Carbohidratos

ANÁLISIS CUALITIVO DE CARBOHIDRATOS
IDENTIFICACIÓN DE AZÚCARES
Descripción resumida de la actividad propuesta:
Los hidratos de carbono actúan como fuente esencial de energía a corto plazo y como unidades
estructurales de las células. Todos los azúcares constan de un esqueleto carbonado que contiene un
grupo carbonilo y varios grupos hidroxilo. En estos grupos funcionales se centra su reactividad. Están
divididos en tres grupos principales: monosacáridos, oligosacáridos y polisacáridos. Esta práctica
consiste en estudiar algunas reacciones químicas en las que participan estos hidratos de carbono y que
se pueden utilizar para su identificación.
Introducción:
Los hidratos de carbono constituyen el grupo de biomoléculas más abundante sobre la

superficie terrestre, representando aproximadamente el 75 % de la materia orgánica existente. En
ocasiones, se denominan también carbohidratos, azúcares, sacáridos o glúcidos. Todos son términos
que hacen referencia a su sabor dulce, o a que poseen la composición Cn(H 2O)n. Aunque dicha
nomenclatura subsiste, no todos los glúcidos tienen sabor dulce ni responden a tal composición.
En los animales los carbohidratos son esenciales desde el punto de vista energético, ya que
muchos órganos y células del cuerpo humano, como el cerebro y los glóbulos rojos, obtienen su energía
principalmente de la glucosa. Pero sus funciones no se restringen a ser únicamente fuente de energía,
sino que también pueden desarrollar funciones estructurales, de reconocimiento celular y adhesión.
Estructuralmente, un hidrato de carbono típico es una cadena hidrocarbonada con varios grupos
alcohol y un carbono más oxidado, en forma de grupo carbonilo. Este grupo oxidado puede situarse en
el extremo de la cadena (aldehído), o adyacente, en posición 2 (cetonas) (Figura 2). A partir de esta
estructura básica, existen otros hidratos de carbono con alguna modificación química.
Figura 2: Estructura de carbohidratos: glucosa (aldosa) y fructosa (cetosa).
Los carbohidratos presentan tamaños moleculares muy diferentes. En función de ello, se

clasifican en monosacáridos, oligosacáridos y polisacáridos. Los monosacáridos contienen de 3 a 8
átomos de carbono. Son las unidades básicas y no pueden hidrolizarse para dar azúcares más sencillos.
Los oligosacáridos son compuestos formados por uniones de algunos monosacáridos. Los más
importantes tienen sólo 2 unidades y reciben el nombre de disacáridos. Por último, los polisacáridos
están constituidos por un alto número de unidades de monosacáridos. Son largas cadenas lineales o
ramificadas, dependiendo del tipo de unión entre las unidades. Se dividen en homopolisacáridos y
heteropolisacáridos según estén formados por el mismo tipo de monosacárido o por varios diferentes.
Esta práctica consiste en estudiar algunas reacciones químicas en las que participan estos hidratos de
carbono, que constituyen la base para la caracterización cualitativa de cada uno de los grupos
principales y de reconocimiento de los distintos tipos de azúcares. Los ensayos se realizan con el doble
objetivo de ilustrar las distintas pruebas descritas e identificar un azúcar desconocido que se entregará
al principio de la sesión.
Objetivos:
Los objetivos de esta práctica consisten en:
- Descripción de monosacáridos, disacáridos y polisacáridos.
- Identificación de azúcares mediante diferentes reacciones químicas.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
Ensayo de Molisch (identificación de carbohidratos):
La reacción de Molisch permite estimar la presencia de glúcidos en una muestra α-naftol al 5%

en etanol de 96º. Polisacáridos y disacáridos se hidrolizan con ácido sulfúrico concentrado hasta
monosacáridos que pueden ser deshidratados y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil
furfural, los cuales reaccionan con α-naftol formando un anillo color púrpura violeta. Esta reacción es
general para los hidratos de carbono, pero algunos otros compuestos orgánicos dan también furfural
con ácido sulfúrico concentrada.
Se numeran 5 tubos de ensayo. Se añade a cada tubo 1 ml de: agua (ensayo blanco), glucosa,
sacarosa, fructosa y manosa. Se añaden 2 ml de reactivo de Molisch a cada uno de ellos y se mezcla
bien. Se calientan en un baño de agua hirviendo durante 5 minutos. Si la reacción es positiva aparece un
precipitado rojizo, verde o amarillo. En otra batería de tubos, se coloca 0,5 mL de ácido sulfúrico
concentrado. inclinar un poco el tubo de ensayo, adicionando cuidadosamente la solución del
carbohidrato preparada con anterioridad, buscando que quede encima del ácido sulfúrico.
Inquietudes:
1. ¿En cuál de los tubos cree usted que deba ocurrir la reacción?
2. Muestre la reacción de un disacárido cuando es sometido a la prueba de Molisch.
3. ¿Qué sucede cuando la reacción de Molisch se lleva a cabo con una muestra de alta
concentración de carbohidratos?
4. ¿Qué se observa cuando en una muestra problema carente de carbohidratos es sometida a
tratamiento con reactivo de Molisch?
Reacción de Benedict (detecta la presencia de azúcares reductores):
Se basa en la reducción de Cu 2+ a Cu+ en medio básico débil. Aunque es similar a la reacción de

Fehling, el medio básico débil y el estabilizante (citrato sódico) utilizados hacen que este test sea más
sensible y estable. El ion cúprico es capaz de reducirse por efecto del grupo aldehído del azúcar a su
forma de El Cu+, el cual posteriormente precipita en forma de óxido cuproso (de color rojo ladrillo).
La amilosa, el componente del almidón de cadena lineal, forma hélices donde se juntan las
moléculas de yodo, formando un color azul oscuro a negro. - Al romperse o hidrolizar el almidón en
unidades más pequeñas de carbohidrato, el color azul-negro desaparece.
Se numeran 5 tubos de ensayo. Se añade a cada tubo 1 ml de: agua (ensayo blanco), glucosa,
sacarosa, fructosa y manosa. Se añaden 2 ml de reactivo de Benedict a cada uno de ellos y se mezcla
bien. Se calientan en un baño de agua hirviendo durante 5 minutos. Si la reacción es positiva aparece un
precipitado rojizo, verde o amarillo.
Inquietudes:
1. ¿En cuál de los tubos cree usted que deba ocurrir la reaccionar? Estime el orden creciente en
cuanto tiempo para que ocurran las reacciones.
2. Muestre la reacción de una azúcar reductora sometida a la prueba de Benedict. Discuta porque
la reacción no se da cuando es utilizada una azúcar no reductora.
3. Cite dos ejemplos de monosacáridos y disacáridos reductores.
Prueba de Barfoed (detecta la presencia de monosacáridos):
El reactivo de Barfoed es débilmente ácido y es reducido solamente por monosacáridos,

formándose como producto de reacción óxido cuproso, de color rojo ladrillo. En medio ácido, tan sólo
los monosacáridos son capaces de reducir el Cu 2+ a Cu+. El Cu+ así producido reduce al ácido
fosfomolíbdico a un complejo de intenso color azul oscuro.
Se numeran 7 tubos de ensayo. Se añade por separado a cada tubo 1 ml de: agua (ensayo
blanco), glucosa, sacarosa, lactosa, galactosa, fructosa y almidón. A cada tubo se le añaden 2 ml de
reactivo de Barfoed. Se ponen en un baño hirviendo anotando el tiempo que tarda en aparecer un
precipitado amarillo-rojizo o rojo. Los monosacáridos dan la reacción con mayor rapidez que los
disacáridos.
Inquietudes:
1. ¿En cuál de los tubos cree usted que deba ocurrir la reaccionar? Ordene en forma creciente en
cuanto tiempo de reacción.
2. Muestre la reacción de un monosacárido y disacárido sometidos a la prueba de Barfoed.
Prueba de Bial (presencia de monosacáridos):
Cuando se identifica que es un monosacárido reductor se pueden aplicar dos pruebas para saber
si se trata de una hexosa o pentosa, y si es una aldosa o cetosa. El ensayo de Bial se usa para detectar la
presencia de pentosas. El reactivo de Bial está compuesto por orcinol, ácido clorhídrico y cloruro férrico.
Si una pentosa está presente, se deshidratará para formar furfural que reaccionará con el orcinol para
general un compuesto coloreado.
blanco), glucosa, sacarosa, lactosa, ribosa, fructosa y arabinosa. A cada tubo se le añaden 2 ml de
reactivo de Bial.
Inquietudes:
2. Muestre la reacción de una pentosa sometida a la prueba de Bial.
3. Discuta porque al realizar sobrecalentamiento algunas hexosas la prueba de Bial puede resultar
en un falso positivo.
Prueba de Seliwanoff (diferenciación entre cetosas y aldosas):
La prueba de Seliwanoff es una reacción para diferenciar cetosas de aldosas; aunque ambas dan
la reacción, las cetosas la dan rápidamente y las aldosas lentamente. Está basada en la formación de
furfural o en un derivado de éste y su posterior condensación con el resorcinol, dando un color rojo
fuego para cetosas y rosa para aldosas.
blanco), glucosa, sacarosa, lactosa, ribosa, fructosa y arabinosa. A cada tubo se le añaden 2 ml de
reactivo de Seliwanoff. Calentar los tubos de ensayo a baño de María. El desarrollo de un color rojo en
dos minutos es prueba positiva para cetosas.
Inquietudes:
2. Muestre la reacción de una cetosa y aldosa sometida a la prueba de Seliwanoff.
Prueba de ioduro:
Los polisacáridos sin ramificar forman complejos característicos cuando reaccionan con yodo. Los
ramificados también lo hacen, pero los complejos formados tienen menos intensidad de color. Los
polisacáridos dan color azul y los demás azúcares no presentan ninguna coloración. El almidón es
coloreado de azul en presencia de Lugol, debido a una absorción o fijación del I 3. Al romperse o
hidrolizar el almidón en unidades más pequeñas de carbohidrato, el color azul-negro desaparece.
Se numeran 5 tubos de ensayo. Se añade por separado a cada tubo 1 ml de: agua (ensayo blanco),
glucosa, sacarosa, almidón y fructosa. A cada tubo se le añaden 5 gotas de disolución de iodo-ioduro.
Inquietudes:
2. Muestre la reacción del almidón cuando es sometido a la prueba de Iodo.
Anexo:
ANÁLISIS DE CARBOHIDRATOS
Marcha analítica

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ANÁLISIS CUALITIVO DE CARBOHIDRATOS

Descripción resumida de la actividad propuesta:

Los hidratos de carbono constituyen el grupo de biomoléculas más abundante sobre la

Figura 2: Estructura de carbohidratos: glucosa (aldosa) y fructosa (cetosa).

Los carbohidratos presentan tamaños moleculares muy diferentes. En función de ello, se

Los objetivos de esta práctica consisten en:

- Descripción de monosacáridos, disacáridos y polisacáridos.

- Identificación de azúcares mediante diferentes reacciones químicas.

Ensayo de Molisch (identificación de carbohidratos):

La reacción de Molisch permite estimar la presencia de glúcidos en una muestra α-naftol al 5%

Se basa en la reducción de Cu 2+ a Cu+ en medio básico débil. Aunque es similar a la reacción de

Prueba de Barfoed (detecta la presencia de monosacáridos):

El reactivo de Barfoed es débilmente ácido y es reducido solamente por monosacáridos,

Prueba de Seliwanoff (diferenciación entre cetosas y aldosas):

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