Análisis Cualitativo en Espectrofotometría Ultravioleta - Visible
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Análisis Cualitativo en Espectrofotometría Ultravioleta - Visible
FACULTAD DE CIENCIAS
ANALISIS INSTRUMENTAL
Fecha: 13/07/2021
Figura 7- Esquema que representa el fenómeno que describe la ley de Lambert y Beer.
P0 es la potencia de la luz monocromática incidente; P es la potencia de la luz luego de
atravesar la solución de concentración c y b es el camino óptico.
A: absorbancia, adimensional.
ε: coeficiente de extinción molar ó absortividad molar, se define como la unidad de
absorbancia por unidad de concentración y por unidad de longitud de la trayectoria de
luz; es una constante definida que depende de la solución y la longitud de onda, en
general su unidad es la inversa de la molaridad por la inversa de cm, es decir (M x cm)-
1 ó L/mol x cm
b:es el camino óptico, en general se mide en cm.
c: es la concentración del analito expresada en molaridad (M).
La ley de Lambert Beer es una ley límite, es decir que sólo se cumple en determinadas
condiciones: luz monocromática y soluciones diluidas. (Skoog)
Desviaciones de la ley de Lambert Beer
1- Si la solución del analito es concentrada (en general mayor a 0,010 M) se pierde
la relación lineal entre la A y la c, las moléculas muy próximas entre si comienzan
a interferir entre ellas en el proceso de absorción de energía. Decimos que la
recta se “plancha” a altas concentraciones.
2- Desviaciones químicas: Se pierde la relación lineal entre A y c cuando existen
interferencias en la solución, tales como: - asociación o disociación del analito
en solución - reacciones del analito con el solvente - presencia de otros
componentes en la muestra que también absorben luz incidente.
3- Desviaciones instrumentales: La ley de Lambert-Beer se aplica usando luz
monocromática. Sin embargo, en la práctica, el espectrofotómetro utiliza una
fuente policromática de luz y mediante un sistema óptico adecuado (una red de
difracción o un filtro) se selecciona un segmento de longitudes de onda centrado
en la que se desea utilizar, a este segmento se lo denomina “banda”. (Química
Analítica)
Utilizando la ley de Lambert y Beer
Se aplica cuando se conoce el valor del coeficiente de Absortividad Molar para el analito
que queremos cuantificar a la longitud de onda de trabajo y en la solución utilizada (datos
de bibliografía). En estos casos medimos la absorbancia de la muestra a analizar y
utilizando la Ley de Lambert Beer podemos despejar el valor de la concentración. Esta
modalidad de trabajo es la que se utiliza para medir pigmentos en extractos vegetales o
productos agroindustriales. (PRINCIPIOS DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL)
MÉTODO DE LAS ADICIONES MÚLTIPLES APLICADO PARA LA
DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE UNA ESPECIE QUÍMICA EN UNA
MUESTRA DADA.
El método de adiciones estándar a las muestras se usa cuando es difícil o imposible
duplicar la matriz de la muestra. Se adiciona a la muestra una cantidad o cantidades
conocidas de una disolución estándar del analito. En el método de un solo punto, se
toman dos porciones de muestra: una se mide como de costumbre, y a la otra se le
agrega una cantidad conocida del analito. Ambas respuestas se utilizan para calcular la
concentración de analito en la muestra. En el método de adiciones múltiples, a varias
alícuotas de muestra se le agregan cantidades conocidas de la disolución estándar del
analito y se obtiene la curva de calibración de adiciones múltiples. (Underwood, 1995)
Bibliografía
Harris., D. C. (2001). Análisis Químico Cuantitativo . 2ª Ed. Reverté.
SKOOG, D., Leary J.J., H. F., & P. (1998). PRINCIPIOS DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL. Ed. McGraw-
Hill.