Preparación de Medios de Cultivo y Manejo Del Autoclave
Preparación de Medios de Cultivo y Manejo Del Autoclave
Preparación de Medios de Cultivo y Manejo Del Autoclave
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RESUMEN
INTRODUCCIÓN
MATERIALES Y METODOS
13gr -----------1000ml (1l)
Preparación de medio de cultivo
X---------------- 30 ml
Para realizar la practica se elaboraron
inicialmente los medios de cultivo X= 0.39 g de caldo en polvo.
necesarios para la siembra, para ello Para preparar 30 ml de caldo nutritivo
se utilizaron medios deshidratados, es necesario disolver 0.39 gr del
tanto para agar como para caldo medio deshidratado.
nutritivo. Teniendo en cuenta las
indicaciones del fabricante primero, Luego de haber realizado los cálculos
se preparo el medio de cultivo agar a se procedió a pesar en una balanza
partir del medio deshidratado, para analítica e inmediatamente se
preparar 40 ml de agar deben ser dispuso a diluir el medio de cultivo
disueltos 48 gr. Para la preparación (agar) en polvo en 40 ml de agua
de los 40 ml de agar se debieron destilada en un elermeyer. De la
realizar los cálculos necesarios, así: misma manera se hizo con el caldo
nutritivo y se disolvió en 30 ml de
.48 gr ------------- 1000ml agua destilada en un becker.
X ---------------- 40 ml Se tuvo en cuenta la composición de
X= 1.92 gr de agar. cada uno de los reactivos:
Lactosa 5.0
REACTIVOS Y
AGAR
CALDO
RESULTADOS
Figura 1. Colonias de bacterias Figura 2. Bacterias en siembra en
en siembra por agotamiento superficie
significativo de la relación
carbono/nitrógeno sobre la célula y
Calor seco (en horno de
esterilización), Flama directa,
Incineración, Aire caliente,
Pasteurización, Ebullición, Vapor,
Tyndalización.
Métodos químicos, Alcoholes (Etanol,
Alcohol isopropílico), Aldehídos
(Formol, Glutaraldehído), entre otros.
Pero los métodos más comunes son:
Calor al rojo: Los instrumentos tales
como las asas y alambres de siembra
y varillas secas se esterilizan
calentándolas en la llama de un
mechero bunsen hasta que se ponen
al rojo.
Calor seco: Se aplica en un horno
calentado eléctricamente que se
controla mediante termostatos y que
6. ¿Cuál es el mecanismo por el está provisto de un gran ventilador
cual el vapor saturado a circulante que asegura la uniformidad
presión mata a los de la temperatura en todas las partes
microorganismos? del contenido. Los equipos modernos
disponen de controles electrónicos
El calor húmedo produce que pueden llevar la temperatura al
desnaturalización y coagulación de nivel requerido, mantenerla en ese
proteínas; El calor húmedo mata a punto durante un tiempo establecido
los microorganismos porque el agua previamente y desconectar
acelera la rotura de los puentes de seguidamente la corriente. En
hidrógeno que mantienen la algunos modelos se incorpora una
estructura tridimensional de las cerradura solenoide para impedir que
proteínas la estufa sea abierta antes de que se
complete el ciclo. Este dispositivo
7. ¿Cuáles son los métodos más
salvaguarda y protege al personal de
corrientes utilizados para
quemaduras accidentales.
esterilizar?
Tindalización: Este proceso,
Existen muchos métodos de designado así después de que el
esterilizacion, se dividen en métodos científico Tyndall utilizara un
físicos y químicos. vaporizador de Koch (o de Arnold),
Métodos físicos: Calor que es una caja metálica en el fondo
húmedo (en autoclave de vapor), de la cual el agua hierve mediante un
mechero de gas, una resistencia
eléctrica o un serpentín de vapor. El
material que va a tratarse permanece Se denomina termoresistente a la
en una bandeja perforada, capacidad que tienen los
inmediatamente por encima del nivel microorganismos para resistir altas
del agua. La tapa es cónica, de temperaturas bien sea por medio de
manera que el agua de condensación endosporas.
resbala por los laterales en vez de
gotear sobre el contenido. Un 10. ¿Usualmente cómo se
pequeño orificio en la parte superior esterilizan las cajas de Petri y
de la tapa permite que salgan el aire las pipetas?
y el vapor.
Filtración: Las bacterias pueden Esterilización de caja Petri: Se toma
eliminarse de los líquidos haciéndolos la caja de Petri y se coloca en el
pasar a través de filtros con poros centro de un papel estraza y se dobla
muy pequeños que impiden el paso cubriéndola con dos de sus extremos
de las bacterias pero, en general, no (frente y posterior), de tal manera que
de los mycoplasmas ni virus. parezca un rectángulo con unas
pequeñas salientes en la parte
8. Ciertos organismos poseen la superior. Posteriormente se doblan
estructura biológica más las cuatro esquinas que forman el
termoresistente, para rectángulo hacia el centro de tal
supervivencia. ¿cuál es y en manera que queden dos puntas que
que microorganismo se se doblan hacia abajo. Para mayor
encuentra? seguridad, se le coloca una cinta que
sirva de indicativo para verificar la
Las endosporas, soportan esterilizacion.
sorprendentemente altas Esterilización de pipeta: Colocar la
temperaturas debido a sus capas. La pipeta aproximadamente a 45º sobre
importancia de la esporulación reside el papel estraza, cuidando que la
en la resistencia al calor que le otorga punta quede cerca de uno de los
a la bacteria. Las endoesporas, extremos.Doblar la esquina en la que
termoresistente, pueden soportar no está apoyada la pipeta, de tal
incluso la cocción durante horas. En manera que la punta de esta quede
la espora se halla concentrada, en un cubierta. Nuevamente doblar la
espacio muy reducido, una gran esquina en la que no se encuentra la
cantidad de material rico en proteína pipeta para que esta tenga doble
que no se ve afectado por las altas protección. Enrollar la pipeta con el
temperaturas. demás papel estraza.
Al terminar de enrollar doblar la parte
9. ¿Qué significa
final del papel hacia abajo.
termoresistencia en
microbiología?
11. ¿Cómo se verificaría que un con el asa a un tubo que contenga
medio de cultivo procesado en agar nutritivo estéril para cultivar
la autoclave quedo realmente esa colonia aislada; este
esterilizado? procedimiento se conoce como
Se puede verificar fácilmente por transplante.
medio de la Cinta indicadora para
esterilización a vapor confiable. Las 2. Que es una colonia
líneas de este indicador químico bacteriana?
adquieren un color café oscuro Se entiende por colonia
cuando se exponen a un proceso de bacteriana a la agrupación de
esterilización a vapor. El confiable bacterias originadas a partir de
indicador químico reacciona cuando una bacteria madre que se
se expone al proceso de establecen y extienden por
esterilización a vapor. determinado medio.
La esterilización es el proceso
mediante el cual se puede lograr la
destrucción total de los
microorganismos