o con paletas, esto con el fin de obtener una
agitación continua del sustrato sólido para incrementar el contacto entre las
paredes del biorreactor y el sustrato, así como, proveer mayor oxígeno al
microorganismo. Estos equipos consisten de un cilindro, con o sin chaqueta
con agua para el control de temperatura, el cual gira lentamente volteando
al medio de cultivo ayudado de pestañas que se encuentran adheridas a la
 pared, este tipo de biorreactor presenta dificultades en el control de
temperatura y humedad, y debido a problemas de ruptura del micelio. En
cambio con biorreactores con paletas, vuelve más eficiente la transferencia
de oxígeno y disminuye la aglomeración de partículas de sustrato durante el
crecimiento microbiano
 Proceso continuo: El diseño de biorreactores de régimen continuo a escala
laboratorio y cuyo principio es el empleo de un tornillo sin fin que sirve para
alimentar y agitar el sustrato, los cuales pueden ser o no ser inoculados en
el proceso. Los estudios correspondientes de mezclado, crecimiento
fúngico y niveles de esporulación han sido llevados a cabo en condiciones
exitosas de operación continua. Debido a que el tiempo de residencia del
complejo sustratomicroorganismo-enzima es menor que en los
biorreactores convencionales y al estar en condiciones cerradas la asepsia
es mayor
 Zymotis: Biorreactor diseñado por ORSTOM (hoy IRD de Francia), el cual
consiste de platos verticales por donde internamente hay transferencia de
calor debido a la circulación de agua fría, mientras que el aire previamente
temporizado es introducido por el fondo del sistema. Entre cada plato se
carga el medio sólido previamente inoculado, dicha cama se mantiene
estática durante la fermentación. Este sistema es parecido al biorreactor de
columnas, con la diferencia de que las capas de sustrato están
verticalmente fijas, por lo tanto, es difícil trabajar en condiciones asépticas
Biorreactores a nivel piloto e industrial:
 Tanque agitado: Recipientes cilíndricos alargados con una relación altura:
diámetro de 2:1 o mayor. Este diseño permite un mayor tiempo de contacto
de las burbujas de aire con el líquido conforme ascienden.
La base del tanque se redondea para evitar zonas estancadas.
Se mantienen homogéneos mediante agitación mecánica. Poseen un eje
central movido por un motor que soporta uno o más agitadores. Este eje
puede estar soportado por la parte superior o desde el fondo del reactor.
 Columnas de burbujeo: Reactores sin agitación mecánica. Se inyecta el gas
por el fondo, mediante un disco perforado que hace las veces de difusor.
Las burbujas de gas ascienden a través del líquido. Se colocan placas
horizontales perforadas a lo largo de la columna (a intervalos) para mejorar
la transferencia de oxígeno. Recipiente cilíndrico con relación altura:
diámetro de 6:1 o mayor (para lograr una transferencia de oxígeno eficaz).
La temperatura se mantiene constante con camisas refrigerantes o
serpentines colocados en el interior del recipiente. Las propiedades
reológicas del fluido afectan la transferencia de oxigeno y el mezclado. El
mezclado lo proporciona el movimiento del gas a través del líquido. En los
procesos aeróbicos, el gaseo del líquido con aire proporciona el oxígeno
necesario para el proceso, además de la agitación. En los procesos
anaeróbicos los propios gases (CO2) liberados en la fermentación
proporcionan la agitación.
 Air lift: Consiste en dos cilindros concéntricos. Agitación por inyección de
aire. El gas (aire) es inyectado en la columna interior y circula a través del
tubo concéntrico interno en forma ascendente (al igual que el líquido). El
gas sale por la parte superior, dejando el líquido mas pesado, libre de
burbujas, que recircula en forma descendente por el espacio exterior. Esta
diferencia de densidad del líquido en las dos columnas, genera una
circulación de líquido ascendente en el compartimento interno y
descendente en el externo. La densidad del fluido es menor en la zona
ascendente, la que recibe el gas, respecto a la zona descendente.
 Lecho ; El biocatalizador (célula o enzima) está unido a un soporte, a través
del cual pasa el sustrato. Consiste en un tubo vertical, relleno o
empaquetado con partículas de catalizador. Se produce la conversión del S
en P a medida que el líquido fluye a través del sistema. La solución de
Sustrato puede alimentarse por la parte superior o inferior de la columna.
a) Reactor de flujo pistón: Es un fermentador continuo. No se produce
el mezclado entre los elementos del fluido a lo largo de la dirección
del flujo: por lo tanto existe una caída gradual y continua de la
 concentración de sustrato y un aumento de la concentración de
producto en la dirección del flujo. Las condiciones en cada punto del
fermentador se mantienen constantes en el tiempo (ee) pero varían a
lo largo del fermentador. Las partículas deben ser incompresibles y
capaces de soportar su propio peso sin deformarse y obstruir el flujo
del líquido.
b) Reactor de lecho fluidizado: Es un fermentador continuo. El
biocatalizador está suspendido en el fluido (enzimas inmovilizadas, o
flóculos microbianos). El biocatalizador se mantiene en suspensión
por las corrientes de líquido que circula en dirección ascendente y
las fuerzas gravitacionales evitan que sean arrastradas. El
biocatalizador está suspendido en el fluido (enzimas inmovilizadas, o
flóculos microbianos). Los elevados flujos a los cuales se debe
introducir la solución de sustrato para fluidizar las partículas del
biocatalizador puede ocasionar que no se alcancen niveles de
conversión altos por lo que es necesario reciclar el sustrato. Puede
ser burbujeado con aire en caso de cultivos aerobios, lo que
aumenta la agitación.
Agitación y aireación
1- Mantener las células en suspensión.
2- Disminuir el tamaño de burbujas, aumentado el área interfacial G-L En
cultivo aerobios, el gas (aire estéril) ingresa al reactor por debajo del
agitador y al ser golpeado por las paletas se divide en miles de burbujas
pequeñas. La agitación es necesaria para:
3- Dispersiar las burbujas de aire en el seno del líquido.
4- Aumentar el tiempo de retención de las burbujas de aire en el seno del
líquido.
5- Impedir la formación de agregados celulares.
6- Eliminar gradientes de concentración de nutrientes.
7- Mejorar la transferencia de calor (para mantener T= cte).
Tipo de agitadores
La elección del rodete depende: la viscosidad del líquido que se va a mezclar y la
sensibilidad del sistema a la cizalla mecánica. Los tipos de agitadores mas usados
son:
a) Agitador de paletas planas (turbina de disco de Rushton) más utilizado en las
industrias fermentativas (líquidos de baja viscosidad).
b) Agitador de paletas cóncava también para baja viscosidad.
c) Agitador de hélice para cultivos de células animales, se usa un único
a) Agitadores de paletas hidrodinámicos para fermentaciones con micelio y que
son altamente viscosos.
Características del diseño:
El nº de agitadores depende de la relación altura/diam.
El diám. del agitador es ~ 1/3 del diámetro del reactor.
El agitador del fondo debe estar colocado a un distancia ~1/3 del diám. del tanque
desde el fondo.
Los agitadores adicionales están espaciados entre sí una distancia ~ 1 a 2 veces
el diám. del tanque.

Esterilización
Esterilización en batch. Este es el método más común para esterilización de
medios de cultivo. Un reactor con su medio de cultivo se puede calentar de dos
formas distintas, por la inyección directa de vapor o por calentamiento indirecto a
través de camisa o serpentín. En todos los casos debe calcularse apropiadamente
el tiempo de retención a la temperatura de trabajo. Para calcular ese valor hay que
tener en cuenta el volumen a esterilizar, la carga microbiana inicial y el valor final
de la concentración de microorganismos deseado. La inactivación térmica de los
microorganismos sigue una cinética del tipo In(No/XL)=Kt en la que N0 y Nf son
respectivamente el número total de microorganismos al comienzo y al final del
ciclo de esterilización. Nf solo puede alcanzar el valor de cero a tiempo infinito por
lo que no puede asegurarse nunca la completa esterilidad del medio de cultivo.
Mientras el valor de N se mantiene por encima de la unidad, el mismo posee
significado real, cuando el mismo disminuyo y toma valores decimales, su
significado es estadístico.
Dado que los bioreactores de gran tamaño pueden tardar un tiempo considerable
en llegar a la temperatura de trabajo y a fin de minimizar el tiempo de retención (lo
cual ahorra energía y disminuye la destrucción de componentes del medio) se
calcula el tiempo que hay que mantener a 121 °C teniendo en cuenta que por
encima de 100 °C ya existe una considerable destrucción celular (Universidad
Nacional de Quilmes, 2005)
Conclusión

Los biorreactores son de suma importancia ya que son contenedores de cualquier

proceso de producción basado en la biotecnología, ya sea para la fabricación de
cerveza, compuestos orgánicos o aminoácidos, antibióticos, enzimas o vacunas o
para procesos de biorremediación. Para todo proceso de biotecnología se encarga
de diseñar el sistema contenedor más apropiado para crear el entorno adecuado
para optimizar el crecimiento y la actividad metabólica del biocatalizador. Los
biorreactores oscilan desde simples recipientes abiertos con o sin agitación a
sistemas integrados asépticos complejos que implican niveles variables de control
avanzado por computadora.

Bibliografía
Garro, O. (2019). Principales tipos de biorreactores [Diapositivas]. Microsoft Power
Point. http://www.aulavirtual-
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Mora, B. (2015). UNIDAD 2. BIORREACTORES Y SU APLICACIÓN -

Bioingeniería. Bioingeniería.
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Ruiz-Leza, H. A., Rodríguez-Jasso, R. M., Rodriguez-Herrera, R., Contreras-

Esquivel, J. C., & Aguilar, C. N. (2007). Diseño de biorreactores para fermentación
en medio sólido. Revista Mexicana de Ingeniería Química, 6, 33–38.
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Universidad Nacional de Quilmes. (2005). Trabajo Practico Esterilización.

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