Cinetica Enzimatica
Cinetica Enzimatica
Cinetica Enzimatica
Estudio de
como la
velocidad de
una enzima
varia en
función de la
concentración
del sustrato
El sustrato
requiere de
mucha
energía para
alcanzar ET
Una vez
alcanzado la
enzima se
estabiliza
reduciendo la
energía
Cinetica Enzimatica
S
Representando la
desaparición del
sustrato o la aparición
del producto, se
obtiene una curva de
velocidad o de reacción
P
Leonor Michaelis y Maud Leonora Menten.
E + S [ES] E+P
Cinetica Enzimatica
E + S [ES] E+P
Parámetros cinéticos
Vmax:
Es el punto de
saturación de la
enzima
Km:
Concentracion
de sustrato que
hace que la
enzima funciona
a la mitad de la
vel max
Cinetica Enzimatica
Modelos de linealización: Lineweaver Burk
_1_ = Km 1 + 1
V0 Vmax [S] Vmax
Km + [S]
1/Vo =
Vmax [S] Y = m x + b
_1_ = Km [S]
+
V0 Vmax [S] Vmax [S]
_1_ = Km 1 + 1
V0 Vmax [S] Vmax
Y = m x + b
Calculo de Km y Vmax en Excel: (ecuación de LB)
_1_ = Km 1 + 1
[sustrato] M Vo M/seg 1/[sustrato] 1/V
1,25 0,0000278 0,8 35971,22302
2,5 0,00005 0,4 20000
5
20
0,000083
0,00016
Se transforman
los datos
0,2 12048,19277
0,05 6250 V0 Vmax [S] Vmax
1/V
y = 39689x + 4180,1
40000
1/Vo 35000
30000
vmax = 0,00023923 M/seg
25000
20000
Km 9,49474893 M
15000
10000
5000
0
-0,2 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1/[S]