Laboratorio Mitosis Cebolla Pendiente

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OR TO
UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO
PROGRAMA DE ZOOTECNIA
GUÍA PRÁCTICA LABORATORIO DE BIOLOGÍA
LAB

RIO
2021

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ÍA
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B I O LO G Profesor: Ricardo Soto Agudelo

PRÁCTICA DE LABORATORIO
MITÓSIS

OBJETIVOS:

 Diferenciar los procesos de división celular


 Identificar cada una de las fases del proceso de división mitótica.

INTRODUCCIÓN

División celular. Mitosis y sus fases: la división celular es la base de la reproducción de todos los
organismos; y para que una célula se divida también debe dividirse su genoma, de modo que la
replicación del DNA precede siempre a la división celular.

Se denomina ciclo de división celular a la serie de sucesos que ocurren desde que una célula
progenitora se encuentra en cualquier etapa específica hasta que la célula hija se encuentra en la
misma etapa. Este ciclo se compone de cuatro fases:

Figura 1. Representación del ciclo de división celular

Etapa intermedia G1 (gap 1, 25%): Hay un crecimiento activo del citoplasma, incluyendo la
producción de los orgánulos.

S (síntesis, 40%): Se replica el DNA, de forma que cada cromosoma queda compuesto por dos
cromátidas hermanas que se extienden longitudinalmente una junto a la otra
( http://asociaciones.uca.es/genetica-vid/practicas).

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Figura 2. Representación esquemática de las partes de un cromosoma

http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ingenieria/2001832/lecciones/estructura_genoma.html

Etapa intermedia G2 (gap 2, 25%): Se sintetiza el material citoplasmático necesario para la división
celular (moléculas de tubulina, proteínas de los microtúbulos del huso acromático).

G1+S+G2: Interfase.

Por último llega la mitosis (M, 10%), que es la división celular asociada a la división de las
células somáticas (células de un organismo eucariótico que no van a convertirse en células
sexuales). La mitosis presenta cuatro fases:

1ª) Profase: Comienzan a condensarse los cromosomas, es decir, ya son visibles, aunque todavía se
pueden ver mejor. La membrana nuclear se rompe.

CROMOSOMAS: son visibles al microscopio de luz, posiblemente debido al enrollamiento,


acortamiento y engrosamiento. Al final de la profase las dos cromátidas idénticas o “hermanas”
pueden verse.

NUCLÉOLO: Desaparece al finalizar la profase.

MEMBRANA NUCLEAR: Va desapareciendo lentamente, en la profase tardía se ha borrado casi


toda.
CENTROSOMA: Se presenta usualmente cerca al núcleo, como una región más clara con fibras
radioladas a manera de estrella y una o dos granulaciones llamadas CENTRIOLOS, en esta fase de
la mitosis emigran a lado y lado de la célula.

A medida que se separan los centriolos, se va formando el HUSO MITÓTICO que se extiende de
un centriolo a otro. El huso mitótico está compuesto de micro-túbulos y proteínas delgadas o rayos
astrales, en este momento los cromosomas se contraen y quedan más cortos y gruesos.

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2ª) Metafase: Se empiezan a ver las fibras del huso acromático. Los cromosomas se encuentran en
su estado más condensado, es decir, es el momento en el que son visibles con mayor claridad. Cada
pareja de cromátidas hermanas se sitúan en el plano ecuatorial de la célula.

3ª) Anafase: Comienza cuando se separan la pareja de cromátidas, moviéndose cada una a uno de
los polos ( http://asociaciones.uca.es/genetica-vid/practicas).

CROMOSOMAS: Los centrómeros se separan simultáneamente en todos los pares de cromátidas y


estas se alejan de modo que cada cromátida se convierte en un cromosoma aparte, al parecer
arrastrados por las fibras del huso hacia polos opuestos. Los brazos de los cromosomas adoptan
formas diferentes según la ubicación del centrómero. Los metacéntricos tienen forma de V, los
submetacéntricos de J y los telocéntricos forma de bastón.

Figura 3: Representación esquemática de los cromosomas según la posición del centrómero


www.oni.escuelas.edu.ar

La anafase es la parte más rápida de la mitosis.

4ª) Telofase: Se empieza a formar la nueva membrana nuclear de cada célula hija. Los cromosomas
(antes cromátidas) se empiezan a descondensar.

Al final del proceso, la dotación cromosómica de cada célula hija es idéntica a la de la célula
original.

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Figura4. Micrografías de las fases de la división celular mitótica


http://asociaciones.uca.es/genetica-vid/practicas

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La finalidad de esta práctica es el reconocimiento de las distintas etapas de la división celular:


Interfase, Profase, Metafase, Anafase y Telofase.
MATERIALES

o
o Bulbos de cebolla y cabeza de ajo
o Bisturí
o Beakers
o Cajas Petri
o Palillos
o HCl 1N
o Orceina acética o lactoacética
o Porta y cubre objetos
o Vidrio reloj
o Incubadora
o Papel secante
o Microscopios
o Aceite de inmersión
o Pinceles
o Agua destilada
o Agujas de insulina


PROCEDIMIENTO

1. Escoja un bulbo de cebolla fresca y uno de ajo, elimine las raíces secas que se encuentran
en la base de los bulbos.
2. En un beaker apropiado coloque a enraizar varias cebollas y ajos, cinco días antes de la
práctica, vierta agua en el beaker, hasta tocar la base de la cebolla.
3. Coloque el recipiente en la semi-oscuridad a temperatura ambiente.
4. Mantenga la base de la cebolla húmeda, mediante la adición de agua si es necesario.
5. Cambie el agua del recipiente cada 24 horas. Al transportar la cebolla cuide de no maltratar
las raicillas.

Figura 5. Procedimiento para obtención de raicillas de cebolla


(Manual de prácticas de Laboratorio Biología Celular. Universidad Autónoma Metropolitana. Unidad Iztapalapa. Disponible
en: www.izt.uam.mx/ceu/.../manual%20de%20biologia%20celuarok.pdf).

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Figura 6. Representación esquemática del procedimiento para la obtención de ápices de raíz de


cebolla o ajo para observación de mitosis
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6. Cuando las raíces nuevas alcancen 1.5 a 2.0 cm. de longitud, cortarlas a 2mm del ápice.

Con un bisturí se corta el extremo de varias raicillas, procurando que su longitud sea de
unos 2 a 3 mm, ya que es en esta zona de la raíz, donde se encuentran las células en
división.

Figura 7. Izq. Raíces en cebolla roja. Der. Parte de la raíz de cebolla que se toma para
observar el proceso de mitosis
https://inakiresa.wordpress.com/category/practicas/page/4/
http://mmegias.webs.uvigo.es/1-vegetal/v-imagenes-grandes/meristemo_primario.php

7. Coloque las raíces en un vidrio de reloj, añada 5 gotas de HCl 1 N.

8. Lleve las raicillas a una incubadora durante 10 minutos a 60 Cº o caliente al mechero


suavemente durante 1 minuto.

9. Coloque en un portaobjetos 3 ápices, agregue 1 gota de orceína acética y disponga en


cámara húmeda durante 45 minutos. Eventualmente, punce las raicillas para facilitar la
entrada de la orceina acética, que tiene por función teñir los cromosomas.

10. Elimine el exceso de orceina empleando papel secante, para ello, deposite suavemente el
cubreobjetos y realice el llamado “squash” (aplastamiento). Para ello, proceda de la

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siguiente manera: coloque sobre el cubreobjetos papel de filtro o secante y luego presione
suavemente con la yema del dedo pulgar haciendo un giro de más o menos 60º, para así
conseguir que las células queden en un solo plano (squash) y se elimine el exceso de
colorante. Sin necesidad de retirar el papel de filtro se golpea, también suavemente, con el
extremo romo de una aguja enmangada o bien con el extremo plano de un lápiz para
completar la disgregación de las células meristemáticas.

Figura 8. Representación de la técnica para obtener el micropreparado de células en las cuales se


observará la mitosis
profyefersonserrano.jimdo.com

11. Observe al microscopio en 10, 40 y 100x (recuerde usar aceite de inmersión para 100x) y
dibuje. Realice esquemas de un núcleo en interfase y en las cuatro diferentes etapas de las mitosis
observadas durante la práctica. Identifique el número de cromosomas en metafase y anafase.

12. Indique las diferencias observadas para las células en estado de mitosis de cebolla y de ajo

CUESTIONARIO

1. Indique cuál es la acción de un agente mitógeno y de uno mitostático. Dé ejemplos de


ambos.
2. Defina cuál es la importancia de la meiosis y de la mitosis y en qué tipo de células se
realizan.

BIBLIOGRAFÍA

Curtis, H. & Barnes, S., 2007. Biología. Panamericana. Buenos Aires. 7ª edición.

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