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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE


MÉXICO
FACULTAD DE QUÍMICA
LABORATORIO DE QUÍMICA ORGÁNICA I
(1311)
GRUPO: 34
PROFESOR: JUAN GÓMEZ DUEÑAS
ALUMNO: DUEÑAS FUENTES MARCO
ANTONIO
REPORTE PRÁCTICA 4. CROMATOGRAFÍA EN
CAPA FINA
LA PRÁCTICA SE REALIZÓ EL DÍA 18 DE
NOVIEMBRE DE 2020
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PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Preparar la
Preparar la
Estirar los cámara de
cromatoplaca
capilares a elución
Cromatografía con 3 puntos de
utilizar sobre la colocando 1 mL
en capa fina aplicación a
flema del de acetato de
diferentes
mechero etilo y cerrar el
concentraciones
sistema

Retirar la
cromatoplaca El primer punto
cuando el Introducir la tendrá la
Marcar el frente
eluyente esté cromatoplaca a concentración
del eluyente con
casi al borde la cámara de de 1 aplicación,
un lápiz fino
superior de la elución el segundo de 3
capa de gel de y el tercero de 9
silíce

Preparar otras 3
Colocar la
cromatoplacas
cromatoplaca en
Revelar la placa con 3
una hoja de Introducir la
con una aplicaciones de
papel para placa a una
lámpara de luz hexano, acetato
anotar datos y cámara de yodo
UV de etilo y
dejar que se
metanol
seque
respectivamente

Eluyir la Preparar otra Dejar evaporar


cromatoplaca en cromatoplaca el eluyente y
acetato de etilo, Identificar los para las revelar cada
dejar secar, componentes de sustancias 4 y 5 cromatoplaca
revelar con medicamentos y repetir el con una lámpara
lámpara de luz con base en una procedimiento de luz UV.
UV y después muestra patrón de nuestra Anotar
en cámara de primera resultados y
yodo cromatoplaca observaciones
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ANÁLISIS DE PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL


Para hacer que el capilar quede un poco más delgado hay que ponerlo sobre la
llama de un mechero o encendedor y estirarlo suavemente.

Con ayuda del capilar ya estirado, vamos a colocar en nuestra cromatoplaca (en la
parte inferior) las aplicaciones correspondientes a la sustancia 1A. Es decir,
tendremos tres puntos en nuestra cromatoplaca, el 1ro con una aplicación, el 2° con
tres aplicaciones y el 3° con 9 aplicaciones de sustancia 1A. Es importante que se
dejen secar muy bien nuestras aplicaciones para que no tengamos proyecciones o
nuestros resultados sean incorrectos.

En la campana de extracción, con ayuda de una probeta, vamos a verter 1mL de


metanol, 1 mL de acetato de etilo, estos van a ser nuestros eluyentes.

Seguido de esto, se debe de verter el acetato de etilo en nuestra cámara de elución.


Para colocar nuestra cromatoplaca dentro de la cámara es necesario que la
sujetemos con unas pinzas y la coloquemos lo más pegada a las paredes de la
cámara para que no se vaya a caer y tapamos la cámara.
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Permitimos que eluya el disolvente (fase móvil). Lo que nos deja ver que la fase
estacionaria será la muestra de sílica gel impregnada en la cromatoplaca. Es
importante retirar la cromatoplaca antes de que el eluyente la cubra por completo
porque de ser así la cromatoplaca se ¨ahoga¨ y debemos de volver a comenzar, de
igual manera, es de suma importancia que dejemos secar el disolvente para poder
revelar la placa.

Si queremos revelar la placa con luz UV obtendríamos algo como esto:

Sin embargo, hay que recordar que también se puede revelar utilizando yodo.
Colocamos nuestra placa de manera que la parte impregnada con sílica gel no toqué
las paredes, es decir, que quede ¨boca arriba¨ para que se pueda impregnar con los
gases de yodo y pueda revelarse. Este proceso dura entre 1 y 2 minutos.
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El siguiente experimento se realiza para observar el efecto de la polaridad de la fase


móvil en las moléculas de nuestras muestras. En tres cromatoplacas, colocamos 1
aplicación de nuestra sustancia 2A y 1 aplicación de la sustancia 3A separadas
entre sí, con ayuda de capilares limpios.

Con ayuda de tres cámaras eluyentes diferentes, colocamos en cada una la


cromatoplaca correspondiente. En nuestra cámara 1 tendrémos puro acetato de
etilo, en la 2da puro metanol y en la 3ra puro hexano. Dejámos que eluya la fase
móvil.

Retiramos nuestras placas cuando las mezclas lleguén a la línea que hemos
marcado previamente en cada placa, generalmente de 0.5 cm en la parte superior.

Colocamos cada una de las placas bajo la luz UV para poder revelarlas.
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El último experimento se realiza con la finalidad de revisar la pureza de una muestra


4 y 5. Colocamos en una cromatoplaca 1 aplicación de cada una de las sustancias,
con ayuda de capilares limpios, separadas entre si. Posteriormente, colocamos la
placa en nuestra cámara de eluyición con acetato de etilo.

Revelamos la placa con la ayuda de luz UV.

Para poder determinar el principio activo de nuestras muestras problema vamos a


tomas una pastilla de 2 medicamentos comerciales (Desinfriol D y Algidol), las
vamos a moler en un mortero con un poco de acetato de etilo y vamos a decantar
el resultante en dos vasitos diferentes para poder compararlas con nuestra muestra
de referencia (sustancia 2).

Una vez que tengamos nuestros medicamentos comerciales en sus vasos viales,
colocaremos una apliacación de cada uno de ellos en las esquinas de una placa, en
medio pondremos la aplicación de nuestra sustancia 2 (sustancia referencia).
Recordar que esto se hace con capilares limpios.
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Posteriormente, colocamos la placa en nuestra cámara de eluyición con acetato de


etilo. Ya cuando eluya dejamos que seque y la revelamos en luz UV.

RESULTADOS
1ra Parte del experimento

2da Parte del experimento

3ra Parte del experimento


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ANÁLISIS DE RESULTADOS
1ra Parte del experimento
A pesar de que realizamos la eluyición con un eluyente relativamente fuerte, como
es el caso del acetato de etilo, pudimos comprobar cómo es que una mayor
concentración de la sustancia a analizar repercute en la eficiencia de la separación
de la misma, siendo así que no se pudo obtener una buena cromatografía de los
puntos 2 y 3 (3 y 9 aplicaciones respectivamente.)
2da Parte del experimento
Pudimos corroborar lo que se investigó previamente, vimos que si el compuesto era
polar necesitaba de un eluyente con una polaridad aceptable para tener cálculos
adecuados, ni deficientes ni exagerados. Se puede ver cómo es que el hexano
desplazó la muestra prácticamente nada debido a la poca fuerza de
eluyición/carencia de polaridad que presenta. Por otro lado, se aprecia cómo es que
el metanol realizó un desplazo excesivo debido a la alta polaridad que presenta, sin
embargo, comprobamos que el acetato de etilo presenta la fuerza de eluyición
adecuada para la muestra examinada, por lo que es el mejor eluyente para este
caso.
3ra Parte del experimento
Un experimento bastante curioso. En nuestra investigación previa encontramos que
si dos muestras corren igual en la placa podrían ser idénticas y, por ende, podríamos
deducir que tienen una pureza similar o igual. Los medicamentos utilizados,
Desinfriol D y Algidol, nos demostraron a pesar de no ser exactamente el mismo
medicamento, sí tienen una sustancia idéntica en igual pureza; la cafeína. Prueba
de ello es que corrieron a la misma distancia respecto a nuestra muestra patrón
(cafeína).
CONCLUSIONES
Al término de esta práctica pudimos corroborar que la cromatografía en capa fina
sirve, al menos, para 3 cosas: determinar la pureza de un compuesto, identificar la
polaridad y el efecto de la concentración de la sustancia a analizar. Se puede
apreciar cómo es que, en efecto, la cromatografía es un criterio parcial de
identificación de las sustancias porque no es 100% exacta, ya que tiene muchos
criterios que la pueden afectar como lo son: la temperatura, el lugar donde se lleva
a cabo, la limpieza de las placas, la pureza de los disolventes e incluso el adsorbente
a utilizar. Por ejemplo, nosotros utilizamos la sílica gel porque es un buen
adsorbente de sustancias polares, como en el caso de esta práctica, si hubiéramos
utilizado como adsorbente alúmina, no hubiésemos podido tener los resultados que
obtuvimos porque este adsorbente sirve mucho mejor para sustancias poco
polares/apolares como hidrocarburos, haluros de alquilo, éteres, aldehidos y
cetonas.
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CUESTIONARIO
1. ¿Cómo se elige el eluyente para cromatografía en capa fina?
R= Generalmente la elección del eluyente depende del componente a separar y del
material en que la separación se llevará a cabo. Puede ensayarse previamente la
cromatografía en capa fina con distintos disolventes y unas muestras patrón.
2. ¿Por qué se dice que la cromatografía en capa fina es un criterio parcial y no
total, de identificación?
R= Es parcial y no total porque hay compuestos que tienen el mismo Rf.
3. ¿Cuál será el resultado de los siguientes errores en cromatografía en capa
fina?
1. Aplicación de solución muy concentrada.
R= Si los Rf de las sustancias son muy próximos, la separación no se logrará de
manera adecuada o indeficiente.
2. Utilizar eluyente de alta polaridad.
R= Desplazaría demasiado la muestra, por lo que al momento de hacer los cálculos
para obtener el Rf estos serían erróneos.
3. Emplear gran cantidad de eluyente en la cámara de cromatografía.
R= Sería bastante chistoso, la muestra/aplicación se disolvería en el eluyente antes
de ser arrastrada por la fase estacionaria.
4. El valor del Rf ¿depende del eluyente utilizado?
R= No, depende de la polaridad de la sustancia que se va a analizar.
5. Qué significa que una sustancia tenga:
1. Rf < 0.5
R= La muestra se desplazó por debajo del punto medio de la distancia entre el punto
de aplicación y el frente del eluyente.
2. Rf = 0.5
R= La sustancia se desplazó una distancia media entre el punto de aplicación y el
frente del eluyente.
3. Rf > 0.5
R= La muestra se desplazó por encima de la mitad de la distancia entre el punto de
aplicación y el frente del eluyente.
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BIBLIOGRAFÍA
Anónimo. Cromatografía en capa fina. UAM. Artículo recuperado el
24/11/2020 a las 15:13 horas de http://www.qfa.uam.es/qb/practicas/P6-
guion.pdf
Ochoa, Sergio. (2018). Adsorción. Departamento de biotecnología. UAM.
Artículo recuperado el 24/11/2020 a las 16:03 horas de
http://sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/sho/Adsorcion.pdf
Romero García Aida (202). Cromatografía. Instituto de biotecnología, UNAM.
Artículo recuperado a las 17:25 horas de
http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/Cromatografia.pdf

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