Guía Actividad Enzimática de Catalasa

UNIVERSIDAD MARIANA Versión: 1.
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FACULTAD DE INGENIERÍA
PROGRAMA DE INGENIERÍA DE PROCESOS Página 1 F: 26/08/20
LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA Elaboró: Ing. Lucía Verdugo
PRÁCTICA No. 01 DE LABORATORIO EN CASA
SEMESTRE 2020-2
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE CATALASA
1. INTRODUCCIÓN
Como parte de las reacciones bioquímicas generadas en el metabolismo celular se liberan

especies reactivas de oxígeno (EROS), las cuales en altas concentraciones pueden reaccionar
con ciertas biomoléculas como proteínas, lípidos y ácidos nucleicos, y generar alteraciones
y potencial daño en sus estructuras (Nandi et al., 2019).
Una de las EROS más importantes es el peróxido de hidrógeno (H2O2), cuya presencia se ha
asociado a estrés oxidativo y como consecuencia, daño celular y trastornos somáticos. Sin
embargo, existen mecanismos de regulación de estas especies en tejidos y órganos como
moléculas de bajo peso molecular y enzimas antioxidantes como la catalasa (Castro, 2006).
La acción de dicha proteína permite descomponer el peróxido de hidrógeno en agua y
oxígeno, sustancias seguras para el cuerpo (Iwase et al., 2013), como se indica en la
siguiente reacción:
2𝐻2 𝑂2 → 2𝐻2 𝑂 + 𝑂2
La enzima catalasa se encuentra naturalmente en tejidos de células animales y vegetales

como el hígado y los riñones y en algunas frutas y hortalizas como la cebolla, zanahoria,
apio, aguacate, piña, banano, papas y batata entre otros. En la industria el uso de esta
enzima ha tenido una amplia gama de funciones. Desde la purificación del peróxido de
hidrógeno como blanqueador en la industria textil, hasta diagnóstico clínico e identificación
microbiológica.
En esta práctica de laboratorio en casa se evidenciará la acción enzimática y antioxidante

de la catalasa presente en frutas, hortalizas y tejido animal bajo diferentes condiciones de
reacción.
2. MATERIALES
• Un trozo de aguacate.
• Un trozo de papa.
• Hígado de pollo o res.
• Agua oxigenada (Peróxido de hidrógeno).
UNIVERSIDAD MARIANA Versión: 1.0
• Cuchillo.
• Hielo.
• Vasos de vidrio.
• Reloj
• Marcador.
• Olla.
• Agua.
• Estufa o fogón.
3. PROCEDIMIENTO
3.1 Preparación del sustrato
- Pele la papa y el aguacate y córtelos en trozos pequeños.

- De igual forma corte un trozo de hígado animal (pollo o res).
-Se tomará una porción de la papa y el hígado y se cocinará por 5 minutos en agua.
3.2 Concentración de catalasa en diferentes sustratos y estabilidad de la enzima
-En diferentes vasos de vidrio limpios depositar el aguacate, el hígado crudo, papa cruda,
papa cocida e hígado cocido.
-En cada vaso de vidrio, adicionar agua oxigenada, de tal manera que tape por completo el
sustrato e inmediatamente señalar con un marcador el nivel del líquido en el vaso.
-Esperar por 5 minutos y describir los cambios que se observan.
Responda: ¿Qué sustrato presentó la mayor concentración de catalasa? ¿Qué diferencia

encontró entre los sustratos crudos y cocidos? ¿Por qué cree que sucede?
3.3 Efecto de la temperatura de reacción
Tomar tres vasos de vidrio limpios y agregar lo siguiente:
-Marcar tres vasos como T1, T2 y T3 que corresponde a la primera, la segunda y tercera
temperatura por analizar.
-A cada vaso se le agregará un trozo del sustrato de su interés, preferiblemente el que mayor
concentración de enzima demostró en el experimento anterior.
-En otro recipiente, dejar enfriar en baño de hielo, un volumen pequeño de agua oxigenada
por 5 minutos.
-Después de transcurrido este tiempo, adicionar la solución anterior al sustrato del
recipiente T1 e inmediatamente señalar con un marcador el volumen del líquido.
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-Tomar un volumen pequeño de agua oxigenada y calentar suavemente a baño María hasta
obtener una temperatura “Tetero” o cercana a la temperatura corporal (37°C). Adicionar
este volumen al recipiente marcado como T2 e inmediatamente señalar con un marcador el
volumen del líquido.
-Por último, calentar a baño maría un volumen similar de agua oxigenada hasta ebullición y
posteriormente agregarlo al recipiente marcado como T3 e inmediatamente señalar con un
marcador el volumen del líquido.
Responda: ¿A qué temperatura se logró una mayor actividad de la enzima? ¿A qué se debe
este fenómeno?
4. CUESTIONARIO
- Describa el seguimiento de la práctica mediante registro fotográfico o video.

- ¿Teniendo en cuenta la función bioquímica de esta enzima, que papel cumple en la
conservación de alimentos?
5. BIBLIOGRAFÍA
Castro, J.A, Baquero, L.E, Narvéz, C.E. (2006). CATALASA, PEROXIDASA Y POLIFENOLOXIDASA DE
PITAHAYA AMARILLA (Acanthocereus pitajaya). Rev.Colomb.Quim. vol.35 no.1.
Iwase, T., Tajima, A., Sugimoto, S., Okuda, K., Hironaka, I., Kamata, Y., Takada, K., Mizunoe, Y.
(2013). A Simple Assay for Measuring Catalase Activity: A Visual Approach. Sci. Rep. 3, 3081;
DOI:10.1038/srep03081
Nandi, A., Yang, L.J., Kumar Jana, C., Das, N. (2019). Role of Catalase in Oxidative Stress- and Age-
Associated Degenerative Diseases. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. Volume 2019.
https://doi.org/10.1155/2019/9613090
6. PRESENTACIÓN DE INFORME
La realización de la práctica se evidenciará mediante un informe que el estudiante presentará de

forma creativa, mediante un video, presentación en PowerPoint, Canva, Genially, Prezi o utilizando
la herramienta más conveniente.
En dicho informe debe constar las actividades realizadas y se deben responder la totalidad de las
preguntas planteadas en el cuestionario y a lo largo de la práctica. Hacer una descripción de los
fenómenos ocurridos en cada parte del proceso. No olvidar incluir la bibliografía utilizada.

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- Pele la papa y el aguacate y córtelos en trozos pequeños.

3.2 Concentración de catalasa en diferentes sustratos y estabilidad de la enzima

Responda: ¿Qué sustrato presentó la mayor concentración de catalasa? ¿Qué diferencia

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