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RECUENTO DE BACTERIAS DEL AIRE

I. INTRODUCCION:

En estudios realizados dentro de universidades se han reportado

diversidad de bacterias en aires interiores. Soto et al llevaron a cabo un
estudio en la Universidad de Murcia, en la Facultad de Biología, donde
identificaron bacterias de los géneros Micrococcus, Staphylococcus, La
determinación de los microorganismos en el aire interior se vuelve
importante cuando se analiza la incidencia en la salud de las personas
que ocupan las edificaciones, ya que el aire es un medio de dispersión
de muchos microorganismos patógenos, entre ellos las bacterias. Estas
bacterias transportadas en el aire tienen un efecto en la calidad del aire
interno de viviendas y oficinas, hospitales, industrias de manufactura y
farmacéuticas, laboratorios, salones de clase, archivos documentales,
museos, bibliotecas y librerías.
Es cada vez más frecuente que dentro de las normativas de control de
calidad se incluya un control microbiológico ambiental y de superficies y
se hace prácticamente imprescindible en actividades relacionadas con
productos destinados a sanidad o alimentación.

Para llevar a cabo este análisis debemos establecer previamente:

 El método de muestreo que se va a utilizar
 Los microorganismos que se desean aislar y cuantificar
 los lugares de muestreo
 la posición del muestreador
 número de muestras en cada punto
 frecuencia de los muestreos

Todos estos puntos dependen de las características específicas del

ambiente que se pretende evaluar.Una vez determinados,
conseguiremos análisis que podremos comparar y por tanto, obtener
datos estadísticos. Cualquier comparación de resultados ha de tener en
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cuenta los procedimientos de muestreo utilizados ya que, existen

diferencias importantes en la eficacia de captación de los distintos
métodos.

Al realizar la valoración de los resultados obtenidos a partir de la

medición de microorganismos en ambiente o en superficie, nos
encontramos la mayoría de las veces con el problema de la no
existencia de criterios legales de valoración. Por ello, sólo nosotros
mismos podremos valorar nuestras estadísticas y fijar nuestros
parámetros.

II. OBJETIVOS:

 Cuantificar las unidades formadoras de colonias bacterianas por

metro cubico de aire (UFC/m3)

 Determinar la calidad microbiológica ambiental del aire (bacterias

heterótrofas)

III. MATERIALES:

 Placas petri
 Medio TSA
 Cocina eléctrica
 Lapicero rotulador
 1 Matraz
 Agar para recuento en placa, PCA
 Caldo BIH
 Incubadora

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 Pipetas 1 ml

IV. MÉTODO Y PROCEDIMIENTOS:

A. TÉCNICA DE SEDIMENTACIÓN EN PLACA

 El método utilizado es el de sedimentación en placas de agar,

que consiste en exponer placas con un medio nutritivo sólido
al ambiente durante un periodo determinado, incubar las
placas y hacer el recuento de las colonias obtenidas.

 Con este método se detectan los microorganismos que caen

sobre la superficie de la placa, lo cual simula lo que ocurre
normalmente cuando estamos trabajando en el laboratorio.
Como las condiciones ambientales influyen en la
sedimentación de los microorganismos es necesario que,
cuando se realiza este método, las placas se expongan
siempre en el mismo lugar y bajo las mismas condiciones
para poder comparar los resultados obtenidos.

 Verter el medio PCA en las placas Petri.Destapar la placa de

PCA en el lugar cuyo nivel de contaminación se desee
examinar durante diferentes intervalos de tiempo: 0,5; 1; 1,5
horas.

 Tapar las placas e incubar durante 24-48 horas a 37 °C.

Determinar el número de aerobios mesófilos totales
ambientales.

B. MUESTREO POR MÉTODO VOLUMÉTRICO EMPLEANDO

JERINGA DE 60 mL
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 Se preparará un matriz conteniendo caldo para cultivo BHI,

considerando 3.3 g del mismo para 90 ml de agua
destilada.
 Para muestrear el aire se utilizó jeringas de 60 ml cada una
para cada área a muestrear, se realizará 20 aspiraciones
en cada área.

 Después de realizada cada aspiración se descargará el

aire contenido en la jeringa dentro de un matraz con medio
BHI. Se utilizará la metodología de impinger o burbujeo,
que consiste en tomar aire con un dispositivo automático o
mecánico y depositarlo en forma inmediata en un medio de
cultivo líquido.

 Incubación de muestras con BHI

 El matraz que contiene el medio BHI para crecimiento de
bacterias se incubará a 37°C por u tiempo de 48 horas.

C. Enumeración de bacterias

 Para la enumeración se utilizará el método de recuento en

placa, con la ayuda de una pipeta se obtuvo 0,1 ml de
muestra del matraz con BHI y se vierte en una placa Petri
vacía y esterilizada, a la cual después se agregará 10 ml
de Agar Plate count.

 Luego se agitará mediante movimientos suaves hacia la

derecha e izquierda y se dejará solidificar por 10 minutos.
 De ahí se llevará las placas a estufa a 37°C por 48 horas.

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 Después de ese tiempo se realizará el conteo de bacterias

UFC/ml = Nº colonias x inóculo x factor de dilución

V. RESULTADOS:

UFC = (nº de colonias de placa / 2) x 65

30 minutos
UFC= (140 /2) x 65 = 4550 UFC / m3

UFC = (nº de colonias de placa / 2) x 65

1 hora UFC= (120 /2) x 65 = 3900 UFC / m3

UFC = (nº de colonias de placa / 2) x 65

1.5 horas
UFC= (185/2) x 65 = 6012 UFC / m3

Observación de filamentos en tinción

Placa dejada en aire de salón 101
Gram de probable hongo

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VI. DISCUSION
 El aire no posee microorganismos propios, pero estos son capaces
de dispersarse en ambientes exteriores e interiores gracias a las
corrientes de aire, las cuales se encargan de recoger los
microorganismos presentes en otros ambientes naturales como el
suelo, el agua, las plantas y la microbiota humana. Además, algunas
actividades industriales, comerciales y sociales han contribuido a la
producción de desechos, emitiendo partículas que ayudan al
camuflaje y dispersión de los microorganismos.

 Los hongos representan uno de los grupos más diverso de los

microorganismos de la atmósfera y alcanzan concentraciones
elevadas en determinadas épocas Del año por tal motivo se decidió
usar un medio especial para hongos, donde se observa una gran
variedad de colonias de hongos.

 El recuento de bacterias y hongos en el aire es un factor importante

para determinar la calidad del mismo y de igual forma es importante
la identificación de las bacterias y hongos que predominan para
determinar si representan riesgo para la salud humana. La rama de la
Aeromicrobiología que estudia la variación temporal y espacial de
esporas y propágulos fúngicos, así como la influencia de los factores
que afectan dichas variaciones se le denomina Aeromicología.
 es posible identificar aparentemente dos tipos de hongos,
correspondientes a una colonia aterciopelada y pulvurenta de color
verde oliva; de los cuales el más observado en toda la micrografía
pertenece al género Cladosporium, caracterizado por presentar hifas
finas, septadas, ramificadas de color hialino a marrón, que sostienen
cadenas ramificadas de conidios unicelulares, elipsoides o
cilíndricos.Se identifica también la presencia del género Aspergillus,
sin poder identificar la especie, pero al observar microscopías de
referencia se presume que se podría tratar de caracterizado por
ascocarpos esféricos con ascosporas.

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VII. CONCLUCIONES

 El Área del laboratorio no se encuentra dentro de los parámetros

ya que es > 2000 UFC/m3

 Según Norma UNE 100012-2005: Estándar microbiológico de

superficies interiores previo a la limpieza: Se considera
INACEPTABLE la cantidad de flora microbiana en superficies
interiores, cuando el recuento es superior a 100 ufc/25 cm2.

 Estándar microbiológico de superficies, posterior a la limpieza: Se

considerarán dos niveles obtenidos por comparación de los
valores previos y posterior a la limpieza: El valor límite de
aceptabilidad de flora microbiana, que deberá ser menor de 100
ufc/25 cm2.El valor de porcentaje de reducción, que deberá ser
mayor al 85%.

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VIII. REFERENCIAS BILIOGRAFICAS

 Bohórquez, C. A. R., Alvarado, D. F. C., & Peñaloza, G. S. A.

(2016). Determinación de la calidad bacteriológica del aire en un
laboratorio de microbiología en la Universidad Distrital Francisco
José de Caldas en Bogotá, Colombia. Nova, 14(26), 129-137.

 De la Rosa, M. D. C., Ullán, C., Prieto, M. P., & Mosso, M. Á.

(2000). Calidad microbiológica del aire de una zona limpia en una
industria farmacéutica. In Anales de la Real Academia Nacional
de Farmacia (Vol. 66, No. 2).

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