PRACTICA N 4.

DETERMINACIÓN DE BACTERIAS TOTALES, ACTINOMICETOS,

HONGOS Y AISLAMIENTO DE GRUPOS FUNCIONALES DEL SUELO

2. Marco teórico:

Entre los microorganismos habitantes del suelo las bacterias, incluidos los Actinomicetos,
son los más abundantes pues se les encuentra presentes en un rango aproximado de 106 y
108 células por gramo de suelo pesando aproximadamente 10 000 kg/ha, que representa el
5 % del total de material orgánica seca presente en el suelo. En cuanto a los hongos, dado
su biomasa más significativa, representando un 10 a 20% de la microbiota total, esto es
aproximadamente 105 a 106 organismos /gramo de suelo.

Es importante mencionar que existen varios factores abióticos que influencian la vida de los
microorganismos en el suelo. Uno de los factores más importantes es el pH. Una
modificación de éste puede activar o casi inactivar las enzimas de los microorganismos; el
pH también actúa sobre la disponibilidad o fijación de minerales nutritivos. Se puede decir
que, en suelos con pH de 5.6 la mayoría de los microorganismos beneficiosos para los
cultivos existen, y sus enzimas son activas. Las bacterias necesitan de nutrientes como los
de los exudados de las plantas, porque ante la ausencia de éstos no son capaces de utilizar
la materia orgánica como fuente de energía, siendo ésta utilizada solo por hongos. Por esta
razón es

importante también la aplicación de nutrientes que sea indispensables para el desarrollo de

los microorganismos. La abundancia de bacterias en la rizósfera en comparación con otros
microorganismos se puede deber a su rápido crecimiento y la habilidad que presentan de
utilizar un amplio rango de sustratos como fuentes de carbono o nitrógeno. La cantidad de
bacterias que se van a encontrar depende de muchos factores como son: la temporada, el
tipo de suelo, la vegetación, el contenido de humedad, el tipo de labranza y fertilización. Si
hablamos del hábitat específico de las bacterias, algunas se pueden encontrar adheridas a
la superficie de las partículas de suelo como agregados o interactuando específicamente
con las raíces de las plantas; sin embargo, la concentración de bacterias por gramo de
suelo que se halla alrededor de las raíces de las plantas en la llamada rizósfera es mucho
mayor que en el resto del suelo. Esto se puede deber a los altos niveles de nutrientes que
se hallan en la zona que rodea a las raíces y que permiten el desarrollo de poblaciones
microbianas. La rizósfera ha sido definida por, como el volumen de suelo influenciado por la
presencia de raíces de una planta viva, cuya extensión puede variar de acuerdo al tipo de
suelo, la especie de planta, su edad y otros factores. Se sabe que en la rizósfera la
interacción entre las bacterias y las raíces de las plantas puede ser beneficiosa, en este
caso se puede considerar la rizósfera como una zona de amortiguación microbiológica en
donde la microbiota sirve de protección a la planta frente al ataque de patógenos. Se estima
que los exudados rizosféricos pueden llegar a contener entre 10 y 44% del carbono
asimilado y otra serie de compuestos, lo que contribuye generalmente a un incremento de
las densidades poblacionales de los microorganismos. Dada su abundancia, el componente
microbiano del suelo es importante para la salud de los ecosistemas. Los procesos
agrícolas, así como el manejo de los recursos vegetales inciden sobre este componente
afectando tanto a su biodiversidad como a la densidad de las poblaciones microbianas
implicadas; los resultados a mediano y largo plazo .
http://www.scielo.org.pe/pdf/ecol/v7n1-2/a17v7n1-2.pdf

3. Pre laboratorio:

1.Qué poblaciones de grupos funcionales de microorganismos (a nivel metabólico) se

puede encontrar en el suelo. Realice una tabla determinando el tipo de metabolismo
que realizan.

POBLACIÓN METABOLISMO

proteolíticos gracias a la producción de enzimas

proteasas se produce la liberación de
compuestos menores asimilables , como
los aminoácidos que hacen parte de la
materia orgánica particulada y que pueden
ser rápidamente accesibles para los
microorganismos

solubilizadores de fosfato hacen parte de la microflora nativa de los

suelos y se encuentran en niveles de hasta
4.23 Log UFC.g-1 de suelo. La
revegetalización ha sido reportada como la
forma más efectiva para abatir la erosión
del suelo, su degradación y como una
alternativa para restaurar la integridad
ecológica en ecosistemas perturbados .
Adicionalmente, es sabido que la
abundancia de diversos grupos
microbianos, incluidos los solubilizadores,
está ligada directamente a la abundancia
de plantas y actividad fisiológica de las
mismas . Parece existir un efecto
rizosférico sobre dichos organismos debido
a que los exudados radicales y detritus
vegetales proporcionan el sustrato
energético para que sea posible la actividad
microbiológica solubilizadora de fosfato
(Valero, 2003). A pesar de esto, en la zona
sin revegetalización la densidad de este
grupo funcional fue superior. El grupo
funcional de los solubilizadores de fosfato
está presente en varios tipos de
ecosistemas tanto naturales como
agroecosistemas
libres fijadores de nitrógeno pueden favorecer el establecimiento de las
plantas, aumentar su productividad e
incrementar la explotación de los suelos en
términos de agua y nutrientes, también
aumentan la cantidad de nutrientes a nivel
del follaje y permiten aumentar las tasas de
sucesión en los sitios revegetalización , Los
microorganismos fijadores libres de
nitrógeno contribuyen al mantenimiento de
la diversidad a través de su influencia en la
disponibilidad de diferentes fuentes de
nitrógeno tanto orgánico como inorgánico
en los suelos

celulolíticos El crecimiento microbiano depende del

influjo de materiales orgánicos como la
celulosa, lo cual depende en gran medida
de la disponibilidad de C en los suelos . En
este sentido, es conocido que los
microorganismos de la rizósfera son
capaces de usar un amplio rango de
moléculas orgánicas complejas como
lignina, celulosa y otros polisacáridos, una
consecuencia de dicha habilidad es que
estos no dependen de los exudados
radiculares para sobrevivir. afirman que la
actividad microbiana del suelo es mayor en
la superficie del suelo que en las capas
profundas, debido a que el suministro de
carbono fresco que proviene de la biomasa
vegetal y el incremento de materiales
orgánicos e inorgánicos provee sustratos
para una comunidad microbiana abundante
y activa

amilolíticos El almidón y la celulosa son las dos fuentes

de carbono más distribuidas en la
naturaleza. Estos polímeros están
compuestos de unidades de glucosa y se
requieren de diferentes sistemas
enzimáticos para degradarlos. Los grupos
microbianos con actividad amilolítica juegan
un papel fundamental en el ciclaje de
nutrientes a nivel de suelo, pues actúan
sobre el almidón gracias a la producción de
enzimas extracelulares denominadas
amilasas, liberando glucosa que es un
sustrato más fácilmente asimilable por el
resto de las poblaciones heterótrofas de
microorganismos
 https://eprints.ucm.es/3428/1/T17025.pdf

https://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=&cad=rja&uact=
8&ved=2ahUKEwjti5ST1-TrAhUQw1kKHeTjD2U4ChAWMAJ6BAgBEAE&url=http%3A%
2F%2Funicauca.edu.co%2Frevistas%2Findex.php%2Fsuelos_ecuatoriales%2Farticle
%2Fdownload%2F53%2F46%2F&usg=AOvVaw1ohkFL-3w5hl_9saRtugPY

http://lunazul.ucaldas.edu.co/index.php/english-version/91-coleccion-articulos-espan
ol/298-grupos-funcionales-microbianos-en-suelos

https://core.ac.uk/download/pdf/267165574.pdf

http://www.scielo.org.co/pdf/cofo/v20n2/v20n2a05.pdf

2.A que hace referencia el término bacterias simbióticas en agricultura explíquelo con
ejemplos y determine algunos antecedentes y esquematícelas.

Bacterias simbióticas: Aquellas que necesitan de otra célula y organismo para sobrevivir y
a su vez, su contraparte se beneficiará creando un sistema de codependencia. En el caso
de la agricultura es la relación explicada anteriormente pero en bacteria-planta.

Ejemplo: Las bacterias fijadoras de nitrógeno de los géneros Azotobacter, Rhizobium y

Azospirillum han sido las más empleadas en agricultura como biofertilizantes. Los
mecanismos mediante los que estas bacterias ejercen estos efectos son variados. Así,
pueden fijar nitrógeno atmosférico y suministrar a la planta; pueden sintetizar diferentes
fitohormonas que actúan mejorando diferentes estadios del crecimiento vegetal; solubilizar
minerales de fósforo poniéndolo a disposición de la planta, y sintetizar diversos compuestos
de bajo peso molecular o enzimas que intervienen en el crecimiento y desarrollo vegetal.
Una determinada bacteria puede afectar al desarrollo de la planta mediante uno o más de
estos mecanismos.

Antecendentes:
Fue en la década de 1960 cuando Lynn Margulis elaboró la teoría endosimbiótica del origen
de los organelos celulares de los eucariontes, ya que encontró evidencias relevantes (por
ejemplo que dichos organelos tienen su propia maquinaria genética) de que la simbiosis dio
origen a los cloroplastos y las mitocondrias, que surgieron cuando un organismo unicelular
comenzó a habitar dentro de otro (endosimbiosis), dotándolo de características que antes
no tenía, como la fotosíntesis llevada a cabo por los cloroplastos (originados por
cianobacterias) o la respiración por las mitocondrias (que surgieron de bacterias).

Jean Baptiste Boussingault (1802-1887), un auto didacta que no tuvo una educación formal,
es considerado el fundador de la química agrícola. Sus cuidadosos experimentos sobre
suelos, cultivos, fertilizantes, la asimilación de nitrógeno atmosférico por las plantas, los
cambios en la composición de semillas durante la geminación y la utilización de alimentos
por los animales, aportaron la información fundamental que llevaría a la comprensión
completa del ciclo del nitrógeno en la Naturaleza. También encontró una relación entre la
enfermedad del bocio y el yodo y recomendó el uso de sal yodada para combatir los efectos
de la enfermedad.

Sin embargo, y pese a su enorme importancia para la vida en el planeta Tierra, es poco lo
que se conoce sobre cómo surgieron y evolucionaron este tipo de relaciones simbióticas.
Una alternativa interesante es la que se expone en el artículo The birth of cooperation,
publicado en la revista Science del mes de julio de 2014, donde a partir de otro artículo que
aparece en el mismo número (a cargo de Erick Hom y Andrew Murray, de la Universidad de
Harvard) se analiza una alternativa a la visión tradicional que supone que dos organismos
evolucionan juntos por la influencia mutua del uno sobre el otro (coevolucionan) y ambos
reciben beneficios. Esta alternativa, propuesta por el ecólogo Daniel Jenzen, considera que
uno de los organismos involucrados está utilizando una estrategia de oportunismo ecológico
(gracias a plasticidad genética).

Al estudiar la relación entre un alga y una levadura, Hom y Murray encontraron evidencias
que apoyan la teoría de Jenzen. Mostraron que entre los posibles orígenes de la simbiosis
se encuentran tanto relaciones inicialmente antagónicas como relaciones inicialmente
mutualistas. Es decir, relaciones como el parasitismo o la que lleva a una especie a
esclavizar a otra pueden a lo largo de un proceso de coevolución convertirse en una
relación no sólo de beneficio para ambas sino de dependencia estricta mutua, esto es
simbiótica. Parece imposible que una relación inicialmente de parásito-hospedero pueda
convertirse en una simbiosis pero hay muchos casos en que ha ocurrido, tal vez los billones
de bacterias que habitan en nuestro cuerpo y que nos son indispensables para sobrevivir
tuvieron ese origen.

https://www.redalyc.org/pdf/1816/181621661014.pdf

https://agroalimentando.com/nota.php?id_nota=934

http://repositorio.minciencias.gov.co/handle/11146/459

http://siaprendes.siap.gob.mx/contenidos/2/01-agricultura/contexto-1.html

https://www.eluniversal.com.mx/entrada-de-opinion/articulo/rosaura-ruiz/nacion/2016/
01/2/el-origen-evolutivo-de-las-relaciones

3.A que hace referencia el término bacterias no simbióticas en agricultura explíquelo

con ejemplos y determine algunos antecedentes y esquematícelas.

POST LABORATORIO.

En grupos de 4 o 5 (no 6, no 3) personas del mismo grupo de laboratorio, (cada uno en su

casa), desarrolle y prepare, un agar para seleccionar un grupo funcional de
microorganismos (para este ítem debe haber resuelto el prelaboratorio y debe saber que
existen varios tipos de agares como son los de crecimiento primario, los selectivos, los
diferenciales, enriquecidos, medios para

microorganismos exigentes, para inhibición de ciertos microorganismos) el tipo de agar que

va a desarrollar no puede ser de aislamiento primario; en el medio que desarrolle va a
cultivar: suelo o agua o microorganismos fitopatógenos (o sea de plantas; no humano, ni
animal), para poder desarrollarlo recuerde cosas tales como: debe llevar… un soporte
(gelatina), una fuente de carbono (no necesariamente azúcar puede leer y consultar cuales
existen, cual podría conseguir en su casa y cual va a utilizar), una fuente de nitrógeno
consulte y decida cual puede obtener y va a utilizar; sales que en este caso imagino solo
podrá ser NaCl y recuerde que debe agregar un compuesto que ud pueda justificar y que
haga a su agar diferente al de los otros grupos, pero que además que me permita
seleccionar una población determinada. El agar debe llevar un nombre.
Es evidente que ud no cuenta con todos los medios necesarios para realizarlo, puede
guiarse de la literatura y tratar de reemplazar de alguna forma, sin salir de su casa los
compuestos que no tenga.

Indicaciones:

1. Todos los integrantes del grupo deben contar con el mismo agar.

2. Debe estar muy bien fundamentado.

3. Se puede servir o en cajas, que se que algunos estudiantes cuentan o en frascos de

compota u otros, desinfecte muy bien el material antes de servir el agar alcohol e
hipoclorito.

4. Si el agar se le volvía agua en la práctica anterior, agregue una mayor proporción de

gelatina sin sabor.

5. Deben estandarizar entre todos la preparación y colocarla en el trabajo.

6. En el Trabajo debe venir con: composición o materiales, cantidades (un estimado de

cuanto es…), preparación (como lo hicieron), fundamento y que microorganismos esperan
obtener y resultados (fotos de crecimiento y posible microorganismo que puede obtener,
según el fundamento de su agar), bibliografía de donde se guiaron.

Tiempo de desarrollo del trabajo:

Para desarrollar la presente actividad cuenta con dos semanas… organice su tiempo.

Como entregar el trabajo: en ppt o canva, guardado como pdf, se coloca el trabajo en el
muro de Edmodo, con el nombre de los integrantes y el adjunto. La forma de marcar el
archivo, para será el nombre del medio con el que bautizo su experimento.

Entregar máximo 5 diapositivas (guardadas en pdf, por lo tanto, no llevaran sonido), en la

primera diapositiva, la presentación del grupo con la foto de cada persona puede ser en los
costados de la misma, y en las otras 4 ordenará el material de tal manera que me presente
los ítems que se le solicitan en la presente guía remítase al numeral 6 de la anterior página.

Para la siembra de suelo esparza una pequeña cantidad de gránulos sobre la superficie de
su agar (no necesita ningún otro procedimiento, ya que no cuenta con el material para hacer
diluciones seriadas); si es agua, que sea agua lluvia o aposada (no potable porque
difícilmente obtendrá algo), coloque una gota en la superficie del medio y la espárzala por
todo el medio, rotando su frasco; si es de plantas; desinfecte la parte de la planta que desea
cultivar de la siguiente manera:

tome el fragmento a cultivar, páselo con un pinzas o depilador flameado a un frasco que
contenga alcohol durante 30 segundos, luego a uno con hipoclorito relación, una parte de
hipoclorito por nueve de agua de la llave, otros 30 segundo y repita el procedimiento 5
veces; después coloque el fragmento vegetal con el depilador, levemente presionado sobre
el medio.

Analice resultados.

Recuerde; En mi concepto la responsabilidad social como futuros bacteriólogos y personal

de la salud y la seguridad de sus familias, prima sobre cualquier trabajo, no se aceptan
trabajos en los cuales se hayan reunido en la casa de un integrante a hacer la experiencia,
ya que viola el protocolo de distanciamiento y autocuidado que por responsabilidad nos
corresponde. Así el gobierno de algunas permisividades.