DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUIMICAS Y DINAMICAS

MANUAL DE PRACTICA DE BIQUIMICA

I. PRESENTACIÓN DE RESULTADOS

Sistema 01

Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml) Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml)
Agua destilada. (4ml) Agua destilada. (4ml)
COMPONENTES Alcohol etílico (2ml)
Se observa por 15 minutos Reactivo de schiff. (1ml)

EVIDENCIAS

RESULTADOS No son visibles las Se hace visible un cambio

evidencias. de color a morado claro.
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Sistema 02

Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml) Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml)
Agua destilada. (4ml) Agua destilada. (4ml)
COMPONENTES Agua oxigenada 3 Agua oxigenada. (3ml)
volúmenes. Alcohol etílico (2ml)
Reactivo de schiff. (1ml)
Se observa por 15 minutos

EVIDENCIAS

RESULTADOS No son visibles las Se hace visible un cambio

evidencias. de color a fucsia.

Sistema 03

Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml) Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml)
Limaduras de fierro. .(0,5g) Limaduras de fierro.(0,5g)
COMPONENTES Agua oxigenada (3ml). Agua oxigenada. (3ml)
Alcohol etílico (2ml)
Se observa por 15 minutos Reactivo de schiff. (1ml)

EVIDENCIAS
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RESULTADOS Se hace visible un cambio Se hace visible un cambio

de color a marrón claro. de color marrón fuerte.

Sistema 04

Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml) Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml)
Tozos de papa. .(0,5g) Tozos de papa. .(0,5g)
COMPONENTES Agua oxigenada 3 Agua oxigenada 3
volúmenes. volúmenes.
Alcohol etílico (2ml)
Se observa por 15 minutos Reactivo de schiff. (1ml)

EVIDENCIAS

RESULTADOS Es evidente espuma por las Más presencia de espuma

paredes del tubo de con un cambio de color a
ensayo.(efervescencia) fucsia fuerte.

Sistema 05
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Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml) Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml)
Trozos de hígado.(0,5g) Trozos de hígado. (0,5g)
COMPONENTES Agua oxigenada 3 Agua oxigenada 3
volúmenes. volúmenes.
Alcohol etílico (2ml)
Se observa por 15 minutos Reactivo de schiff. (1ml)

EVIDENCIAS

RESULTADOS Es evidente espuma por las Más presencia de espuma

paredes del tubo de ensayo con un cambio de color a
.(efervescencia) fucsia fuerte.

Sistema 06
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Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml) Buffer fosfato pH: 7.2. (2ml)
Levadura de panificación. . Levadura de panificación. .
COMPONENTES (0,5g) (0,5g)
Agua oxigenada 3 Agua oxigenada. (3ml)
volúmenes. Alcohol etílico. (2ml)
Reactivo de schiff. (1ml)
Se observa por 15 minutos

EVIDENCIAS

RESULTADOS Es evidente espuma por las Más presencia de espuma

paredes del tubo de con un cambio de color a
ensayo. .(efervescencia) morado claro fuerte.

II. Discusión

Función de algunos reactivos

Sistemas buffer fosfato

Pares conjugados de ácido-base que amortiguan y evitan los cambios bruscos de pH en el

medio donde ellos se encuentran.

Reactivo de schiff

En química, el reactivo de Schiff []es un reactivo para la detección de aldehídos. Cambia a

color violeta púrpura con un aldehído, al perder ácido sulfuroso, por la reacción, pues éste
es un ácido inestable.
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Analizamos los sistemas

catalasa
Sustrato + Enzima Producto + Enzima Peróxido
peroxido tejidos Condiciones de Rx O2 + H2O
(H2O2) papa pH= 7.2
Hígado T°= normal

Sistema 01
el sustrato(peróxido) no está presente porque el peróxido no es agregado y por lo tanto al
reaccionar con el alcohol etílico(CH3-CH2-OH) no se produce ninguna reacción ya que es el
peróxido es el que oxida al alcohol etílico por lo que al agregar el reactivo schiff existe
cambio de color pero no existe sustrato. El reactivo schiff reconoce cetonas y aldehídos.
Sistema 02
Aparte de agregar buffer fosfato, agua destilada también se agrega agua oxigenada que
al reaccionar con el alcohol etílico el peróxido se descompone dando un color fucsia color
característico por la oxidación del peróxido (agua oxigenada). Dando como consecuencia
un aldehído, a este mismo lo reconoce el reactivo de schiff: por lo tanto sabiendo que el
peróxido de hidrogeno es el sustrato decimos que en este sistema si hay sustrato pero no
está presente la enzima.

Sistema 03
Existe presencia de buffer fosfato y limaduras de hierro (catalizador inorgánico) además
de agregar agua oxigenada que al reaccionar con el alcohol etílico se produce una
efervescencia y es que se está liberando oxigeno es decir se está oxidando el peróxido,
aquí no haya presencia de catalasa pero si de sustrato (peróxido o agua destilada).
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Sistema 04
En este sistema antes de los 15 minutos al agregar Buffer fosfato los trozos de papa y
agua oxigenada se observa una efervescencia que da lugar a espuma por las paredes del
tubo de ensayo, lo que demuestra la presencia de enzimas, posteriormente se agrega,
alcohol etílico y reactivo de schiff lo que da lugar al cambio de color y a una velocidad de
reacción que es más rápida a las anteriores.

H2O2 + CH3 - CH2 –OH CH3 – CHO + 2 C20-H20-Cl-N3

Rosado Schiff

Sistema 05
En este sistema antes de los 15 minutos al agregar Buffer fosfato los trozos de hígado y
agua oxigenada se observa una efervescencia que da lugar a espuma por las paredes del
tubo de ensayo, lo que demuestra la presencia de enzimas, posteriormente se agrega,
alcohol etílico y reactivo de schiff lo que da lugar al cambio de color y a una velocidad de
reacción que es más rápida a comparación del sistema 04.

Sistema 06
En este sistema antes de los 15 minutos al agregar Buffer fosfato Levadura de
panificación. Y agua oxigenada se observa una efervescencia que da lugar a espuma por
las paredes del tubo de ensayo con un color marrón bajo, lo que demuestra la presencia de
enzimas, posteriormente se agrega, alcohol etílico y reactivo de schiff lo que da lugar al
cambio de color y a una velocidad de reacción que es menos lenta al sistema anterior

Finalmente deducimos:

 Un catalizador químico es el hierro.

 Las enzimas o biocatalizadores están presentes en el hígado, papa y levadura.
 La solución donde está presente el hígado es la que reacciona más rápido
 El hígado tiene más peroxidasas.
 La evidencia de la espuma simboliza la presencia de catalizadores.

Cuestionario

1.- ¿Mencione Ud. En que organelos se encuentra las peroxidasas?

Está presente en los peroxisomas de vegetales y animales.

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2.- ¿Cuál es la función en la peroxidasa en la célula?

Catalizan reacciones bisustrato de carácter redox, utilizando un peróxido como oxidante.

En animales, existen peroxidasas con una función predominantemente defensiva en la

saliva, la leche o los leucocitos, donde se aprovecha el carácter oxidante con fines
germicidas y bactericidas el peróxido que se genera de forma endógena mediante otras
reacciones (glucosa oxidasa, amino ácido oxidasa etc.).

No todas las peroxidasas son defensivas, y por ejemplo una peroxidasa es también la
responsable de la síntesis de las hormonas tiroideas, oxidando en este caso el yoduro a
yodo para que éste se adicione a algunos de los anillos fenólicos de los residuos de tirosina
de la tiroglobulina. Otras peroxidasas, como la glutatión peroxidasa, están ampliamente
distribuida en diversos tejidos con fines diferentes, pero relacionados con una función
antioxidante. Prácticamente todas las peroxidasas son hemoproteínas.

3.- ¿Qué diferencias hay entre peroxidasa y catalasa?

Aquí tenemos diferencias:

Catalasa: es una enzima que se encuentra en organismos vivos y cataliza la

descomposición del peróxido de hidrógeno (H202) en oxígeno y agua. El peróxido de
hidrógeno es un residuo del metabolismo celular de muchos organismos vivos, pero dada
su toxicidad debe transformarse rápidamente en compuestos menos peligrosos. Para ello
se usa con frecuencia esta enzima que cataliza su descomposición en agua y oxígeno.
Además la catalasa se usa en la industria textil para la eliminación del peróxido de
hidrógeno, así como en menor medida se emplea en la limpieza de lentes de contacto que
se han esterilizado en una solución de peróxido de hidrógeno.

Peroxidasa: Es una hemoproteína (enzima) altamente específica para el aceptor de

hidrogeno, que es el peroxido de hidrogeno, que cataliza la oxidación de un amplio
número de sustratos orgánicos e inorgánicos, utilizando el poder oxidante del peróxido de
hidrógeno. Es utilizada ampliamente en bioquímica clínica. Así, los ensayos para la
determinación y cuantificación de metabolitos como glucosa, ácido úrico, colesterol o
triglicéridos en fluidos biológicos usan peroxidasa como enzima acoplada. También se
utiliza en inmunoensayos para la detección de virus tan conocidos como el virus de la
inmunodeficiencia humana (VIH) causante del SIDA o el herpesvirus. La peroxidasa
también se utiliza como biocatalizador para la generación de productos de interés
biotecnológico e industrial como resinas fenólicas, adhesivos, antioxidantes, antiestáticos
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y protectores de radiación magnética, colorantes alimentarios y componentes bioactivos

de detergentes.

4.- ¿Explique Ud. Como en la célula se forman los peróxidos (H2O2) y qué función tiene?.

Según las observaciones se puede apreciar que la formación de peróxidos se da a través de

la liberación de oxigeno en forma de espuma indicando mayor actividad enzimática debido
a que se produce una reacción exotérmica con una función predominantemente defensiva
en la saliva, la leche o los leucocitos, función protectora contra microorganismos
patógenos, principalmente anaerobios

6.- ¿Reacción química de las catalasas?

Cataliza y descompone al peróxido de hidrógeno (H202) en oxígeno y agua, según la

siguiente reacción:

2H2O2 CH3CHO + 2H2O

El peróxido de hidrógeno es uno de los productos del metabolismo celular en diversos

organismos, pero dada su potencial toxicidad, es transformado enseguida por la enzima
catalasa.
Además, la catalasa cumple una función protectora contra determinados
microorganismos patógenos, sobre todo anaerobios.

III. Conclusiones:

 Se demostró la acción de la peroxidas, un catalizador presente en tejidos

orgánicos.

 Se comparó la actividad catalítica por medio del tiempo del cambio de color.

 Las enzimas o biocatalizadores están presentes en el hígado, papa y levadura.

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IV. Referencias Bibliografías:

 OCHIAI, E., «Química bioinorgánica», Reverté, pp. 143–147, España, 1985.

 SÁNCHEZ ENRIQUEZ, S., Uribe Luna, S. y Flores Alvarado, L.J., Manual de prácticas.
Bioquímica , 2da. Edición, Mc– GrawHill, p. 35, México, 2008.

 RODNEY B. (2000) “Conceptos de bioquímica” 1ra Ed. Editorial International

Thomson editores pag. 141- 166.

 CARMEN D. M y J.GARCIA. I. VICENTE. (2006) “fundamentos y técnicas de análisis

bioquímicos”. International Thomson editores. España. Pag 229 – 237.