UNIVERSIDAD MAYOR, REAL Y PONTIFICIA DE SAN FRANCISCO XAVIER DE

CHUQUISACA

FACULTAD DE MEDICINA

CATEDRA DE FISIOLOGIA HUMANA

RECUENTO CELULAR

Dr. Anthony D. Albornoz M. Dr. Enver R. Beltrán

DOCENTE PRACTICAS DOCENTE PRÁCTICAS

GESTION 2020
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DEFINICION.

Determinación de la concentración de células en una suspensión, realizada en la cámara de

Neubauer o hemocitometro.

OBJETIVOS DEL RECUENTO CELULAR

 Realizar un recuento de células en la cámara de Neubauer

 Realizar recuento de leucocitos, hematíes y otras variedades de células corporales.

GENERALIDADES

El recuento de leucocitos mediante cámara consiste en determinar el número de ellos presentes

en un volumen determinado de sangre diluída. A esta muestra se le lisan los hematíes para
facilitar la visualización y recuento de leucocitos. La muestra de sangre se diluye lo suficiente
para que los leucos estén separados unos de otros y así poder contarlos. El recuento se realiza
en una cámara de Neubauer o similar de dimensiones conocidas.
La profundidad de la cámara es de 0,1 mm. Los cuadrados de las esquinas miden 1 mm 2 de
superficie y están subdivididos en 16 cuadrados más pequeños de 0,25 mm de lado. El cuadrado
del centro está dividido en 16 cuadrados de 0,2 mm de lado y éstos a su vez están subdivididos
en 16 cuadrados de 0,05 mm de lado.

CAMARA DE NEUBAUER O HEMOCITOMETRO

La cámara de Neubauer (es un instrumento utilizado en medicina y biología para realizar el

recuento de esporas y células en un medio líquido, que puede ser; un cultivo
celular, sangre, orina, líquido cefalorraquídeo, etc.)

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La cámara de recuento, Neubauer, es un dispositivo de precisión hecho de vidrio óptico especial.

Se utiliza para contar células u otras partículas en suspensiones bajo el microscopio. Las cámaras
de recuento se utilizan principalmente para el análisis de sangre (recuento de leucocitos, eritrocitos,
trombocitos). Además, las cámaras de recuento sirven para contar bacterias, espermatozoides y
esporas de hongo. La cámara de Neubauer o, también llamada, Hematocimetro es un grueso
portaobjetos de cristal, dividido en tres secciones, la sección media a su vez cuenta con un rayado
fino formando una cuadrícula de 3 mm x 3 mm identificable fácilmente al microscopio.

Así mismo, esta sección está a exactamente 0.1 mm más bajo que las secciones laterales,
estableciendo un volumen fijo una vez colocado el cubreobjetos especial (cubrehematocimetro).

Esquema que indica la profundidad de la cámara

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Al observar al microscopio la sección central, podremos identificar un cuadrado de tres por tres,
que en conjunto mide 9 mm2 .

Dimensiones de la cuadrícula del hematocimetro

En esta cuadrícula podemos localizar fácilmente los cuatro cuadrantes que están en los extremos,
cada uno de ellos divididos a su vez en un conjunto de 4 x 4, en el esquema correspondiente se
muestran con la letra A. En la parte central se puede apreciar un cuadro central de 1 x 1 mm dividido
en 25 cuadrantes de 0.2 x 0.2 mm, en la figura se encuentra delimitada por un recuadro e indicado
por una flecha B.

Cuadrantes del hematocimetro, indicando la cuadrícula central

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El cuadro central, al observarlo a mayor aumento, vemos que cada cuadro de esos cinco limitados
por una triple línea, están constituidos a su vez por un conjunto de 4 x 4. De estos 5 cuadros se
utilizan de manera rutinaria los cuatro conjuntos de los extre mos y el central,

Cuadrícula central de la cámara, indicando los conjuntos utilizados y sus dimensiones

Para identificar en cuál de los cuadrantes centrales nos encontramos, basta con localizar las líneas
prolongadas, en la siguiente figura podemos ver esa característica y el cuadro correspondiente:

Líneas prolongadas indicando su correspondencia con el cuadrante a contar

A diferencia de los cuadrantes 1, 2, 4 y 5, el cuadrante 3 no presenta estas líneas por ser un

cuadrante central y estar rodeado de otros cuadrantes, el cuadro 3 presenta unas líneas como las
mostradas en la siguiente figura

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Cuadro central rodeado por otros cuadrantes, compararlo con la anterior figura

Los cuadrantes a utilizar dependerá de la cantidad y tipo de célula a contar, de manera rutinaria se
tiene que:

 Leucocitos se contabilizan en los cuadrantes A.

 Hematíes, plaquetas y espermatozoides se contabilizan en el cuadrante B.

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RECUENTO DE LEUCOCITOS

LEUCOCITOS

Los leucocitos son un conjunto de células que se encuentran en la sangre, el sistema linfático
y los tejidos. A su vez, están formadas por 5 tipos de células diferentes, cada una de ellas con
funciones específicas. La función principal de los leucocitos es la defensa del organismo
frente a agresiones externas, como una infección, una inflamación, una reacción alérgica, un
proceso autoinmune.

Cuando nos realizamos una analítica convencional siempre se refleja el recuento del total de los leucocitos.
También se analiza proporción de los diferentes leucocitos (número, forma y madurez celular). El número
total de leucocitos puede variar con la edad, la raza, el consumo de tabaco, la ingesta de determinados
fármacos, etc. Por lo que el resultado de la analítica debe interpretarse individualmente y teniendo en cuenta
el entorno médico del paciente, los síntomas y tratamientos realizados.

El recuento de leucocitos contribuye al diagnóstico de procesos inflamatorios, infecciosos, alérgicos,

inmunes, cancerígenos. Asimismo, la monitorización de los valores en analíticas sucesivas nos permite
conocer la respuesta al tratamiento y la evolución de la patología. Por ejemplo, solicitaremos una analítica
con recuento de leucocitos ante síntomas como fiebre, mal estado general, dolor, pérdida de peso
injustificada, astenia, cansancio. Puede ser necesario complementar el estudio mediante un aspirado o
biopsia de la médula ósea.

BARRERAS DE PROTECCION BIOLOGICA

 Guantes de látex estériles a medida

 Barbijos (NK – 95) con respirador
 Antiparras
 Mandil quirúrgico

VALORES DE REFERENCIA

- De 4.500 a 11.000 células x mm2 de sangre

- Recuento por encima de los rangos se denomina LEUCOCITOSIS

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- Recuento por debajo de los rangos se denomina LEUCOPENIA

RECUENTO DE LEUCOCITOS EN CAMARA DE NEUBAUER

MATERIALES

 Sangre hecha incoagulable con EDTA (tubo con tapón violeta sistema vacutainer)
 Cámara de Neubauer o hemocitometro
 Tubos de hemolisis
 Liquido de Turk
 Gradilla para tubos de hemolisis
 Pipeta de 2 ml (200 ul)
 Gasa pequeña
 Micropipeta automática (20 ul)
 Puntas de micropipeta o Tips (amarillos) descartables
 Marcador indeleble
 Contometro
 Microscopio biocular
 Contenedor de bioseguridad para descartar material contaminado

PROCEDIMIENTO

PASO 1

- Tenga todo el material preparado para evitar contratiempos en la técnica

TECNICA

1. Tome un tubo de hemolisis, rotule con el código del paciente y proceda a cargar con la
micropipeta automática 20 ul de la muestra sanguínea del paciente previa
homogenización de la misma.

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2. Añadir 30 ul de líquido de Turk, al tubo de hemolisis con la sangre del paciente. Factor de
dilución de 1/100

2. Inmediatamente homogeneizar la dilucion con movimientos rotatorios para lisar los hematies, hasta que
haya un cambio de color ( color cafe caoba)

4. Dejar reposar unos minutos.

5. Preparar la cámara de Neubauer, adosando a esta el

cubrecamara.

6. Seguidamente con la pipeta automática cargar 10 ul del lisado de hematíes a la cámara por capilaridad
apoyando suavemente la punta del tip en uno de los extremos del cubrecamara. (No debe rebalsar o inundar
el retículo)

7. Dejar reposar 30 segundos.

8. Luego enfocar el retículo en el microscopio objetivo 10x y proceder a contar los leucocitos (se ven como
puntos oscuros) con la ayuda del contometro, y en los cuadrantes de los extremos (4).

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9. Por último la suma total de los leucocitos contados en los 4 cuadrantes, se multiplica por el factor 50,
por ejemplo:

- 1er cuadrante conto: 85 células

- 2do cuadrante conto: 95 células
- 3er cuadrante conto: 80 células
- 4to cuadrante conto: 98 células
Total 358 x 50 = 17.900

Interpretación: LEUCOCITOSIS

10. Elimine todo el material correctamente y siguiendo todas las normas de bioseguridad.

“toda muestra biológica es potencialmente infectante hasta que no se pruebe lo contrario”

INTERPRETACION CLINICA.

Un índice bajo de Leucocitos (LEUCOPENIA) puede deberse a:

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 Infecciones víricas como la gripe o enfermedades como el sarampión, que afectan a los glóbulos
blancos haciendo que desciendan.
 Algunos medicamentos como los antipsicóticos y antiepilépticos.
 Enfermedades de la médula ósea, congénitas o adquiridas, lo que impide su producción.
 Infecciones que dañan la inmunidad o defensa de la persona. Hablamos de enfermedades como el
VIH, lupus, tuberculosis o malaria.
 Tumores cancerosos que afectan a la médula ósea.
 Insuficiencia hepática o del bazo.
 Estar sometido a un tratamiento de quimioterapia o radioterapia.

Es importante conocer cuáles son los síntomas que constituyen un aviso de leucopenia. Los casos leves no
suelen presentar problemas, pero a medida que los glóbulos blancos descienden es habitual que el paciente
sienta una sensación de malestar general, que va unida a:

 Astenia o decaimiento.
 Vértigos.
 Náuseas o pérdida de apetito.
 Infecciones de repetición.

Un índice alto de Leucocitos (LEUCOCITOSIS) puede deberse a:

 La respuesta normal del cuerpo a una infección.

 Ciertos medicamentos, como los corticoesteroides

 Cáncer de médula ósea (como leucemia)

 Liberación de glóbulos blancos inmaduros o anormales de la médula ósea a la sangre

UTILIDAD CLINICA

Los datos obtenidos del recuento celular pueden revelar:

1. Recuento de leucocitos normales:

2. Recuento aumentado de leucocitos. (LEUCOCITOSIS)

3. Recuento disminuido de leucocitos. (LEUCOPENIA)

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LEUCOCITOSIS.

Hay muchas definiciones: aumento en el número de células de la serie blanca de la sangre, incremento de
los leucocitos, aumento de los leucocitos por arriba del valor de referencia, etc. Puede deberse al aumento
de uno, de varios o de todos los tipos de leucocitos, motivo por el que todo recuento anormal deberá de
acompañarse por una medición diferencial: el aumento de los neutrófilos (neutrofilia) es la causa más común
de leucocitosis; le siguen en frecuencia el aumento de linfocitos (linfocitosis) y de monocitos (monocitosis);
no es frecuente encontrar aumento de eosinófilos o de basófilos y es raro encontrar un aumento aislado de
estas células tan grande como para ocasionar leucocitosis.

Al aumento de todos los granulocitos se le llama granulocitosis.

La leucocitosis puede ser fisiológica o patológica. Los mecanismos y las causas de la leucocitosis son
muchos y muy complejos. Se recomienda consultar la literatura especializada si se desea ahondar en este
tema.

A la cuenta de leucocitos de 50.000/mm3 o mayor se le denomina reacción leucemoide (o mielemia),

término que se suele utilizar para diferenciar este grado de leucocitosis de la leucemia. En la reacción
leucemoide los leucocitos circulantes suelen ser maduros. En cambio, en la leucemia, la médula ósea o el
tejido linfoide producen leucocitos en exceso, inmaduros y disfuncionales, frecuentemente a costa de la
disminución proporcional de los otros elementos formes de la sangre (eritrocitos y plaquetas), lo cual
ocasiona anemia, defectos de la coagulación y defectos inmunitarios, situaciones que pueden llegar a ser
mortales. Como la leucemia consiste en un aumento desproporcionado y desenfrenado de nuevas e
innecesarias células, se le clasifica como un cáncer (cáncer de la sangre). Para diferenciar una reacción
leucemoide de una leucemia se debe de realizar y de analizar frotis de sangre periférica y aspirado de médula
ósea.

El recuento diferencial de leucocitos permite establecer los conceptos de neutrofilia, neutropenia,

agranulocitosis, eosinofilia, eosinopenia, basofilia, basopenia, monocitosis, monocitopenia, linfocitosis y
linfopenia que pueden estar asociados a enfermedades benignas como procesos infecciosos, procesos
inflamatorios y mielotoxicidad, entre otros, o enfermedades malignas como leucemia y mieloptisis.

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RECUENTO DE HEMATIES

Los glóbulos rojos o eritrocitos o hematíes son el tipo de célula más numerosa de la sangre
ya que constituyen el 99% de los elementos formes de la sangre. En realidad no son
verdaderas células porque no tienen núcleo ni otras organelas y su tiempo de vida es
limitado (unos 120 días). Tienen forma de discos bicóncavos, con un diámetro medio de 8
micras, son muy finos y flexibles y pueden deformarse para circular a través de los capilares más estrechos.
En el hombre normal su número es de unos 5,200.000/m3 (5x1012/litro ó 5 billones de hematíes por litro
de sangre) y en la mujer 4,700.000/mm3 (4,7x1012/litro) de sangre. Su principal función es la de transportar
la hemoglobina y, en consecuencia, llevar oxígeno (O2) desde los pulmones a los tejidos y dióxido de
carbono (CO2) desde los tejidos a los pulmones. La hemoglobina (Hb) es la responsable del color rojo de
la sangre y es la principal proteina de los eritrocitos (hay unos 15 g/dl de sangre). Cada molécula de Hb está
formada por 4 subunidades y cada subunidad consiste en un grupo hemo (que contiene 1 átomo de hierro)
unido a una globina. La fracción con hierro de la Hb se une de forma reversible al O2 para formar
oxihemoglobina.

VALORES DE REFERENCIA

De 4.000.000 a 6.000.000 células x mm2 de sangre (4,5-5,9 millones/mm3 en hombres y 4-5,2

millones/mm3 en mujeres)

- Recuento por encima de los rangos se denomina POLICITEMIA

- Recuento por debajo de los rangos se denomina OLIGOCITEMIA

MATERIALES

 Pipeta de 2 ml
 Micropipeta automática de 10 microlitros
 Puntas de micropipeta
 Guantes
 Cubreobjetos
 Cámara de Neubauer
 Tubo de ensayo
 Microscopio óptico

REACTIVOS

 Sangre anticoagulada con EDTA

 Líquido de Hayem

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TECNICA

1. Con una pipeta echar en un tubo de ensayo 2 ml de líquido de Hayem.

2. Con la micropipeta automática de 10 microlitros retirar dicho volumen del
tubo de ensayo.

3. Echar 10 microlitros de sangre en el tubo, haciendo un factor de dilución de 1/200.

4. Homogeneizar bien la mezcla.
5. Poner el cubreobjetos sobre la cámara de Neubauer.
6. Cargar la cámara con la micropipeta automática.

7. Dejar reposar la cámara durante 5 minutos.

8. Observar al microscopio óptico, realizando un recuento de cinco de los cuadrados de 0,2 mm de
lado del cuadrado central.

9. El total de los hematíes contados en los 5 cuadrados pequeños, se multiplica por el factor (50), y el
resultado se multiplica por el factor de dilución (200) y se expresa en millones de células por mm3
de sangre.

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LECTURA DE RESULTADOS

Se leyeron 5 cuadrados al azar de los 16 que consta el cuadrado

central. Es conveniente tener cuidado al contar los hematíes que están
en contacto con las rayas que delimitan los cuadrados. Si un hematíe
está en contacto con las rayas superior y derecha, entonces se
cuenta. En cambio, si está en contacto con las rayas inferior e
izquierda, no se cuenta.
Por ejemplo:
Los conteos en los 5 cuadrados pequeños fueron los siguientes: 95, 95, 82, 83 y 79, haciendo una suma de
434 hematíes en esos cinco cuadrados. El cálculo consiste en una simple regla de 3, si hay 434 hematíes en
5*(0,1*0,2*0,2) mm3, en 1 mm3 habrá X hematíes.
La resolución de esta regla de 3, una vez despejada la X, es de 21700 hematíes/mm 3 diluidos. Esa cifra hay
que multiplicarla por la inversa del factor de dilución (1/200), es decir:
434 x 50 = 21.700

21700 x 200 = 4.340.000 / mm3 (4,34*106 hematíes/microlitro.)

INTERPRETACION CLINICA.

RECUENTO DE ERITROCITOS ALTO (POLICITEMIA)

Un recuento de glóbulos rojos elevado puede deberse a niveles de oxígeno bajos, enfermedad renal u otros
problemas.
Niveles bajos de oxigeno
El organismo puede aumentar la producción de glóbulos rojos para compensar cualquier afección que
provoque niveles bajos de oxígeno, entre ellas:

 Enfermedad cardíaca (como la enfermedad cardíaca congénita en los adultos)

 Insuficiencia cardíaca

 Una afección presente en el nacimiento que disminuye la capacidad de transportar oxígeno de los
glóbulos rojos (hemoglobinopatía)

 Alturas elevadas

 Enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) (enfermedad pulmonar obstructiva crónica) —

síntomas que empeoran

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 Fibrosis pulmonar (cicatrices y lesiones en los pulmones)

 Otras enfermedades pulmonares

 Apnea del sueño

 Dependencia de la nicotina (tabaquismo)

 Deshidratación (Si el componente líquido de la sangre (plasma) disminuye, como sucede con la
deshidratación, el recuento de glóbulos rojos aumenta. Esto se debe a que se genera una mayor
concentración de glóbulos rojos. La cantidad real de glóbulos rojos es la misma).

 Enfermedad renal, n raras ocasiones, en algunos tipos de cáncer renales y a veces después de los
trasplantes de riñón, los riñones podrían producir demasiada eritropoyetina. Esto aumenta la
producción de glóbulos rojos.

 Producción excesiva de médula ósea

 Policitemia vera

 Otros trastornos mieloproliferativos

RECUENTO DE ERITROCITOS POR DEBAJO DE LOS RANGOS DE REFERENCIA

(OLIGOCITEMIA)

Los valores bajos de hematíes en sangre indican que hay pocos glóbulos rojos (también llamados hematíes
o eritrocitos) circulando en la sangre. Los hematíes en volumen se miden en número de millones por
microlitro de sangre.

Los glóbulos rojos contienen una proteína denominada hemoglobina encargada de aportar oxígeno a los
tejidos del cuerpo. Por ello, si hay un número insuficiente de glóbulos rojos es casi seguro que haya déficit
de hemoglobina y se padezca anemia.

Hay que resaltar que la anemia hace referencia a valores bajos de hemoglobina en sangre. En algunas raras
ocasiones es posible que exista eritrocitopenia sin anemia, es decir, bajo recuento de glóbulos rojos por
volumen pero con la hemoglobina en valores normales.

Los niveles bajos de hematíes en la sangre pueden ser indicativo de:

 Anemia hemolítica
 Aplasia medular

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 Anemia megaloblástica
 Anemia ferropenia
 Úlcera gastroduodenal
 Pólipos
 Cáncer de colon
 Leucemia
 Mieloma múltiple
 Linfoma
 Insuficiencia renal
 Hepatitis C
 Cirrosis hepática

CUADRO DE VALORES DE HEMOGLOBINA RESPECTO AL HEMATOCRITO

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BIBLIOGRAFIA.

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- VEIGA, M. L, etc. ASPECTOS MORFOLÓGICOS Y CITOQUÍMICOS DE LAS CÉLULAS
SANGUÍNEAS.200.Disponible en:http://www.scielo.cl/scielo.

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