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    Medios de Cultivo de Microorganismos

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    Este documento describe los medios de cultivo utilizados para el crecimiento de microorganismos en el laboratorio. Explica que los medios de cultivo proporcionan los nutrientes necesarios para que los microorganismos se desarrollen y se multiplicen. Luego clasifica los medios de cultivo según su consistencia, composición, origen y factores selectivos, y describe los pasos para preparar y almacenar los medios de cultivo antes de su uso.

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    Medios de Cultivo de Microorganismos

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    Este documento describe los medios de cultivo utilizados para el crecimiento de microorganismos en el laboratorio. Explica que los medios de cultivo proporcionan los nutrientes necesarios para que los microorganismos se desarrollen y se multiplicen. Luego clasifica los medios de cultivo según su consistencia, composición, origen y factores selectivos, y describe los pasos para preparar y almacenar los medios de cultivo antes de su uso.

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    MEDIOS DE CULTIVO DE MICROORGANISMOS

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    Este documento describe los medios de cultivo utilizados para el crecimiento de microorganismos en el laboratorio. Explica que los medios de cultivo proporcionan los nutrientes necesarios para que los microorganismos se desarrollen y se multiplicen. Luego clasifica los medios de cultivo según su consistencia, composición, origen y factores selectivos, y describe los pasos para preparar y almacenar los medios de cultivo antes de su uso.

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    Medios de Cultivo de Microorganismos

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    Este documento describe los medios de cultivo utilizados para el crecimiento de microorganismos en el laboratorio. Explica que los medios de cultivo proporcionan los nutrientes necesarios para que los microorganismos se desarrollen y se multiplicen. Luego clasifica los medios de cultivo según su consistencia, composición, origen y factores selectivos, y describe los pasos para preparar y almacenar los medios de cultivo antes de su uso.

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    UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA – FACULTAD DE

    CIENCIAS AGRARIAS – ESCUELA PROFESIONAL DE


    AGRONOMIA

    UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA

    Facultad de Ciencias Agrarias


    Escuela Académico Profesional de Agronomía

    PRACTICA N °4

    PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVOS,

    APELLIDOS Y NOMBRES: Camacho Rojas, Darli Alvaro.

    GRUPO: A1 DIA: Viernes HORARIO: 11am- 01pm.

    CURSO: Microbiología agrícola.

    NOMBRE DEL DOCENTE: John Victor López Orbegoso.

    CICLO: V FECHA: /06 / 2019


    UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA – FACULTAD DE
    CIENCIAS AGRARIAS – ESCUELA PROFESIONAL DE
    AGRONOMIA

    MEDIOS DE CULTIVO
    I. INTRODUCCIÓN
    Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes tratados químicamente y
    procesados para una máxima acumulación de micro y macro elementos
    necesarios aptos o primordiales para adaptar algún medio de cultivo, factores de
    crecimiento y otros componentes que crean las condiciones necesarias para el
    desarrollo de los microorganismos. La diversidad metabólica de los
    microorganismos es muy amplia; por ello, la variedad de medios de cultivo es
    también muy grande, ya que no existiendo un medio de cultivo universal adecuado
    para todos ellos no pueden adaptarse o sobrevivir en cualquier medio preparado.

    II. MARCO TEORICO


    MEDIOS DE CULTIVO
    Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que permite el
    desarrollo máximo y acondicionado de microorganismos. En las condiciones de
    laboratorio para la siembra o la perpetuación de un cultivo se debe sembrar
    sobre el medio de cultivo elegido las muestras en las que los microorganismos van
    a crecer y multiplicarse para dar colonias.
    Los microorganismos son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir en
    condiciones extremas de pH, temperatura y tensión de oxígeno, colonizando una
    amplia diversidad de nichos ecológicos. Entre los requerimientos más importantes
    para su desarrollo están el carbono, el oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono e
    hidrógeno.
    Muchas bacterias sin embargo necesitan del aporte extra de factores de
    crecimiento específicos en forma de suero, sangre y extracto de levadura entre,
    medios de putrefacción. Se sabe que al no tener estos medios en su crecimiento
    rara vez o con algunas excepciones estos podrían crecer y colonizarse.

    III. OBJETIVOS
     Conocer los diferentes medios de cultivo, además poder identificar y
    comprobar con en cuál de estos los microrganismos tienen mayor auge en
    su crecimiento.
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    CIENCIAS AGRARIAS – ESCUELA PROFESIONAL DE
    AGRONOMIA

     Comprender la función de cada uno de los componentes de un medio de


    para el medio a sembrar.

    IV.
    MEDIOS DE CULTIVO
    PREPARACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO.
    Los microorganismos son seres que han colonizado todos los tipos de
    ecosistemas: el agua, el suelo, el aire, el resto de organismos. Por ello todas las
    manipulaciones para conseguir cultivos puros se deben realizar en un ambiente
    estéril que impida el acceso al medio de otros microorganismos diferentes a los
    que se desea aislar. Estos deben crecer dentro de recipientes y medios de cultivo
    previamente esterilizados. Los recipientes más utilizados en el crecimiento de
    microorganismos son los tubos de ensayo, los matraces (ambos para los medios
    líquidos) y las placas de Petri (para los cultivos sólidos).
    En la actualidad, la mayoría de los medios de cultivo se encuentran
    comercializados, normalmente y obligatoriamente se debe rehidratar. En general,
    la preparación de un medio de cultivo se reduce simplemente a pesar la cantidad
    deseada del mismo, re disolverlo en agua destilada (libre de inhibidores del
    crecimiento) siguiendo las instrucciones del fabricante y esterilizarlo.
    Antes de su esterilización, los medios líquidos se distribuyen en los
    recipientes adecuados (tubos o matraces); en ningún caso el volumen del líquido
    en el recipiente debe exceder un tercio del volumen total del recipiente.
    Si es un medio sólido, habitualmente se procede a fundir el agar en un baño
    maría antes de esterilizarlo. Una vez fundido, se distribuye en caliente en tubos o
    matraces (no en placas de Petri), se tapa y se esteriliza. Finalizada la
    esterilización en autoclave.
    1.- Los medios líquidos se dejarán enfriar a temperatura ambiente.
    2.- Los medios sólidos contenidos en tubos deben inclinarse para que al
    solidificarse adopten la forma de agar inclinado (slant), si tal es su finalidad.
    3.- Las placas de Petri pueden también ser preparadas ahora, vertiendo el medio
    aún fundido y estéril dentro de ellas en un ambiente aséptico (p.e. en la
    proximidad de la llama de un mechero Bunsen).
    4.- Caldos y medios sólidos pueden conservarse, una vez esterilizados, a
    temperatura ambiente. Sin embargo, para reducir su deshidratación y el
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    AGRONOMIA

    consiguiente cambio de las concentraciones de los componentes es preferible


    conservarlos a 4°C.

    CLASIFICACIO DE LOS MEDIOS DE CULTIVO


    Los medios de cultivo pueden ser sólidos o líquidos. La composición de estos
    medios puede ser definida (medio sintético) o no definida (medio complejo). No
    todos los medios de cultivo son iguales, ni todos los microorganismos pueden
    crecer en todos los medios de cultivo. Hablamos de medio mineral o basal cuando
    se trata de un medio que sólo contiene compuestos inorgánicos. Con la adición de
    una fuente de carbono orgánica a este medio mineral obtendremos lo que se llama
    8 medio mínimo. Un medio rico es aquel medio con todos los tipos de
    requerimientos nutritivos (fuente de carbono, nitrógeno, fósforo, azufre, sales
    minerales y factores de crecimiento) que permiten el crecimiento de la mayoría de
    microorganismos heterótrofos. Aun así no hay un medio universal que sirva para
    aislar los diferentes tipos de microorganismos que existen.
    A. Según su consistencia
    1. a) LÍQUIDOS: se denominan caldos y contienen los nutrientes en solución
    acuosa.
    2. b) SÓLIDOS: se preparan añadiendo un agar a un medio líquido (caldo) a
    razón de 15g/litro. El agar es una sustancia inerte (hidrato de carbono) que
    se extrae de las algas. Como esta sustancia no es digerida por las bacterias
    no constituye ningún elemento nutritivo. Este conjunto convenientemente
    esterilizado puede ser vertido en placas de Petri o en tubos de ensayo y
    presentan la posibilidad de aislar y diferenciar bacterias.
    3. c) SEMISÓLIDOS: contienen 7,5 g de agar /litro de caldo. Se utilizan para
    determinar la motilidad de las especies en estudio. Actualmente se
    encuentran disponibles comercialmente con el agregado de agar.

    B. Según su composición:
    1. COMUNES O UNIVERSALES: su finalidad es el crecimiento de la mayor
    parte de los microorganismos poco existentes. Es el medio más
    frecuentemente utilizado para mantener colonias microbianas. Por ejemplo:
    agar común o caldo común.
    2. ENRIQUECIDOS: están compuestos de un medio base como apoyo del
    crecimiento al cual se le puede agregar un gran exceso de nutrientes como
    suplementos nutritivos, por ejemplo: sangre, suero, líquido ascítico, etc. Se
    utiliza para microorganismos que tienen grandes exigencias nutricionales.
    3. SELECTIVOS: son sólidos en los que la selectividad se consigue alterando
    las condiciones físicas del medio o añadiendo o suprimiendo componentes
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    AGRONOMIA

    químicos específicos con el fin de inhibir el crecimiento de especies


    químicas cuyo crecimiento no interesa. Este tipo de medio sólo permite el
    crecimiento de un grupo de microorganismos. Se utiliza para seleccionar y
    aislar microorganismos y permite el crecimiento de ciertos estafilococos.

    C. Según su origen:
    1. NATURALES: son los preparados a partir de sustancias naturales de
    origen animal o vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya
    composición química no se conoce exactamente.

    2. SINTÉTICOS: son los medios que contienen una composición química


    definida cualitativa y cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados
    reproducibles.
    3. SEMISINTÉTICOS son los sintéticos a los que se les añaden factores de
    crecimiento bajo una forma de un extracto orgánico complejo, como por
    ejemplo extracto de levadura.

    D. Según su origen:

    1. NATURALES: son los preparados a partir de sustancias naturales de


    origen animal o vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya
    composición química no se conoce exactamente.

    2. SINTÉTICOS: son los medios que contienen una composición química


    definida cualitativa y cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados
    reproducibles.
    3. SEMISINTÉTICOS son los sintéticos a los que se les añaden factores de
    crecimiento bajo una forma de un extracto orgánico complejo, como por
    ejemplo extracto de levadura.
    Entre los factores selectivos que alteran las condiciones del medio tenemos:
     Cambio de pH: por ejemplo agregando ácido acético para favorecer el
    crecimiento de Lactobacillus (pH final: 5,4 que es hostil para la mayoría de
    las especies que crecen entre 6,5 y 7,2). Los hongos crecen entre pH 4 y 6
    y S. faecalis a pH 9,6.
     Cambio de temperatura: la mayoría de las bacterias crece óptimamente
    entre 20º C y 40º C. Los cultivos típicos de S. Faecalis requieren 60º C de
    temperatura y los de Listeria son capaces de desarrollarse y crecer a 4º C.
     Alteraciones osmóticas: se acrecientan las propiedades osmóticas un
    medio con el agregado de cloruro de sodio. Estos medios intensifican la
    selección de bacterias halófilas como Staphylococcus spp. (7,5%).
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    AGRONOMIA

     Ajuste en la tensión de oxígeno: es importante en la selección de


    aerobios y anaerobios.
     Ajuste en la tensión de anhídrido carbónico: muchos patógenos
    importantes pueden ser cultivados a menos que se eleve la tensión más
    allá de la atmosférica.
    Entre los factores que inhiben el crecimiento de bacterias indeseables
    tenemos:
     Antisépticos: sustancias antibacterianas inespecíficas que pueden actuar
    como inhibidores. Por ejemplo: el medio de cultivo comercial (Salmonella -
    Shigella) que contiene verde brillante (inhibe las bacterias Gram positivas).
     Antibióticos: sustancias antibacterianas específicas que impiden el
    crecimiento de aquellos microorganismos que no nos interesa que crezcan
    en ese medio. Un ejemplo La penicilina en una concentración de 5,50
    unidades/ ml inhibe la mayoría de las Gram positivas.
    CONSTITUYENTES HABITUALES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
    “AGAR”
    Se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios de cultivo. El
    componente predominante en el agar bacteriológico es un polisacárido al que
    acompañan algunas impurezas y que se obtiene de ciertas algas marinas. Un gel
    de agar al 1-2 % en agua licua hacia los 100°C y se gelifica alrededor de los 40°C,
    dependiendo de su grado de pureza. Con la excepción de algunos
    microorganismos marinos, el agar no es empleado como nutriente por las
    bacterias. Entre su composición tenemos.
     EXTRACTOS. Son extraídos, con agua y calor, de ciertos órganos o tejidos
    animales o vegetales (p.e.: carne, hígado, semillas...) y posteriormente
    concentrados hasta la forma final de pasta o polvo. Se utilizan de forma
    deshidratada.
     PEPTONAS. Son mezclas complejas de compuestos orgánicos
    nitrogenados y sales minerales que se obtienen por digestión enzimática o
    química de proteínas animales o vegetales (soja, carne, gelatina, caseína..).
    Son muy ricas en péptidos y aminoácidos.
     SISTEMAS AMORTIGUADORES. Son incorporados al medio de cultivo
    para mantener el pH dentro del rango óptimo de crecimiento bacteriano.
     INDICADORES DE pH. Son compuestos que presentan una coloración
    diferente según la acidez basicidad del medio. Cada indicador presenta
    colores diferentes además de un rango propio de valor de pH al cual
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    AGRONOMIA

    cambia de color. Se añaden a menudo a los medios de cultivo para detectar


    variaciones de pH.
     AGENTES REDUCTORES. Se añaden al medio para crear condiciones
    que permitan el desarrollo de los gérmenes microaerófilos o anaeróbicos.
     AGENTES SELECTIVOS. Permiten el crecimiento de determinados
    microorganismos e impiden el crecimiento de otros; p.e. sales biliares,
    antibióticos, etc.

    V. CONCLUSIONES

     Mediante el desarrollo de esta práctica definimos, estudiamos y aplicamos


    los procedimientos que se deben realizar para la elaboración de un medio
    de cultivo.

     De acuerdo con lo realizado en la presente práctica se concluye que es de


    gran importancia  preparar adecuadamente los medios de cultivo, añadir la
    cantidad de solución exacta y disolverla correctamente para obtener los
    resultados esperados.

    VI. BIBLIOGRAFIA.

     Biotecnología Vegetal  (cultivo de tejidos, manual ) Gonzalez, Cruz,


    Camarillo, Silos. 2000. SEP. 133p.

     Sofía Gutiérrez de Gamboa, Octubre 2001.


    http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10
    _Preparaci%C3%B3n_de_medios_de_cultivo.pdf

     Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiología. Manual de


    Métodos Generales (2da edición). Facultad de Farmacia. Universidad
    Central de Venezuela.

     Dugas Beverly Tratado de Enfermería Práctica Nueva Editorial


    Interamericana México, 1999. http://es.scribd.com/doc/14173118/4-
    Esterilizacion-y-Preparacion-de-Medios-de-Cultivo
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    AGRONOMIA

    VII. ANEXOS.

    M
    E DI
    O

    LIQUIDO
    MEDIO SOLIDO

    PREPARACIO DE MEDIO SOLIDO MEDIOS SEGÚN SU COMPOCICION

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