"AÑO DE LA LUCHA CONTRA LA CORRUPCIÓN Y LA IMPUNIDAD"

FACULTAD DE FARMACIA
Y BIOQUÍMICA

TEMA: PRÁCTICA 13 Y 14 DETERMINACIÓN DE PLOMO Y

MERCURIO

INTEGRANTES:
 Estrada Lapas, Guillermina
 Freyre Torres, Susana
 Sañac Romero, Richar
 Vento Aquino , Midori
 Vidal Olortegui, Claudia

DOCENTE: Lizano Gutiérrez Jesús

SECCIÓN: FB9N1
 PRÁCTICA 13 Y 14 DETERMINACIÓN DE
PLOMO Y MERCURIO

1.- Importancia
La contaminación industrial, tecnológica, agropecuaria, minera y el uso
indiscriminado de diversos fertilizantes químicos en el suelo con metales
pesados, que se incorporan finalmente a ríos, a los vegetales, animales y
alimentos alteran la sostenibilidad de la cadena trófica, provocando riesgos
potenciales en la naturaleza y en la sociedad, debido a que originan serios
problemas en la salud humana y animal.
Preocupación importante en Salud Pública por su toxicidad aguda y crónica,
alta persistencia, amplia variedad de fuentes de exposición y por su rápida
acumulación para los organismos vivos. El plomo y el mercurio preocupan
especialmente por su neurotoxicidad, a su vez el plomo, produce daño renal,
anemia, retraso del desarrollo mental e intelectual de los niños, hipertensión
y enfermedades cardiovasculares en adultos.
En Perú es un tema preocupante debido a que existe una exposición
importante tanto vía alimentaria como vía ambiental y hay sectores de mayor
riesgo por presentar mayores concentraciones de estos metales tales como
sectores mineros o agropecuarios; por ello, es importante detectar altos
niveles a tiempo para evitar que se produzcan mayores problemas de salud
incluyendo intoxicaciones agudas o enfermedades crónicas.
La exposición masiva a estos agentes tóxicos se convierte en un verdadero
peligro público; transportados por la contaminación del aire, la tierra y el
agua (aguas subterráneas y agua de mar) los metales pesados contaminan
el cuerpo humano, ya sea directamente por el contacto o indirectamente a
través de la cadena alimentaria. La presencia de metales pesados genera
una desvitalización general del cuerpo humano afecta considerablemente la
capacidad de respuesta del organismo tanto físico como mental en el
2
 combate de enfermedades, generan respuestas tardías frente a el estrés,
aumenta la frecuencia y alarga los periodos de licencias médicas y además
genera un mal rendimiento laboral.

2.- Metodología
2.1.- Fundamento

Método de la BAMBACH Y BURKEY

El método se basa en la formación de un complejo coloreado, el cual se forma

haciendo reaccionar la ditizona (difenilcarbazona) que es un reactivo cromóforo
con el analito no absorbente (plomo) presente en la muestra con solución
reductora amoniacal de citrato-cianuro, en medio ácido, para favorecer la
ruptura del enlace S-H de la ditizona liberando iones hidrónios y formando el
complejo con el analito. El plomo es extraído con cloroformo (CHCL3) en
forma de ditizonato de color rojo cereza, cuya coloración es susceptible de una
determinación colorimétrica. Las medidas deben ser realizadas a una longitud
de onda de 520 nm.

Método de GOLDMAN Y JACOBS

Este método se basa en la reacción del mercurio presente en el agua con
laditizona para dar un complejo de ditizonato mercúrico de color naranja, el
cual se extrae con cloroformo, en un medio ácido, cuya intensidad se
cuantifica colorimétricamente a una longitud de onda de 490 nm

2.2.- Técnica Operatoria

PLOMO
Tomar 5 ml de la muestra peoblema
+ 15 ml citrato amonio 40%
+ 3 gts rojo fenol
+ Gota a gota NH4 OH hasta pH 8
+ Hidroxilamina 20% 2ml
+ 5ml CNK 10%
+ 5ml Diltiazona (16mg % em Cl3CH)
+ Agitar fuertemente

2
 Elimina A

Continua B
B

Agregar
50ml Buffer Elimina
3.4
+
Agitar x 4'
+ + 10ml mezcal
Separar Amonio cianuro
+ 15ml diltizona
Continua Std (8 mg%
Cl3OH)
+ Agitar

2
 Leer Diltiazona
Estándar a 520
nm
Ver resultados

MERCURIO
Tomar 5 ml de la muestra problema
+ 3 gts Azul Triol
+ NO3 H [] pH 3.5
+ Hidroxilamina 20% 2ml
+ 5ml CNK 10%
+ 5ml Diltiazona
+ Agitar fuertemente

Elimina A
Evaporar

R3
 Continua B

Agregar
+ 50ml HCl 0.25 Elimina
N
+ 5ml BrK 40% Continua
+ Agitar x 4' + 7ml buffer 6
+Separar + 15ml Diltiazona
std
a + Agitar
+ Separar

Leer Diltiazona
Estándar a 490
nm
Ver resultados

3.- Resultado

PLOMO

Blanco = 0.314
Muestra= 1.470
Diferencias= 1.154

“ Ley de Lambert y Beer”

B
2
NO se logro desarrollar la grafica debido que la muestra sobrepaso la “ Ley de Lambert
y Beer”

MERCURIO
Blanco = 0.284
Muestra= 0.334
Diferencias= 0.050

Se aplican
Regla de 3 Simple

4.- Interpretación
PLOMO:
El procedimiento para la extracción del plomo empieza con preparación
de la pera de decantación, en esta fase se agrega el citrato de amonio
para evitar la formación de hidróxidos con los otros metales, el rojo fenol
solo trabajara como un indicador de pH, la hidroxilamina formara un
complejo (quelato) con los otros metales que no deseamos estudiar por
ejemplo Zinc, Bismuto, etc. Luego al agregar el cianuro de potasio este
reaccionará con los otros metales, para que el plomo quede libre y
pueda reaccionar con la Ditizona formando el Ditizonato de plomo
(presente en la fase inferior de la pera) se verá un color verde azulado o
de color rojo si está saturado.

En la segunda fase se agrega el Buffer 3,4 esto nos sirve para que todo
el plomo que se formó como Ditizonato de plomo, se separe de la
2
 Ditizona, pasando a la fase superior de la pera y poder eliminar solo la
Ditizona y quedarnos con el Buffer con plomo. Y finalmente agregamos
la mezcla de amonio cianurado para separar el plomo del Buffer, luego la
Ditizona estándar para que pueda atrapar de nuevo al plomo y leerlo al
espectrofotómetro a 520 nm, y poder cuantificar la cantidad de plomo
presente en la muestra.

MERCURIO:
El procedimiento para la extracción del mercurio empieza con
preparación de la pera de decantación, en esta fase se agrega el ácido
nítrico concentrado a un pH 3,5 formando color azul para poder atrapar
otros metales que no queremos estudiar como por ejemplo el nitrato de
plomo, el azul de timol solo es un indicador de pH, de esta manera la
hidroxilamina formara un complejo (quelato) con el metal mercurio, pero
también existirá la posibilidad de atrapar otros metales, formando un
color verde botella, azul naranja o rojo botella. Luego al agregar la
Ditizona, esta atrapara todo el mercurio que sea posible y también otros
metales formando un complejo o quelato (se elimina la fase superior de
la pera). Se agrega el ácido clorhídrico y el bromuro de potasio, el ácido
es como medio para que el bromuro pueda reaccionar con el mercurio
separándolo de la Ditizona, la cual es eliminada (fase inferior de la pera).

En la segunda fase se agrega el Buffer 6 esto nos sirve para que todo el
mercurio que reacciono con el bromuro se separe, y pueda formar un
nuevo complejo con la Ditizona estándar y poder leerlo al
espectrofotómetro a 490 nm, y poder cuantificar la cantidad de mercurio
presente en la muestra.

6.- Cuestionario

PLOMO (pb)
Explique la función de cada reactivo en la técnica.
 Rojo de Fenol.
2
 Se usa como indicador de pH. A pH inferiores a 6,8 la media vira a amarillo,
a pH superiores a 8 el cultivo se torna de color violeta, los pH entre 6,8 y 8.
Dan tonalidades graduales de color naranja.

 NH4 Citrato 40%.

Es utilizado para evitar que precipite hidróxidos de otros metales y así
prevenirr Interferencias.

 NH4OH 20%.
Tiene la función de alcalinizar el medio para que se pueda llevar a cabo la
reacción de ditizona y plomo, ya que un medio alcalino es un requisito para
la adecuada disolución de ditizona y la formación del complejo.

 KCN 10%
Reacciona con otros cationes como Ag+, Cu2+, Hg2+, Cd2+ para evitar la
interferencia de estos en la reacción con Ditizona, resultando entonces una
reacción específica para el plomo con una sensibilidad muy alta.

 Hidroxilamina 20%
Quela a los metales como Zinc, Bismuto, etc. Y deja libre al plomo. Es un
compuesto que procede de sustituir un átomo de Hidrógeno del amoníaco
por un hidroxilo. No se encuentra libre en la naturaleza. Es un compuesto
sólido, incoloro, inodoro, muy ávido del agua y se mezcla con ella en todas
proporciones.

 Ditizona Extractora (16 mg DTZ)/100 mL CHCL3)

La ditizona es un compuesto soluble en disolventes orgánicos no polares Se
emplea como acomplejante del Pb formando Ditizonato de Plomo. Los
completos metálicos se forman cuando algunos metales remplazan a uno o
a ambos hidrógenos ácidos de la ditizona. La coloración del completo sirve
de fundamento para el análisis espectrofotométrico.
2
  Cloroformo
Se emplea para la extracción de ditiozanato de Plomo, ya que es altamente
soluble en cloroformo a temperatura de ambiente 2 g/100 mL. Además, este
medio es adecuando para la concentración del analito e incremento de
sensibilidad del análisis y elimina interferencias.

 Solución Buffer
Acidifica el medio, por la cual el plomo pasará a la misma bajo forma de
nitrato. Entonces el plomo se encontrará en la fase acuosa.

Valores normales de toxicos de plomo

El plomo es un metal pesado que no juega ningún papel en la fisiología humana, por lo
que su nivel ideal en sangre debería ser cero. La Organización Mundial de la Salud
define como intoxicación por plomo los valores de plombemia de más de 15 μg/dL y
para el Center of Disease Control de los Estados Unidos, cuando los valores son
mayores o iguales a 10 μg/dL. Niveles séricos entre 5 y 9 μg/dL dan como resultado
reducción del coeficiente intelectual, disminución de la agudeza auditiva, retraso del
desarrollo psicomotor y disminución del crecimiento, valores entre 10 μg/dl hasta 70
μg/dl producen anemia, disminución del metabolismo de la vitamina D y disminución
de la velocidad de conducción nerviosa periférica y niveles superiores a 70 μg/dl
producen nefropatía, encefalopatía, coma y la muerte.

MERCURIO (Hg)
. Fundamento de la reacción.
Fundamento:

MÉTODO DE GOLDMAN Y JACOBS

Este método se basa en la reacción del ion mercúrico (Hg +2) presente en la muestra
de agua con la ditizona (difeniltiocarbazona) para dar un complejo de ditizonato
mercúrico de color naranja, el cual es soluble en cloroformo en un medio ácido y se
2
cuantifica colorimétricamente a 490 nm.

. Función de cada reactivo de la técnica.

 DITIZONA O DIFENILTIOCARBAZONA: La ditizona es

un reactivo utilizado en la determinación de metales debido
a que forma complejos coloreados con muchos de ellos.
Tradicionalmente, el procedimiento para medir la
absorbancia de los complejos de ditizona implicaba la
extracción del complejo en un solvente orgánico como
cloroformo o tetracloruro de carbono.
La ditizona (difeniltiocarbazona) es un compuesto orgánico
que es soluble en cloroformo y tetracloruro de carbono y
que se ha utilizado para la cuantificación de metales
pesados, ya que forma complejos no polares de gran
estabilidad.

 AZUL DE TIMOL: El azul de bromo timol es un indicador

muy utilizado para determinar el PH en zonas próximas a la
neutra, pH=7, porque tiene un intervalo de viraje del
amarillo al azul entre valores 6.0 y 7.6.

 HIDROXILAMINA: Se emplea el cloruro de hidroxilamina

para evitar la oxidación de la ditizona.

 ACIDO NITRICO: se utilizó para bajar el PH de la ditizona

donde se encuentra el mercurio.

 ACIDO CLORHÍDRICO: sirve como medio acido donde el

mercurio va a ir junto con el bromuro.

 BUFFER PH 6: se encarga que subir el PH y el mercurio se

retire al lado de la ditizona.

Valores normales y tóxicos del Hg.

La OMS considera como valor de mercurio “normal” en sangre <10 μg/L y
orina <20 μg/L.

2
No existe unanimidad en cuanto al umbral medio de toxicidad humana; la
investigación actual en salud ha establecido los límites de toxicidad del
mercurio entre 50 y 160 μg/día.

2
7.- Referencia Bibliográfica

 Zenz C, ed. Occupational medicine: principles and practical applications. 2nd

Ed. Chicago: Mosby; 1988.

 Ellemhorn MJ. Medical Toxicology. 2nd Edition. Baltimore: Williams Wilkins;

1996.

 Dabeka RW. Examen de mercurio total en alimentos de la dieta y valoración

de la ingesta dietética del mercurio de los adultos y de niños en dos
ciudades canadienses, 1998-2000. Rev Alimento Addit Contam. 2003;20

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fishes and shellfish. England: The Commitee; 2003

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 OMS. Guía breve de métodos analíticos para determinar las

concentraciones de plomo en la sangre. Organización Mundial de la Salud;
2013
 Londoño L, Londoño P, Muñoz F. Los riesgos de los metales pesados en la
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 Rojas K, Romero V. Determinación por absorción atómica de plomo y arsénico en

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 Acuña V. Determinación espectrofotométrica de plomo (II) con ditizona en

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