Reporte P4 PDF
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PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Preparar la
Preparar la
Estirar los cámara de
cromatoplaca
capilares a elución
Cromatografía con 3 puntos de
utilizar sobre la colocando 1 mL
en capa fina aplicación a
flema del de acetato de
diferentes
mechero etilo y cerrar el
concentraciones
sistema
Retirar la
cromatoplaca El primer punto
cuando el Introducir la tendrá la
Marcar el frente
eluyente esté cromatoplaca a concentración
del eluyente con
casi al borde la cámara de de 1 aplicación,
un lápiz fino
superior de la elución el segundo de 3
capa de gel de y el tercero de 9
silíce
Preparar otras 3
Colocar la
cromatoplacas
cromatoplaca en
Revelar la placa con 3
una hoja de Introducir la
con una aplicaciones de
papel para placa a una
lámpara de luz hexano, acetato
anotar datos y cámara de yodo
UV de etilo y
dejar que se
metanol
seque
respectivamente
Con ayuda del capilar ya estirado, vamos a colocar en nuestra cromatoplaca (en la
parte inferior) las aplicaciones correspondientes a la sustancia 1A. Es decir,
tendremos tres puntos en nuestra cromatoplaca, el 1ro con una aplicación, el 2° con
tres aplicaciones y el 3° con 9 aplicaciones de sustancia 1A. Es importante que se
dejen secar muy bien nuestras aplicaciones para que no tengamos proyecciones o
nuestros resultados sean incorrectos.
Permitimos que eluya el disolvente (fase móvil). Lo que nos deja ver que la fase
estacionaria será la muestra de sílica gel impregnada en la cromatoplaca. Es
importante retirar la cromatoplaca antes de que el eluyente la cubra por completo
porque de ser así la cromatoplaca se ¨ahoga¨ y debemos de volver a comenzar, de
igual manera, es de suma importancia que dejemos secar el disolvente para poder
revelar la placa.
Sin embargo, hay que recordar que también se puede revelar utilizando yodo.
Colocamos nuestra placa de manera que la parte impregnada con sílica gel no toqué
las paredes, es decir, que quede ¨boca arriba¨ para que se pueda impregnar con los
gases de yodo y pueda revelarse. Este proceso dura entre 1 y 2 minutos.
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Retiramos nuestras placas cuando las mezclas lleguén a la línea que hemos
marcado previamente en cada placa, generalmente de 0.5 cm en la parte superior.
Colocamos cada una de las placas bajo la luz UV para poder revelarlas.
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Una vez que tengamos nuestros medicamentos comerciales en sus vasos viales,
colocaremos una apliacación de cada uno de ellos en las esquinas de una placa, en
medio pondremos la aplicación de nuestra sustancia 2 (sustancia referencia).
Recordar que esto se hace con capilares limpios.
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RESULTADOS
1ra Parte del experimento
ANÁLISIS DE RESULTADOS
1ra Parte del experimento
A pesar de que realizamos la eluyición con un eluyente relativamente fuerte, como
es el caso del acetato de etilo, pudimos comprobar cómo es que una mayor
concentración de la sustancia a analizar repercute en la eficiencia de la separación
de la misma, siendo así que no se pudo obtener una buena cromatografía de los
puntos 2 y 3 (3 y 9 aplicaciones respectivamente.)
2da Parte del experimento
Pudimos corroborar lo que se investigó previamente, vimos que si el compuesto era
polar necesitaba de un eluyente con una polaridad aceptable para tener cálculos
adecuados, ni deficientes ni exagerados. Se puede ver cómo es que el hexano
desplazó la muestra prácticamente nada debido a la poca fuerza de
eluyición/carencia de polaridad que presenta. Por otro lado, se aprecia cómo es que
el metanol realizó un desplazo excesivo debido a la alta polaridad que presenta, sin
embargo, comprobamos que el acetato de etilo presenta la fuerza de eluyición
adecuada para la muestra examinada, por lo que es el mejor eluyente para este
caso.
3ra Parte del experimento
Un experimento bastante curioso. En nuestra investigación previa encontramos que
si dos muestras corren igual en la placa podrían ser idénticas y, por ende, podríamos
deducir que tienen una pureza similar o igual. Los medicamentos utilizados,
Desinfriol D y Algidol, nos demostraron a pesar de no ser exactamente el mismo
medicamento, sí tienen una sustancia idéntica en igual pureza; la cafeína. Prueba
de ello es que corrieron a la misma distancia respecto a nuestra muestra patrón
(cafeína).
CONCLUSIONES
Al término de esta práctica pudimos corroborar que la cromatografía en capa fina
sirve, al menos, para 3 cosas: determinar la pureza de un compuesto, identificar la
polaridad y el efecto de la concentración de la sustancia a analizar. Se puede
apreciar cómo es que, en efecto, la cromatografía es un criterio parcial de
identificación de las sustancias porque no es 100% exacta, ya que tiene muchos
criterios que la pueden afectar como lo son: la temperatura, el lugar donde se lleva
a cabo, la limpieza de las placas, la pureza de los disolventes e incluso el adsorbente
a utilizar. Por ejemplo, nosotros utilizamos la sílica gel porque es un buen
adsorbente de sustancias polares, como en el caso de esta práctica, si hubiéramos
utilizado como adsorbente alúmina, no hubiésemos podido tener los resultados que
obtuvimos porque este adsorbente sirve mucho mejor para sustancias poco
polares/apolares como hidrocarburos, haluros de alquilo, éteres, aldehidos y
cetonas.
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CUESTIONARIO
1. ¿Cómo se elige el eluyente para cromatografía en capa fina?
R= Generalmente la elección del eluyente depende del componente a separar y del
material en que la separación se llevará a cabo. Puede ensayarse previamente la
cromatografía en capa fina con distintos disolventes y unas muestras patrón.
2. ¿Por qué se dice que la cromatografía en capa fina es un criterio parcial y no
total, de identificación?
R= Es parcial y no total porque hay compuestos que tienen el mismo Rf.
3. ¿Cuál será el resultado de los siguientes errores en cromatografía en capa
fina?
1. Aplicación de solución muy concentrada.
R= Si los Rf de las sustancias son muy próximos, la separación no se logrará de
manera adecuada o indeficiente.
2. Utilizar eluyente de alta polaridad.
R= Desplazaría demasiado la muestra, por lo que al momento de hacer los cálculos
para obtener el Rf estos serían erróneos.
3. Emplear gran cantidad de eluyente en la cámara de cromatografía.
R= Sería bastante chistoso, la muestra/aplicación se disolvería en el eluyente antes
de ser arrastrada por la fase estacionaria.
4. El valor del Rf ¿depende del eluyente utilizado?
R= No, depende de la polaridad de la sustancia que se va a analizar.
5. Qué significa que una sustancia tenga:
1. Rf < 0.5
R= La muestra se desplazó por debajo del punto medio de la distancia entre el punto
de aplicación y el frente del eluyente.
2. Rf = 0.5
R= La sustancia se desplazó una distancia media entre el punto de aplicación y el
frente del eluyente.
3. Rf > 0.5
R= La muestra se desplazó por encima de la mitad de la distancia entre el punto de
aplicación y el frente del eluyente.
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BIBLIOGRAFÍA
Anónimo. Cromatografía en capa fina. UAM. Artículo recuperado el
24/11/2020 a las 15:13 horas de http://www.qfa.uam.es/qb/practicas/P6-
guion.pdf
Ochoa, Sergio. (2018). Adsorción. Departamento de biotecnología. UAM.
Artículo recuperado el 24/11/2020 a las 16:03 horas de
http://sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/sho/Adsorcion.pdf
Romero García Aida (202). Cromatografía. Instituto de biotecnología, UNAM.
Artículo recuperado a las 17:25 horas de
http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/Cromatografia.pdf