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    Caso Clínico 4

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    Viridiana Gonzalez
    Este documento presenta un caso clínico de una mujer que sufre infecciones recurrentes del tracto urinario. Se detallan las muestras a analizar, técnicas de diagnóstico como cultivos y tiras reactivas, medios de cultivo específicos para aislar posibles patógenos como Ureaplasma spp. y E. coli. También se describen pruebas bioquímicas como Simmon's citrate, MIO y KIA para identificar los microorganismos, así como posibles mecanismos de patogenicidad e antibiótic

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    Este documento presenta un caso clínico de una mujer que sufre infecciones recurrentes del tracto urinario. Se detallan las muestras a analizar, técnicas de diagnóstico como cultivos y tiras reactivas, medios de cultivo específicos para aislar posibles patógenos como Ureaplasma spp. y E. coli. También se describen pruebas bioquímicas como Simmon's citrate, MIO y KIA para identificar los microorganismos, así como posibles mecanismos de patogenicidad e antibiótic

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    Este documento presenta un caso clínico de una mujer que sufre infecciones recurrentes del tracto urinario. Se detallan las muestras a analizar, técnicas de diagnóstico como cultivos y tiras reactivas, medios de cultivo específicos para aislar posibles patógenos como Ureaplasma spp. y E. coli. También se describen pruebas bioquímicas como Simmon's citrate, MIO y KIA para identificar los microorganismos, así como posibles mecanismos de patogenicidad e antibiótic

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    Este documento presenta un caso clínico de una mujer que sufre infecciones recurrentes del tracto urinario. Se detallan las muestras a analizar, técnicas de diagnóstico como cultivos y tiras reactivas, medios de cultivo específicos para aislar posibles patógenos como Ureaplasma spp. y E. coli. También se describen pruebas bioquímicas como Simmon's citrate, MIO y KIA para identificar los microorganismos, así como posibles mecanismos de patogenicidad e antibiótic

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    UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIAPAS

    FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS


    EXTENSION OCOZOCOAUTLA
    LICENCIATURA EN QUIMICOFARMACOBIOLOGO

    MATERIA
    BACTERIOLOGIA II

    DOCENTE

    TRABAJO
    CASO CLINICO

    SEXTO SEMESTRE

    OCOZOCOAUTLA DE ESPINOZA CHIAPAS.


    A 09 DE NOVIEMBRE DE 2017
    4.- Mujer de 31 años con varias infecciones del tracto urinario (ITU) de
    repetición catalogadas como cistitis no complicadas por ser mujer
    premenopáusica sin patología de base ni anómalas del tracto urinario. En los
    episodios de ultimo año fue tratada con ciprofloxacino en uno y con
    cotrimoxazol en otro. Acude de nuevo a su médico de familia por disuria
    polaquiuria y frecuencia de dos días de evolución. La tira reactiva introducida
    en una muestra de orina en la consulta muestra la presencia de leucocitos y
    nitritos.
    b) Muestras representativas para su estudio Bacteriológico:

     Cultivos de orina
     Líquido vaginal
     Líquido uretral
     Las pruebas y análisis que tendrán que realizarse al paciente dependerán de la
    zona donde se presume que radica la infección y de los síntomas que éste
    padezca.

    d) Técnicas convencionales y alternativas para el diagnóstico microbiológico.

    Métodos de diagnóstico rápido:

     Tiras reactivas

    Es recomendable su uso como aproximación diagnóstica:

    Leucocitoestearasa. Sensibilidad del 90% y especificidad del 92% (la tasa de falsos
    positivos es del 8%).

     Nitritos. Sensibilidad del 35-85% y especificidad del 92-100%.

    Realización conjunta. Sensibilidad del 88-92% y especificidad del 78-98%.

     Microscopio óptico

    Se considera que existe bacteriuria cuando se detecta, mediante la tinción de gram,


    una o más bacterias en orina no centrifugada. Se considera que tiene una
    sensibilidad del 95%.

    Otras técnicas diagnósticas


     Cultivo

    Se siembra una gota de algunos de estos líquidos en una placa con nutrientes para
    bacterias y, después de transcurridas varias horas para que éstas crezcan, se
    determina qué tipo de bacteria es la causante de la infección y qué antibióticos
    pueden resultar efectivos (antibiograma).

    e) Medios de cultivo específicos a utilizar para el aislamiento del


    microorganismo

    Ureaplasma spp

    Ureaplasma son parásitos en la superficie de las células epiteliales humanas y


    animales, carecen de algunas vías metabólicas, son dependientes de sus
    huéspedes, que les proporcionan los factores de crecimiento esenciales, de base
    rica en peptona, el medio contiene los nutrientes necesarios (Vitox, cisteína, extracto
    de levadura, urea y suero de caballo) que el huésped les ofrece in vivo. El agar para
    Mycoplasma o Ureaplasma está diseñado para la detección, el aislamiento y el
    recuento de especies de Mycoplasma y Ureaplasma, sobre todo de muestras
    urogenitales. La mezcla de antibióticos inhibe la mayoría de las bacterias
    gramnegativas y grampositivas, así como las levaduras, que pueden estar presentes
    en las muestras.

    Las colonias incoloras de Mycoplasma hominis tienen el aspecto típico de “huevos


    fritos” (dependiente de la densidad de crecimiento). Las colonias de Ureaplasma
    urealyticum son de color marrón oscuro y crecen adoptando la típica morfología de
    “erizo de mar”. U. urealyticum metaboliza la urea, lo que provoca un cambio de pH a
    condiciones alcalinas. Por consiguiente, el sulfato de manganeso se oxida a óxido
    de manganeso, que U. urealyticum incorpora y que aporta el color marrón oscuro a
    las colonias. El cambio de pH induce el cambio de color del indicador de pH rojo
    fenol: Como consecuencia, el medio que rodea las colonias de Ureaplasma pasa de
    amarillo a rojo., se incuban a 37° C, y se observarán diariamente.[ CITATION OXO17
    \l 2058 ].
    Escherichia coli

    Medios selectivos son también diferenciales por ejemplo podemos mencionar:

    Agar Tergitol 7: Este medio permite diferenciar especies fermentadoras de la lactosa


    de las especies no fermentadoras. En este medio Escherichia coli presenta colonias
    amarillas.

    Agar MacConkey: Al igual que el anterior separa las bacterias fermentadoras de la


    lactosa. Escherichia coli produce colonias rosadas.

    Agar Eosina – Azul de Metileno (EMB) de Levine: Permite la diferenciación de


    especies fermentadoras de la lactosa. Klebsiella pneumoniae y Escherichia
    coli presentan colonias que varían del púrpura a verde metálico.

    f) Marchas microbiológicas

    Primarias

    Escherichia coli

     Tinción de Gram
    1. De la toma de muestra se utilizó cantidad suficiente de muestra.
    2. La muestra se aplicó a un porta objetos con una asa bacteriológica.
    3. Se realizó la tinción de Gram.

    Se observaron bacilos Gram negativos.


     Prueba de catalasa

    El peróxido de hidrógeno es el producto final del metabolismo oxidativo de


    carbohidratos, a esta vía metabólica recibe el nombre de metabolismo aerobio-
    oxidativo.
    La acumulación del peróxido es muy toxico por lo que la mayoría de las bacterias
    aerobias y anaerobias facultativas exceptuando a Streptococcus sp.  producen una
    enzima llamada catalasa que degrada el peróxido de hidrógeno obteniendo agua y
    oxigeno gas.

    1. Colocar una gota de agua oxigenada sobre un


    portaobjetos con ayuda de un asa
    2. Poner después una muestra de la cepa
    3. Detectar la formación de burbujas

    El resultado de la prueba fue positivo.

    Secundarias

     Citrato Simmons

    Esta prueba nos permite diferenciar un grupo de bacterias que son capaces de
    crecer con citrato como única fuente de carbono y sales amónicas inorgánicas como
    única fuente de nitrógeno, provocando la alcalinización del medio.
    El medio a utilizar es agar Citrato de Simons, que contiene citrato de sodio, fosfato
    de amonio y azul de bromotimol como indicador de pH.
    El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias poseedoras de citrato
    permeasa, a través del ciclo del ácido tricarboxílico. El desdoblamiento del citrato da
    progresivamente, oxalacetato y piruvato. Este último, en presencia de un medio
    alcalino, da origen a ácidos orgánicos que, al ser utilizados como fuente de carbono,
    producen carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces vira al azul y esto
    es indicativo de la producción de citrato permeasa.

    Resultados  

    -Positivo: crecimiento y color azul en el pico, alcalinidad.


    -Negativo: el medio permanece de color verde debido a que no hay desarrollo
    bacteriano y no hay cambio de color.

    MIO (motility Iron Agar)

    Esta prueba bioquímica permite identificar bacterias de acuerdo a su motilidad a la


    reacción de Indol a la descarboxilación de la ornitina.

    Son tres pruebas, en esta prueba se evaluó la producción de indol, la


    descarboxilación de la lisina por la enzima ornitina descarboxilasa y la movilidad del
    microorganismo.
    La presencia de indol, degradación del tripotofano para la enzima triptofanasa libera
    indol, acido pirúvico, amoniaco y energía.
    Procedimiento:
    Inocular en picada las cepas de microorganismos en el medio de cultivo e incubar
    por 24 horas a 37ºC.

    KIA (Kliger Iron Agar)


    Permite un diagnóstico rápido orientativo del tipo de enterobacteria aislado. Las
    enterobacterias mas patógenas no suelen fermentar (producir ácidos de) la lactosa.
    Se detecta la producción de ácidos (acompañada o no del desprendimiento de
    gases) de glucosa o lactosa y producción de SH 2. 

    Método:
    1- Inocular los tubos con una asa : primero por picadura y a continuación una
    siembra en estría en la superficie inclinada. Incubar a 37 oC durante 24 horas.

    Caldo de Urea

    Este medio de cultivo, formulado por Rustigian y Stuart, presenta bajo contenido de
    nutrientes y alta capacidad buffer. 
    El extracto de levadura es la única fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y
    cofactores, y aporta los nutrientes esenciales para el desarrollo bacteriano. Las sales
    de fosfatos constituyen el sistema buffer, el rojo de fenol es el indicador de pH y la
    urea es el sustrato de la enzima ureasa.
    Aquellas bacterias que poseen la enzima ureasa, pueden utilizar el nitrogeno
    proveniente de la urea, la hidrolizan, liberando amoníaco y dióxido de carbono. Estos
    productos metabólicos alcalinizan el medio, haciendo virar el indicador rojo fenol del
    amarillo al rojo. 

    Microorganismo Actividad ureásica Color del medio


    Proteus mirabilis ATCC Positiva Rojo-rosado
    43071
    Escherichia coli ATCC Negativa Amarillo
    25922
    S. flexneri ATCC 12022 Negativa Amarillo
    S. typhimurium ATCC Negativa Amarillo
    14028
    g) ¿Qué antibióticos se recomendaría?

    Es recomendable utilizar los siguientes antibióticos:

     Cefalosporinas.
     Quinolonas.
     Carbapenem
     Gentamicina
     Azitromicina
     Doxiciclina
     Fluroquinolonas

    Ya que se tratan de bacterias Gram negativas y este tipo de antibióticos tiene un


    mayor espectro de acción inhibiendo el crecimiento de este.

    h) Describa los posibles mecanismos de patogenicidad de la bacteria aislada para


    producir la enfermedad.

    Factores de patogenicidad de Ureaplasma sp.

     Adhesinas
     Adhesión a epitelio urogenital.
     Evasión inmune

    Factores de patogenicidad de la E. coli

    La infección urinaria se produce por la habilidad que tienen las bacterias de


    adherirse a las células uroepiteliales de la superficie mucosa, por medio de
    adhesinas o fimbrias que son proteínas de la pared celular bacteriana; producción de
    hemolisinas que son polipéptidos, excretados extracelularmente que lisan eritrocitos
    y otras células; y por la liberación de varias endotoxinas, como el lípido A que
    disminuye el peristaltismo ureteral y produce inflamación, el antígeno O que es
    tóxico e induce fiebre e inflamación y es nefritogénico, el antígeno K que aumenta la
    resistencia bacteriana a la fagocitosis.
    Bibliografias

    Salvatore S, Salvatore S, Cattoni E, et al. Urinary tract infections in women. Eur Obst


    & Gyn and R B, June 2011;156(2):131-136 doi:10.1016/j.ejogrb.2011.01.028
    - Truls E. Bjerklund Johansen, et al. Patient assessment in urinary tract infections:
    symptoms, risk factors and antibiotic treatment options. Surgery (Oxford), June
    2011;29(6):265-271. 

    Medicina Barceló Estudiantes (24 de septiembre de 2013). Ureaplasma urealyticum.


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    Tinoco, M. (20 de junio de 2012). Presentación infección urinaria 2012. Obtenido de


    https://es.slideshare.net/angelito0001/presentacion-infeccion-urinaria-2012

    Echeverria Zarate, J., Sarmiento Aguilar, E., Osores Plengue, F., (2006)., Infección
    del tracto urinario y manejo antibiótico., Consultado el 08 de noviembre de 2017 en:
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    Herrera, L. (2011). Biota et scientia. Obtenido de


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    %20Mycoplasma%20Ureaplasma%20Selektive%20Agar.pdf

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