UNIVERSIDAD CENTRAL DEL

ECUADOR FACULTAD DE CIENCIAS

MÉDICAS CARRERA DE
LABORATORIO CLÍNICO ASIGNATURA
DE QUÍMICA ORGÁNICA
GUÍA DE
LABORATORIO
Nombre de práctica: Identificación de Lípidos
NOTA
Fecha de realización: 22-08-2020 Fecha de entrega: 24-08-2020

Apellido/s y nombre/s Benavides Lagos Yamid Teresa

1. Título: Identificación de Lípidos.

2. Objetivos:
 Comprender e identificar las propiedades físicas y químicas de los lípidos
mediante distintas sustancias.
 Reconocer la reacción que se produce al momento de saponificar una grasa.
 Identificar la solubilidad de una grasa mediante un solvente polar y apolar.
 Comprender de mejor manera, el funcionamiento y en que procesos interviene el
colesterol en nuestro organismo.
3. Fundamento Teórico

LIPIDOS
Los lípidos o grasas son moléculas orgánicas solubles en solventes diferentes al agua. Están
compuestas principalmente de carbono e hidrógeno y en menor proporción, de oxígeno, nitrógeno
y fósforo. Se caracterizan por cómo se disuelven en diferentes líquidos o solventes, en su mayoría
son insolubles en agua, pero se disuelven fácilmente en solventes orgánicos como el éter, el
benceno o la acetona.
Los lípidos complejos son aquellos que son fáciles de hidrolizar a constituyentes más simples, la
mayor parte de los lípidos complejos son ésteres de ácidos carboxílicos de cadena larga
denominados ácidos grasos. Los dos principales grupos de los ésteres de ácidos grasos son las
ceras y los glicéridos. Las ceras son ésteres de alcoholes de cadena larga y los glicéridos son
ésteres de la glicerina.
Los lípidos simples son aquellos que no se hidrolizan fácilmente en disolución acuosa ácida o
básica. Este término con frecuencia parece inapropiado, ya que muchos lípidos denominados
simples son moléculas estructuralmente bastante complejas. Se considerarán tres importantes
grupos dentro de los lípidos simples: esteroides, prostaglandinas y terpenos.
CLASIFICACIÓN
La clasificación de los lípidos biológicos, los cataloga por sus propiedades físico-químicas y por su
estructura molecular, de este modo son ocho las categorías para estos compuestos.
Categoría Ejemplo

Ácidos grasos Ácido oleico

Glicerolípidos Triglicéridos
Glicerofosfolípidos Fotidilcolina
 Esfingolípidos Esfingosina

Esteroles Colesterol
Isoprenoides Farnesol
Glucolípidos UDP-3-0-(3
hidroxitetradecanol)-
Nacetilglucosamina
Policétidos Aflatoxina

Los lípidos más importantes que intervienen en la absorción y metabolismo humano son los
siguientes:
a) Ácidos grasos: Químicamente son cadenas hidrocarbonadas de longitud variable, con un grupo
carboxilo en su extremo y que pueden ser saturados como insaturados, por otro lado son
constituyentes tanto de los triglicéridos, lípidos complejos o pueden hallarse en forma libre,
además pueden esterificar el colesterol. Este tipo de lípidos es una importante fuente de energía
para las células, ya que pueden oxidarse hasta obtener ATP.
b) Triacilgliceroles: Siendo mayoritarios en la dieta, son compuestos formados por tres ácidos
grasos unidos a una molécula de glicerol, de modo que por hidrólisis, se obtiene glicerol y ácidos
grasos, últimos que producen grandes cantidades de energía, la que equivale a 9 Kcal/g.
c) Lípidos de membrana o lípidos complejos: Se debe tomar en cuenta que aunque no tengan
tanta importancia nutricional estos compuestos tales como los glicerofosfolípidos, los
esfingolípidos y el colesteroldeterminan las propiedades físicas de las biomembranas, como la
fluidez, el transporte y la señalización.
d) Otros lípidos: En este apartado se incluyen las hormonas esteroideas, las vitaminas
liposolubles A, D, E y K y los esteroles (colesterol, esteroles vegetales y fitoesteroles) los mismos
que cumplen con una función reguladora y que derivan de ácidos grasos esenciales.
FUNCIONES PRINCIPALES
La ausencia de lípidos puede producir diversas alteraciones, debido a que muchos de ellos
realizan funciones estructurales y reguladoras, las cuales son:
 Mediante la betaoxidación, las grasas pueden ser fuente de energía inmediata para las
células, excepto las del sistema nervioso central y los eritrocitos, o servir como un
reservorio de energía para cubrir las necesidades a largo plazo.
 Existen ácidos grasos esenciales que no pueden ser sintetizados por el organismo, por lo
que deben ser ingeridos en la dieta diaria, tales son ácido araquidónico, linoleico y
linolénico.
 Los fosfolípidos, colesterol y proteínas establecen las características fisicoquímicas de la
membrana, las cuales son: reconocimiento celular, transmisión de mensajes, transporte de
nutrientes, metabolitos y diversas actividades enzimáticas.
 Protegen los órganos y el cuerpo de traumas y ayuda en la regulación de temperatura.
 A nivel digestivo retrasan el vaciado del estómago, de modo que producen un efecto de
saciedad, por otro lado el ácido oleico por ejemplo, estimula la liberación de hormonas
gastrointestinales como la colescistoquinina, el polipéptido pancreático (PP) y la sustancia
P.
 Ayudan en el transporte de vitaminas liposolubles y en su absorción.
COLESTEROL
El colesterol es un lípido (grasa) que se forma en el hígado a partir de alimentos grasos y es necesario
para el funcionamiento normal del organismo. El colesterol está presente en la membrana plasmática
de todas las células del organismo, se desplaza por la sangre mediante unas moléculas llamadas
lipoproteínas.
Los tipos principales son:
Lipoproteínas de baja densidad (LDL): llamado también como ¨colesterol malo¨; se cree que causan
enfermedades arteriales. Las LDL transportan el colesterol desde el hígado a las células y pueden
causar una acumulación nociva si hay más de lo que las células pueden usar.
Lipoproteínas de alta densidad (HDL): llamado ¨colesterol¨ bueno; se cree que previenen las
enfermedades arteriales. Las HDL se llevan el colesterol de las células y lo devuelven al hígado
donde se descompone y se elimina como residuo corporal.
Triglicéridos: se forman en el hígado y están presentes en productos lácteos, carne y aceites
culinarios. La obesidad y la alimentación rica en grasas aumentan el riesgo de tener niveles altos de
triglicéridos.
FUNCIONES
El colesterol desempeña un papel imprescindible en el organismo. Sus principales funciones son:
 Precursor de las hormonas sexuales: interviene en los precursores de la progesterona, los
estrógenos y la testosterona.

 Estructural: Es uno de los componentes clave de las membranas plasmáticas presentes en las
células animales. En la membrana citoplasmática, por ejemplo, participa en la fluidez al regular las
propiedades físico-químicas. En las membranas subcelulares se encuentra en una cantidad
mínima.

 Precursor de las sales biliares: Estas sales representan la vía principal para la excreción del
colesterol corporal y juegan un papel imprescindible en la absorción del algunos nutrientes grasos.

 Precursor de las hormonas corticoesteroidales, como la aldosterona y el cortisol.

 Impulsor de la vitamina D: esta vitamina es clave para la formación normal de los dientes y de los
huesos y para la absorción del calcio a nivel intestinal.

 Precursor de las balsas de lípidos de la membrana celular.

El cuerpo necesita colesterol para fabricar hormonas, ácidos biliares, vitamina D, y otras sustancias
como las que se mencionó anteriormente, sin embargo, el aumento del colesterol en la sangre y su
depósito en las arterias puede ser peligroso y producir ateroesclerosis (estrechamiento o
endurecimiento de las arterias por depósito de colesterol en sus paredes).
El aumento del LDL-colesterol o colesterol malo en la sangre lleva a un conjunto de procesos que
desembocan en la formación de placas de grasa en las paredes de los vasos sanguíneos,
conocidos como ateromas, estos reducen la luz de las arterias y venas, y si una de estas placas se
desprende puede producir un infarto agudo al miocardio o en el cerebro un derrame o accidente
vascular cerebral.
FUENTES DE COLESTEROL
El origen del colesterol en el organismo tiene dos fuentes, la externa que que proviene de la dieta
y la interna que produce el propio organismo, debido a que el organismo puede producir su propio
colesterol, existe la posibilidad que personas que no consuman exceso de colesterol, tengan
niveles sanguíneos elevados por tener algún desorden genético-metabólico que conlleva a dicha
elevación.
Los alimentos derivados de animales son ricos en colesterol especialmente huevos, lácteos y las
carnes. El organismo absorbe aproximadamente la mitad del colesterol contenido en la dieta.
El hígado es el principal órgano productor de colesterol (10 al 20 % del total), siendo otros órganos
importantes en la producción como el intestino, corteza suprarrenal, testículos y ovarios. La síntesis
del colesterol se halla regulada sobre todo por la ingesta de colesterol en la dieta.
NIVELES DEL COLESTEROL EN LA SANGRE
La medición de solamente el colesterol total tiene valor limitado. Sin embargo cuando se mide en
conjunto con las diferentes lipoproteínas sobre todo el colesterol LDL y el colesterol HDL ofrece un
panorama más amplio sobre la probabilidad de producción de ateroma y por lo tanto de riesgo de
enfermedades de las arterias coronarias.
Los niveles normales en sangre de colesterol varían con la población y suelen aumentar con la
edad. Por eso, aunque en grasas sanguíneas se puede hablar de niveles normales es mejor
utilizar los niveles recomendables ya que estos sí nos indican riesgo de aterosclerosis.
Aunque es una cifra orientativa, los niveles normales de colesterol son:
- Normal: menos de 200mg/dl.
- Normal alto: entre 200 y 240 mg/dl. Cuando se superan los 200 mg/dl de colesterol total se
denomina hipercolesterolemia.
- Alto: por encima de 240 mg/dl.
Colesterol HDL
- Se considera que es normal cuando es superior a 35 mg/dl en los hombres y 40 mg/dl en las
mujeres.
Colesterol LDL
- Normal: menos del 100 mg/dl.
- Normal alto: de 100 a 160 mg/dl.
- Alto: Por encima de 160 mg/dl.

CAUSAS
Son varias las causas que pueden afectar los niveles de colesterol como son:
Dieta: La grasa saturada y el colesterol en los alimentos que consume aumentan el nivel de
colesterol en la sangre.

Peso: El sobrepeso es un factor de riesgo de enfermedad cardíaca, ya que hace que el colesterol
se incorpore en las paredes de las arterias e impide su buen funcionamiento.

Actividad física: No hacer ejercicio es un factor de riesgo para la enfermedad cardíaca. La actividad
física regular puede ayudar a reducir el colesterol malo (LDL) y elevar el bueno (HDL) y también
ayuda a perder peso.
Tabaquismo: Fumar cigarrillos reduce el colesterol bueno (HDL), que ayuda a eliminar el colesterol
malo de las arterias. Así, un HDL más bajo puede contribuir a un mayor nivel de colesterol malo.
4. Procedimiento.
VIDEO 1

Materiales Reactivos
Matraz balón de fondo redondo Aceite
Termómetro Hidróxido de sodio NaOH
Soportes universales Agua
Pinzas tipo nuez Cetona
Pinzas para balón Sudan III
 Embudos de separación Colorante rojo
Probetas
Pipetas Pasteur
Tubos de Ensayo
Gradilla
Vaso de precipitación
Manta de calor

Saponificación:
1. Se prepara 50 ml de disolución de hidróxido de sodio (NaOH) al 20 %, se debe tener en
cuenta que es una solución exotérmica y por lo tanto se debe realizar la práctica con cuidado.
2. En una balanza se coloca un vaso de precipitación y se procede a pesar 10 gr de sodio,
(teniendo en cuenta que debe ser una medida exacta, ya que no se puede devolver el reactivo
al recipiente una vez este en el vaso de precipitación, para evitar contaminaciones.)
3. Se agrega agua destilada y una pulga magnética, se coloca el vaso sobre el agitador, donde
la solución se va a calentar debido a que es un proceso exotérmico

4. Con la ayuda de un embudo vertemos la disolución preparada en un matraz aforado, se

enjuaga el vaso de precipitación y se afora con agua destilada, se invierte varias veces el
matraz aforado hasta conseguir que la disolución quede completamente homogénea.
5. En una probeta se mide 25 ml de aceite y se vierte a un matraz redondo, de la misma manera,
se mide 35 ml de la solución preparada de sodio y se vierte al mismo matraz de fondo
redondo
6. Una vez que este caliente la manta eléctrica, se coloca el matraz redondo y dentro del matraz
se introduce un termómetro para controlar la temperatura.
7. Se controla que la temperatura no suba de 100°, se espera durante 20-30 minutos y durante
este tiempo cuidadosamente se debe agitar la muestra de vez en cuando con la ayuda de una
pinza.
8. Al llegar a los 90° se baja la potencia de la manta al mínimo, si la temperatura del termómetro
es mayor a 100°, primero se retira el termómetro y luego el matraz redondo de la manta,
teniendo en cuenta que el termómetro se lo debe sujetar de su gancho plástico y al matraz
con la pinza, ya que están a 100°.
9. Se observa como el proceso de saponificación ha concluido, y se observa el resultado.

Solubilidad
1. Se procede a armar el equipo de sujeción, con la ayuda de 2 soportes universales y pinzas
de nuez. Se coloca la varilla en cada soporte y se ajusta con la nuez en la posición
adecuada, posterior a eso, se coloca una pinza a la otra parte de la nuez, se ajusta y se
observa que las pinzas estén juntas para luego observar los resultados.
2. Una vez armado los soportes se coloca 1 embudo de sujeción a cada uno, Con la ayuda
de unaprobeta al primer embudo se le añade 10ml de agua y al segundo 10ml de
acetona, se rotula y se tapa. (Se debe tomar en cuenta que la llave de paso de los embudos
este de forma perpendicular y apretada, para evitar el paso de la disolución.)
3. En una probeta, con ayuda de un embudo se mide 20 ml de aceite y se le añade a cada
embudo de decantación y se agita fuertemente de arriba abajo.
4. Se deja reposar y se observa cómo reacciona con el paso del tiempo.
Tinción
1. Se toman dos tubos de ensayo y se procede a rotularlos

2. En un vaso de precipitación se coloca aceite, con de una aspira pipetas se pulsa la valvula
de subida del aspira pipetas para que se llene.

3. Se debe inclinar el tubo de ensayo para que la punta de la pipeta quede en contacto con la
pared del tubo de ensayo, antes de soltar el aceite se debe presionar la válvula adecuada
para que el aceite quede dentro de cada tubo.

4. En un vaso d e precipitación se coloca colorante sudan III y con la ayuda de una pipeta
pasteur se añade 4 gotas a uno de los tubos de ensayo con aceite, se agita y se deja reposar.

5. Se coloca tinta roja en un vaso de precipitación diferente y se añade esta tinta al tubo de
ensayo con aceite, también una pipeta pasteur diferente (para evitar
contaminaciones), se agita y se deja reposar.

VÍDEO Nº2
1. Se recibe al paciente con el pedido de exámenes emitido por el médico, se corrobora los
datos generales del paciente y la historia clínica.
2. Una vez corroborada la información y analizado los exámenes a realizar, se procede a darle
las respectivas indicaciones a la paciente, donde se le indica que debe acudir en ayunas por
12 horas.
3. Posterior a eso, se inicia la fase analítica, donde se procede a escoger los materiales e
insumos para la extracción de sangre, donde se va a necesitar un aguja vacutainer, guantes,
torniquete, torundas con alcohol y un tubo de ensayo tapa roja sin aditivo.
4. Antes de extraer la muestra del paciente, se deben aplicar las normas de bioseguridad,
para continuar con el proceso de extracción.
5. Se descartan los insumos empleados en el recipiente a d e c u a d o , de desechos
infecciosos y cortopunzantes.
6. Se rotula el tubo de ensayo y se deja reposar a temperatura ambiente por 10 minutos.
7. Se colocan dos tubos de ensayo en la centrifuga, uno con la muestra de sangre obtenida y
otro para nivelar la centrifuga y se pone a centrifugar la muestra por 5 minutos a 3500
r.p.m.

Trigliceridos
1. Se colocan 3 tubos de ensayo en una gradilla debidamente rotulados, el primer tubo de
ensayo e s blanco, el segundo tubo de ensayo es estándar y el tercer tubo de ensayo es el
problema o la muestra.
2. En el primer tubo no se coloca nada, c o n a y u d a d e u n a p i p e t a en el segundo tubo
se coloca 10 lambdas de reactivo estándar y en el tercer tubo se coloca 10 lambdas del suero
extraído de la sangre centrifugada.
3. En los tres tubos de ensayo se coloca 1000 ml del reactivo para la prueba de triglicéridos,
se agita y se deja reposar por 10 minutos a temperatura ambiente o también se pueden
colocar los tubos en el baño María a 37º C por 5 minutos.

Colesterol
1. Se colocan 3 tubos de ensayo rotulados en la gradilla, el primero es un tubo de
ensayo blanco, el segundo un tubo de ensayo estándar y el tercero es el problema o
muestra.
2. Al primer tubo de ensayo se lo deja vacio, con una pipeta automatica al segundo tubo de
ensayo se le coloca 10 lambdas de reactivo estándar y a l tercer tubo de ensayo se coloca
10 lambdas del suero extraído de la sangre centrifugada.
3. A los tres tubos de ensayo se les añade 1000 ml de reactivo para colesterol.
4. Se mezclan las sustancias y se deja reposar durante 10 minutos a temperatura ambiente
o en el baño María a 37ºC durante 5 minutos.
5. Se calibra el espectrofotómetro y primero se inserta el tubo de ensayo blanco, después el
 estándar y por último el suero que se procede a leer con el equipo.
6. En un tubo de ensayo, se agregan 10 lambdas del suero de la sangre centrifugada con
1000ml del reactivo para HDL, Se deja reposar por 5 minutos a temperatura ambiente.
7. Se coloca el tubo de ensayo en la centrifuga por 5 minutos a 2000 r.p.m.
8. Después de la centrifugación, se obtienen 10 lambdas del sobrenadante del tubo de ensayo
centrifugado y se añade a otro con 1ml del reactivo del colesterol.
9. Se coloca en el equipo para que sea analizado el tubo de ensayo y p a r a q u e
e m i t a los resultados.

Ldl

1. El valor del LDL se puede obtener con una fórmula matemática, a partir de los resultados
previamente obtenidos.

5. Resultados

SUSTANCIA POLARIDAD SOLUBILIDAD

Acetona Apolar Soluble

Agua Polar Insoluble

COLORANTE COLORACIÓN OBSERVACIONES

Completamente
Sudan III ROJO
soluble en el aceite

No se Una fase del

Colorante
distingue la colorante rojo y
Rojo
tinta otra fase del Aceite

Producto de la reacción de saponificación

se obtuvo:
Jabón
Glicerina
Saponificación
Hidróxido de sodio (que no reacciono)
Aceite(residuos)

6. Discusión de resultados
 La acetona es un compuesto apolar por lo tanto los lípidos son solubles en este tipo de
compuestos orgánicos.
 El agua es un compuesto polar, es por esto que los lípidos no se solubilizan en agua.
 Al colocar un colorante disuelto en agua de color rojo en el aceite no dio coloración
solo se separaron en dos fases.
 El colorante SUDAN III es un colorante específico para los lípidos, al mezclarse con el
aceite dio una coloración rojiza formando una sola fase.
  En la reacción de saponificación se obtuvo como productos: jabón, glicerina y
residuos de hidróxido de sodio con aceite que no reaccionaron.
 El colesterol forma parte de los lípidos, el cual se divide en diferentes tipos de colesterol,
los principales en el ser humano, son el HDL y LDL. La importancia del colesterol
radica en que, va a ayudar a formar hormonas, por ejemplo, la testosterona
fundamental para la expresión de los caracteres sexuales y ácidos biliares importantes
para la digestión.
 Es primordial estudiar los niveles de colesterol en las personas, ya que, estas nos van
a ayudar a determinar el estado de salud del paciente, si llegan a existir valores elevados
sobre lo normal de LDL o colesterol malo, el paciente puede estar en riesgo de padecer
enfermedades vasculares al formarse un bloqueo por la acumulación de este
colesterol. Sin embargo, si los valores de HDL están elevados, se puede analizar que
el paciente se encuentra consumiendo una dieta balanceada.
 Por otro lado, los triglicéridos también forman parte de los lípidos y son fundamentales
por ser una fuente de energía.

7. Conclusiones

Dentro de las propiedades de un lípido tenemos la solubilidad que solo se da en sustancias

apolares, que por lo general son compuestos orgánicos, esto se debe principalmente a su
composición una cadena par larga hidrocarbonada (CH2) y un grupo carboxilo (COOH).
Un lípido puede ser coloreado por un colorante específico como lo es el SUDAN III, que es
específico para reconocer lípidos de cualquier naturaleza, dando una coloración muy llamativa
Roja.
La reacción de saponificación es muy especifica para los lípidos ya que nos permite obtener
como principales productos glicerina y un jabón, siempre y cuando se la realice con un
hidróxido sea este de potasio o de sodio (KOH o NaOH).
El colesterol es un tipo de lípido presente en el ser humano, sintetizado en el hígado que nos
ayuda para la producción de hormonas y vitamina D, las principales fuentes de colesterol son
los productos de origen animal, nuestro cuerpo requiere del colesterol pero asi mismo existe
complicaciones graves en caso de ser excesivo.

8. Bibliografía Consultada:

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