“EXTRACCIÓN Y CROMATOGRAFIA EN TLC DE HOJAS DE

TECA (TECTONA GRANDIS) Y DEL ACEITE ESENCIAL DE LA

HIERBA DE LIMON (CYMBOPOGON SPP)”
Cubas Shraon1; Sánchez, Elaine Yuribeth2, González, Zury3
CIP: 4-782-2072 4-779-2008 4-781-1928

Curso de Química de Productos Naturales (QM-460), Escuela de Química, Facultad de Ciencias

Naturales y Exactas, Universidad Autónoma de Chiriquí. David, Chiriquí, Republica de Panamá.
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2

Resumen:

Esta experiencia se basó en el estudio de los metabolitos secundarios por medio de la cromatografía
de capa delgada (TLC) así como la extracción de aceites esenciales de la hierba de limón, para
posteriormente realizar la correspondiente cromatografía. Primeramente, se utilizó los extractos
vegetales (acuoso y etanolico), obtenidos del laboratorio anterior de las hojas de Teca, en donde se
logró la separación de los componentes de la mezcla por cromatografía en capa fina. Para las
muestras etanolicos se utilizó como fase móvil una mezcla de Cloroformo, alcohol metílico y agua
(4:3:2), para la muestra seca (acuosa) se utilizó una placa revés en donde se utilizó acetonitrilo y
agua (9:1) y alcohol anhidro y para su revelación se utilizó Vainillina a 1%.
Obteniendo como resultado un Rf promedio de 0,4704 cercano al Rf que en la literatura encontramos
para el Citral…….. En la segunda parte de la experiencia consistió en la obtención de aceite
esenciales por arrastre de vapor de la planta hierba de limón, en donde se peso 50,04 g de la
muestra en un balón y en un segundo balón se colocó agua posteriormente se calienta el agua hasta
ebullición, con el fin de generar el vapor que pasará al matraz número 1 y el aceite extraído es
arrastrado junto con el vapor de agua hacia un condensador, que enfría la mezcla, la cual es
separada posteriormente para obtener el producto deseado. Para la extracción del aceite total, la
muestra obtenida se colocó en un embudo de separación para ir separando la mayor parte de la
fracción acuosa. Al aceite se le agrego unos 7 mL de hexano para facilitar su separación. La fase
acuosa se desecha y el extracto orgánico se colecta en un matraz Erlenmeyer o un vaso de
precipitados, en donde se le agregua entonces la cantidad necesaria de sulfato de sodio anhidro
para eliminar el agua remanente y caliente un poco para eliminar residuos de hexano que pueda
contener la muestra y colocar el aceite en un vial. De igual manera se hizo correr la muestra de
aceite en Cloroformo y se revelo con vainillina obteniendo como resultado una coloración azul oscuro
tenue……Concluimos que la destilación por arrastre con vapor es una técnica usada para separar
sustancias orgánicas insolubles en agua y ligeramente volátiles, de otras no volátiles que se
encuentran en la mezcla.
Tectona grandis L. y en el aceite
Palabras claves: Cromatografía (TLC), esencial de la cymbopogon spp.
aceites esenciales, polaridad, fase móvil,
arrastre por vapor.  Calcular los valores de Rf de los
extractos obtenidos y correlacionarlos a
Objetivos: la selección adecuada del eluyente,
para así deducir la relación existente
 Extraer el aceite esencial de la hierba
entre la polaridad de las sustancias que
de limón (Cymbopogon spp) utilizando
se analizan y de los eluyentes
la destilación por arrastre con.
utilizados..
 Introducir la técnica de cromatografía en
capa delgada TLC para identificar Marco teórico:
metabolitos presentes en las hojas de
Los aceites esenciales son fracciones liquidas requisitos esenciales son, pues, un
volátiles, generalmente son mezclas adsorbente, placas de vidrio, un dispositivo
homogéneas de hasta 100 compuestos que mantenga las placas durante la extensión,
químicos orgánicos, provenientes de la familia Es preciso también poder guardar con facilidad
química de los terpenoides. Generan diversos las placas preparadas y una estufa para
aromas agradables y perceptibles al ser activarlas. La fase móvil es líquida y la fase
humano. Bajo condiciones de temperatura estacionaria consiste en un sólido. La fase
ambiental, son líquidos poco densos, pero con
Nombre Cantidad capacidad
mayor viscosidad que el agua. Los aceites
esenciales son metabolitos secundarios Vasos Varios 100mL
sintetizados por las plantas, producidos al químicos 250mL
momento de activarse mecanismos de defensa
Balanza 1 250 gr
como respuesta a factores ambientales y
ecológicos, estos presentan roles de defensa, Probeta 3 10mL 25mL
atracción de polinizadores, entre otros. Son 50mL
inflamables, no son tóxicos, aunque pueden
Tijera 1 --
provocar alergias en personas sensibles a
determinados terpenoides (Cadby P, 2002). Cinta adhesiva 1 --
Gotero Varios --
De acuerdo con Palomino, A (2006), Los
aceites esenciales se pueden extraer mediante Embudo de 3 100mL
diferentes métodos como: prensado, Separación 250mL
destilación con vapor de agua, extracción con Trípodes 3 --
solventes volátiles, enfleurage y con fluidos
supercríticos. La destilación por arrastre de Plancha 2 --
vapor no existe un nombre claro y conciso para Blower 1 --
definirlo, debido a que se desconoce
exactamente lo que sucede en el interior del Placa de TLC Varios --
equipo principal y porque se usan diferentes Regla 1 --
condiciones del vapor de agua para el proceso.
Es así que, cuando se usa vapor saturado o Lámpara UV 1 --
sobrecalentado, fuera del equipo principal, es estacionaria será un componente polar y el
llamado “destilación por arrastre de vapor”. eluyente será por lo general menos polar que
Cuando se usa vapor saturado, pero la materia la fase estacionaria, de forma que los
prima está en contacto íntimo con el agua componentes que se desplacen con mayor
generadora del vapor, se le llama velocidad serán los menos polares.
“hidrodestilación”. Cuando se usa vapor
saturado, pero la materia no está en contacto Materiales y Reactivos:
con el agua generadora, sino con un reflujo del
condensado formado en el interior del
destilador y se asumía que el agua era un Reactivos Toxicidad
agente extractor, se le denominó Inhalación: Irritación en
“hidroextracción”. El término hidrodestilación, el tracto respiratorio,
lo definimos como el proceso para obtener el Etanol náuseas, vómito.
aceite esencial de una planta aromática, Piel: resequedad y
mediante el uso del vapor saturado a presión agrietamiento.
atmosférica. Ojos: irritación.

Según Bandoni, L (2008), la cromatografía en Inhalación: depresión

respiratoria, neumonitis
capa fina se basa en la preparación de una
química, edema
capa, uniforme, de un adsorbente mantenido pulmonar.
sobre una placa de vidrio u otro soporte. Los
 CHCl3 Ingestión: Provoca vómito
náusea, vómito, Ojos: Irritación, dolor,
salivación, anorexia lagrimeo, sensación de
Ojos: Ocasiona quemadura y visión
conjuntivitis, e, incluso, borrosa
quemaduras dolorosas. Piel: Produce
resequedad,
Inhalación: Corrosivo, enrojecimiento y dolor.
irritación nasal, Inhalación: irritación en
sofocación, las vías respiratorias.
HCl concentrado quemaduras. Ingestión: náuseas,
Ingestión: vomito, Vainillina 1% vómitos.
diarrea quemadura en Piel: Irritación,
la boca, colapso y enrojecimiento.
muerte Ojos: Provoca irritación
Piel: Inflamación, ocular grave
enrojecimiento, dolor. Inhalación: Puede ser
Ojos: lagrimeo fatal y causar irritación
excesivo, dolor. en el tracto
respiratorio, daño en el
Ojos: Causa irritación y SNC
enrojecimiento. Acetonitrilo Ingestión: Produce
Piel: Causa irritación y dolor abdominal,
enrojecimiento. Si la náuseas, daño a los
exposición es riñones e Hígado
constante, se genera Piel: puede causar
C6H14 dermatitis. irritación con
Ingestión: Causa enrojecimiento y dolor
náusea, vómito e Ojos: puede causar
irritación de la irritación con
garganta. En casos enrojecimiento y dolor
severos, puede Inhalación: Puede
perderse la conciencia. irritar la nariz, la
existe información al garganta y los
respecto. pulmones
Inhalación: Irritaciones Na₂SO4 Ingestión: irrita la boca,
en vías respiratorias. esófago y estómago.
Sustancia muy Piel: Puede causar
corrosiva. Puede irritación si la
provocar exposición es
bronconeumonía, prolongada.
edemas en el tracto Ojos: Puede causar
CH3COOH respiratorio. ‐Piel: irritación.
Provocar quemaduras. Inhalación: espasmos,
‐Ojos: quemaduras, edema pulmonar,
trastornos de visión, sofocación.
ceguera (lesión Ingestión: vómito con
irreversible del nervio sangre, diarrea, sed
óptico). Quemaduras H2SO4 concentrado Piel: quemaduras
en mucosas. severas, profundas y
Inhalación: Irrita las dolorosas.
mucosas nasales y Ojos: es corrosivo,
oculares. severa irritación
Ingestión: Disturbios (inflamación, dolor).
visuales, dolor
CH3OH abdominal, diarrea,
Flujograma:

A. Obtención del Aceite Esenciales de la

Hierba de Limón.

Inicie el calentamiento
hasta ebullición, abrir la Recoger unos mL del
Se peso 50,04 g de
llave de agua que entra al destilado en un vaso
hierba de limon, se
condensador y espere a quimico colocado en un
coloco en el balon 1
que empieze la baño de hielo
destilación.

En el primer balon debe ir

agua y perlas de Todas las uniones deben
ebullición y un tubo de quedar bien selladas para
seguridad que va inmerso evitar fugas de vapores.
en el agua

Figura 1: Capa Fina realizada a los extractos de la hoja

Cymbopogon spp. Solvente utilizado (cloroformo).
En el segundo balón El tubo que entra en el
B. Extracción delbalon
debe ir la muestra con un
poco de agua Aceite
cerca Esenciales de la
2 debe quedar
de la muestra
Hierba de Limón Discusión:
En la destilación por arrastre con vapor de
agua, la muestra fue cortada en trozos
Luego de a ver
obtenido la
Utilizando un embudo pequeños, se utilizó 50.04 g de la muestra y se
de separación, agitar
muestra,separar la
por 30 seg sometió a una corriente de vapor de agua
muestra con hexano
sobrecalentado, la esencia así arrastrada es
posteriormente condensada, recolectada y
separada de la fracción acuosa.
La fase organica Es una de
golocar el embudo en (aceite esencial) se las
un anillo y espere a recoge en un vaso
que se diferencien las quimico y se le añade técnicas
fases y separar sulfato de sodio más
anhidro y agite
comunes
que
permite la
Se calienta sobre una
plancha a muy baja separación
temperatura girando el Guardar el aceite en de
recipiente hasta vial
sequedad total del sustancias
disolvente.
Especie Recorri Rf compue Vainil
vegetal da por stos lina
C. Separación de los componentes de la la fase probable 1%
mezcla por cromatografía en capa fina. móvil s
(9.0 cm)
Hojas RfA= Se pudo Manc
Cymbopo Muestra 4.2 identificar ha
gon spp A=4.2c =0.4778
los colora
9.0
m compuest cion
Resultados: os Citral azul
RfB=
Muestra con un Rf oscur
B=4.2c
4.2 de 0,47. . a
Taba 1. Dteccion de Rf en =0.4778
m 9.0
muestrasde hojas
Cymbopogon spp. Muestra RfC=
C=4.3c 4. 3
m =0.4 667
9.0
Rfpromedio=
0.4704
ligeramente volátiles e inmiscibles en agua por Figura 2: Placa TLC Zona de coloración del
medio de una destilación a baja temperatura. Citral. (Clifford,2010)
Es particularmente útil cuando la sustancia
hierve a una temperatura superior a los 100°C Se identificó un solo compuesto en el aceite
y se descompone por debajo de su punto de esencial extraído de las hojas Cymbopogon
ebullición. El proceso consiste en una spp. utilizando la técnica de cromatografía de
vaporización a temperaturas inferiores a las de capa fina oTLC. La corrida de los componentes
ebullición de cada uno de los componentes se comparó con los reportes en
volátiles por efecto de una corriente directa de (Wagner,2009). Para esta hoja se utilizó el
vapor de agua, el cual ejerce las funciones de siguiente sistema de cromatografía:
calentar la mezcla hasta su punto de ebullición a) Una placa de silica gel 60 como fase
y disminuir la temperatura de ebullición por estacionaria.
adición de la tensión del vapor que se inyecta b) La fase móvil fue cloroformo.
a la de los componentes volátiles de los c) El revelado se realizó con vainillina al 1%.
aceites esenciales. Los vapores que salen del Para así determinar los compuestos presentes
destilador se enfrían en un refrigerante donde en el aceite.
regresan a la fase líquida, agua y aceite Se pudo identificar la presencia del compuesto
esencial, y finalmente se separan en un vaso Citral el cual de acuerdo con la literatura se
químico. (Elder, 2010). encuentran con un con un Rf de 0,47 y
también podíamos referirnos a la probabilidad
Los aceites esenciales se ubican en las de encontrar alcoholes terpénicos dentro de
estomas odoríferas de la planta por lo que el nuestra muestra ya que según (Wagner 2009),
vapor de agua tiene que entrar al material estos poseen Rf varían de 0,2 a 0,469. Los
vegetal, romper las estomas y finalmente cuales no se alejaban de los valores que
destilar. (Bandoni, 2003). experimentalmente obtuvimos. Pero para
La composición mayoritaria del aceite de descartar la existencia de estos según
Hojas de Cymbopogon spp. Son los (Clifford,2010) nos llevó a comprar
monoterpenos cualitativamente con la comparacion de la
(± 80%), y también se encuentran figura 1 y2 que finalmente se trataba del citral,
sesquiterpenos. Las hojas de hierba de limón debido a que presento una zona de coloración
tienen olor característico a citral. Los dentro del rango que estandarizo Clifford con
principales terpenoides encontrados en el base a laa solución referencia que plaqueo del
aceite esencial de citronela son el citronelal, citral. Y también concluimos en que si se
citronelol y geraniol, que se utilizan en trataba de este basándonos en que en
perfumería, jabonería, preparación de nuestros resultados la coloración obtenida en
insecticidas y repelentes, su componente laa placa era de color azul puro tenue.
mayoritario, el citronelal, es un importante
intermediario o producto de partida para la
síntesis de terpenoides de mayor importancia
comercial. (Guarnizo,2009).
Concusiones:
Debido a dicha composición química de las  Se logró la extracción del aceite
Hojas de Cymbopogon spp, se utilizó el esencialde la Hoja de
cloroformo para la determinación de los Rf de Cymbopogon spp, esto lo pudimos
la capa fina, ya que este tiene naturaleza comprobar mediante la
apolar y permite extraer las grasas que se
encuentran en cantidades mayoritarias. cromatografía capa fina, que nos
muestra un compuestos posibles
citral que se comparan con la
literatura.
  Clifford, M. N, 2010. Sensory and dietary
Bibliografía: properties of terpenic alcohol .
Proceedings of the 16th international
 Palomino, A. (2006). Hidroextracción de conference of grape polyphenol.
los aceites esenciales. Memorias de la IV
Reunión de Fenómenos de Transporte.
Callao, Perú.

 Cadby, P. (2002). Consumer exposure to

fragrance ingredients: Providing estimates
for safety evaluation. Regul. Toxicol.
Pharmacol. Belgium. Disponible en:
https://pdfs.semanticscholar.org/2b6f/5c92
69401cf79bd5c493c808ba919c28c9e2.pdf

 Bandoni, L. (2008). Los Recursos

Vegetales Aromáticos en Latinoamérica.
CYTED. Buenos Aires, Argentina.
Disponible en:
https://es.scribd.com/doc/7959699/Los-
Recursos-Vegetales-Aromaticos-en-
America-Latina.

 Elder, H. (2010). Optimización de los

Procesos Extractivos Aplicados a Especies
Aromáticas y Medicinales.
Latinoamericana.

 Bandoni, A. (2003). Los Recursos

Vegetales Aromáticos en Latinoamérica.
Buenos Aires: CYTED.

 Guarnizo, A. (2009). Experimentos de

Química Orgánica. Editorial ELIZCOM
Colombia.

 Wagner,Hildebert. 2009.Plant Drug

Analysis. Recuperado de:
https://books.google.com.pa/books?
id=8y2B_61iOhIC&pg=PA178&lpg=PA178
&dq=Rf+del+citral+en+cloroformo&source=
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