UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRÉS

FACULTAD DE AGRONOMIA

CARRERA DE INGENIERIA AGRONÓMICA

TESIS DE GRADO

EFECTO DE ENTOMOPATÓGENOS EN EL CONTROL DE Erinnyis ello,

(Lepidoptera: Sphingidae) EN CULTIVO DE YUCA (Manihot esculenta C.) EN EL
MUNICIPIO DE PALOS BLANCOS, DEPARTAMENTO DE LA PAZ.

JUAN REYNALDO CONDE MIRANDA

La Paz – Bolivia

2011
 UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRÉS

FACULTAD DE AGRONOMÍA

CARRERA DE INGENIERIA AGRONÓMICA

EFECTO DE ENTOMOPATÓGENOS EN EL CONTROL DE Erinnyis ello,

(Lepidoptera: Sphingidae) EN CULTIVO DE YUCA (Manihot esculenta C.) EN EL
MUNICIPIO DE PALOS BLANCOS, DEPARTAMENTO DE LA PAZ.

Tesis de grado presentado como requisito

parcial para optar el Título de

Ingeniero Agrónomo

JUAN REYNALDO CONDE MIRANDA

ASESORES:

Ing.M.Sc. Yuri Zurita Valdivia..............................................................................................

Ing.M.Sc. Erik Murillo Fernández........................................................................................

Ing. Brígida Alicia Tintaya Bautista......................................................................................

TRIBUNAL EXAMINADOR:

Ing. Ph. D. David Cruz Choque...........................................................................................

Ing. M.Sc. René Calatayud Valdez......................................................................................

Ing. M.Sc. Celia Fernández Chávez....................................................................................

Aprobada

Presidente Tribunal Examinador ...............................................................

2011
 DEDICATORIA

Al supremo creador por darme las fuerzas

y su bendición.

Al sacrificio de mi mamá María Paz

Miranda por su comprensión, paciencia y
apoyo incondicional durante estos años.

Gracias a mi tío Pascual Miranda y

familia por darme la fuerza para seguir
adelante y su paciencia en momentos de
alegría y tristeza.

Dios los bendiga

REYNALDO
 AGRADECIMIENTOS

Expresar el más sincero agradecimiento a las siguientes instituciones y personas:

A la Universidad Mayor de San Andrés y la Facultad de Agronomía, Carrera de Ingeniería

Agronómica al Sr. Decano Ing. Ph. D. René Chipana Rivera, al Sr. Vicedecano Ing. M. Sc.
Ramiro Mendoza Nogales, Sr. Director de Carrera Ing. Ph. D. David Cruz Choque y docentes
que me impartieron en mi formación académica.

Al Instituto Nacional de Innovación Agropecuaria y Forestal (INIAF) La Paz, por el apoyo y

confianza que me brindaron al realizar mi tesis.

Al Instituto de Investigaciones Fármaco Bioquímicas (IIFB) de la UMSA, a la Dra. María Teresa

Álvarez Aliaga (encargada del área de biotecnología) y al Lic. Christian Espinal (responsable
control biológico).

Al laboratorio de microbiología de la fundación PROINPA – Cochabamba, al Ing. Noel Ortuño y

a la Ing. Brígida Tintaya por su ayuda.

A mis asesores Ing. M. Sc. Yuri Zurita y al Ing. M. Sc. Erik Murillo Fernández, por su
cooperación y apoyo desprendido en la orientación de mi tesis.

Al Ing. Juan José Vicente Rojas por el apoyo y confianza que me dio.

Al Lic. Fernando Guerra por su conocimiento y cooperación desprendida.

A los miembros del Tribunal Examinador: Ing. Ph. D. David Cruz Choque, Ing. M. Sc. Celia
Fernández Chávez, Ing. M. Sc. René Calatayud Valdez por las sugerencias y correcciones
realizadas a este documento.

A los señores Pablo Anconi y Flia. (Chayanta II) Área V, al señor William Callizaya (Agua Dulce)
y don Esteban Mariscal y Flia. (Puerto Carmen), Área VII por permitir realizar mi trabajo de
investigación.

A mi gran amigo y hermano Tomas Jiménez por su apoyo desprendido.

A Juan Víctor Villalobos por su apoyo incondicional en momentos de alegría y tristeza y mi

compañero Gerardo Fernández Valencia por su gran ayuda.

A mis compañeros de mi Facultad, un agradecimiento por haberles representado en diferentes

actividades y a los grupos AGRO2000, AGROIRA, LA ROSCA y DORADO.
 CONTENIDO

DEDICATORIA.................................................................................................................. I
AGRADECIMIENTO ........................................................................................................II
INDICE GENERAL .........................................................................................................III
LISTA DE FIGURAS..................................................................................................... VII
LISTA DE CUADROS.................................................................................................... IX
RESUMEN...................................................................................................................... X

I. INTRODUCCIÓN..........................................................................................................1
1.1 Justificación ....................................................................................................2
1.2 Objetivos..........................................................................................................4
1.2.1 Objetivo General..............................................................................................4
1.2.2 Objetivos específicos.......................................................................................4
1.3 Hipótesis ..........................................................................................................4
II. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA ......................................................................................5
2.1 Origen de la yuca.............................................................................................5
2.2 Distribución y cultivo de la yuca.......................................................................6
2.3 Botánica de la yuca .........................................................................................7
2.3.1 Taxonomía.......................................................................................................7
2.3.2 Descripción de la planta...................................................................................7
2.3.2.1 Tallo .................................................................................................................8
2.3.2.2 Hojas................................................................................................................8
2.3.2.3 Raíces..............................................................................................................8
2.3.2.4 Flor y fruto........................................................................................................9
2.4 Requerimientos Edafoclimáticos......................................................................9
2.4.1 Temperatura ....................................................................................................9
2.4.2 Luminosidad y fotoperiodo...............................................................................9
2.4.3 Suelo................................................................................................................9
2.5 Control Biológico de plagas de la yuca...........................................................10
2.6 Descripción del insecto biología de reproducción..........................................11
2.6.1 Origen y distribución .....................................................................................11
2.6.1.2 Distribución de Erinnyis ello en Bolivia .........................................................11
2.6.2 Clasificación taxonómica ..............................................................................13
2.6.3 Ciclo de vida de Erinnyis ello ........................................................................14
2.6.4 Estados de desarrollo ...................................................................................14
2.6.4.1 Huevo ...........................................................................................................14
2.6.4.2 Larva.............................................................................................................15
2.6.4.3 Prepupa .......................................................................................................16
2.6.4.4 Pupa .............................................................................................................16
2.6.4.5 Adulto............................................................................................................16
2.7 Forma de ataque y daño al cultivo................................................................17
2.8 Causas de la aparición de altas poblaciones de larvas ................................18
2.9 Componente de control de la plaga a corto y mediano plazo .......................19
2.10 Las plantas hospederas................................................................................19
2.11 Control del Erinnyis ello ................................................................................21
2.12 Control biológico ...........................................................................................21
2.12.1 Control con entomopatógenos......................................................................23
2.12.2 Bacteria Bacillus thuringiensis ......................................................................24
2.12.2.1 Clasificación taxonómica ..............................................................................25
2.12.2.2 Toxinas de Bacillus thuringiensis..................................................................26
2.12.2.3 Clasificación de las endotoxinas...................................................................26
2.12.2.4 Modo de acción de Bacillus thuringiensis en larvas de lepidópteros ...........27
2.12.2.5 Eficiencia y eficacia de Bacillus thuringiensis ...............................................27
2.12.2.6 Lepidópteros susceptibles a Bacillus thuringiensis .......................................28
2.12.2.7 Sintomatología de Bacillus thuringiensis en larvas de lepidópteros..............28
2.12.2.8 Resistencia del insecto por parte del Bacillus thuringiensis..........................29
2.12.2.9 Cepa Biobat ..................................................................................................29
2.12.2.6 Producción de Bacillus thuringiensis ............................................................29
2.12.3 Hongo Beauveria bassiana...........................................................................30
2.12.3.1 Clasificación taxonómica ..............................................................................31
2.12.3.2 Características generales .............................................................................32
2.12.3.3 Propiedades biológicas.................................................................................32
2.12.3.4 Mecanismos de acción .................................................................................32
2.12.3.4.1 Adhesión de la espora a la cutícula del insecto ............................................33
2.12.3.4.2 Germinación de la espora.............................................................................33
2.12.3.4.3 Penetración a la cutícula...............................................................................33
2.12.3.4.4 Replicación en el hemocele del insecto plaga ..............................................34
2.12.3.4.5 Disperción de las esporas.............................................................................35
2.12.3.5 Mecanismo de defensa contra los hongos entomopatógenos ......................35
2.12.3.6 Aislamiento del hongo Beauveria bassiana ..................................................35
2.12.3.7 Producción masiva de hongos entomopatógenos ........................................36
2.13 Patogenicidad ...............................................................................................36
2.14 Virulencia ......................................................................................................36
III. LOCALIZACIÓN.......................................................................................................37
3.1 Ubicación geográfica del trabajo de campo ..................................................37
3.2 Ubicación del trabajo de laboratorio .............................................................37
3.3 Descripción del municipio .............................................................................38
3.4 Características climáticas .............................................................................38
3.5 Ecosistema ...................................................................................................39
3.6 Clasificación de la zona ................................................................................39
3.7 Geología y geomorfología.............................................................................39
3.8 Suelos...........................................................................................................39
3.9 Vegetación....................................................................................................41
IV. MATERIALES Y MÉTODOS....................................................................................42
4.1 Materiales .....................................................................................................42
4.1.1 Material vegetal ............................................................................................42
4.1.2 Material biológico..........................................................................................42
4.2. Metodología de campo .................................................................................43
4.2.1 Estudio de campo .........................................................................................43
4.2.2 Parcelas de estudio ......................................................................................43
4.2.3 Adquisición del Bacillus thuringiensis ...........................................................45
4.2.4 Procedencia de la Beauveria bassiana.........................................................45
4.2.5 Multiplicación del hongo en medio de arroz....................................................46
4.2.6 Aplicación de los entomopatógenos ...............................................................46
4.2.7 Diseño experimental del trabajo de campo.....................................................46
4.2.8 Variables de respuesta de campo ..................................................................47
4.2.9 Dimensiones de la investigación en campo ....................................................48
4.2.10 Croquis de la investigación (campo)...............................................................49
4.3 Metodología de laboratorio .............................................................................49
4.3.1 Estudio de Laboratorio....................................................................................49
4.3.2 Preparación del ambiente ...............................................................................50
4.3.3 Realización de los Bioensayos .......................................................................50
4.3.4 Parámetros de evaluación de la efectividad de los entomopatógenos ...........50
4.3.5 Infección del Bacillus thuringiensis sobre Erinnyis ello ...................................51
4.3.6 Infección de la Beauveria bassiana sobre Erinnyis ello ..................................52
4.3.7 Diseño experimental de laboratorio ................................................................52
4.3.8 Dimensiones de los tratamientos....................................................................53
4.3.9 Variables de respuesta de laboratorio ............................................................54
V. RESULTADOS Y DISCUSIONES..................................................................55
5.1 Resultado de la etapa de laboratorio ..............................................................55
5.1.1 Número de larvas muertas después de la aplicación .....................................55
5.1.1.1 Número de larvas muertas de los entomopatógenos por estadíos larvales....56
5.1.2 Tiempo de acción de los entomopatógenos ...................................................57
5.1.3 Estadío de larva al que afecta más los entomopatógenos..............................59
5.1.3.1 Mortalidad de los entomopatógenos por estadíos larvales .............................61
5.1.4 Efectividad de los entomopatógenos ..............................................................62
5.1.4.1 Eficiencia del Bacillus thuringiensis ................................................................63
5.1.4.2 Eficiencia de Beauveria bassiana ...................................................................63
5.1.4.3 Efectividad por dosificaciones.........................................................................64
5.1.5 Análisis de la Interacción de Entomopatógeno por Dosis ...............................65
5.2. Resultado de la etapa de campo ....................................................................68
5.2.1 Número de larvas muertas después de la aplicación .....................................68
5.2.1.1 Número de larvas muertas de los entomopatógenos por estadíos larvales....68
5.2.2 Tiempo de acción de los entomopatógenos ...................................................70
5.2.3 Estadío de larva al que afecta más los entomopatógenos..............................72
5.2.3.1 Prueba de Duncan para el primer estadío ......................................................74
5.2.3.2 Prueba de Duncan para el segundo estadío...................................................75
5.2.3.3 Prueba de Duncan para el tercer estadío .......................................................76
5.2.3.4 Prueba de Duncan para el cuarto estadío ......................................................78
5.2.3.5 Mortalidad de los entomopatógenos por estadíos larvales .............................78
5.2.4 Efectividad de los entomopatógenos ..............................................................79
5.2.4.1 Eficiencia del Bacillus thuringiensis ................................................................80
5.2.4.2 Eficiencia de Beauveria bassiana ...................................................................81
5.2.4.3 Efectividad por dosificaciones.........................................................................81
5.2.5 Análisis de la Interacción de Entomopatógeno por Dosis ...............................83
VI. CONCLUSIONES...........................................................................................86
6.1 Para la etapa de laboratorio............................................................................86
6.2 Para la etapa de campo..................................................................................87
VII. RECOMENDACIONES ..................................................................................89
VIII. BIBLIOGRAFÍA .............................................................................................90
IX. ANEXOS ........................................................................................................99
 LISTA DE FIGURAS

Figura 1. Vista del cultivo de yuca ..................................................................................6

Figura 2. Mapa de distribución de Erinnyis ello en Bolivia ............................................13
Figura 3. Ciclo de vida de Erinnyis ello .........................................................................14
Figura 4. Adultos de Erinnyis ello, 1) hembra; 2) macho ..............................................17
Figura 5. Daño al cultivo de yuca Puerto Carmen.........................................................18
Figura 6. Aglomeración de larvas .................................................................................19
Figura 7. Plantas hospederas .......................................................................................20
Figura 8. Vista microscópica de las endotoxinas cristalíferas del B. thuringiensis........25
Figura 9. B. bassiana en proceso de multiplicación en el laboratorio de Bioquímica....31
Figura 10. Imagen satelital del municipio de Palos Blancos y Puerto Carmen .............37
Figura 11. Parcelas afectadas en el sector del Playón .................................................44
Figura 12. Zona de muestreo: Puerto Carmen – Palos Blancos, Depto. La Paz ..........45
Figura 13. Materiales para el trabajo de campo............................................................46
Figura 14. Dimensiones de los tratamientos en las plantas de yuca ............................48
Figura 15. Larvas recolectadas para laboratorio...........................................................49
Figura 16. Preparación y aplicación de B. thuringiensis en frascos de laboratorio .......52
Figura 17. Tamizado y aplicación de Beauveria bassiana en frascos de laboratorio....52
Figura 18. Dimensiones de los tratamientos de Laboratorio.........................................53
Figura 19. Larvas muertas y vivas después de la aplicación (laboratorio)....................55
Figura 20. Larvas muertas en el tiempo de acción del B. thuringiensis en laboratorio .57
Figura 21. Larvas muertas en el tiempo de acción de la B. bassiana en laboratorio ....58
Figura 22. Mortalidad entre entomopatógenos por estadíos larvales, estudio de
laboratorio....................................................................................................62
Figura 23. Eficiencia del Bacillus thuringiensis con relación al tiempo de acción .........63
Figura 24. Eficiencia de la Beauveria bassiana con relación al tiempo de acción ........64
Figura 25. Efectividad por dosificaciones de los entomopatógenos..............................65
Figura 26. Efectividad de los entomopatógenos en condiciones controladas...............65
Figura 27. Interacción Entomopatógeno por Dosis para el 1er estadío ........................66
Figura 28. Interacción Entomopatógeno por Dosis para el 2do estadío .......................67
Figura 29. Interacción Entomopatógeno por Dosis para el 3er estadío ........................67
Figura 30. Larvas muertas y vivas después de la aplicación (campo) ..........................68
Figura 31. Larvas muertas en el tiempo de acción del Bacillus thuringiensis ...............71
Figura 32. Larvas muertas en el tiempo de acción de la Beauveria bassiana ..............72
Figura 33. Mortalidad entre entomopatógenos por estadíos larvales, estudio de
Campo .........................................................................................................79
Figura 34. Eficiencia del Bacillus thuringiensis con relación al tiempo de acción .........80
Figura 35. Eficiencia de la Beauveria bassiana con relación al tiempo de acción ........81
Figura 37. Efectividad por dosificaciones de los entomopatógenos..............................82
Figura 36. Efectividad de los entomopatógenos en condiciones de campo..................82
Figura 38. Interacción de Entomopatógeno por Dosis para el 1er estadío ...................83
Figura 39. Interacción de Entomopatógeno por Dosis para el 2do estadío ..................84
Figura 40. Interacción de Entomopatógeno por Dosis para el 3er estadío ...................84
Figura 41. Interacción de Entomopatógeno por Dosis para el 4to estadío ...................85
 LISTA DE CUADROS

Cuadro 1. Controladores naturales de las plagas de la yuca........................................10

Cuadro 2. Distribución de Erinnyis ello en el ámbito regional .......................................12
Cuadro 3. Principales diferencias entre estadíos de las larvas de Erinnyis ello ...........15
Cuadro 4. Principales controladores de Erinnyis ello....................................................22
Cuadro 5. Material para el estudio de laboratorio .........................................................42
Cuadro 6. Material utilizado para el estudio de campo .................................................42
Cuadro 7. Condiciones de laboratorio...........................................................................50
Cuadro 8. Larvas muertas y vivas de los entomopatógenos por tratamientos..............56
Cuadro 9. Análisis de varianaza para el primer estadío................................................59
Cuadro 10. Análisis de varianza para el segundo estadío ............................................60
Cuadro 11. Análisis de varianza para el tercer estadío.................................................61
Cuadro 12. ANVA de efecto simple para el primer estadío...........................................66
Cuadro 13. ANVA de efecto simple para el segundo estadío .......................................66
Cuadro 14. ANVA de efecto simple para el tercer estadío............................................67
Cuadro 15. Larvas muertas y vivas de los entomopatógenos por tratamientos............69
Cuadro 16. Análisis de varianza para el primer estadío................................................73
Cuadro 17. Comparaciones de promedios del efecto en el primer estadío ..................74
Cuadro 18. Análisis de varianza para el segundo estadío ...........................................74
Cuadro 19. Comparaciones de promedios del efecto en el segundo estadío...............75
Cuadro 20. Análisis de varianza para el tercer estadío.................................................76
Cuadro 21. Comparaciones de promedios del en el tercer estadío ..............................77
Cuadro 22. Análisis de varianza para el cuarto estadío................................................77
Cuadro 23. Comparaciones de promedios del efecto en el cuarto estadío...................78
Cuadro 24. ANVA de efecto simple para el primer estadío...........................................83
Cuadro 25. ANVA de efecto simple para el segundo estadío .......................................83
Cuadro 26. ANVA de efecto simple para el tercer estadío............................................84
Cuadro 27. ANVA de efecto simple para el cuarto estadío...........................................84
 RESUMEN

Las zonas tropicales de nuestro país presentan factores adversos como ser: climáticos,
presencia de plagas y enfermedades y ataques micoticos entomológicos y/o virales, es
por ello que se ve la necesidad de estudiar alternativas orgánicas y evitar el control
químico pues su uso provoca la ruptura del equilibrio existente entre la población de la
plaga.

En el caso de la yuca (Manihot esculenta C.) es una de las especies vegetales que
posee una alta capacidad de producción de carbohidratos, la incidencia y consecuencia
del ataque del gusano cachón causa perdidas en la producción.

Es por ello que se realizo este trabajo de investigación: Efecto de entomopatógenos en

el control de Erinnyis ello, (Lepidoptera: Sphingidae) en cultivo de yuca (Manihot
esculenta C.) en el municipio de Palos Blancos del Departamento de La Paz, con la
bacteria Bacillus thuringiensis y el hongo Beauveria bassiana con distintas
dosificaciones de aplicación, donde se realizo en la central de Puerto Carmen Área VII,
donde se obtuvo un resultado con el bacilo 49% de efecto donde hubo mayor efecto en
el 1er estadío 75% y 2do estadío con 61% y no así en los demás estadíos y las
dosificaciones fueron con 4gr un 58% y 3gr 49%. En cuanto en el hongo 33% de efecto
en el 1er estadío 66%, 2do estadío con 45% con una dosificación de 4ml un 50% y 3ml
38%. Y en los demás dosificaciones no tuvo efecto.

En el trabajo de laboratorio (INIAF) La Paz fue en condiciones controladas donde se

determino en Bacillus thuringiensis con 86% en sus primeros estadíos y el efecto de las
dosis Bt 4gr 80% y de 3gr con 60%. En cuanto a Beauveria bassiana un 55% en el
primer estadío y en las dosis 4ml 53% y 3ml 40%. Hay factores que determinan su
efectividad en la aplicación.

El desarrollo de Beauveria bassiana presenta un modo de acción de: adhesión y

germinación de la espora en la cutícula del insecto, la penetración en el hemocele y
desarrollo del hongo lo cual generalmente resulta en la muerte del insecto. Se cree que
el pH alto (9.0) de los intestinos de los insectos provoca la disolución del cristal en sus
componentes tóxicos los cuales desgarran las paredes del intestino medio cesando el
proceso de la alimentación, la bacteria invade el celoma del insecto a través de las
paredes del insecto, produciendo una septicemia que mata al insecto.
 SUMMARY

Tropical zones of our country are adverse factors such as: climatic, presence of pests
and diseases and micoticos entomological and/or viral attacks, that is why that is the
need to study organic alternatives and avoid chemical control because its use causes
the disruption of the existing balance between the population of the plague.

In the case of cassava (Manihot esculenta C.) is a plant species that has a high capacity
of production of carbohydrates, the incidence and result of the attack of the cachón
worm causes losses in production.

Is why that was conducted this research work: effect of entomopathogenic Erinnyis ello
control, (Lepidoptera: Sphingidae) in cultivation of cassava (Manihot esculenta C.) in the
municipality of white sticks of the Department of peace, with the bacteria Bacillus
thuringiensis and the fungus Beauveria bassiana with different dosages of application,
which took place in the central of Puerto Carmen area VII earning a result with the
Bacillus thuringiensis 49% of effect where there was greater effect on the 1st stage 75%
and 2nd stage with 61% and not in the other stages and the dosages were with 4 gr
58% and 3 gr 49%. As in the fungus Beauveria bassiana 33% effect on the 1st stage
66%, 2nd stage with 45% with a dosage of 4 ml 50% and 3 ml 38%. And in the other
dosages had no effect.

Laboratory work (INIAF) peace was in controlled conditions where I establish in Bacillus
thuringiensis with 86% in its first stages and the effect of the dose Bt 4 gr 80% and 3 gr
with 60%. As for Beauveria bassiana 55% in the first stage and 4 ml 53% and 40% 3 ml
doses. There are factors that determine its effectiveness in the application.

The development of Beauveria bassiana presents a way of action: accession and

germination of the spore in the cuticle of the insect, the penetration of the hemocele and
development of the fungus usually resulting in the death of the insect. It is believed that
high pH (9.0) of the guts of insects causes the dissolution of the glass in their toxic
components which tear the walls of the small intestine means stopping the process of
feeding; the bacterium invades the coelom of the insect through the walls of the insect,
producing a sepsis who kills the insect.
I. INTRODUCCIÓN

Erinnyis ello (Lepidóptera: Sphingidae) se encuentra distribuida en todo el Continente

Americano, en la mayoría de las zonas yuqueras y papayales, es una plaga que se
caracteriza por su alta capacidad de consumo foliar principalmente en los últimos
estadíos de su fase larval, por esta razón al presentarse altas poblaciones puede
defoliar totalmente la planta, e incluso la parte tierna del tallo y las yemas laterales. El
gusano es una de las plagas más importantes en la América tropical la capacidad
migratoria de Erinnyis ello, su adaptación a varios climas y su amplio rango de
hospederos son las causas de su extensa distribución y de sus ataques esporádicos.

La yuca (Manihot esculenta Crantz) es una de las especies vegetales que posee una
alta capacidad de producción de carbohidratos. La facilidad de cultivo en regiones
tropicales la ha convertido en una de las principales fuentes carbohidratos. Para cubrir
el déficit calórico que padece una gran parte de la población, si no también para ser
utilizada en la alimentación animal y para su procesamiento agroindustrial.

Por ser una planta perenne la yuca se ve afectada por una gran cantidad de plagas
entre las cuales se destaca el gusano cachón, el incremento del área cultivada y el uso
indiscriminado de insecticidas alteran el equilibrio ecológico entre las poblaciones
insectiles en muchas regiones, dando lugar a que algunos insectos que antes aparecían
esporádicamente (plagas secundarias) se conviertan en plagas causantes de daños de
importancia económica. Uno de ellos es Erinnyis ello llamado comúnmente gusano
cachón. El cual causa daños especialmente en plantas jóvenes, encontrándose en la
mayoría en las zonas yuqueras.

El uso continuo e inadecuado de insecticidas han inducido en diversas regiones del

mundo: el desarrollo de insecto-resistencia, desequilibrio ambiental y afectaciones a la
salud humana, una de las estrategias es la manipulación deliberada de organismos
vivos (parasitoides, depredadores y patógenos) para el control de plagas, diseñados o
proyectados para reducir la población plaga a un nivel que no produzca daños
económicamente importantes.
Erinnyis ello, se encuentra distribuida en nuestro país en casi todos los departamentos
excepto Potosí, Oruro y la Zona Andina. El primer reporte de Erinnyis ello en Bolivia fue
por J. Steinbach (1888-1889) en la localidad de Espíritu Santo, Provincia Chapare,
Cochabamba.
Su presencia por entonces fue mínima ya que sus depredadores naturales controlaban
a la plaga, ahora sea incrementado la población del hospedero y muy difícil de
controlar, por que rápidamente en semanas e incluso días se pierden los cultivos a
causa de la defoliación de sus hojas y prácticamente se convierten en pérdidas para los
productores de yuca, donde las familias impotentes no pueden hacer nada para salvar
sus cultivos. Además debido a que son plantaciones ecológicas que están controladas
por el CEIBO, por lo que es prohibido manejar insecticidas. (INIAF, 2010)

A nivel departamental el daño es focalizado en tres centrales del municipio de Palos

Blancos con una cobertura de 16 comunidades, donde la población de productores
llega a 385 familias con una superficie aproximada de 1460 ha. Cultivadas con yuca,
papaya, naranja, mandarina, plátano y otros. Donde se produjo un daño 150 hectáreas
de cultivos de yuca y papaya en la región de Alto Beni del Departamento de La Paz,
(INIAF, 2010).

Así mismo Álvarez (1991), menciona que en la región del Alto Beni se practican varios
sistemas de producción agropecuaria, siendo el más importante la agricultura
migratoria, característico de las áreas de colonización y zonas ecológicas. El elevado
uso de plaguicidas en esta región, puede tener consecuencias serias en el medio
ambiente a causa de la falta de regulación de estos productos.

1.1 Justificación

La investigación cobra importancia ya que las pérdidas provocadas por Erinnyis ello en
las plantaciones es evidente, ya que la plaga se encuentra en poblaciones altas
alimentándose de las hojas o el follaje de la planta de yuca, defoliando totalmente y
provocando posteriores daños fisiológicos en los frutos de las plantas provocando
posteriores daños en su sistemas nutritivos y esta es expresada en la producción
provocando pérdidas. Siendo un área con cultivos agroecológicos, principalmente de
cacao asociados al CEIBO y producción banadera a BANABENI y productos cítricos de
mayor importancia. Se pretende evitar la fumigación con agroquímicos, aplicándose
más bien un control biológico a base de entomopatógenos como el Bacillus
thuringiensis y Beauveria bassiana.

Esta investigación no hay registros de estudios de estos patógenos sobre Erinnyis ello,
los países con mayores problemas con la plaga son el Perú, Colombia y Brasil. En el
primero se realizo un Manejo Integrado de Control en la región del Madre de Dios
(Gonzales, 2005), en Colombia controles con Bacillus thuringiensis y Baculovirus
Erinnyis en la región del Valle del Cauca y Palmira (CIAT, 2001) y Manejo Integrado del
gusano defoliador, experiencias realizadas en el Acre Brasileño (Fazolin et. al. 2007).
Además se tiene como registro el estudio de la patogenicidad del hongo Beauveria
bassiana sobre Erinnyis ello pero en condiciones controladas (Múnera et. al. 1999).
1.2 OBJETIVOS:

1.2.1 OBJETIVO GENERAL

Estudiar la eficiencia de los entomopatógenos (Bacillus thuringiensis y Beauveria

bassiana) para el control de Erinnyis ello (Lepidóptera: Sphingidae) en cultivo de yuca
(Manihot esculenta C.) en el municipio de Palos Blancos – Departamento de La Paz.

1.2.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS

 Evaluar la eficiencia de los entomopatógenos, para el control del gusano

defoliador Erinnyis ello, (Lepidóptera: Sphingidae).

 Estudiar la interacción de los entomopatógenos por dosis de aplicación.

 Determinar la eficiencia de la Bacteria en el control (Bacillus thuringiensis).

Subsp. Kurstaki.

 Evaluar la eficiencia del hongo (Beauveria bassiana).en el control.

 Evaluar en laboratorio los primeros estadíos en su aplicación larval.

1.3 HIPOTESIS Ho

Ho1: Existen diferencias en el efecto de los entomopatógenos en la larva de E. ello.

Ho2: La Bacteria (B. thuringiensis) existe diferencia en la eficiencia en laboratorio

Ho3: El hongo (Beauveria bassiana) hay relativa diferencia en el efecto en cuanto a

Laboratorio ya que son en condiciones controladas.
II. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA

2.1. Origen de la Yuca

La yuca (Manihot esculenta C.) es una de las principales fuentes de energía (calorías
para la actividad del cuerpo) para millones de personas que viven en las zonas
tropicales y subtropicales del mundo, para mejorar este cultivo tan útil, se han realizado
investigaciones desde hace mas de 30 años, sobre su manejo agronómico y sobre el
conjunto de plagas (insectos y ácaros) que se asocian con este cultivo.

El origen de la yuca y el sitio donde tuvo lugar su domesticación aun no ha sido

establecido definitivamente. A pesar de que se ha sugerido que la yuca se habría
originado en lugares diversos como África, Asia, islas del Pacífico, Mesoamérica y
América del Sur, existe un reconocimiento muy generalizado, de que este cultivo se
originó en América tropical, específicamente en el noreste del Brasil (Renvoize, 1973).

El nombre científico de la yuca fue dado por Cranzt, en 1766. Posteriormente, la yuca
fue clasificada como dos especies diferentes, dependiendo si se trataba de yuca
amarga M. utilísima o dulce M. aipi. Sin embargo, el italiano Ciferri reconoció que para
el nombre científico de la yuca debía dársele prioridad al trabajo hecho por Cranzt en el
que propone su nombre actual Manihot esculenta (Ciferri, 1938).

En la cuenca Amazónica es donde el género botánico de la yuca muestra su mayor

variabilidad genética. También se observa en Mesoamérica un centro secundario de
diversidad genética (Allem, 1994).

Numerosas evidencias apuntan a que el área de domesticación de la yuca comprende

una vasta región desde México hasta Brasil, esta especie se habría cultivado desde
hace menos de 5000 años (Simmonds, 1976).
 Figura 1. Vista del cultivo de yuca

2.2. Distribución y Cultivo de la Yuca

Según León, et. al. (1987), las especies de Manihot cerca de un centenar, se extienden
desde Arizona hasta la Cuenca del Plata. Hay dos áreas de concentración de especies:
una en México y otra en el Noreste de Brasil; las especies taxonómicamente más afines
a Manihot esculenta se encuentran en la segunda.

En América del Sur se separa tradicionalmente los cultivares de yuca en “amargas” y

“dulces”, sin embargo esta clasificación tiene cierto significado geográfico. Las
variedades amargas o bravas en general con mayor contenido de HCN, se encuentran
principalmente en la Cuenca del Amazonas – Orinoco; las dulces desde el Noreste de
Argentina por la vertiente pacífico de América de Sur hasta México.

Rogers (1973), de acuerdo a estudios taxonómicos efectuados se encuentra que varias

especies son sinónimos de Manihot esculenta. Entre estos se incluye M. utilissima, M.
aipi, M. dulcis, M. flexuosa, M. flabellito, M. diffusa, M. melanobasis, M. digitiformis y M.
sprucei. El contenido del glucósido Linamarina que genera HCN, que es el que los
distingue es muy variable, y depende de las condiciones ecológicas del cultivo.
2.3. Botánica de la Yuca

2.3.1. Taxonomía

Según Montaldo (1985), la clasificación es la siguiente:

División: Espermathophyta

Subdivisión: Angiospermo

Clase: Dicotyledonae

Subclase: Archyclamydae

Orden: Geraniales

Familia: Euphorbiaceae

Género: Manihot

Especie: esculenta

N.C.: Manihot esculenta

Variedad: Rosada

2.3.2. Descripción de la Planta

La yuca es un arbusto de tamaño variable de 1 a 5 m. de altura. Los cultivares se

agrupan según el tamaño en:

 Bajos (hasta 1.50 m.)

 Intermedios (1.50 – 2.50 m.)
 Altos (más de 2.50 m.)

Montaldo (1985), indica que la yuca es un arbusto que puede llegar a 4 a 5 m. de altura,
pero entre los tipos cultivados no pasa de 2 a 3 metros y según Araque (1967), es una
planta perenne. Es monoica, cuyas raíces se utilizan como fuente de carbohidratos,
ramificación simpodial y con variaciones en la altura que oscilan entre los 1 a 4 m.
aunque la altura máxima generalmente no excede de los 3 m.
2.3.2.1. Tallo

Montaldo (1985), la estaca plantada da nacimiento preferentemente en su apical a uno

a más tallos. El tallo es nudoso, con savia abundante y médula voluminosa, de 2 a 5
cm. de diámetro en la base; quebradizo de color variado según la especie, se ramifica
en dicotomía y tricotomía (2 a 3 ramas).

2.3.2.2. Hojas

Según Montaldo (1985), las hojas son alternas, simples y tienen vida corta (1 – 2
meses). Son de forma palmípartidas, con 5 – 7 lóbulos, los que pueden tener forma
aovada o lineal, el largo de la hoja se mide por el largo del lóbulo medio y por lo general
es de 14 – 17 cm. el color de la cara superior de las hojas puede ser: verde, verde
marrón y verde claro. Los peciolos son largos y delgados de 20 – 40 cm. y sus colores
son rojo, rojo verdoso, verde rojizo y verde. Las hojas de la yuca son bifaciales con una
epidermis brillante.

2.3.2.3. Raíces

Según Indira y Kurian (1973), en las estacas de la yuca se forman (previo a las raíces),
callos en el extremo distal a una semana de la plantación; de allí se originan las raíces
en dos a tres días. Las raíces así formadas, debido a diferenciación, manifiestan un
crecimiento secundario de la región vascular, que comienza a las tres semanas, dando
origen a las raíces reservantes, un corte transversal de una raíz reservante de yuca
muestra dos divisiones principales: la corteza y el cilindro central o pulpa.

El número de raíces reservantes por planta va de 2 – 3 hasta 10 a más. La yuca tiene

su producción de 0 – 30 cm. de profundidad. Lo óptimo son las especies que acumulan
su producción en los primeros 15 cm. del suelo, las formas predominantes de las raíces
de yuca son cilíndricas, cónicas, fusiforme e irregular.

Según Araque (1967), las raíces son tuberosas y constituyen la parte más importante
de la planta; alcanzan un gran desarrollo, llegando a tener hasta 1 m. de longitud y 15
kg. De peso, su forma y diámetro difieren bastante. El jugo tiene un glucósido que
genera ácido cianhídrico.
2.3.2.4. Flor y Fruto

Aunque rara vez llega a florecer porque se la reproduce por estacas, posee flores
unisexuales, agrupadas en racimos terminales y paniculados, las flores femeninas se
ubican en la parte baja de la planta y son menores en número que las masculinas, que
se encuentran en la parte superior de la inflorescencia; las flores masculinas son más
pequeñas. Los frutos son cápsulas tripartitas con 6 valvas; secas de tipo caja a cápsula,
dehiscentes (Araque, 1967).

2.4. Requerimientos Edafoclimáticos

2.4.1. Temperatura

Los rendimientos máximos se obtienen en un rango de temperatura de 25-29º C,

siempre que haiga humedad disponible y suficiente en el periodo de crecimiento.
Aunque puede tolerar el rango de 16-38º C, por debajo de 16ºC el crecimiento se
detiene, por este motivo en los climas tropicales y húmedos se alcanzan altas
productividades, mientras en las regiones subtropicales, al descender los 16ºC se
paraliza el crecimiento, conforme la temperatura disminuye el desarrollo del área foliar
se hacen más lento, y el tamaño de la hojas más pequeño (Infoagro, 2006).

2.4.2. Luminosidad y fotoperiodo

La yuca crece y florece bien en condiciones de plena luz, siendo un factor importante de
cara al rendimiento de la planta. La longitud del día afecta a varios procesos fisiológicos
de la planta, es una planta típica de un fotoperiodo corto: 10 -12 horas luz, propio de las
regiones tropicales (Infoagro, 2006).

2.4.3. Suelo

No es un cultivo exigente de acuerdo a suelos, se da desde suelos muy pobres en

elementos nutritivos hasta en aquellos con una alta fertilidad. Preferiblemente los suelos
han de tener un pH ligeramente ácido, con una materia orgánica y han ser sueltos,
porosos y friables, evitando suelos con excesos de agua o desérticos (Infoagro, 2006).
2.5. Control Biológico de Plagas de la Yuca

Según el CIAT (1989), los enemigos más comunes de las plagas de yuca pertenecen a
tres grupos: parásitos, predadores y patógenos; dentro de estos se destacan los
hongos, los nematodos y los virus, por ser los más estudiados. En el cuadro se
muestran algunos principales enemigos naturales que controlan las plagas de la yuca,
además pueden existir más especies aún no reportadas.

Cuadro 1. Controladores naturales de las plagas de la yuca.

PLAGAS PARÁSITOS PREDADORES PATÓGENOS

Ácaros
Mononychellus tanajoa 60 2
Tetranychus urticae 1
Gusano cachón 18 15 15
Mosca blanca 17 5 6
Chinche de encaje 1
Piojo harinoso 25 46 2
Mosca de la fruta 3
Barrenadores
Chilomima clarkei 5 2 5
Lagochirus sp. 2
Escamas
Aonidomytilus albus 2 9 2
Saissetia miranda 2
Cydnidae 1 2
Mosca de agallas 2 1
Chizas 1
Total 76 139 37
Fuente: CIAT, 1989
2.6. Descripción del insecto. Biología de Reproducción

2.6.1. Origen y distribución

Erinnyis ello, (Lepidóptera: Sphingidae) es un insecto conocido desde 1750 y también

de vieja ocurrencia en el país, es oriundo del continente americano y probablemente en
el Brasil donde también tiene su origen. (Maes.1999).

Se distribuye en la América Tropical desde Canadá hasta Chile, donde infesta cultivos
de yuca y papaya además se ha encontrado en caucho en el Perú. A pesar de los
hábitos devastadores de las larvas, el conocimiento avanzado que se posee del insecto
hace posible su control evitando así la aplicación de insecticidas. (Maes. 1999;
Gonzales. 2005).

El gusano cachón de la yuca Erinnyis ello es una plaga que ataca el cultivo de yuca
ocasionando reducciones hasta de un 70% según la edad del cultivo, el número de
ataques y condiciones agroecológicas, es una de las plagas más importantes de la
América Tropical. La capacidad migratoria del Erinnyis ello, su adaptación a varios
climas y su amplio rango de hospederos son las causas de su extensa distribución y de
sus ataques esporádicos. (CIAT, 2001).

2.6.1.2 Distribución de Erinnyis ello en Bolivia

El primer reporte del Erinnyis ello en Bolivia fue por Steinbach (1888 – 1889) en la
localidad de Espíritu Santo, Provincia Chapare del Departamento de Cochabamba.
(Guerra, 2010). Erinnyis ello ha sido reportada para Bolivia en las siguientes
localidades:
Cuadro 2. Distribución de Erinnyis ello en el ámbito regional.

Departamento Provincia Localidad Año

Andrés Ibáñez Santa Cruz 1915, Stienbach
Ichilo Potrerillos Güenda 1996, J.B.
Andrés Ibáñez Santa Cruz 1987, 1988, 1990
(PB, JLA).
Florida Santa Rosa 1994
SANTA CRUZ Pampa Grande 1995, A.L.
Caballero San Juan Potrero 1996, F.C.
Ichilo Buena Vista 1990, (RR, PB)
Ichilo Buena Vista 1906, 1907, 1914
1915, Stienbach
Ichilo – Florida Par. Nal. Ámboro 1987, RR.
Sud Yungas Inicua 2010, FG.
Caranavi El Porvenir 1983, 1986 – 1987
(AC, FG).
Sud Yungas Agua Dulce 2010, FG.
LA PAZ Nor Yungas El Chairo 2007, FG.
Sud Yungas Cocochi 2010, FG.
Sud Yungas Sapecho 2010, FG.
Sud Yungas Puerto Carmen 2010, FG.
Caranavi San Antonio 2010, FG.
Yacuma Espíritu 1985, EF.
BENI Ballivian Est. Biol. del Beni 1987, (MGP).
Ballivian Rurrenabaque 1982, FG.
TARIJA O´ Connor Entre Ríos 1991, FG.
CHUQUISACA Hernando Siles Monteagudo 1991, FG.
PANDO Manuripi Luz de América 2010, FG.
Manuripi Puerto América 2010, FG.
COCHABAMBA Chapare Espíritu Santo 1888 – 1889, J.
Stienbach
Fuente: Guerra, 2010.

Según el mapa de distribución (Figura. 2) Erinnyis ello se encuentra en casi toda

Bolivia, no se tienen registros del Departamento de Oruro y Potosí, pero se presume la
existencia de la especie en los valles mesotérmicos potosinos. (Guerra, 2010).
 Localización de Erinnyis
ello en Bolivia

Erinnyis ello

Mapa modificado
por Guerra, 2010.

Figura 2. 1) Mapa de distribución de Erinnyis ello en Bolivia; 2) Vista del gusano cachón

2.6.2. Clasificación Taxonómica

(2008) Bayer de Perú S.A de C.V.

Nombre vulgar - gusano cachón

Reino : Animal

División : Endopterigota

Clase : Insecta

Orden : Lepidoptera

Familia : Sphingidae

Genero : Erinnyis

Especie : ello ello

Subespecie : ello
2.6.3. Ciclo de vida de Erinnyis ello

El Erinnyis ello presenta metamorfosis completa por cinco fases de desarrollo: huevo,
larva, pre pupa, pupa y adulto. El ciclo biológico se completa en 28.9 días a 28.9ºC y
76.2% HR, y 30.8 días a 25.3ºC y 80.7% HR (Maes. 1999).

2do
estadío
1er 3 días 3er
estadío estadío
3 días 3 días

huevo 4to
estadío
1-3 3 días

CICLO DE VIDA
5to
adulto estadío
30 – 32 días
2 días

emergie migra al
ndo suelo

pupa
prepupa
10 - 12
2 días
días

Figura 3. Ciclo de vida del Erinnyis ello.

2.6.4. Estados de desarrollo

2.6.4.1. Huevo

Gonzales (2005), indica que los huevos son casi esféricos de 1.5 mm de diámetro,
superficie lisa y coloración verdosa; son colocados principalmente en el haz de las
hojas. El Corion es transparente, por lo que el huevo toma la coloración de su contenido
que es verde cuando la larva esta desarrollando en el interior, la eclosión ocurre de 3 a
5 días después de la ovoposición. Cuando se encuentran posturas negruzcas o
marrones, es probable que el huevo este parasitado y que el color corresponda al
cuerpo de un parasitoide.
2.6.4.2. Larva

Esta fase larval tiene una duración de 12 a 15 días, dependiendo de las condiciones
climáticas, consta de 5 estadíos larvales con cuatro cambios o mudas de piel, los cuales
pueden medir desde 6 mm en el primer estadio hasta 100 mm en el último estadío.
Además durante este proceso so observan cambios en el tamaño de la capsula
cefálica, la placa toráxica y en la definición de los últimos segmentos en que se divide el
cuerpo (Cuadro 3). Las larvas de este insecto se caracterizan por tener un cuerno
caudal erecto, de donde proviene su nombre de gusano cachón (CIAT, 1989).

CIAT (1989), indica que durante la etapa larval es cuando Erinnyis ello ocasiona daño a
las plantaciones de yuca; su voracidad es tal que puede consumir hasta 1.100 cm.
cuadrados de superficie foliar, de los cuales 75% son consumidos durante los últimos
estadíos; con base en las características del cuerno caudal se puede determinar con
gran exactitud a nivel de campo los estadíos o estado de desarrollo de las larvas,
condición importante que ayuda en el manejo eficiente y efectivo de esta plaga cuando
se presentan eclosiones.

Cuadro 3. Principales diferencias entre estadíos de las larvas de Erinnyis ello.

Estadío Tamaño Capsula Placa División de segmentos

Nº mm cefálica toráxica del cuerpo
I 4 – 10 0.8 No visible No definida
II 11 – 16 1.3 No visible Notoria en la parte media
III 17 – 23 2.1 Visible Bien definida en el cuerpo
IV 30 – 48 3.1 Notoria Definida
V 50 - 120 5.1 Notoria Definida
Fuente: CIAT, 1989.

Las larvas son defoliadoras y usualmente se encuentran en el envés de las hojas

alimentándose, las larvas pequeñas verdes a veces se localizan a lo largo de la
nervadura principal de la hoja camuflándose muy bien, lo cual debe ser tomado en
cuenta en cada evaluación; las larvas presentan una marcada variación de color
pueden ser verdes, amarillas, naranjas, marrones, gris oscuro, negras veteadas de rojo,
blanco y negro. Esta variabilidad en el color de la larva parece depender de factores
tales como la aglomeración de larvas en la planta, la calidad del alimento consumido,
las condiciones climáticas y otros factores desconocidos. La larva del último estadío
migra al suelo a fin de empupar (CIAT, 1989; Gonzales, 2005).

2.6.4.3 Prepupa

Después de haber completado sus cinco estadíos, la larva desciende al suelo y se

esconde debajo de residuos u hojas caídas, mediante movimientos bruscos (retractiles),
formando una cámara donde pasa al estado de prepupa, que dura aproximadamente
dos días. En este estado no consume ningún alimento, tiene poca movilidad y
finalmente empupa (Martins, et. al. 1992).

2.6.4.4. Pupa

Gonzales (2005), las pupas son encontradas en el suelo, removiendo la hojarasca,

dentro de un cocón al que se han adherido tierra y restos vegetales. Estas pueden
medir 55 mm y tener coloraciones de negro y naranja. A diferencia de pupas de otras
especies de Sphingidae que presentan una trompa curvada donde la probosis del futuro
adulto desarrolla separadamente, las pupas de E. ello no presentan esta trompa, es
decir su probosis se derrolla en su interior como mayoría de Lepidoptera.

En esta etapa de desarrollo ya se puede hacer diferenciación entre las futuras hembras
y los machos. En el macho la abertura genital esta en el noveno segmento, por lo
anterior la distancia entre la abertura anal y el gonoporo es menor en el macho y mayor
en la hembra. En el macho el gonoporo se observa en relieve mientras que en la
hembra es liso y más difícil de observar; en la hembra la unión del octavo y noveno
segmento, donde esta el gonoporo tiene la forma de una V invertida (CIAT, 1989).

2.6.4.5. Adulto

Gonzales (2005), indica que los adultos de E. ello tienen una expansión alar de 70-90
mm. En ambos sexos las alas posteriores son rojas con una banda marginal ancha de
color gris oscuro. El abdomen es bandeado transversalmente con bandas alternantes y
contrastantes de color negro y gris pálido. Presentan dimorfismo sexual en las alas
anteriores, las cuales son de color gris-arena pálido en las hembras, con líneas
transversales grises a manera de ondas; los machos presentan manchas más oscuras,
grises y marrones, una banda irregular oblicua de color marrón oscuro que corre desde
la base de la ala hasta la apéndice.

La hembra adulta puede vivir hasta 19 días (9 días promedio) y los machos un máximo
de 15 días (7 días promedio), aun cuando se tienen informes de que algunos adultos
pueden vivir hasta 25 días en condiciones normales. La copulación ocurre comúnmente
durante la noche en las primeras 24 horas después de la emergencia de adultos. La
ovoposición se inicia dos o tres días después de la copula. La hembra adulta puede
ovopositar durante todo su ciclo, pero algunas observaciones indican que más del 70%
de sus huevos son puestos durante los primeros 7 días de ovoposición, preferiblemente
sobre la haz de la hoja, aunque también sobre el envés o incluso el peciolo y el tallo
(CIAT, 1989).

1) Hembra 2) Macho

Figura 4. Adultos del Erinnyis ello.

2.7. Forma de ataque y daño al cultivo

Según Decazy (1990), el ataque a las plantaciones varía de acuerdo a factores tales
como: temperatura, humedad, tipo de cultivo, grado de incidencia inicial.

La susceptibilidad al ataque aparenta estar relacionada a la altitud sobre el nivel del mar
a la que se encuentran las plantaciones y las condiciones de la zona yuquera. Cuando
el gusano cachón ataca y desarrolla una población alta, llega a defoliar totalmente el
cultivo; en consecuencia, hay un descenso considerable en el rendimiento de raíces de
yuca (entre el 18% y el 64% de lo normal).
 Figura 5. Daño al cultivo de yuca Puerto Carmen.

2.8. Causas de la aparición de altas poblaciones de larvas

Según el CIAT (1989), una población de larvas capaz de causar daños severos a
plantaciones de yuca puede aparecer por alguna de las siguientes causas:

1. La alta movilidad del adulto. Como las mariposas son capaces de volar grandes
distancias, pueden migrar de una región a otra alterando el equilibrio biológico
existente entre la población de dicha plaga y sus enemigos naturales.
2. Las variaciones marcadas en las condiciones climáticas, especialmente al
comenzar o finalizar los periodos de lluvia cuando la humedad del suelo favorece
la emergencia de adultos de las pupas.
3. El uso indiscriminado de insecticidas para combatir otras plagas, lo cual puede
provocar una disminución en la población de los enemigos naturales del gusano
cachón permitiendo por consiguiente, que una mayor cantidad de huevos
continúe su ciclo normal y de origen a una alta población de larvas.

Es necesario por tanto, controlar la plaga para evitar el deterioro del cultivo y las
pérdidas de la cosecha.
 1) Alta población de larvas, Puerto Carmen. 2) Cultivo defoliado, Agua Dulce.

Figura 6. Aglomeración de larvas.

2.9. Componente de control de la plaga a corto y mediano plazo

Para lograr la aplicación adecuada de estrategias de control de E. ello a corto y

mediano plazo se debe considerar inicialmente el área de producción, así como el
grado de incidencia y severidad del ataque de la plaga en atención a las normas NIMF
No 26 por la FAO y el enfoque regional. (Guerra, 2010).

2.10. Las Plantas Hospederas

Si bien las plantas hospederas que son atacadas con mayor agresividad por Erinnyis
ello son el papayo (Carica papaya) y la yuca (Manihot esculenta), se conocen además,
como 30 especies de plantas hospederas. Diversos autores citan únicamente los
géneros como hospederas de Erinnyis ello y en algunos casos las especies, todas ellas
se encuentran en Bolivia.
De la familia Caricaceae se conocen 35 especies (Kyndt et. al. 2005), de las cuales dos
que se cultivan Carica papaya y Vasconcellea cundinamarcensis, ambas se encuentran
en Bolivia y al menos 10 especies más de la familia.
De la familia Euphorbiaceae, el género Conidoscolus, en Bolivia se conocen al menos
cuatro especies entre ellas C. beckii y C. tubulusus (Fernández, 2005). Otro género
presente es Euphorbia, con al menos 5 especies entre ellas, E. boliviana y E.
heterophylla. Del género Manihot se han reportado para Bolivia 17 especies entre ellas
Manihot esculenta, 7 de ellas con identidad no definida (según Mendoza en: MMAyA
2009). La Poinsettia (Euphorbia pulcherrima), también se encuentra en Bolivia y es
conocida como corona del inca, papagayo y estrella del oriente.
Sapium thelocarpum, se distribuye desde México hasta Bolivia y Uruguay, en el bosque
secundario por debajo de los 1000 m de altitud (Carpio et. al. 2003). El género
Sebastiania, presente en Bolivia con varias especies, aparentemente la especie S.
confusa, se limita a Norte y Centro América. El árbol de la goma o siringa (Hebea
brasiliensis), se encuentra en Bolivia en la región amazónica hasta los 1000 m.
Por último la familia Sapotaceae, con la especie Manilkara chicle, es una especie
originaria de México hasta Costa Rica, pero actualmente se ha introducido
prácticamente en todos los países tropicales del mundo, en nuestro medio es conocido
como “níspero” y se encuentra desde los 2000 mts. Hasta la Amazonía.
Así, la sobrevivencia de Erinnyis ello en la vida silvestre está asegurada, ya que las
especies que citamos son plantas hospederas de la especie plaga tanto en la vida
silvestre como en el medio cultivado. Por esta razón el manejo integro y permanente de
la especie Erinnyis es fundamental. (Guerra, 2010).

1) Cultivo de yuca, Puerto Carmen Área VII. 2) Cultivo de papaya, Chayanta II Área V.

Figura 7. Plantas hospederas.

CIAT (1989), indica que investigadores han reportado que el género Erinnyis ataca
solamente plantas que producen látex, el cual parece actuar como estimulante de
reconocimiento del hospedero. Aunque este género es extremadamente polífago, es
posible que Erinnyis ello pueda completar su desarrollo solamente sobre familias que
producen látex.
2.11. Control del Erinnyis ello

Un buen control de las poblaciones hospederas de Erinnyis ello se logra con un

programa adecuado de manejo integrado, que implica la aplicación oportuna de
diversos métodos de control como: medidas preventivas, control cultural, control
etológico, control mecánico, control biológico y químico (Gonzales, 2005).

El gusano cachón puede manejarse empleando varios métodos, entre ellos el control
biológico que es el más importante por que no contamina el ambiente y es muy efectivo.
En este caso aplicaremos este control.

2.12. Control biológico

En control biológico existen varios insectos, parásitos, predadores, bacterias, hongos y

virus que hacen posible el control del Erinnyis ello, sin necesidad de recurrir a las
aplicaciones de insecticidas, que rompan el equilibrio que debe existir entre este y sus
enemigos naturales. (Herrera, 1999).

Según Arias y Belloti (1977), indican que a pesar que el control biológico del gusano
cachón es ejercido por numerosas especies de organismos vivos, las explosiones de
esta plaga ocurren en casi todas las zonas yuqueras de América. En algunas
explosiones se presentan frecuentemente (casi todos los años) y en otras pueden
transcurrir entre 3 y 7 años para que ocurran.

CIAT (1989), indica que los intentos de controlar plagas por medios biológicos han
resultado exitosos en algunos cultivos y específicamente para algunas plagas, aun
cuando todavía existen muchos problemas que no pueden ser solucionados por este
tipo de control. Debido a la importancia que ha adquirido y su papel estratégico en el
control integrado de plagas, especialmente del gusano cachón este método se tratara
en detalle.
Cuadro 4. Principales controladores de Erinnyis ello.

Plaga Parásitos Predadores Patógenos

Gusano cachón de la yuca
(Erinnyis ello) Trichogramma sp. (H)ª Chrysopa sp. (H) Bacillus
thuringiensis (L)
Telenomus sp. (H) Podisus negrispinus Baculovirus de
(L) Erinnyis ello (L)
Sphingis sp. (H) P. obscurus (L) Metarhizium
anisopliae (L)
Cotesia americana (L) Polistes cannadensis Beauveria
(L) bassiana (L)
Euplectrus sp. (L) P. carnifex (L) Paecilomyces sp.
(L)
Apanteles flaviventris P. erythrocephalus Nomuraea rileyi
(L) (L) (L)
Drino sp. (L) P. versicolor (L) Cordiceps sp. (P)
Fuente: CIAT, 2001. H = huevo; L = larva; P = pupa

Según el CIAT 1989, Existen varias especies de microhymenópteros de las familias

Trichogramatidiae, Scelionidae y Encyrtidae que parasitan huevos de E. ello, tales
como Trichogramma minutim, Telenomus sphingis, T.dilophonotae, Ooencyrtus sp. Y
O.submetalicus .Algunas especies de Trichogramma y Telenomus se han reportado
parasitando 94% a 99% de los huevos (Belloti y Schoonhoven, 1978).

Entre los dípteros parasitoides, las moscas Tachinidae, y entre los himenópteros, las
avispas Braconidae, especialmente del género Cotesia (Belloti et al., 1992; 1994).

El predador más común es Chrysoperla spp. Otros predadores importantes de larvas

incluyen Polistes spp. (Hymenoptera: Vespidae), Podisus spp. (Hymenoptera:
Pentatomidae) y varias especies de arañas (Belloti et al., 1992.)

Las fases de control son los huevos y larvas. Los principales enemigos de la plaga la
atacan en alguno de estos dos estados bien sea depredándola o parasitandola, entre
los que se destacan son: la bacteria Bacillus thuringiensis, el hongo entomopatógeno
Beauveria bassiana, Baculovirus de Erinnyis ello (CIAT, 2001).
La clave para un uso efectivo de agentes de control biológico es la habilidad para
sincronizar la liberación de un gran número de predadores o parásitos durante estadíos
tempranos, preferiblemente en estado de huevo o en primer a tercer instar larval. La
eficiencia de parásitos y predadores esta limitada por una pobre respuesta funcional
durante una explosión del gusano cachón, las cuales son de corta duración de 15 días
(Herrera, 1999).

2.12.1 Control con Entomopatógenos

Los entomopatógenos son aquellos microorganismos (bacterias, hongos, nemátodos y

los virus) que son capaces de matar insectos. Estos organismos entonces, fueron
desplazados debido a la falta de interacción entre el patógeno, su huésped y el medio
ambiente; el interés hacia esta área se renovó a medida que se fueron demostrando los
efectos negativos que tienen los insecticidas sintéticos en la salud de las personas y en
la calidad del entorno (Jiménez et. al. 1980).

Algunas ventajas de los entomopatógenos son:

1. Especificidad: Infectan solo una especie o un grupo de especies muy relacionadas,

sin afectar especies que no son plaga ni a los enemigos naturales.

2. Persistencia: Si el entomopatógeno encuentra las condiciones adecuadas para

infectar a su hospedero, se reproduce y renueva en forma continúa haciendo
innecesarias nuevas aplicaciones.

3. Compatibilidad: Se puede aplicar combinaciones de entomopatógeno con dosis

subletales de insecticidas para lograr efectos superiores a los logrados con aplicaciones
por separado por cada producto.

4. Inocuidad ambiental: No contaminan el medio ambiente ni afectan al hombre y otros

animales superiores.

Algunas de las desventajas que han limitado el desarrollo de esta técnica son:
1. Factores ambientales: Son sensibles a temperaturas extremas, desecación y luz
ultravioleta. Estas limitantes están siendo contrarrestadas con aditivos (antidesecantes,
aceites, protectores solares etc.).

2. Almacenamiento: Requieren de condiciones más exigentes que las moléculas

inorgánicas, se han reportado periodos de almacenamiento de 7 años, conservando su
viabilidad y capacidad infectiva.

3. Menor velocidad de acción: En general, los entomopatógenos no matan

instantáneamente. Alcanzan buenos niveles de control entre una y tres semanas,
después de la aplicación dependiendo de la plaga y el ambiente.

Dentro de estos tipos de entomopatógenos nos referimos especialmente a la bacteria

Bacillus thuringiensis y al hongo Beauveria bassiana.

2.12.2 Bacteria Bacillus thuringiensis

Bacillus thuringiensis es el insecticida biológico más aplicado en el mundo y se utiliza

para controlar diversos insectos que afectan la agricultura, la actividad forestal y que
transmiten patógenos humanos y animales. B. thuringiensis constituyo durante las
últimas décadas un tema de investigación intensiva. (Fernández & Ortega, 2002).

La principal diferencia entre B. thuringiensis y otros bacilos es que durante el proceso

de esporulación se forma uno o más cuerpos cristalinos de naturaleza proteica
adyacentes a la espora. Algunos de estos cristales parasporales son tóxicos para
ciertas especies de insectos. (Iriarte y Caballero, 2001).

Descubierto en 1901 por el japonés Ishiwata y redescubierto diez años mas tarde por
el científico Berliner en Thuringuia, Alemania al cual denominó Bacillus thuringiensis
(Bt). Las cepas de B. thuringiensis constituyen la materia activa de distintos formulados
comerciales que, en su conjunto, representan más del 90% de los bioinsecticidas
actualmente comercializados (Caballero y Ferré, 2001).

Los insecticidas derivados de esta bacteria constituye el ejemplo más importante de

este tipo de productos y ocupan la mayor parte del consumo mundial de bioinsecticidas,
estos productos se han utilizado comercialmente por más de 35 años y han sido
aceptados como productos biodegradables y seguros para los vertebrados y el
ambiente (Fernández & Ortega, 2002). Sin embargo, la posibilidad de producir y aplicar
productos bacterianos a gran escala fue posible hasta después de la Segunda Guerra
Mundial, cuando se produjo en Francia el primer producto comercial a partir del Bacillus
thuringiensis llamado Sporiene en 1948. (CATIE, 2002).

Figura 8. Vista microscópica de las endotoxinas cristalíferas de Bacillus thuringiensis.

2.12.2.1 Clasificación Taxonómica

Según Woese (1987), es la siguiente:

Nombre comercial: Dipel, Biobat, Thuricide, Biotrol.

Reino : Eubacteria

División : Gram positivas

Clase : Firmicutes

Orden : Eubacteriales

Familia : Bacillaceae

Género : Bacillus

Especie : Bacillus thuringiensis

Variedad : Kurstaki
Presenta células vegetativas en forma de bastoncillos más o menos largos, agrupados
en cadenas de 2 a 3 células. Son Gram positivas, aeróbicas y esporógenas, durante su
cultivo y asociadas a la formación de esporas, se forman cuerpos parasporales en
forma de cristales que tienen efecto insecticida y se conocen como delta endotoxinas.
(Fernández & Ortega, 2002).

2.12.2.2 Toxinas de Bacillus thuringiensis

Fernández & Ortega (2002), menciona a tres exotoxinas y una endotoxina, esta última
es la principal responsable del efecto insecticida. Existen diferentes tipos de delta
endotoxinas y, cada una de ellas se asocia a un grupo determinado de insectos. Sus
pesos moleculares varían entre 72 y 135 kDa y su composición es proteínica, por lo
cual se desnaturalizan por el calor y son solubles en condiciones alcalinas.

Las delta endotoxinas se producen en forma de cuerpos de inclusión o cristales

parasporales y forman una familia de proteínas cuyos miembros pueden ser tóxicos,
contra diversos invertebrados: insectos, nemátodos, ácaros, platelmintos y protozoos
(Soberón y Bravo, 2003?).

2.12.2.3 Clasificación de las endotoxinas

Según (Fernández & Ortega, 2002), están basados en cinco grupos fundamentales:

 Cry I Lepidópteros

 Cry II Lepidópteros y Dípteros

 Cry III Coleópteros

 Cry IV Dípteros

 Cry V Lepidópteros y Coleópteros

En 1989, Hofe y Whiteley propusieron una nomenclatura y clasificación de las proteínas

Cry basados en la similitud de su secuencia de aminoácidos y el rango de especificidad.
En esos años, las proteínas Cry I, Cry II, Cry III y Cry IV eran las específicas contra
lepidópteros, lepidópteros – dípteros, coleópteros y dípteros respectivamente.
Las clases V y VI, activas contra nemátodos, fueron consideradas posteriormente en la
clasificación por Feitelson en 1992.

2.12.2.4 Modo de acción de Bacillus thuringiensis en larvas de lepidópteros

B. thuringiensis es un insecticida que actúa por ingestión, su actividad tóxica radica en

el cristal parasporal que la bacteria sintetiza en el momento de la esporulación, el cual
está compuesto por proteínas llamadas proteínas cristalinas o d-endotoxinas
(Caballero y Ferré, 2001).
Una vez que las toxinas han sido activadas en el intestino del insecto se unen
específicamente a receptores de membrana de naturaleza glicoproteica, situados en las
células columnares del epitelio del intestino medio de los insectos (Iriarte y Caballero,
2001) donde los sistemas enzimáticos (proteasas), favorecidos por las condiciones
altamente alcalinas, transforman la protoxina en toxina verdadera (Lacey, 1985); esto
provoca una hipertrofia y alteración de la integridad de la membrana plasmática con la
consecuente lisis de las células que conforman el tejido epitelial (Margalit, 1989). Tras la
lisis de las células epiteliales, cuyos efectos pueden bastar para matar al insecto, las
esporas contenidas en el intestino pueden acceder a la cavidad hemocélica del insecto
aprovechando las lesiones como puerta de entrada, provocando su multiplicación en la
hemolinfa (Iriarte y Caballero, 2001) y la desintegración completa de la monocapa
epitelial, ruptura de la membrana peritrófica y dispersión del contenido del estómago en
el lumen del insecto (Lahkim-Tsror et. al., 1983).

2.12.2.5 Eficiencia y eficacia de Bacillus thuringiensis

La toxicidad y efectividad insecticida de una cepa bacteriana viene determinada por la

combinación de d-endotoxinas y la proporción relativa de las mismas. En B.
thuringiensis hasta la fecha se han identificado más de 200 proteínas tóxicas diferentes
que ofrecen un valioso recurso natural para su utilización en el control de plagas
(Caballero y Ferré, 2001).

La eficacia potencial del B. thuringiensis depende además de factores ambientales, de

factores intrínsecos de la especie a controlar y de la formulación en la cual se presente
la bacteria. Dentro de los factores ambientales que afectan la eficacia del B.
thuringiensis están la temperatura (Panbangred et al., 1979), la radiación solar (Becker
et al., 1992) y el pH del agua (Margalit 1989). Igualmente, el comportamiento
alimentario de las larvas puede afectar la eficacia potencial del B. thuringiensis.

Una de las desventajas de la incorporación de insecticidas biológicos para el control de

insectos, es la baja persistencia que presentan las formulaciones al ser evaluadas en el
campo, probablemente debido a una alta tasa de sedimentación de las partículas
tóxicas.

2.12.2.6 Lepidópteros susceptibles a Bacillus thuringiensis

Muchos grupos taxonómicos de invertebrados son susceptibles a la acción tóxica del

cristal de B. thuringiensis. Dentro del orden Lepidóptera, encontramos especies
susceptibles en la mayor parte de sus familias, destacando por su interés agronómico a
Cossidae, Gelechiidae, Lymantriidae, Noctuidae, Sphingidae, Pieridae, Pyralidae,
Tortricidae, entre otros (Krieg y Langenbruch, 1981).

2.12.2.7 Sintomatología de Bacillus thuringiensis en larvas de lepidópteros

En larvas de lepidópteros, los síntomas iniciales del proceso tóxico vienen marcados
por la parálisis muscular de todo el intestino, por lo que el insecto deja de alimentarse.
A continuación, el pH y el contenido de K+ de la hemolinfa aumentan rápidamente y la
larva ralentiza sus movimientos. Comienza entonces un proceso de vómitos, diarrea y
seguidamente la parálisis se vuelve general. Desaparecen los movimientos reflejos y la
larva muere tras cesar los latidos cardiacos, apareciendo una serie de manchas más
oscuras en el tegumento (Nishitsutsuji-Uwo y Endo, 1980). Si la cantidad de protoxina
no es letal, la larva supera el síndrome de parálisis intestinal inicial y se recupera
(Dulmage y Martínez, 1973).

Las larvas enfermas pasan siempre por el mismo cuadro de síntomas que inicialmente
consiste en la pérdida del apetito, suspensión de la alimentación, regurgitación y
diarrea; en una segunda etapa, el integumento aunque continúe intacto adquiere una
coloración más seca, luego marrón oscuro y al final totalmente negra.
Las larvas muertas por este patógeno se caracterizan por su aspecto negro – seco
como carbonizado (Madrigal, 2001).

2.12.2.8 Resistencia del insecto por parte del Bacillus thuringiensis

La habilidad de los insectos para sobreponerse y adaptarse al estrés ambiental hace

que los métodos de control se vuelvan ineficientes, como sucede con el uso excesivo
de algunos plaguicidas. (CIAT, 2001).

Hasta el momento aparecen pocos informes de resistencia a Bacillus thuringiensis, dos

ejemplos son Plutella xylostella en repollo en Asia y Plodia interpunctella, plaga de
productos almacenados. (Fernández & Ortega, 2002).

La resistencia se explica por vía bioquímica, Fisiológica y de conducta. En el primer

caso, el insecto llegar a metabolizar las toxinas, en el segundo parece existir una
disminución de sensibilidad en los receptores y en el tercero disminuye la habilidad del
insecto para aceptar el insecticida (Fernández & Ortega. 2002; CIAT, 2001).

Ahora se están desarrollando diferentes estrategias para disminuir la posible resistencia

a esta bacteria. Una de las utilizadas es su uso en programas de manejo integrado, otra
de ellas es el uso de productos a partir de diferentes cepas del Bacillus thuringiensis,
con diferentes tipos de delta endotoxinas (Fernández & Ortega, 2002).

2.12.2.9 Cepa Biobat

Según Angulo, (2008) es formulado y producido por la planta de biocontroladores

procedentes del cepario del Laboratorio de Microbiología de la Fundación Proinpa.
Según sus registros dicha cepa fue aislada a partir de muestras de costras de papa
(tejidos internos del tubérculo endurecidos por el daño producido por larvas de
Rhigopsidius tucumanus) procedentes del departamento de Cochabamba.

2.12.2.10 Producción de Bacillus thuringiensis

En biotecnología son utilizados dos tipos de producciones básicas: cultivos superficiales

sobre medios sólidos o semisólidos y producción en medios líquidos superficiales o
sumergidos. (Guzman, 1991).
El mantenimiento y conservación de las cepas seleccionadas es una garantía del éxito
del proceso y del producto final. Para la conservación se emplean diferentes métodos,
entre los más utilizados están la liofilización, suelo estéril, papel de filtro, medio
agarizado, etc. Lo mas importante es evitar los subcultivos continuos, por que se puede
perder la virulencia y podrían aparecer poblaciones cristalíferas (Fernández & Ortega,
2002).

Unos de los aspectos es su producción a escala industrial, la primera etapa el cual es

una de las importantes de este proceso, es la selección y conservación de las cepas de
trabajo, en muchos países ya la desarrolla la bacteria para ampliar su espectro y
aumentar su capacidad insecticida. (Fernández & Ortega, 2002).

Una recomendación importante es agregar un producto adherente a la solución del

bacilo para que impida que la lluvia lave fácilmente el producto aplicado a la planta,
además que deber ser aplicado en las mañanas para poder ver el diagnostico en el día
(CIAT, 2001).

2.12.3 Hongo Beauveria bassiana

Los hongos entomopatógenos causan la muerte rápida del hospedero por penetración y
proliferación dentro del cuerpo de este. Es importante destacar que no todos los hongos
asociados con insectos son patógenos: aunque hay patógenos obligados, la mayoría
son facultativos, hay también hongos saprófitos y otros simbiontes (Ferrón, 1985). Los
investigadores de los hongos entomopatógenos han realizado trabajos que marcan una
ruta aparentemente lógica para demostrar la virulencia o patogenicidad de estos
hongos en diferentes insectos (Sánchez, 1996).

Beauveria bassiana es un hongo de amplia distribución en la naturaleza, donde a sido

aislada del suelo, asociado con restos de insectos. Sus condiciones de crecimiento son
poco exigentes (Bioagro, 2010).

Su especificidad y su alta capacidad de reducir los números de sus hospederos han

hecho que exista desde hace muchos años, un gran interés a nivel mundial por manejar
a estos microbios como agentes de control biológico de insectos en la agricultura,
Además numerosos estudios confirman que la Beauveria bassiana es un agente de
control altamente específico que únicamente afecta insectos.

No tiene efecto alguno sobre el hombre, plantas, animales domésticos ni ganado.

Asimismo, su efecto sobre abejas domesticas no es significativo, por los mecanismos
de defensa que presentan contra este tipo de microorganismos (Bioworks, 2006).

Figura 9. Beauveria bassiana en proceso de multiplicación en laboratorio de Bioquímica.

2.12.3.1 Clasificación taxonómica

Según Bioworks (2006), cuya taxonomía puede resumirse en lo siguiente:

Nombre comercial: Botanigard.

Reino : Fungi

División : Mycota

Clase : Deuteromycetes

Orden : Moniliales

Familia : Moniliaceae

Género : Beauveria

Especie : Beauveria bassiana (Bálsamo) Vuillemin

Es un hongo imperfecto, caracterizado por la formación de micelio septado con
producción de conidios de aproximadamente 0.5 a 0.8 micras de diámetro y formas de
reproducción asexual, en conidióforos que nacen a partir de hifas ramificadas.

2.12.3.2 Características generales

Las especies de Beauveria bassiana causan enfermedades en insectos conocidas

como muscardinas blancas. El género se caracteriza por presentar un micelio blanco,
conidióforos sencillos, irregularmente agrupados o en grupos verticilados, en algunas
especies hinchados en la base y adelgazándose hacia la porción que sostiene la
conidia, la cual presenta forma en zig – zag después de que varias se producen; las
conidias son hialinas, redondeadas a ovoides, unicelulares y naciendo en pequeños
esterigmas (Bioagro, 2010).

2.12.3.3 Propiedades biológicas

Las esporas del hongo se sedimentan después de algunas horas en reposo, por lo que
se requiere agitar bien el recipiente antes de usarse, no presenta polimerización. En la
naturaleza este hongo se encuentra parasitando a gran número de especies de
insectos, especialmente en los ordenes Coleóptera, Himenóptera, Lepidóptera,
Homóptera, Ortóptera y otros (Bioworks, 2010).

2.12.3.4 Mecanismos de acción

Las esporas de Beauveria bassiana en el modo de acción puede estar dividido en tres
fases (1) adhesión y germinación de la espora en la cutícula del insecto, (2) penetración
en el hemocele y (3) desarrollo del hongo.

Lo cual generalmente resulta en la muerte del insecto. El periodo requerido para matar
es variable, dependiendo de la cantidad de esporas que se depositen sobre el mismo,
temperatura, especie, tamaño y edad del insecto, pero en la mayoría de las
condiciones, la muerte ocurre en aproximadamente 72 horas (Bioworks, 2010).
2.12.3.4.1 Adhesión de la espora a la cutícula del hospedero

El primer contacto que hace la espora con la superficie del hospedero es por la cutícula.
Las características físicas y químicas de las superficies de la cutícula del insecto y la
espora son las responsables de esta unión; en algunos hongos la adhesión es un
fenómeno no específico, mientras en otros esto es un proceso especifico para las
esporas (Tanada y Kaya, 1993).

2.12.3.4.2 Germinación de la espora

Se entiende por geminación el proceso mediante el cual una espora emite uno o varios
pequeños tubos germinales, los cuales por crecimiento y alargamiento dan origen a las
hifas (Volcy y Pardo, 1994).

La germinación de las esporas en gran parte depende de la humedad ambiental y

temperatura y en menor grado de las condiciones nutricionales y de luz. El nivel de
agua determina el crecimiento de los hongos y pequeñas diferencias en el nivel de
humedad relativa, después de la aplicación de conidios se puede determinar de un
modo u otro el éxito del hongo en el control de insectos plaga (Guillespie, 1988).

El resultado de la germinación del hongo y la penetración no depende necesariamente

del porcentaje total de germinación sino del tiempo de duración de la germinación,
modo de germinación, agresividad del hongo, el tipo de espora y la susceptibilidad del
hospedero (Samson et al., 1988).

2.12.3.4.3 Penetración a la cutícula

La fuerza mecánica es notable en el extremo de una hifa invasiva donde la capa

cuticular es deformada por presión (Tanada y Kaya, 1993). Se produce un tubo
germinativo y un apresorio, con este se fija en la cutícula (hifa de penetración) se da la
penetración al interior del cuerpo del insecto.

En la penetración participa un mecanismo físico y uno químico, el primero consiste en la

presión ejercida por la estructura de penetración, la cual rompe las áreas esclerosadas
y membranosas de la cutícula.
El mecanismo químico consiste en la acción enzimática, principalmente proteasas,
lipasas y quitinasas, las cuales causan degradación del tejido en la zona de
penetración, lo que facilita la penetración física (Monzón, 2001).

La penetración de hifas al cuerpo del hospedero (Erinnyis ello) dura de 3 a 4 días, la

penetración del hongo al hospedero ocurre a través de la cutícula o por vía oral.

Cuando la penetración se da por la cutícula intervienen lipasas, quitinasas y proteasas;

el tubo germinativo de la conidia invade directamente, produciendo apresorios que
penetran la epicutícula, dando lugar a cuerpos hifales, los cuales se desarrollan en el
hemocele y circulan en la hemolinfa (CIAT, 1989).

2.12.3.4.4 Replicación en el hemocele del insecto plaga

Después de llegar al hemocele, la mayoría de los hongos convierten el crecimiento

micelial en una fase de lavadura o sea crecimiento por gemación. Se producen toxinas
y enzimas, aunque algunos hongos aparentemente no poseen toxinas, matan al insecto
al consumir todos los nutrientes o por física destrucción (Bustillo, 2001).

Posterior al crecimiento del hongo en el hemocele, la micosis induce a sistemas

fisiológicos anormales en el insecto tales como convulsiones, carencia de coordinación
y comportamientos alterados. Ocurre una competencia entre el hongo y la flora
intestinal, en la mayoría de los casos los hongos producen sustancias antibacteriales y
cambio de color del cadáver (Ferrón, 1978).

Después de muerto el insecto, si la disponibilidad de agua es alta los hongos emergen

al exterior a través de la cutícula y esporulan sobre el cadáver produciendo inoculo para
infectar a otros insectos, si las condiciones no son favorables, queda dentro el cadáver
del insecto, donde puede sobrevivir por algunos meses y eventualmente producirá
esporas cuando lleguen las condiciones favorables.

La esporulación ocurre generalmente en cadáveres pero puede también ocurrir en

insectos vivos; la Beauveria bassiana produce metabolitos tóxicos como son:
Beauvericin, Beauveriloides, Bassianolide, Isarolide, Enniatinas y Oosporeina (Tanada y
Kaya, 1993).
2.12.3.4.5 Dispersión de las esporas

La dispersión de la espora puede ser un proceso activo o pasivo y depende de las

características de la espora y el esporangio. Cada conidia puede adherirse o pasar de
un invertebrado a otro por dispersión (Fletcher, 1977; Inglod, 1978 citado por Tanada y
Kaya 1993).

El micelio del hongo se observa primero en las articulaciones y partes blandas de los
insectos y en días posteriores se incrementa a todo el cuerpo hasta finalmente cubrirlo,
tras la muerte del insecto y bajo unas condiciones de humedad relativa alta las
conidiosporas pueden extenderse a través del cuerpo cubriéndolo con material fungoso
característico.

2.12.3.5 Mecanismo de defensa contra los hongos entomopatógenos

Las barreras estructurales constituyen la defensa primaria de los insectos contra los
patógenos y endoparásitos. Las principales barreras son el rígido exoesqueleto
(cutícula) y la membrana peritrófica (Borror et al., 1981) que rodea el bolo alimenticio y
protege a las paredes del epitelio intestinal. Los microorganismos que atraviesan estas
estructuras y llegan hasta el hemocele deben de superar las defensas activas
secundarias como la fagocitosis, encapsulación y melanización, además de la actividad
de la enzima lisozima que hidroliza las paredes de las bacterias y de proteínas
antibacterianas bloquean el crecimiento de bacterias y hongos (Kuno et al., 1981).

2.12.3.6 Aislamiento del hongo Beauveria bassiana

Jiménez y Gómez (1992), señalan que estudios ya realizados comprobaron que la

primera etapa para el desarrollo de cualquier hongo entomopatógeno como insecticida,
es la selección de aislamiento altamente patogénicos y virulentos para el insecto que se
quiere controlar, para lograrlo es necesario diseñar un sistema de bioensayos
apropiados.
2.12.3.7 Producción masiva de hongos entomopatógenos

La producción de hongos entomopatógenos se basa en la multiplicación masiva del

hongo y sus estructuras reproductivas en un sustrato (Monzón, 2001).

Tovar (1999), dice que el proceso inicial de producción de un micro plaguicida se inicia
con la colecta de aislamientos fungosos y la posterior selección de estos, en virtud de
los ensayos de virulencia sobre los insectos que se desea controlar y otros parámetros
deseados.

2.13. Patogenicidad

La patogenicidad, es una habilidad cualitativa del patógeno para causar enfermedad

determinada por factores relacionados con el huésped, la fisiología de los
microorganismos y el medio ambiente (Shapiro et al. 2005).

Alves (1996), define patogenicidad a la capacidad de un microorganismo patógeno a

provocar enfermedad en términos de virulencia y agresividad sobre insectos e
individuos; refiriéndose a la virulencia como la capacidad de vencer resistencia
especifica del hospedero conocido como resistencia vertical y la agresividad afectando
la resistencia horizontal del hospedero.

Según Gonzales et al. (1993), la patogenicidad determina si el patógeno ataca a la

plaga a la cual esta dirigida, sin embargo no asegura la efectividad bajo condiciones de
campo a diferencia de las condiciones de laboratorio.

2.14. Virulencia

Por otro lado Thomas et al. (2004) y Shapiro – llan et al. (2005), Mencionan que la
virulencia es la capacidad de producir enfermedad en términos de grado o velocidad de
daño en el insecto, es una característica esencial para todo microorganismo si se quiere
utilizar en estrategias a corto plazo, lo cual le permite tener una capacidad para matar
más rápidamente y reducir los daños al cultivo, ya que tendrá la capacidad de reducir la
población del insecto plaga por debajo del umbral económico de daño.
III. LOCALIZACIÓN

3.1. Ubicación Geográfica del trabajo de campo

El presente trabajo de investigación se llevo a cabo en el municipio de Palos Blancos

(Alto Beni) Área VII Central de Puerto Carmen - Provincia Sud Yungas del
Departamento de La Paz se encuentra al Noreste de la ciudad de La Paz a 254 Km, sus
altitudes se oscilan entre 586 y 1552 m.s.n.m. y latitud Sud 15º 00´a 16º 49´ longitud
Oeste 67º 34´a 67º 06´ tiene una precipitación promedio anual de 1600 – 2000mm
(COSUDE/ MDSP/ INE, 1999).

Camino a Sapecho Camino a Inicua RIO ALTO BENI

El Playón
Camino a S. M. de Huachi

Puerto Carmen

Camino a San Antonio,

Puerto Carmen RIO BOOPI

1) Municipio de Palos Blancos 2) Puerto Carmen, Área VII

Figura 10. Imagen satelital del municipio de Palos Blancos y la central de Puerto Carmen.

3.2. Ubicación del trabajo de Laboratorio

El trabajo de investigación se efectuó en el laboratorio del INIAF Regional La Paz, la

cual se ubica en la Avenida Busch Nº 1370, Edificio Monterrey, planta baja en Oficinas
3 y 4 en la zona de Miraflores.
3.3. Descripción del Municipio

El municipio de Palos Blancos, es la cuarta sección de la provincia Sud Yungas con una
población 16.691 (censo 2001) en su mayoría son colonizadores provenientes de la
región alto andina (aimaras y quechuas) y en una menor proporción se encuentran
habitantes de los llanos de Bolivia, y tiene un grupo Étnico como los Mosetenes. Se
encuentra a 254 km de la ciudad de La Paz. Perteneciente a la circunscripción 20, Las
principales actividades económicas de la población son las labores agrícolas, crianza
de ganado mayor y menor y la explotación de madera; en el Alto Beni los cultivos que
más se producen son el cacao, luego el arroz, seguidos de plátano, banano, papaya y
yuca.

Disponible (http://www.raicesmilenarias.com/?p=513-palos)

3.4. Características climáticas

El clima en Palos Blancos de la Provincia Sud Yungas esta en relación directa con la
latitud sobre el nivel del mar. La misma que en promedio alcanza los 1600 metros, el
clima es cálido y húmedo que oscilan entre 24.5ºC, 82% de humedad relativa anual y
una velocidad de viento promedio de 8km/hora, con una dirección de SE predominante
y con amplias variaciones estacionales. (Morales, 1990).

La precipitación anual promedio varia desde 1300mm en el valle (estación de Covendo,

15º47´, altitud 560 m.) hasta casi 2000mm en las colinas altas (estación Entre Ríos,
15º39´ altitud 1000 m.) en Sapecho (15º32´ altitud 450 m.). Centro del área de acción la
precipitación anual es de 1580 mm. El periodo lluvioso ocurre entre noviembre y marzo,
seguido de un periodo de transición, con lluvias ocasionales entre abril y junio y un
fuerte periodo seco entre julio y octubre (Morales, 1990; Elbers, 1991).

La temperatura anual promedio es de 26º C, pero las mínimas absolutas pueden bajar
hasta 11º C en los meses de junio y agosto, épocas del frío, la temperatura mensual
promedio varia entre 16º C (junio y agosto) y 26º C (enero a marzo, época de verano).
La humedad relativa promedio anual varía entre 70 – 80%, mínima en septiembre y
máxima en mayo. El brillo solar es de 4,7 horas día-1 (Morales, 1990).
3.5. Ecosistema

Según Ibisch (2003), la situación latitudinal y los parámetros primarios de clasificación

de zonas de vida del Alto Beni, indican que los ecosistemas pertenecen a la región
latitudinal subtropical.

3.6. Clasificación de la zona

La región de Alto Beni contiene tres zonas de vida: (1) Bosque húmedo subtropical
(Sapecho), (2) Bosque húmedo subtropical transición a seco (Covendo) y (3) Bosque
muy húmedo subtropical (Entre Ríos), (Elbers, 1991; Ibisch, 2003).

3.7. Geología y geomorfología

La región de Alto Beni corresponde a la formación terciaria clasificada como Formación

Huachi (Terciario Subandino) y Cretácico. Presenta serranías paralelas (anticlinales) y
valles amplios (sinclinales), los cuales están formados por sedimentos cretácicos y
terciarios litológicamente corresponden a bancos de areniscas, algunos con creaciones
calcáreas, lutitas y conglomerados (Elbers, 1991; 1994).

3.8. Suelos

Los suelos se derivan de areniscas calcáreas del terciario, pertenecen mayormente a

los ordenes: Alfisoles, Inceptisoles y Entisoles y forman dos grupos de fertilidad: 1)
Acrisoles háplicos y Cambisoles dístricos, poco fértiles, franco arenosos, muy ácidos,
pobres en nutrientes, con baja de CIC y baja saturación de bases; y 2) Cambisoles
crómicos y Lixioles háplicos de buena fertilidad, con textura más fina (de franco a franco
– arcillosa), moderadamente ácidos, con mayor CIC y baja saturación de bases (Elbers,
1991; 1994).

Las características de los suelos varían dependiendo de su posición en el paisaje. En la

terraza reciente, a orillas de los ríos Alto Beni e Inicua, los suelos (Entisoles) son
aluviales, están sujetos a inundaciones frecuentes y tienen una topografía casi plana,
algunas veces con depresiones mal drenadas, profundos con varias capas de diferente
textura, color y espesor franco arenoso, débil estructura en bloques y en buenas
condiciones físicas. La fertilidad natural varía de moderada a baja, pero el constante
apoyo de sedimentos mantiene estable el contenido de nutrientes, la terraza
subreciente se ubica en una posición más elevada que la llanura reciente, no hay
riesgos de inundación, terrenos planos con pequeñas áreas depresivas y mal drenadas.

Según Elbers (1991; 1994), los suelos son profundos, moderadamente bien drenados,
texturas (superficial y subsuelo) franco arcillo limosa, permeabilidad moderada,
ligeramente ácidos y fertilidad moderada alta. En la terraza antigua los terrenos son casi
planos, bien drenados, sin riesgos de inundación; los suelos son de textura franco a
franco limoso hasta 35 cm de profundidad, permeabilidad moderada lenta y
escurrimiento superficial, la fertilidad natural varía de media a baja el contenido de
materia orgánica es medio y ligeramente ácidos.

En el pie de monte (colinas bajas) las pendientes varían entre el 2 y 60%, los suelos
son moderadamente bien drenados, sin peligro de inundación; se originan de areniscas
calcáreas, son profundos; la textura superficial (30 cm) varía de franco a franco
arcilloso, coloración pardo oscuro, excepcional rojizo oscuro. El contenido de arcilla
aumenta con la profundidad (franco limoso a franco arcilloso), la permeabilidad es
moderada y el escurrimiento superficial varía de moderadamente rápido. (Elbers, 1991;
1994).

El pH es neutro a ligeramente alcalino y la fertilidad natural es moderada o baja. En las

colinas altas las pendientes varían entre 8 y 50%, los suelos son profundos, textura
superficial franco o franco arenosa de color pardo oscuro a pardo amarillento, subsuelo
franco arcillo arenoso, permeabilidad moderada a lenta rápido a rápido, el pH varía
desde ligeramente ácido a ligeramente alcalino y la fertilidad natural varía de moderada
a muy baja (Elbers, 1991; 1994).

Según el Servicio Agrícola Interamericano (Arce, 1965), limitándose a un

reconocimiento detallado de la capacidad agrícola de los suelos en la parte baja del
valle, más del 50% del área fue clasificada como CLASE I, es decir prácticamente sin
ningún tipo de restricción para la agricultura. Por las características especiales de los
suelos estudiados, estos son de origen aluvial y coluvial.
Según Arce (1965) y Morales (1991), el paisaje del Alto Beni esta compuesto por valles
aluviales (terrazas reciente, subreciente y antigua), pie de monte (colinas bajas) y
colinas que ascienden hasta los 1600 m. los valles se extienden en ambas márgenes
del río Beni (350 – 500 m altitud) y tienen una topografía plana a levemente ondulada,
la agricultura tiene lugar en el valle y en el pie de monte hasta los 900 m. el resto es
bosque con fuertes pendientes y no se cultiva.

3.9. Vegetación

Biogeográficamente Ellenberg (1981), clasifica a la vegetación como selva húmeda

montañosa, Bosque Húmedo Subtropical y Beck (en Morales, 1990), como Bosque
Húmedo Subandino.

La vegetación natural de las partes bajas, donde se encuentra la producción de cacao,

es un bosque alto (30 – 40m), denso bien estratificado siempre verde. La mayor parte
de los bosques se encuentra en la Reserva Pilón Lajas y cuenta con grandes
volúmenes de maderas valiosas; ya que el bosque ha desaparecido de la mayoría de
comunidades (Ellenberg, 1981; Morales, 1990).

Los bosques aun no alterados, presentan estratos arbóreos superpuestos y una gran
diversidad de especies y epifitas vasculares de las familias Bromeliáceas, Orchidaceae
y Aráceas sobre las copas y troncos de arboles. Están restringidos a lugares alejados
de caminos vecinales, laderas, serranías y cumbres, de difícil acceso. El suelo esta
protegido del sol y las lluvias por la gran cantidad de vegetales y la hojarasca que se
encuentra en el bosque (CUMAT/ COTESU, 1985).
IV. MATERIALES Y METODOS

4.1. Materiales

4.1.1. Material vegetal

 Plantaciones de yuca (Manihot esculenta C.)

4.1.2. Material biológico

 Bacillus thuringiensis
 Beauveria bassiana

Cuadro 5. Material utilizado para el estudio de laboratorio

Atomizador Cámara para la cría de larvas Frascos de laboratorio

Balanza electrónica Termómetro Agua Destilada
Alcohol Libreta de anotaciones Pinzas
Tela microporica 1 jeringa de 10 ml
Fuente: Elaboración Propia

Cuadro 6. Material utilizado para el estudio de campo

Cámara fotográfica Mochila manual 16 lt Frascos de recolección

Libreta de anotaciones Guantes Flexómetro
Planillas Reloj Machete
Regla Plástico Varillas
Pinzas Alcohol Detergente
Marcadores Jeringas de 10 ml
Fuente: Elaboración Propia
4.2. Metodología de Campo

4.2.1. Estudio de campo

En la gestión agrícola del 2010 en la región de Palos Blancos área VII se produjo un
incremento poblacional de Erinnyis ello que ha ocasionado las pérdidas de muchos
cultivos de yuca y papaya, donde se realizo el estudio de campo desde el mes de
marzo se hizo un diagnostico, identificación de la plaga, recolección de especímenes y
determinación del daño producido en la región.

Se hizo varias evaluaciones durante varios meses (de Abril hasta septiembre) en el cual
la plaga desapareció, por factores como la temperatura, radiación solar y la poca
humedad, el 4 octubre hubo un pequeño rebrote del mismo en Inicua Área V
específicamente en Chayanta II, comunidad que cultivan mayormente papaya y cítricos;
el 15 Noviembre se observo una mayor cantidad de huevos y larvas recién nacidas (1er
estadío), en las localidades de Agua Dulce, Puerto Carmen en el Área VII en cultivos de
yuca, estaba empezando a resurgir la plaga.

El 13 diciembre del 2010 se hizo la recolección de huevos y larvas del 1er estadío para
realizar la cría masiva en condiciones de campo estudiando su ciclo biológico del
gusano cachón hasta el estado de adulto.

4.2.2. Parcelas de estudio

Se realizo en la central de Puerto Carmen en el sector del playón cerca al rio Cotakajes
en parcelas de yuca afectadas del Colono Esteban Mariscal, que permitió realizar el
estudio. Donde se aplico las labores culturales propias del cultivo, y en parcelas
abandonadas aledañas al mismo, por las características que presentaba se decidió
hacer un trabajo de deschumado y limpieza, en las tres parcelas de un total de 21
unidades experimentales y siete por parcela, y luego la medición de la unidades
afectadas 5m X 3m cada uno con tres repeticiones, donde se señalo el muestreo de 3
plantas de yuca que fueron objeto de estudio para cada tratamiento.
 1) Unidad experimental 2) Planta con hojas 3) Plantaciones de yuca
en parcela afectada defoliadas en la parcela en el sector del playón

Figura 11. Parcelas afectadas en el sector del playón.

 Recolección de huevos

El 6 de enero se hizo la recolección de huevos en las comunidades de: Agua Dulce,

Cocochi y Puerto Carmen en el Área VII, en envases pett y se trasladaron en cajas de
cartón para realizar la investigación del estudio de campo.

 Nacimiento de larvas y su alimentación

Una vez completado el desarrollo de los huevos estos dieron lugar al nacimiento de
larvas, a las que se les dio de alimento hojas de yuca fresca. Estas fueron criadas en
cautiverio en yucales abandonados en el sector del playón de Puerto Carmen bajo
control.

 Larvas en estudio de campo

Nacieron de los huevos recolectados (en cautiverio) del 1er a 4to estadío. Las parcelas
afectadas con Erinnyis ello tenían 4 a 6 larvas por planta y se aumentaron hasta 17
larvas sumando en el primer bloque de 357 larvas; segundo bloque 16 larvas y 336, el
tercer bloque de 18 y 378 larvas asiendo un total de 1071 larvas en estudio. De 63
plantas tratadas, Luego se coloco un plástico debajo de las plantas para realizar la
contabilización de las larvas muertas.
 1) Toma de datos de la 2) Larva alimentándose 3) Cultivo de yuca en la
planta de yuca en el envés de la hoja central de Agua Dulce

4) Larva del 1er estadío 5) Plantas defoliadas 6) Larva del 5to estadío
sobre hoja de yuca por la plaga defoliando vorazmente

Figura 12. Zona de muestreo, Puerto Carmen - Palos Blancos, Dpto. de La Paz.

4.2.3. Adquisición del Bacillus thuringiensis

El material biológico fue proporcionado por el laboratorio de microbiología de la

fundación PROINPA-BIOTOP, que fue proporcionado por el Ing. Noel Ortuño al INIAF
La Paz. Bacillus thuringiensis comercialmente (Biobat), viene en producto mojable de
medio kilo y líquido de 750 ml con una concentración de 1 x 109 ufc, la preparación de
la mezcla para la aplicación debe ser cuidadosa, con el fin de obtener una buena acción
del producto biológico.

4.2.4. Procedencia del Beauveria bassiana

Las cepas de Beauveria bassiana fueron facilitadas por el Ing. Yuri Zurita Valdivia para
posteriormente realizar la multiplicación en el Laboratorio de Biotecnología de la
Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas asesorados por el Dra. María
Teresa Álvarez y el Dr. Cristian Espinal.
La replicación de este hongo controlador, se realizó a partir del aislado del hongo en las
cajas Petri que se encontraba en fase de muerte, este se replicó en medio papa
dextrosa agar (PDA). Luego se realizó el ajuste de esporas de Beauveria bassiana a
108 esporas/ml, para inocular en medio de arroz.
4.2.5. Multiplicación del hongo en medio de arroz.

Se procedió a pesar 50 gr. de arroz que fue autoclavado a 1.5 atm y 120 ºC por el lapso
de 15 min, posteriormente frío se inoculo una concentración de 108 esporas/mL a 60
gramos de arroz que contenía 60 mL de agua destilada, y se colocó en cámara de
incubación por un lapso de 12 días donde se obtuvo la concentración del hongo 4,5 x
107 esporas/ml.

1) Bacillus thuringiensis y Beauveria 2) Materiales para el trabajo de campo

bassiana

Figura 13. Materiales para el trabajo de campo.

4.2.6. Aplicación de los entomopatógenos

La aplicación de la bacteria y el hongo se realizo el 9 de enero 2011 a las 9 am cuando

ya no hubo escarcha y nos favoreció el día porque estaba nublado, se preparo el
Bacillus thuringiensis 2, 3, 4 gr por litro de agua y Beauveria bassiana 2, 3, 4 ml por litro
de agua del lugar, tomando encuenta la calibración de la mochila a presión constante,
solo se hizo una sola aplicación y sin el uso de productos adherentes que ayuden para
que el producto no se lave de la planta.

4.2.7. Diseño Experimental del trabajo de campo

La evaluación del trabajo de campo se realizo en base al Diseño bloques al azar con
arreglo en Parcelas Divididas, según lo sugerido por Ochoa (2007), donde se tiene:
Factor A: Entomopatógenos

a1: Bacillus thuringiensis

a2: Beauveria bassiana

Factor B: Niveles de dosificación

b1: 2gr de B. thuringiensis x 1lt de agua b1: 2 ml de B. bassiana x 1lt de agua

b2: 3gr de B. thuringiensis x 1lt de agua b2: 3 ml de B. bassiana x 1lt de agua

b3: 4gr de B. thuringiensis x 1lt de agua b3: 4 ml de B. bassiana x 1lt de agua

Modelo lineal aditivo:

Yijk = µ + βk + αi + □aik + ‫ץ‬j + α‫ץ‬ij + □ijk

Donde:

Yijk = una observación cualquiera

µ = media poblacional
βk = efecto del k-ésimo bloque
αi = efecto del i-ésimo entomopatógeno
□aik = error de parcela grande
‫ץ‬j = efecto de la j-ésima dosis
α‫ץ‬ij = efecto del i-ésimo entomopatógeno con la j-ésima dosis (interacción AxB)
□ijk = error de la parcela pequeña

4.2.8. Variables de respuesta de Campo

• Número de larvas muertas después de la aplicación.

Esta variable nos permitió conocer el número de larvas muertas por las diferentes
dosificaciones y se hizo el conteo de larvas por plantas tratadas, donde nos favoreció el
plástico para el conteo de las larvas muertas.
 • Tiempo de acción de los entomopatógenos.

Se evaluó en diferentes dosificaciones y días (24, 48, 72, 96 y 120 horas) en el tiempo
de la deseción de la larva para ver su efecto de los entomopatógenos.

• Estadío de larva al que afecta más los entomopatógenos.

Acá nos permitió conocer los estadíos más susceptibles que actuaron en el control del
gusano Erinnyis ello.

• Efectividad de los entomopatógenos.

Esta variable nos permitió que la bacteria Bacillus thuringiensis y el hongo Beauveria
bassiana, tenga mejor resultado a nuestra investigación tomando en cuenta a las
condiciones ecológicas que predominan.

4.2.9. Dimensiones de la investigación en campo

1) Bloque I 2) Bloque II 3) Bloque III

Figura 14. Dimensiones de los Tratamientos en las plantas de yuca.

4.2.10. Croquis de la investigación (campo)

Bacillus thuringiensis Beauveria bassiana testigo

a1b3 a1b2 a1b1 a2b3 a2b2 a2b1 T

Testigo Beauveria bassiana Bacillus thuringiensis

T a2b3 a2b1 a2b2 a1b1 a1b3 a1b2

Bacillus thuringiensis testigo Beauveria bassiana

a1b3 a1b1 a1b2 T a2b1 a2b3 a2b2

4.3. Metodología de Laboratorio

4.3.1. Estudio de laboratorio

Se realizo el 17 de enero del 2011 en el laboratorio del Instituto Nacional de Innovación

Agropecuaria y Forestal (INIAF) de la ciudad de La Paz, se recolectaron larvas del
gusano defoliador (Erinnyis ello) en sus primeros estadíos larvales en botellas pett;
también se recolectaron hojas de yuca y se coloco en una cámara refrigeración para su
conservación en los días de estudio.

Figura 15. Larvas recolectadas para laboratorio.

  Adaptación de larvas a laboratorio

El acondicionamiento consistió en adaptar las larvas recolectadas de campo a

laboratorio procurando no realizar cambios bruscos respecto a la temperatura y
humedad y alimentación natural, las larvas fueron clasificadas por estadíos (1er, 2do y
3er) posteriormente se colocaron 5 larvas por envase en un total de 105 larvas en 21
frascos, los cuales estarán con su respectivo alimento (hojas de yuca fresca) para no
alterar su metabolismo.

4.3.2. Preparación del ambiente

Para que el ambiente del laboratorio sea adecuado en el estudio se realizo la limpieza
del laboratorio desinfectándolo con hipoclorito de sodio al 5%, como también de todo el
equipo, dejándolo cerrado por unas 24 horas. La asepsia es esencial en el lugar de
trabajo para evitar contaminación de hongos y bacterias.

Cuadro 7. Condiciones de laboratorio

Tº Máxima (ºC) Tº Media (ºC) Tº Mínima (ºC) H. Relativa (%) Luz (hrs/día)
28 25 22 70 16
Fuente: INIAF, 2010.

4.3.3. Realización de los Bioensayos

En laboratorio se trabajo con los mismos entomopatógenos y los mismos niveles de

dosificación que se prepararon para el trabajo de campo, se peso en la balanza
electrónica el Bacillus thuringiensis en 2gr, 3gr y 4gr por litro de agua destilada, en la
Beauveria bassiana 2ml, 3ml y 4ml por litro de agua destilada.

Determinadas las dosis, con la ayuda del atomizador se realizo la aplicación de los
entomopatógenos de acuerdo a cada tratamiento, en los envases ya mencionados de
1er al 3er estadio posteriormente hacer la toma de datos y finalmente la evaluación.

4.3.4. Parámetros de evaluación de la efectividad de los entomopatógenos

Patogenicidad: Para la evaluación se determino si los patógenos realmente afectan al

insecto plaga a la que esta dirigida a controlar por la alteración ocasionada por los
agentes patógenos sobre una o varias funciones esenciales del hospedero (insecto
larva), donde se evaluó por los postulados de Koch (Agrios, 1996):

1. Los entomopatógenos (Bacillus thuringiensis y Beauveria bassiana) deben

encontrarse asociados con la plaga, en todos los bioensayos afectados que se
examinen.

2. Los patógenos deben ser aplicados en el alimento del insecto y debe producir el
mismo efecto realizado en campo.

3. Los patógenos deben aislarse de otras bacterias y hongos para que no alteren el
efecto y sus características deben corresponder a las anotadas en el segundo punto.

Virulencia: Se define como la probabilidad que tiene de causar la muerte al

hospedante en un periodo de tiempo determinado. Se seleccionaron larvas en el primer
y tercer estadío para ser sometidas a bioensayos de efectividad (probar si los
entomopatógenos son efectivos en el control), evaluando la enfermedad sobre los
insectos tratados hasta su muerte.

Tiempo letal: Es el tiempo letal en el cual un patógeno tiende a matar al hospedante,

es medido en horas hasta la muerte de 50% y 100% de los insectos de cada
tratamiento. Esto buscara favorecer a los tratamientos que causaron mayor mortalidad
en los días después realizada la aplicación, de manera de aumentar la exigencia para
elegir las dosis más agresivas; los ensayos se evaluaron hasta el momento en que uno
de los tratamientos logre el 100% de mortalidad de los insectos.

4.3.5. Infección del Bacillus thuringiensis sobre Erinnyis ello

La infección del Bacillus thuringiensis se observó desde el momento en que se realizó

la fumigación a las larvas en los frascos de la cámara de crías, su desarrollo y
comportamiento da inicio cuando las hojas de yuca transformadas son ingeridas por el
insecto, su consistencia es entonces blanda y presenta un abultamiento en la parte
anterior debido a la licuefacción de los tejidos internos del insecto.
 1) Pesaje del bacilo 2) Aplicación en 3) Toma de datos 4) Frascos en la
en balanza frascos en Laboratorio cámara de crías

Figura 16. Preparación, aplicación de Bacillus thuringiensis en frascos de laboratorio.

4.3.6. Infección de la Beauveria bassiana sobre Erinnyis ello

La infección del hongo se observó desde el momento en que se realizó la fumigación a

las larvas en los frascos de la cámara de crías, su desarrollo y comportamiento da inicio
cuando las conidias del hongo entran en contacto con el cuerpo del insecto, germinan,
penetran al cuerpo y muere llegando a cubrirlo totalmente con formaciones
blanquecinas.

1) Beauveria 2) Toma de datos de 3) Aplicación del 4) Frascos en la

bassiana en frasco Laboratorio hongo en frascos. cámara de crías

Figura 17. Tamizado y aplicación de Beauveria bassiana en frascos de laboratorio.

4.3.7. Diseño experimental de Laboratorio

La evaluación del trabajo de laboratorio se realizo en base al diseño completamente al

azar con arreglo factorial 2x3 y 1 testigo según lo sugerido por Ochoa (2007), donde se
tiene:

Factor A: Entomopatógenos

a1: Bacillus thuringiensis

a2: Beauveria bassiana

Factor B: Niveles de dosificación

b1: 2gr de B. thuringiensis x 1lt de agua b1: 2 ml de B. bassiana x 1lt de agua

b2: 3gr de B. thuringiensis x 1lt de agua b2: 3 ml de B. bassiana x 1lt de agua

b3: 4gr de B. thuringiensis x 1lt de agua b3: 4 ml de B. bassiana x 1lt de agua

Modelo lineal aditivo:

Yij = µ + αi + βj + (αβ)ij + □ij

Donde:

Yij = una observación cualquiera

µ = media poblacional
αi = efecto del i-ésimo entomopatógeno
βj = efecto de la j-ésima dosis
(αβ)ij = efecto del i-ésimo entomopatógeno con la j-ésima dosis (interacción AxB)
□ij = error experimental

4.3.8. Dimensiones de los tratamientos

Las unidades experimentales y cada uno de sus tratamientos tuvieron las siguientes
características:

Figura 18. Dimensiones de los tratamientos de Laboratorio.

Descripción de los tratamientos

T = Testigo (T) como parámetro de comparación bajo desinfección.

a1b1 = Bacillus thuringiensis para el primer tratamiento aplicado en las larvas.

a1b2 = Bacillus thuringiensis para el segundo tratamiento aplicado a las larvas.

a1b3 = Bacillus thuringiensis para el tercer tratamiento aplicado en las larvas.

a2b1 = Beauveria bassiana para el primer tratamiento aplicado a las larvas.

a2b2 = Beauveria bassiana para el segundo tratamiento aplicado a las larvas.

a2b3 = Beauveria bassiana para el tercer tratamiento aplicado a las larvas.

4.3.9. Variables de Respuesta de Laboratorio

• Número de larvas muertas después de la aplicación.

Se realizo con un atomizador por frasco en el primer y tercer estadío larval en

condiciones controladas.

• Tiempo de acción de los entomopatógenos.

Se evaluó en 24, 48, 72 y 96 horas, el efecto en diferentes dosis, no se tomó en cuenta

el horario si no la muerte de la larva.

• Estadío de larva al que afecta más los entomopatógenos.

Bacillus thuringiensis es más efectivo en el 1er y 2do estadío larval, sin embargo hay
diferencias relativas en de Beauveria bassiana en el 1er y 2do estadío.
V. RESULTADOS Y DISCUSIONES

5.1. Resultado de la etapa de laboratorio

5.1.1. Número de larvas muertas después de la aplicación de los

entomopatógenos (Bacillus thuringiensis y Beauveria bassiana)

Realizado la aplicación de los entomopatógenos en los envases de larvas, se procedió

a la contabilización de las larvas muertas y vivas con sus respectivos tratamientos de un
total de 105 larvas en todo el experimento de laboratorio, de diferentes instares
(estadíos), donde 46 fueron larvas muertas que representa el 44% y 59 larvas vivas que
representan el 56% (figura 19).

Porcentaje No. de larvas

44

56 larvas muertas
larvas vivas

Fuente: Elaboración propia

Figura 19. Larvas muertas y vivas después de la aplicación.

En el cuadro 8, tenemos detalladamente la cantidad de larvas muertas y vivas de los

entomopatógenos por tratamientos; la cantidad total de larvas del B. thuringiensis son
45 de diferentes instares (estadíos) donde 29 son larvas muertas y 16 son larvas vivas,
por lo tanto muestra un mejor rendimiento en el control de la larva en estas condiciones.

En la cantidad total de larvas de la Beauveria bassiana son de igual manera 45 de

diferentes estadíos, donde 17 son larvas muertas y 28 son larvas vivas; los resultados
indican un mejor efecto por parte del hongo, esto se debe a que el hongo en
condiciones controladas mejora su rendimiento y efectividad, St. Leger et. al., (1992),
sugieren que la susceptibilidad o resistencia de un insecto a un hongo en particular,
puede estar determinada por los componentes de la cutícula al inicio de la infección.

Cuadro 8. Larvas muertas y vivas de los entomopatógenos por tratamientos.

CONGLOMERADOS Larvas muertas Larvas vivas

Bacillus thuringiensis estadíos estadíos
ENTO DOSIS 1ro 2do 3ro 1ro 2do 3ro 4to 5to
a1 b1 = 2gr 3 4 1 - - 2 5 -
a1 b2 = 3gr 2 4 3 - - 4 1 1
a1 b3 = 4gr 4 4 4 - - - 2 1
Total 9 12 8 - - 6 8 2
Beauveria bassiana estadíos Estadíos
ENTO DOSIS 1ro 2do 3ro 1ro 2do 3ro 4to 5to
a2 b1 = 2ml 2 1 - - 4 6 2 -
a2 b2 = 3ml 5 1 - - - 4 4 1
a2 b3 = 4ml 4 3 1 - - 4 3 -
Total 11 5 1 - 4 14 9 1
Testigo estadíos estadíos
T - - - 2 3 5 2 3
Fuente: Elaboración propia.

5.1.1.1. Número de larvas muertas de los entomopatógenos por estadíos larvales

Los resultados obtenidos en laboratorio para esta variable demuestran en el cuadro,

que murieron más en el 2do estadío con 12 larvas muertas, seguido por las de 1er
estadío con 9 y finalmente en el 3ero estadío con 8 larvas muertas. Las larvas muertas
por acción del hongo, demuestran que murieron más en el 1er estadío con 11 larvas
muertas, seguido por las de 2do estadío con 5 y finalmente en el 3ero estadío con 1
larva muerta.

Las larvas del tratamiento del testigo son 15 de diferentes estadíos, no existió efecto
alguno durante los días de evaluación.

Las larvas se desarrollaron muy rápido así lo demuestra su ciclo biológico, durante el
estudio de laboratorio las larvas recolectadas algunas no murieron por que ya se
encontraban en 3er, 4to y 5to estadío y el efecto de los entomopatógenos no hizo
efecto, por eso es mas efectivo el control en los tres primeros estadíos. Así demostraron
los estudios del ciclo biológico de Erinnyis ello en laboratorio (CIAT, 2001; Fazolin et.
al., 2007), donde mencionan: cada estadío larval tiene una duración aproximada de 2 –
3 días y esto puede variar según el clima, temperatura, tipo de alimento consumido,
humedad y otros factores.

5.1.2. Tiempo de acción de los Entomopatógenos

En la evaluación del tiempo de acción en laboratorio permitió determinar la cantidad de

larvas muertas en horas una vez aplicados los entomopatógenos en los envases de las
larvas, este estudio mostro que existe una diferencia en la cantidad de larvas muertas
del bacilo y del hongo en el tiempo de deseción de las mismas.

 Tiempo de acción del Bacillus thuringiensis

De acuerdo a la figura 20, el tiempo de acción del bacilo esta determinado por infección
patogénica de la bacteria, cuyo resultado les causa la muerte a las larvas.

Bacillus thuringiensis
8
7 7
No. larvas muertas

6 6
5 5
4 1er Estadio
3 3
2do Estadio
2 2 2
3er Estadio
1 1 1
0 0 0 0
24 48 72 96 120
Fuente : Elaboración propia

Figura 20. Larvas muertas en el tiempo de acción del Bacillus thuringiensis en Laboratorio.

A 24 horas de la aplicación murió la primera larva de 1er estadío, en las 48 horas las
larvas del 1er y 2do va en aumento su capacidad de avance, en 72 horas las de 2do
mejora su cantidad y empieza a tener efecto en las de 3er estadío, en 96 horas las
larvas de 3er estadío aumenta su capacidad de avance mientras las larvas de 1er y 2do
estadío van en descenso en su efectividad haciendo un total de 29 muertas.

La efectividad del bacilo se debe que en condiciones controladas se observa una mejor
efectividad, también se puede indicar que el estudio sale mas preciso ya que no afecta
tanto los factores climáticos. Su efectividad además sale como prueba de otro tipo de
cepa, como alternativa en el control de Erinnyis ello. Según Angulo (2008), sus registros
de dicha cepa fue aislada a partir de muestras de costras de papa, proveniente del
Departamento de Cochabamba (cepa de valle) y la propuesta por la bibliografía es de
utilizar cepa tropical CIAT, 1989; Arias y Belloti, 1992; Guzman; 1991.

 Tiempo de acción de la Beauveria bassiana

En la figura 21, el tiempo de acción del hongo sobre las larvas esta determinado por la
duración en cada una de ellas, donde las larvas mueren por infección del hongo.

Beauveria bassiana
6

5 5
No. larvas muertas

4 4
3 3 1er Estadio
2 2 2 2do Estadio
1 1 3er Estadio

0 0 0 0 0
24 48 72 96 120
Fuente : Elaboración propia

Figura 21. Larvas muertas en el tiempo de acción de Beauveria bassiana en Laboratorio.

A 24 horas de la aplicación no murió ninguna larva, en las 48 horas empieza a tener

efecto en la de 1er estadío, en las 72 horas empieza a tener efecto en las de 2do,
aumentando su cantidad las de 1er estadío y en 96 horas muere una sola larva de 3er
estadío, aumentando las de 2do mientras tanto la de 1er estadío esta en descenso.
Haciendo un total de 17 larvas muertas.

La efectividad del hongo bajo condiciones controladas, mejora la efectividad atacando a

las larvas causándoles la muerte, el efecto es muy particular, por que algunas larvas
muertas por el efecto no hubo esporulación en el cuerpo del gusano, Vásquez (2002),
menciona en sus resultados en el efecto de los hongos Verticillum lecanii y Beauveria
bassiana sobre E. ello, donde las larvas murieron a los 3 – 5 días y la esporulación del
hongo en las cámaras húmedas se manifestó recién a los 7 a 8 días.

5.1.3. Estadío de larva al que afecta más los entomopatógenos

Para comprobar la efectividad de los entomopatógenos se realizaron evaluaciones por

estadíos tal como se realizo en el estudio de campo, la cantidad de larvas muertas por
estadíos fueron contabilizadas.

Los resultados muestran que la población de larvas se redujo en un 44% y que los
entomopatógenos fueron más efectivos para el control de la larva en sus dos primeros
estadíos. La evaluación de estadío de larva indica cuan agresivo puede llegar a ser un
controlador biológico permitiendo determinar los tratamientos mas virulentos hacia las
larvas de Erinnyis ello; esta acción esta representado en mortalidad al 100% de
estadíos larvales, a continuación tenemos las ANVAS por estadíos.

Cuadro 9. Análisis de varianza en el primer estadío

Fuente de variación G.L. S.C. C.M. F Cal. Pr > F (5%) Pr > F (1%)
Entomopatógeno 1 0,010 0,010 1,18 4,74723 NS 9,33021 *
Dosis 2 0,004 0,002 0,27 3,88529 NS 6,92661 NS
Entomopatógeno*Dosis 2 0,006 0,003 0,39 3,88529 NS 6,92661 NS
Error 12 0,099 0,008
Total 17 0,120
Fuente: Elaboración Propia
G.L. = Grados de libertad; S.C. = Suma de Cuadrados; C.M. = Cuadrado medio; F Cal. = F calculada; Pr> F =
Probabilidad de F; * = Significativo; ns = no significativo, C.V. = 9.56.
El análisis de varianza en el primer estadío representado en el cuadro 9, nos muestra
que no existen diferencias significativas al 5% y 1% entre tipos de entomopatógenos
también no hay diferencias significativas entre los niveles de dosis, la interacción
Entomopatógeno por Dosis no es significativo por lo que los dos factores son
independientes sobre las larvas.

El coeficiente de determinación indica que el 17.2% de la variación total es debido a los

factores interrelacionados en el modelo lineal aditivo; el coeficiente de variación es de
9.56%.

Cuadro 10. Análisis de varianza en el segundo estadío

Fuente de variación G.L. S.C. C.M. F Cal. Pr > F (5%) Pr > F (1%)
Entomopatógeno 1 0,008 0,008 1,08 4,74723 NS 9,33021 NS
Dosis 2 0,030 0,015 2,04 3,88529 NS 6,92661 NS
Entomopatógeno*Dosis 2 0,003 0,001 0,2 3,88529 NS 6,92661 NS
Error 12 0,089 0,007
Total 17 0,130
Fuente: Elaboración Propia
G.L. = Grados de libertad; S.C. = Suma de Cuadrados; C.M. = Cuadrado medio; F Cal. = F calculada; Pr> F =
Probabilidad de F; ns = no significativo, C.V. = 9.16.

El cuadro 10 representa el análisis de varianza para el segundo estadío muestra las

conclusiones donde no existe diferencias significativas al 5 y 1% entre tipos de
entomopatógenos también no existen diferencias entre los niveles de dosis sobre las
larvas de Erinnyis ello, la interacción Entomopatógeno por Dosis no es significativo por
lo que los dos factores son independientes sobre las larvas.

El coeficiente de determinación indica que el 31.7% de la variación total es debido a los

factores interrelacionados en el modelo lineal aditivo; el coeficiente de variación es de
9.16%, esto significa el grado de variabilidad en los datos tomados, es decir que existió
efecto de los entomopatógenos sobre las larvas de Erinnyis ello.
Cuadro 11. Análisis de varianza para el tercer estadío

Fuente de variación G.L. S.C. C.M. F Cal. Pr > F (5%) Pr > F (1%)
Entomopatógeno 1 0,049 0,049 9,17 4,74723 NS 9,33021 NS
Dosis 2 0,025 0,012 2,32 3,88529 NS 6,92661 NS
Entomopatógeno*Dosis 2 0,004 0,002 0,33 3,88529 NS 6,92661 NS
Error 12 0,064 0,005
Total 17 0,142
Fuente: Elaboración Propia
G.L. = Grados de libertad; S.C. = Suma de Cuadrados; C.M. = Cuadrado medio; F Cal. = F calculada; Pr> F =
Probabilidad de F; ns = no significativo, C.V. = 8.24.

El análisis de varianza para el tercer estadío representado en el cuadro 11, nos dan los
siguientes resultados: no existe diferencias significativas al 5 y 1% entre tipos de
entomopatógenos también no hay diferencias entre los niveles de dosis sobre las
larvas, la interacción Entomopatógeno por Dosis no es significativo por lo que los dos
factores son independientes sobre la plaga.

El coeficiente de determinación indica que el 54.6% de la variación total es debido a los

factores interrelacionados en el modelo lineal aditivo; el coeficiente de variación es de
8.24% indicando que los resultados experimentales son confiables.

5.1.3.1. Mortalidad de los entomopatógenos por estadíos larvales

La mortalidad causada por Bacillus thuringiensis sobre las larvas de Erinnyis ello,
muestran un 100% de mortalidad en el 1er y 2do estadío, y en el 3er estadío solo el con
57.14% (Figura 22), donde las larvas muertas presentan un abultamiento en la parte
interior de su cuerpo, blando y arrugado. Otro estudio similar fue realizado por los
científicos del CIAT (1989), en ensayos de efectividad del bacilo donde se aplicaron
dosis de 3gr y 4gr por litro de agua a plantas de yuca en condiciones de laboratorio que
tenían (37 larvas/planta en promedio), y tuvieron los resultados: con la dosis 4gr se
logro una mortalidad del 100% en el 1er y 2do estadío, 92% en el 3er y 26% en el
cuarto estadío larval en 72 hrs. después de la aplicación. Con la dosis 3gr, el 100% de
mortalidad en los tres primeros estadíos a las 96 horas de aplicación.
La mortalidad causada por Beauveria bassiana sobre las larvas de Erinnyis ello,
muestran un 100% de mortalidad en el 1er estadío, en el 2do estadío 55.55% y en el 3er
estadío con 8.33% (figura 22), donde tienen el cuerpo arrugado por la infección del
hongo; este resultado sale muy efectivo en el 1er estadío. Conforme el insecto realiza
varias mudas siendo este proceso un mecanismo de defensa; sin embargo, la cutícula
recién mudada es considerada vulnerable al ataque fúngico (Vandenberg et. al., 1998),
además demostraron que la baja patogenicidad de un hongo se debe a la naturaleza de
la cutícula, es decir su densidad y grosor del grado de esclerotización.

100 100 100 100

90
80
70
Porcentaje %

60 55,55 57,14
50 Bacillus thuringiensis
40
30 Beauveria bassiana
20 8,33
10
0
1er estadío 2do estadío 3er estadío

Fuente : Elaboración propia

Figura 22. Mortalidad entre entomopatógenos por estadíos, estudio de Laboratorio.

Esto demuestra que los hongos entomopatógenos pueden ser patogénicos para larvas
de lepidópteros y ser más letales para unos que para otros.

5.1.4. Efectividad de los entomopatógenos

La evaluación de efectividad de los entomopatógenos permitió determinar la actividad

efectiva en relación al tiempo de acción sobre las larvas, estableciendo la capacidad del
bacilo y del hongo para matar a las larvas.

En el estudio de laboratorio mejora la efectividad tanto del hongo como del bacilo, los
tratamientos muestran una variabilidad en el efecto de los entomopatógenos hacia las
larvas mostrando los siguientes resultados:
5.1.4.1. Eficiencia del Bacillus thuringiensis

La eficiencia nos muestra que existe una baja correlación positiva lineal entre el tiempo
de acción y el número de larvas muertas, se puede esperar que a medida que el tiempo
se incremente aumente en 11.8% la efectividad del bacilo en sus dosificaciones
aplicadas.

El tiempo de acción explica el 1.4% de la variación total en el numero de larvas

muertas, lo que implica que la efectividad en el tiempo es mínima, se tiene un intercepto
de 2.5, la que representa que el bacilo tuvo su efecto luego de la aplicación lo que
empezó a incrementar en el tiempo (figura 23). Ya que se encuentran en condiciones
controladas y en cautiverio.

Eficiencia del Bacillus thuringiensis

8
7 7
N° Larvas Muertas

6 6
5 5 3,95 Regresión
4 3,75 Lineal
3,5
3 2,75 3 Dispersión
2 2,62 2 2
1 1 1
0
0 50 100 150
Tiempo (Horas)
Fuente : Elaboración propia

Figura 23. Eficiencia del Bacillus thuringiensis con relación al tiempo de acción.

5.1.4.2. Eficiencia de Beauveria bassiana

De igual forma que el bacilo la eficiencia del hongo (figura 24), existe baja correlación
positiva lineal entre el tiempo de acción y el número de larva muertas, y se puede
esperar que a medida que el tiempo se incremente, aumente en 5.5% la efectividad del
hongo en sus dosificaciones aplicadas.

El tiempo de acción explica el 0.3% de la variación total en el número de larvas muertas

lo que implica que la efectividad en el tiempo es mínima, se tiene un intercepto de 2.5,
la que representa que el hongo tuvo su efecto luego de la aplicación lo que empezó a
incrementar en el tiempo. Por su baja dosificación para su mortalidad y las
concentraciones menores 107 conidias/ml (Fuente y Carballo, 1995).

Eficiencia de Beauveria bassiana

6

5 5
N° Larvas Muertas

4
4
3 Regresión
3 2,9 3 3,08
2,6 2,7 Lineal
2 2,55 2 Dispersión
2
1 1
0
0 50 100 150
Tiempo (Horas)
Fuente : Elaboración propia

Figura 24. Eficiencia de Beauveria bassiana con relación al tiempo de acción.

5.1.4.3. Efectividad por Dosificaciones

La efectividad de los entomopatógenos por dosis (Figura 25), advierte una clara
diferencia entre las dosificaciones del estudio con relación al testigo donde las
dosificaciones del bacilo como del hongo causan la muerte a las larvas, en una
mortalidad de la población en cada tratamiento, no siendo así el caso del tratamiento
testigo que muestra un 0% de mortalidad.
 Efectividad en Dosificaciones
80
80 60
70 53,33 53,33
Porcentaje % 60 40
50
40 20
30
20 0
10
0
B1=2gr B2=3gr Bt=4gr Bb=2ml Bb=3ml Bb=4ml T

Bacillus thuringiensis Beauveria bassiana Testigo

Fuente: Elaboración propia

Figura 25. Efectividad por Dosificaciones de los entomopatógenos.

En la figura 26, tenemos la comparación de porcentajes de efectividad registrada en el

control de Erinnyis ello en condiciones controladas.

Efecto en Laboratorio

86
100
55
80
Porcentaje %

60
40
20
0
Bacillus thuringiensis Beauveria bassiana
Fuente : Elaboración propia

Figura 26. Efectividad de los entomopatógenos en condiciones controladas.

5.1.5. Análisis de la Interacción de Entomopatógeno por Dosis

El estudio de la interacción Entomopatógeno por dosis muestran el efecto que tiene

sobre las larvas, diferenciando las dosificaciones más efectivas para el control.
En el estudio de laboratorio, se realizaron los mismos procedimientos que el trabajo de
campo, analizando de igual manera por estadíos larvales.

El ANVA de efectos simples del primer estadío en el cuadro 12 (ver anexos), muestra que
no existen diferencias significativas en las combinaciones AB1, AB2 y AB3.

Según la figura 27 la dosificación b2 = 3gr para a2 presenta mayor rendimiento en

relación a las demás dosificaciones.

1,00
0,99
No. de larvas muertas

0,98 0,98

0,96

0,94 0,94 0,94

0,93 0,93
0,92

0,90
B1 B2 B3
(A1) Bacillus Thuringiensis (A2) Beauveria bassiana

Fuente : Elaboración propia

Figura 27. Interacción de Entomopatógeno por Dosis para el primer estadío.

El ANVA de efectos simples para el segundo estadío en el cuadro 13 (ver anexos),

muestra que existe diferencias significativas en la combinación AB1, también muestra

que no existe diferencias significativas entre las combinaciones AB2 y AB3.

Según la figura 28, corroborada por el ANVA de efectos simples la dosificación b3 = 4gr
tanto para a1 como a2 presenta mayor rendimiento en relación a las demás
combinaciones.
 1,00
0,98 0,98

No. de larvas muertas

0,96
0,94 0,95 0,95
0,92
0,90
0,88 0,89 0,89
0,86
0,84
0,82
B1 B2 B3
(A1) Bacillus Thuringiensis (A2) Beauveria bassiana

Fuente : Elaboración propia

Figura 28. Interacción Entomopatógeno por Dosis para el segundo estadío.

El ANVA de efectos simples para el tercer estadío en el cuadro 14 (ver anexos), muestra
que existen diferencias significativas en las combinaciones de AB1, Además muestra
que no hay diferencias entre las combinaciones AB2 y AB3.

Según la figura 29, corroborada por el ANVA de efectos simples la dosificación b3 = 4gr
para a1 presenta mayor rendimiento que las demás combinaciones.

1,00
0,98
No. de larvas muertas

0,95
0,94
0,90
0,89 0,89
0,85 0,84 0,84
0,80

0,75
B1 B2 B3
(A1) Bacillus Thuringiensis (A2) Beauveria bassiana

Fuente : Elaboración propia

Figura 29. Interacción Entomopatógeno por Dosis para el tercer estadío.

5.2. Resultado de la Etapa de Campo

5.2.1. Número de larvas muertas después de la aplicación de los

entomopatógenos (Bacillus thuringiensis y Beauveria bassiana)

Después de realizada la aplicación de los entomopatógenos en el cultivo de yuca, se

procedió a la contabilización de las larvas muertas y vivas con sus respectivos
tratamientos de un total de 1071 larvas de todo el experimento en diferentes instares
(estadíos), donde 777 fueron larvas vivas que representa el 73% y 294 larvas muertas
que representa el 27% (figura 30).

Porcentaje No. de Larvas

27%

larvas muertas
73% larvas vivas

Fuente : Elaboración propia

Figura 30. Larvas muertas y vivas después de la aplicación (campo).

5.2.1.1. Número de larvas muertas de los entomopatógenos por estadíos larvales

La cantidad total de larvas de Beauveria bassiana son 459 de diferentes estadíos,

donde 363 son larvas vivas y 96 larvas muertas, estos tratamientos nos muestra que
no es efectivo en el control de la plaga, debido a factores como la temperatura, el
viento, la humedad relativa o la poca dosificación aplicada no es favorable al hongo en
estas condiciones de ambiente. Bustillo (2002), señala que la presencia de B. bassiana
en el campo esta influenciada por las condiciones climáticas, en condiciones de alta
humedad los niveles de control pueden llegar hasta un 75%.
La cantidad de larvas del B. thuringiensis son 459 de diferentes estadíos, donde 198
son larvas muertas y 261 son larvas vivas; por tanto muestra un mejor control a
comparación de la B. bassiana pero demostrando poca efectividad. Por otra parte la
acción del bacilo no se observa inmediatamente después de la aplicación; según el
CIAT (1989), indica que una vez que la larva ha comenzado a consumir el follaje tratado
solo sobrevive dos, tres, hasta cuatro días según su comportamiento fisiológico y su
capacidad de consumo disminuye considerablemente durante ese periodo.

Los resultados obtenidos para esta variable se muestran en el siguiente cuadro:

Cuadro15.Larvas muertas y vivas de los entomopatógenos por tratamientos y estadíos.

CONGLOMERADOS Larvas muertas Larvas vivas

Bacillus thuringiensis Estadíos Estadíos
ENTO DOSIS 1ro 2do 3er 4to 1ro 2do 3ro 4to 5to
a1 b1 = 2gr 21 19 9 2 8 19 24 30 21
a1 b2 = 3gr 24 24 15 2 5 10 25 27 21
a1 b3 = 4gr 23 26 24 9 9 15 12 19 16
Total 68 69 48 13 22 44 61 76 58
Beauveria bassiana Estadíos Estadíos
ENTO DOSIS 1ro 2do 3er 4to 1ro 2do 3ro 4to 5to
a2 b1 = 2ml - - - - 33 30 30 30 30
a2 b2 = 3ml 26 13 4 - 12 24 32 21 21
a2 b3 = 4ml 21 21 11 - 12 17 25 24 22
Total 47 34 15 - 57 71 87 75 73
Testigo Estadíos Estadíos
T - - - - 30 30 29 31 33
Fuente: Elaboración propia

Las larvas del testigo son 153 larvas vivas de diferentes estadíos donde no hubo ningún
efecto en toda la evaluación.

 Larvas muertas por acción del Bacillus thuringiensis

El cuadro 15, muestra que murieron más en el 2do estadío con 69 larvas muertas,
seguido por las del 1er estadío con 68 muertas, las de 3er estadío con 48 y finalmente
las de 4to estadío con 13 larvas muertas.
Estudios realizados por el CIAT (1989), menciona que con el objetivo de comprobar la
efectividad del bacilo (B. thuringiensis) consistió en la aspersión del entomopatógeno
sobre una parcela bajo un fuerte ataque del gusano. La población de larvas se midió
antes y en tres días de la aplicación, los resultados mostraron que la población de
larvas se redujo en un 68% y que la bacteria fue más efectiva para el control de la larva
en sus tres primeros estadíos.

 Larvas muertas por acción de la Beauveria bassiana

Asimismo el estudio muestra que murieron más en el 1er estadío con 47 larvas
muertas, las de 2do estadío con 34 y finalmente las de 3er estadío con 15 larvas
muertas (cuadro 15).

La cantidad de larvas muertas por acción del hongo (Beauveria bassiana) indica que
son mas susceptibles las larvas del 1er hasta el 3er estadío larval, desconociéndose las
causas del efecto. Guerra (2010), señala que el uso del B. thuringiensis es efectivo en
sus tres primeros estadíos aunque no se probaron aun otros entomopatógenos como
Baculovirus erinnyis y Beauveria bassiana en el control de Erinnyis ello en condiciones
de campo.

5.2.2. Tiempo de acción de los Entomopatógenos

La evaluación del tiempo de acción permitió determinar la cantidad de larvas muertas

en horas o días una vez aplicados los entomopatógenos en las plantas afectadas, este
estudio mostro que existe una diferencia en la mayor cantidad de larvas muertas del
bacilo con el resultado de larvas muertas del hongo.

 Tiempo de acción del Bacillus thuringiensis

De acuerdo a la figura 31, el tiempo de acción del B. thuringiensis sobre las larvas esta
determinado por la duración en cada una de ellas, donde las larvas mueren por
infección patogénica del bacilo.
 Bacillus thuringiensis
14
No. de larvas muertas 13,33
12 12
11
10
9,33
8
6
3,66 5
4,33
4 4
2 2,66
0 0 0,66
0 0 0 0
24 48 72 96 120

1er Estadio 2do Estadio 3er Estadio 4to Estadio

Fuente : Elaboración propia

Figura 31. Larvas muertas en el tiempo de acción del Bacillus thuringiensis.

A 24 horas de la aplicación no cayó ninguna larva, en las 48 horas empezó a tener más
efecto las larvas del 1er y 2do estadío, en 72 horas la cantidad de las larvas va en
aumento, en las 96 horas la cantidad del 1er estadío va en descenso mientras las
larvas de 2do y 3er estadío va en aumento y a 120 horas la cantidad de larvas del 2do
estadío esta en descenso, mientras las del 3er van en aumento y empieza a tener
efecto en las del 4to estadío.

La baja efectividad del B. thuringiensis en el tiempo de deseción de las larvas es posible

que la resistencia se explique por vía bioquímica, Fisiológica y de conducta de los 3
últimos estadíos. CIAT (1989), indica en el primer caso, el insecto llega a metabolizar
las toxinas, en el segundo aparentemente existe una disminución de sensibilidad en los
receptores y en el tercero disminuye la habilidad del insecto para aceptar el insecticida.
Según (Dulmage y Martínez 1973), indican que si la cantidad de protoxina no es letal, la
larva supera el síndrome de parálisis intestinal inicial y se recupera.

 Tiempo de acción de la Beauveria bassiana

En la figura 32, el tiempo de acción del hongo sobre las larvas esta determinado por la
duración en cada una de ellas, donde las larvas mueren por infección debido a la
proliferación del hongo.
 Beauveria bassiana
7
No. de larvas muertas 6,33
6
5
4,66 4,66
4 4
3,67
3
2 2
1 0,33 1
0 0 0 0 0,33

24 48 72 96 120
1er Estadio 2do Estadio 3er Estadio

Fuente : Elaboración Propia

Figura 32. Larvas muertas en el tiempo de acción de Beauveria bassiana

A 24 horas de la aplicación no murió ninguna larva, en las 48 horas empieza a tener

efecto en el 1er estadío poco aun el 2do, en las 72 horas la cantidad de larvas muertas
va en ascenso, en 96 horas la cantidad del 1er estadío va en descenso, las larvas del
2do y 3er van aumentando su rendimiento y en 120 horas existe una igualdad de larvas
en el 2do estadío mientras las del 3er estadío va en aumento; no hubo efecto alguno en
larvas del 4to estadío.

El efecto es diferente con relación al bacilo, por que el hongo necesita condiciones para
poder desarrollarse en el cuerpo de la larva. Se evidencio que los hongos
entomopatógenos cultivados en medios no enriquecidos o carentes de insectos reducen
su patogenicidad, como ha sido demostrado con los hongos B. bassiana, Metarhizium
anisopliae y Verticillum lecanii por varios investigadores (kawakami 1960; Hall 1980;
Morrow et. al., 1989). Como también factores climáticos: la temperatura, el viento, la
radiación solar (Múnera et. al., 1999).

5.2.3. Estadío de larva al que afecta más los entomopatógenos

Con el objetivo de comprobar la efectividad de los entomopatógenos se realizaron

evaluaciones por estadíos durante la presencia de la plaga, la cantidad de larvas
muertas por estadíos fueron contabilizadas.
Los resultados mostraron que la población de larvas se redujo en un 27% y que los
entomopatógenos fueron más efectivos para el control de la larva en sus tres primeros
estadíos. La evaluación de estadío de larva muestra cuan agresivo puede llegar a ser
un controlador biológico permitiendo determinar los aislamientos que mostraron
actividad efectiva sobre las larvas de Erinnyis ello. A continuación tenemos las ANVAS
por estadíos.

Cuadro 16. Análisis de varianza para el primer estadío

Fuente de variación G.L. S.C. C.M. F Cal. Pr > F (5%) Pr > F (1%)
Bloque 2 0,018 0,009 0,62 4,45897 NS 8,64911 NS
Entomopatógeno 1 0,323 0,323 22,03 5,31766 ** 11,2586 *
Bloque*Entomopatógeno 2 0,003 0,002 0,11 4,45897 8,64911
Dosis 2 1,056 0,528 36,06 4,45897 ** 8,64911 *
Entomopatógeno*Dosis 2 0,676 0,338 23,09 4,45897 ** 8,64911 *
Error 8 0,117 0,015
Total 17 2,194
Fuente: Elaboración Propia
G.L. = Grados de libertad; S.C. = Suma de Cuadrados; C.M. = Cuadrado medio; F Cal. = F calculada; Pr. F =
Probabilidad de F; ** = Altamente significativo; * = Significativo; ns = no significativo, C.V. = 6.96.

El cuadro 16 representa la prueba de ANVA en el primer estadío larval, esto nos indica
que al aplicar los entomopatógenos a las plantas afectadas se tuvo diferencias
significativas al 5% y 1% entre tipos de entomopatógenos sobre la plaga de Erinnyis
ello, también existen diferencias significativas al 5% y 1% entre niveles de
dosificaciones la que es necesario conocer sus diferencias, no existe diferencia entre
bloques pero de todas maneras se hizo los análisis correspondientes, la interacción
Entomopatógeno x Dosis, es significativo por lo que los dos factores no son
independientes sobre la plaga.

El coeficiente de determinación indica que el 94.7% de la variación total es debido a los

factores interrelacionados en el modelo lineal aditivo; el coeficiente de variación es de
6.96% que es el grado de variabilidad que tiene los datos tomados en campo.
5.2.3.1. Prueba de Duncan para el primer estadío

El cuadro 17 representa la prueba de Duncan a un nivel de significancia del 5%, nos

indica para el factor “Entomopatógenos” que se forman 2 grupos bien diferenciados;
mostrando diferencias significativas entre los rendimientos medios del primer grupo
(Bacillus thuringiensis) sobre el segundo grupo (Beauveria bassiana). Es decir que el
bacilo causo mas efectividad de forma normal sobre las larvas del primer estadío pero
es evidente que el carácter de resistencia y susceptibilidad esta presente, mientras el
hongo encontró mas dificultad en su efecto tales como factores climáticos que no
favorecían al desarrollo de este.

Cuadro 17. Comparaciones de promedios del efecto en el primer estadío

ENTOMOPATÓGENOS PROMEDIOS DUNCAN (5%)

Bacillus thuringiensis 1,87 A
Beauveria bassiana 1,60 B
Fuente: Elaboración Propia
Cuadro 18. Análisis de varianza para el segundo estadío

Fuente de variación G.L. S.C. C.M. F Cal. Pr > F (5%) Pr > F (1%)

Bloque 2 0,301 0,150 3,41 4,45897 NS 8,64911 NS

Entomopatógeno 1 0,756 0,756 17,15 5,31766 * 11,2586 *
Bloque*Entomopatógeno 2 0,053 0,027 0,6 4,45897 8,64911
Dosis 2 0,639 0,320 7,25 4,45897 * 8,64911 NS
Entomopatógeno*Dosis 2 0,318 0,159 3,6 4,45897 NS 8,64911 NS
Error 8 0,353 0,044
Total 17 2,420
Fuente: Elaboración Propia
G.L. = Grados de libertad; S.C. = Suma de Cuadrados; C.M. = Cuadrado medio; F Cal. = F calculada; Pr. F =
Probabilidad de F; * = Significativo; ns = no significativo, C.V. = 12.92.

En el ANVA del segundo estadío cuadro 18, nos muestra que existen diferencias
significativas al 5% y 1% entre tipos de entomopatógenos sobre la plaga Erinnyis ello,
por lo que se verificara en prueba de media, no existen diferencias significativas al 5% y
1% entre los niveles de dosificación y tampoco existe diferencia entre bloques por lo
que el ensayo no gana precisión.

La interacción Entomopatógeno x Dosis no es significativo por lo que los dos factores

son independientes sobre la plaga, se tiene 85.4% como coeficiente de determinación
que es la variación total de los factores interrelacionados en el modelo lineal aditivo; el
coeficiente de variación fue de 12.92% que es el grado de variabilidad.

5.2.3.2. Prueba de Duncan para el segundo estadío

La prueba de significancia de efectividad en el segundo estadío larval Cuadro 19,

muestran una diferencia significativa entre los rendimientos medios. Así como en el
primer estadío también muestra una mayor acción patogénica por parte del bacilo sobre
la acción de hongo, por lo que los dos entomopatógenos tienden a actuar en contra de
las larvas al ser aplicadas en las hojas de yuca para luego causarles la muerte por
infección.

Cuadro 19. Comparaciones de promedios del efecto en el segundo estadío

ENTOMOPATÓGENOS PROMEDIOS DUNCAN (5%)

Bacillus thuringiensis 1,83 A
Beauveria bassiana 1,42 B
Fuente: Elaboración Propia

Una de las causas de que no afecte al insecto plaga es su sistema de defensa que
constituye una protección contra los patógenos y endoparásitos. Las principales son la
cutícula y la membrana peritrófica (Borror et. al., 1981), los microorganismos que
atraviesan estas estructuras llegan al hemocele y deben de superar las defensas
activas secundarias como la fagocitosis, encapsulación y melanización, además de la
actividad de la enzima lisozima que hidroliza las paredes de las bacterias bloqueando el
crecimiento de bacterias y hongos (Kuno et. al., 1981; Dunn, 1986).
Cuadro 20. Análisis de varianza para el tercer estadío

Fuente de variación G.L. S.C. C.M. F Cal. Pr > F (5%) Pr > F (1%)
Bloque 2 0,486 0,243 12,27 4,45897 * 8,64911 *
Entomopatógeno 1 0,916 0,916 46,28 5,31766 ** 11,2586 *
Bloque*Entomopatógeno 2 0,033 0,016 0,83 4,45897 8,64911
Dosis 2 0,836 0,418 21,14 4,45897 ** 8,64911 *
Entomopatógeno*Dosis 2 0,010 0,005 0,26 4,45897 NS 8,64911 NS
Error 8 0,158 0,020
Total 17 2,439
Fuente: Elaboración Propia
G.L. = Grados de libertad; S.C. = Suma de Cuadrados; C.M. = Cuadrado medio; F Cal. = F calculada; Pr. F =
Probabilidad de F; * = Significativo; ns = no significativo, C.V. = 9.79.

El ANVA del tercer estadío representado en el cuadro 20, nos indica que existen
diferencias entre bloques por lo que el ensayo gana precisión, existe diferencias
significativas al 5% y 1% entre tipos de entomopatógenos sobre la plaga Erinnyis ello,
por lo que se verificara en prueba de medias, también existen diferencias significativas
entre los niveles de dosificaciones en el control de la plaga.

La interacción Entomopatógeno x Dosis no es significativo por lo que los dos factores

son independientes sobre la plaga Erinnyis ello, se tiene 93.5 % como coeficiente de
determinación que es la variación total de los factores interrelacionados en el modelo
lineal aditivo; el coeficiente de variación es de 9.79% que es el grado de variabilidad.

5.2.3.3. Prueba de Duncan para el tercer estadío

Se observo la efectividad de los entomopatógenos producidas en el tercer estadío

larval, siendo hasta este instar la capacidad máxima de acción efectiva por parte del
bacilo citado por CIAT 2001, pero la susceptibilidad de ataque patogénico esta presente
ahora se comprobó la acción del bacilo como del hongo para medir la efectividad de
estos en el tercer estadío larval.
La prueba de Duncan a un nivel de significancia del 5% cuadro 21, nos muestran
diferencias significativas entre los rendimientos medios del Bacillus thuringiensis sobre
Beauveria bassiana.

Es decir que el bacilo causo mas efectividad de formal normal sobre las larvas del tercer
estadío, mientras el hongo causo poco efecto; ambos entomopatógenos no controlaron
al 100% de las larvas pero si se encontró efecto en pocas cantidades.

Cuadro 21. Comparaciones de promedios del efecto en el tercer estadío

ENTOMOPATÓGENOS PROMEDIOS DUNCAN (5%)

Bacillus thuringiensis 1,66 A
Beauveria bassiana 1,21 B
Fuente: Elaboración Propia

Cuadro 22. Análisis de varianza para el cuarto estadío

Fuente de variación G.L. S.C. C.M. F Cal. Pr > F (5%) Pr > F (1%)
Bloque 2 0,041 0,021 2,43 4,45897 NS 8,64911 NS
Entomopatógeno 1 0,201 0,201 23,7 5,31766 ** 11,2586 *
Bloque*Entomopatógeno 2 0,041 0,021 2,43 4,45897 8,64911
Dosis 2 0,067 0,033 3,95 4,45897 NS 8,64911 NS
Entomopatógeno*Dosis 2 0,067 0,033 3,95 4,45897 NS 8,64911 NS
Error 8 0,068 0,008
Total 17 0,484
Fuente: Elaboración Propia
G.L. = Grados de libertad; S.C. = Suma de Cuadrados; C.M. = Cuadrado medio; F Cal. = F calculada; Pr. F =
Probabilidad de F; * = Significativo; ns = no significativo, C.V. = 8.32.

El ANVA del cuarto estadío representado en el cuadro 22, nos indica que no hay
diferencias entre bloques, sin embargo existe diferencias significativas al 5% y 1% entre
tipos de entomopatógenos sobre la plaga Erinnyis ello, por lo que se verificara en
prueba de medias, también no existen diferencias entre los niveles de dosificaciones
para el control de la plaga. La interacción Entomopatógeno x Dosis, no es significativo
por lo que los dos factores son independientes, el coeficiente de determinación indica
que el 86% de la variación total a los factores interrelacionados en el modelo aditivo; el
coeficiente de variación es de 8.32.

5.2.3.4. Prueba de Duncan para el cuarto estadío

En el estudio de campo se comprobó que los entomopatógenos afectan más en los

primeros estadíos, ahora se encontraron larvas muertas del cuarto estadío por acción
patogénica de estos o por factores desconocidos en pocas cantidades, no causo efecto
alguno en el hongo pero si en el bacilo por lo cual se utilizo la prueba de significancia
Duncan con la que se obtienen los siguientes resultados:

Cuadro 23. Promedios del efecto en el cuarto estadío

ENTOMOPATÓGENOS PROMEDIOS DUNCAN (5%)

Bacillus thuringiensis 1,21 A
Beauveria bassiana 1 B
Fuente: Elaboración Propia

Para esta variable se observa diferencias significativas entre los rendimientos medios
del Bacillus thuringiensis sobre Beauveria bassiana, en todos los cuadros de promedios
del primer, segundo y tercer estadío nos indican que el bacilo es mas efectivo que el
hongo bajo las condiciones de campo, encontrando estos resultados se tiene poco
rendimiento de los entomopatógenos en el control de la plaga para el cuarto estadío
larval.

5.2.3.5. Mortalidad de los entomopatógenos por estadíos larvales

La mortalidad causada por Bacillus thuringiensis sobre las larvas de Erinnyis ello,
muestran un 75.67% de mortalidad en el 1er estadío, 61.33% en el 2do estadío, mientras
en el 3er estadío solo el 43.81% aun mas bajo el 4to estadío con 15.09% (Figura 33),
donde las larvas muertas presentan un abultamiento en la parte interior de su cuerpo,
blando y arrugado. Según Arias y Belloti (1989), muestra un efecto en sus tres primeros
estadíos. La mortalidad por Beauveria bassiana sobre las larvas de Erinnyis ello,
muestran un 66.02% de mortalidad en el 1er estadío, en el 2do estadío 45.19% y en el 3er
estadío con 20.83%, donde las larvas muertas presentan un estado momificado y estos
quedan cubiertos con la presencia del hongo sobre todo el cuerpo del insecto. La
resistencia de una larva a un Hongo Entomopatógeno, puede estar determinada por los
componentes de la cutícula al inicio de la infección.

75,67
80
66,02
70 61,33
60
45,19 43,81
50
Porcentaje

40
Bacillus thuringiensis
30 20,83
15,09 Beauveria bassiana
20
10 0
0
1er estadío 2do estadío 3er estadío 4to estadío

Fuente : Elaboración propia

Figura 33. Mortalidad entre entomopatógenos por estadíos, estudio de Campo.

5.2.4. Efectividad de los entomopatógenos

La evaluación de efectividad de los entomopatógenos permitió determinar la actividad

efectiva en relación al tiempo de acción sobre las larvas, estableciendo la capacidad del
bacilo y del hongo para matar a las larvas.

En la aplicación de los entomopatógenos se debe tomar en cuenta que a periodos de

aplicación más largos la eficiencia de los entomopatógenos tienden a bajar, resultados
parecidos encontraron los científicos del CIAT (1989), en su estudio integral con
Bacillus thuringiensis, Baculovirus Erinnyis y la liberación de Trichogramma sp. Donde
mencionan: a menores tiempos de aplicación el efecto es mayor en los
entomopatógenos y manejo de parasitoides, resultados que se dieron en jaulas de crías
de Erinnyis ello en campo.

Estos tratamientos muestran una variabilidad en el efecto de los entomopatógenos

hacia las larvas, para los tratamientos estudiados mostrando los siguientes resultados:
5.2.4.1. Eficiencia del Bacillus thuringiensis

En la figura 34 muestra que existe baja correlación positiva lineal entre el tiempo de
acción y el número de larvas muertas, se puede esperar que a medida que el tiempo se
incremente pueda aumentar en 16.2% la efectividad del bacilo en todos los niveles
aplicados.

El tiempo de acción explica el 2.62% de la variación total en el número de larvas, lo que

la efectividad en el tiempo es mínima, se tiene un intercepto de 4.33, lo que representa
que el bacilo tuvo su efecto luego de su aplicación lo que comenzó a incrementar en el
tiempo. Según el CIAT (1989), puede ser por factores de baja dosificación ya que se
recomienda a 800 gr por hectárea.

Eficiencia del Bacillus thuringiensis

14
13,33
12 12
11
N° Larvas Muertas

10
9,34 7,91
8
7,40 Regresión
6,78
6 4,94 Lineal
5,55
4,63 5
4 4 4,33 Dispersión
3,67
2,67
2
0,67
0
0 50 100 150
Tiempo (Horas)
Fuente : Elaboración propia

Figura 34. Eficiencia del Bacillus thuringiensis con relación al tiempo de acción.

5.2.4.2. Eficiencia de Beauveria bassiana

De igual manera existe baja correlación positiva lineal entre el tiempo de acción y el
número de larvas, se puede esperar que a medida que el tiempo se incremente en 25%
la efectividad del hongo en todos los niveles aplicados.
El tiempo de acción explica el 6.29% de la variación total del número de larvas lo que
implica que la efectividad en el tiempo es mínima; se tiene un intercepto del 1.48, lo que
representa que el hongo tuvo su efecto mínimo en relación al bacilo luego de su
aplicación lo que comenzó a incrementar en el tiempo significativamente (figura 35).

Eficiencia de Beauveria bassiana

7
6,33
6
N° Larvas Muertas

5
4,67 4,67 4,13
4 4 3,76 Regresión
3,67
3,30 Lineal
3
1,94 2,39 Dispersión
2 2
1,71
1 1
0,33 0,33
0
0 50 100 150
Tiempo (Horas)
Fuente : Elaboración propia

Figura 35. Eficiencia de Beauveria bassiana con relación al tiempo de acción.

5.2.4.3. Efectividad por dosificaciones

La efectividad de los entomopatógenos por dosis advierte una clara diferencia entre las
dosificaciones del estudio con el testigo (figura 36), donde las dosificaciones del bacilo
como del hongo causan la muerte a las larvas, en una mortalidad de la población en
cada tratamiento, no siendo así el caso del tratamiento testigo que muestra un 0% de
mortalidad. La efectividad es ascendente según las dosificaciones aplicadas, mas
efectivas en el bacilo no tanto para el hongo.

Los porcentajes muestran una mortalidad de la población de larvas tratadas, en el caso

del tratamiento de a2b1 = 2gr no se evidencia muerte de larvas debido a poca
dosificación del hongo u otras causas desconocidas.
 Efectividad en Dosificaciones
58
60 49 50
Porcentaje % 50 39 38
40
30
20
10 0 0
0
Bt=2gr Bt=3gr Bt=4gr Bb=2ml Bb=3ml Bb=4ml T

Bacillus thuringiensis Beauveria bassiana Testigo

Fuente: Elaboración propia

Figura 36. Efectividad por Dosificaciones de los entomopatógenos.

En la figura 37, tenemos la comparación de porcentajes de efectividad registrada en el

control de Erinnyis ello en condiciones de campo.

Efecto en Campo
49
50
33
40
Porcentaje %

30
20
10
0
Bacillus thuringiensis Beauveria bassiana
Fuente : Elaboración propia

Figura 37. Efectividad de los entomopatógenos en condiciones de campo.

5.2.5. Análisis de la Interacción entre Entomopatógeno por Dosis

El estudio de la interacción Entomopatógeno por dosis muestran el efecto que tiene

sobre las larvas, diferenciando las dosificaciones más efectivas para el control en el
estudio de campo. Para ser precisos en las conclusiones del efecto, se estudiaron de
igual manera por estadíos larvales.

El ANVA de efectos simples para el primer estadío en el cuadro 24 (ver anexos), muestra
que existen diferencias significativas en las combinaciones AB1, y no hay diferencias en
las combinaciones AB2 y AB3.

Según la figura 38, corroborada por el ANVA de efectos simples, las dosificaciones b2 =
3gr y b3 = 4gr del bacilo como para el hongo presentan una misma acción para el
control de la plaga en el primer estadío larval.

2,50
2,00
No. de larvas muertas

1,89
2,00 1,94
1,82 1,82
1,50

1,00 1,00

0,50

0,00
B1 B2 B3
(A1) Bacillus Thuringiensis (A2) Beauveria bassiana

Fuente : Elaboración propia

Figura 38. Interacción de Entomopatógeno por dosis para el primer estadío.

El ANVA de efectos simples para el segundo estadío en el cuadro 25 (ver anexos),

muestra que existen diferencias significativas en las combinaciones AB1 y AB2 y a la

vez no hay diferencias en las combinaciones de AB3. Según la figura 39, la dosis b3 =
4gr para ambos entomopatógenos presentan una misma acción para el control en el
segundo estadío, siendo estas combinaciones con mayor significancia en el número de
larvas.
 2,00
1,87 1,89
1,76
No. de larvas muertas
1,78
1,50 1,48

1,00 1,00

0,50

0,00
B1 B2 B3
(A1) Bacillus Thuringiensis (A2) Beauveria bassiana

Fuente : Elaboración propia

Figura 39. Interacción de Entomopatógeno por Dosis para el segundo estadío.

El ANVA de efectos simples para el tercer estadío en el cuadro 26 (ver anexos), muestra
que existen diferencias significativas en las combinaciones AB1, AB2 y AB3. Según la
figura 40, las dosificaciones respecto a los entomopatógenos presentan diferencias
altamente significativas, siendo las combinaciones de AB3 el de mayor efecto en el
tercer estadío larval.

2,50
No. de larvas muertas

2,00 1,98

1,50 1,62
1,40 1,48
1,18
1,00 1,00

0,50

0,00
B1 B2 B3
(A1) Bacillus Thuringiensis (A2) Beauveria bassiana

Fuente : Elaboración propia

Figura 40. Interacción Entomopatógeno por Dosis para el tercer estadío.

El ANVA de efectos simples para el cuarto estadío en el cuadro 27 (ver anexos), muestra
que existen diferencias significativas en las combinaciones AB1, AB2 y AB3. Según la
figura 41, corroborada por el ANVA de efectos simples, las dosificaciones del bacilo
presentan diferencias significativas, siendo el tratamiento de a1b3 el de mayor
rendimiento en el cuarto estadío.

1,60
1,40 1,40
No. de larvas muertas

1,20
1,10 1,10
1,00 1,00 1,00 1,00
0,80
0,60
0,40
0,20
0,00
B1 B2 B3
(A1) Bacillus Thuringiensis (A2) Beauveria bassiana
Fuente : Elaboración propia

Figura 41. Interacción Entomopatógeno por Dosis para el cuarto estadío.

VI. CONCLUSIONES

Realizado los resultados y habiéndose plasmado sus respectivas discusiones, se llego

a las siguientes conclusiones:

6.1. Para la Etapa de Laboratorio

La evaluación determino que los entomopatógenos tuvieron un efecto relativo al insecto

donde se tiene las siguientes conclusiones:

 La cantidad de larvas colocadas en los frascos tratados son 105; de las cuales
46 murieron por acción patogénica y 44 resultaron sin efecto. Las larvas muertas
por el Bacillus thuringiensis son 29, para Beauveria bassiana 17. De los cuales
15 larvas son del testigo que no tuvo ningún efecto. Donde tuvo mejor efecto en
sus primeros estadios ya que estuvieron en condiciones controladas.

 En el tiempo acción del bacilo muestra que a 24 hrs empieza a tener efecto en
las de 1er estadío siendo que en 48 hrs alcanza la mayor mortalidad, las larvas
de 2do estadío el más alto en 72 hrs y en 96 hrs tiene mayor efecto en las del
3er estadío debido al consumo foliar.

 Para el hongo muestra que en el tiempo de acción la mortalidad más alta en las
de 1er estadío esta en 72 hrs, en el 2do estadío en 96 hrs de igual manera en la
3er estadío.

 La mortalidad de larvas por estadíos larvales del bacilo muestran un 100% de

efectividad en el 1er y 2do estadío larval y en el 3er estadío con 57.14% de
efectividad. El estadío de larva vulnerable por acción del hongo muestran un
100% de efectividad en el 1er estadío, en el 2do estadío 55.55% y el 3er estadío
 con 8.33% de efectividad. así se demostró que en condiciones controladas es
resultante de este acápite en estudio.

 Las dosificaciones b3 = 4gr de a1 = bacilo y de b3 = 4ml de a2 = hongo es el

mas alto para el control de la plaga en los tres primeros estadíos para el bacilo y
en el 1er estadío para el hongo bajo. También se observo que la dosificación b2
= 3ml de a2 = hongo, presenta mayor rendimiento en relación a las demás
combinaciones en el control de la larva en el 1er estadío.

 La efectividad de los entomopatógenos en condiciones controladas son de 86%

de efecto en el Bacillus thuringiensis y 55% en la Beauveria bassiana, siendo
estos resultados regulares para el control del gusano cachón Erinnyis ello,
observando mayor actividad patogénica en la infección del bacilo, la
patogenicidad del hongo propuesta por la bibliografía obtuvo un mejor
comportamiento con respecto en esta investigación.

La efectividad del 86% de Bacillus thuringiensis, se debe al tipo de cepa que se utilizo,
si bien este bacilo es de cepa de valle, es posible que el efecto favoreció en estas
condiciones. Este tipo de cepa pueda que haya dado algún resultado positivo pero
mejor es cepa de trópico.

El efecto del 55% en la Beauveria bassiana, muestra un mejor comportamiento a

comparación del estudio de campo, es más efectivo en el 1er estadío y en 2do estadío
regular, el contacto del hongo con la larva tuvo su efecto relativo para abajo y no
tuvieron diferencias significativas que influyan en el control de la larva.

6.2. Para la Etapa de Campo

La aplicación de los entomopatógenos (Bacillus thuringiensis y Beauveria bassiana)

para el control de Erinnyis ello, cuya variable de respuesta fue área de evaluación de
efecto, dio las siguientes conclusiones:

 La cantidad de larvas en las plantas tratadas son 1071; de las cuales 294
murieron por acción patogénica y 777 resultaron sin efecto. Las larvas muertas
 del Bacillus thuringiensis son 198, de Beauveria bassiana 96. No hubo efecto
alguno en el testigo.

 En el tiempo de acción del Bacillus thuringiensis el efecto esta más en los tres
primeros estadíos siendo el más el alto para el 1er estadío en 72hrs, para el 2do
estadío es en 96 hrs, para el 3er estadío en 120 hrs y para el 4to estadío esta en
120 hrs en alcanzar efecto en las larvas. En el tiempo de acción de Beauveria
bassiana la mortalidad más alta esta en el 1er estadío en 72 hrs, para el 2do
estadío en 96 hrs y el 3er estadío solo en 120 hrs.

 La mortalidad de larvas muertas por estadíos del bacilo muestran un 75.67% de

efectividad en el 1er estadío, 61.33% de efecto en el 2do estadío, seguido con
43.81% para el 3er estadío y en el 4to estadío con 15.09% de efectividad. Las
larvas muertas por acción del hongo muestran un 66.02% de efectividad en el
1er estadío, en el 2do estadío 45.19% y el 3er estadío con 20.83% de efectividad.

 De todos los tratamientos de los entomopatógenos, las dosificaciones b3 = 4gr

de a1 = bacilo y b3 = 4ml de a2 = hongo son los más altos para el control de la
plaga en el tres primeros estadíos para el bacilo y los dos primeros en el hongo.

El efecto en el estudio de campo es de 49% para el Bacillus thuringiensis y 33% en la

Beauveria bassiana siendo estos resultados muy bajos para el control del gusano
cachón Erinnyis ello. La efectividad de 49% del Bacillus thuringiensis, se debe al tipo de
cepa que se utilizo, este bacilo es de cepa de valle y es posible que el efecto no
favoreciera en su efectividad. Además según revisión bibliográfica indican que para el
control debe utilizarse cepa tropical y también la liberación de parasitoides para tener
mayor efecto. El efecto de Beauveria bassiana (33%) no es significativo pues al ser
aplicado en el control en campo, tiene muchos factores climáticos como: la lluvia, el
viento, la poca humedad, la radiación solar entre otros que no favorecen al crecimiento
del hongo; este patógeno no demostró tener mucho efecto en el control sobre las larvas
y es por ello que la hipótesis nula para este acápite se mantuvo.
VII. RECOMENDACIONES

 El control biológico no tiene una eficiencia inmediata en agroecosistemas

desequilibrados ecológicamente de manera drástica como consecuencia de
manejos inadecuados de las plagas; pero se puede llegar aun manejo eficiente
trabajando con un enfoque de control integrado recabando información biológica
y practica que sirva de base para la toma de decisiones acertadas.

 El control químico debe evitarse en lo posible, deben utilizarse productos

selectivos que tengan poco o ningún efecto letal sobre los enemigos naturales.

 El Bacillus thuringiensis, no se encuentra muy fácil en el mercado local sino en la

fundación Proinpa – Cochabamba por lo cual se recomienda utilizar una cepa
tropical para su mayor efectividad y realizar mayores estudios.

 El hongo Beauveria bassiana se recomienda aplicar mayor dosificación y realizar

mayores estudios con otros hongos (Metarhizium anisopliae, Paecilomyces sp.)
para el control de la larva y (Cordiceps sp.) en el control de la pupa.

 El control Biológico debe fomentarse continuamente, aun sin la ocurrencia de

ataques severos; una buena opción es la utilización combinada de los parásitos
de huevos (Trichogramma spp.) con los predadores de larvas.

 El manejo integrado de Erinnyis ello debe iniciarse inmediatamente después de

la cosecha anterior aplicando medidas culturales como arar entre hileras y
combatir las malezas.
VIII. BIBLIOGRAFIA

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Paulo, BRA. Editora Monole. Pp 73 – 76.

ALLEM, A.C.1994. The origin of Manihot esculenta Crantz (Euphorbiaceae). Genetic

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Anexo 1. Efecto de entomopatógenos sobre Erinnyis ello, validación de laboratorio.

Bacillus thuringiensis Beauveria bassiana

1) Larvas de 1º y 3º 2) Larvas muertas 3) Larva muerta de 2º 4) Larvas muertas

estadío muertas por de diferentes estadío por acción del 1º estadío de
acción del bacilo del colores y estadíos del hongo, diferentes colores.
tratamiento a1b3. larvales. tratamiento a2b3.

5) Larva de 3º 6) Larva de 3º 7) Larva de 2º 8) Larva muerta de 2º

estadío con estadío con estadío con síntomas sin efecto alguno en
síntomas iníciales a síntomas finales, iníciales a la la proliferación del
la infección del con cuerpo infección del hongo. hongo en la cutícula.
bacilo. arrugado.

9) Larvas muertas 10) Larvas muertas 11) Larvas vivas del 12) Larvas vivas del 3º
del 3º estadío todas del 2º estadío por 4º y 5º estadío estadío sin efecto
con el cuerpo acción del bacilo, de larval sin efecto causado por el hongo.
arrugado y flácidas. cuerpo arrugado. alguno.
Anexo 2. Efecto de entomopatógenos sobre Erinnyis ello, validación de campo.

Bacillus thuringiensis Beauveria bassiana

1) Larvas muertas de 2) Larva muerta 3) Larva muerta de 4) Larva caída en el

1º, 2º y 3º estadío. colgada de sus 2º estadío plástico sobre agua.
patas

5) Larva con 6) larva de 4ºestadío 7) Larva muerta de 8) Larva con

síntomas iníciales. colgada sobre rama. 3º estadío. presencia del hongo.

9) Larva arrugada 10) Larvas 11) Larva muerta por 12) Toma de datos
sobre la rama defoliando las hojas. avance del hongo. de larvas caídas.
Anexo 3. Parásitos, predadores y patógenos de Erinnyis ello (L) gusano cachón de la yuca.

Agente benéfico Hábito Orden Familia

EN HUEVO
Trichogramma minutim Parásito Heminoptera Tachogrammatidae
T. fasciatum Parásito Heminoptera Trichogramatidae
T. exiguum Parásito Hymenoptera Trichogramatidae
T. semifumatum Parásito Hymenoptera Trichogramatidae
Telenomus dilophonatae Parásito Hymenoptera Scelionidae
Telenomus sphingis Parásito Hymenoptera Scelionidae
Ooencyrtus submetalicus Parásito Hymenoptera Encyrtidae
Ooencyrtus sp. Parásito Hymenoptera Encyrtidae
Chrysopa sp. Predador Neuroptera Chrysopidae
Dolichoderus sp. Predador Hymenoptera Formicidae

EN LARVA
Apanteles congregatus Parásito Hymenoptera Braconidae
Apanteles americanus Parásito Hymenoptera Braconidae
Euplectrus sp. Parásito Hymenoptera Eulophidae
Cryptophion sp. Parásito Hymenoptera Ichneumonidae
Microgaster flaviventris Parásito Hymenoptera Ichneumonidae
Sarcodexia innota Parásito Díptera Sarcophagidae
Chatogena (Euphorocera) Parásito Díptera Tachinidae
Thysanomyia sp. Parásito Díptera Tachinidae
Belvosia sp. Parásito Díptera Tachinidae
Drino macarensis Parásito Díptera Tachinidae
Polistes erythrocephalus Predador Hymenoptera Vespidae
Polistes versicolor Predador Hymenoptera Vespidae
Polistes carnifex Predador Hymenoptera Vespidae
Polistes cannadensis Predador Hymenoptera Vespidae
Polybia serícea Predador Hymenoptera Vespidae
Podisus nigrispinus Predador Hemíptera Pentatomidae
A continuación
Podisus sp. Predador Hemíptera Pentatomidae
Zellus sp. Predador Hemíptera Reduvidae
Alcaeorrhynchus grandis Predador Hemíptera Pentatomidae
Arácnidos: Familia Tomicidae, predadores de larvas más cuatro familias por reportar.
Bacillus thuringiensis Patógeno Eubacteriales Bacillaceae
Baculovirus erinnyis Patógeno Virus de granulosis

EN PREPUPA Y PUPA
Calosoma sp. Predador Coleoptera Carabidae

EN PUPA
Cordyceps Patógeno Sphaeriales Hypocreaceae
Fuente: CIAT, 1989.
Anexo 4. Control biológico: parasitoides, predadores y patógenos.

Figura 2. Figura 3. Huevo de Figura 4. Telenomus

Figura 1. Chrysopa
Trichogramma sp. Erinnyis ello sp. Parasitando
sp. Devorando
Parasitando huevos. parasitado. huevos de E. ello.
huevos (CIAT, 1989)

Figura 5. Ammophila sp. Figura 6. Pupas de Erinnyis ello

Transportando una larva de afectadas por el hongo Cordiceps.
Erinnyis ello a su nido

Fuente: CIAT, 1989

Figura 7. Avispa del genero Figura 8. Lygaeidae sp. Figura 9. Polybia serícea cazando
Chartegellus sp. Cazando una Alimentándose de larva de una oruga de Erinnyis ello.
larva de Erinnyis ello. Erinnyis ello.

Fuente: Guerra, 2010

Figura 10. Hormigas devorando Figura 11. Hormigas Figura 12. Pájaro Uchi
a larva cuando llega al suelo. depredando huevos. depredador natural de larvas.

Fuente: Elaboración Propia

Anexo 5. Experiencias en Puerto Carmen, Agua Dulce, Cocochi y Chayanta II.

Figura 1. Larvas Figura 2. Planta Figura 3. Conglomeración

defoliando hojas. defoliada, Puerto Carmen de larvas, Agua Dulce.

Figura 4. Convivencia con Figura 5. Oviposición en Figura 6. Cultivo

los colonos, Chayanta II. los yucales P. Carmen defoliado, Agua Dulce.

Figura 7. Captura del Figura 8. Trampeo de luz Figura 9. Larvas

adulto con trampa de luz en el cultivo de yuca. defoliando en la noche.

Figura 10. Recolección de Figura 11. Recolección de Figura 12. Preparación

pupas por los colonos larvas. de insumos.

Fuente: Elaboración Propia.

 Figura 13. Larvas empupando Figura 14. Captura de Figura 15. Ciclo larval de
en el suelo. adulto, hembra y macho. huevo a 5to estadío.

Figura 16. Huevos de Figura 17. Recolección Figura 18. Toma de datos
coloración verde y amarillo. de huevos, Agua Dulce. de la planta.

Figura 19. Fumigación en el Figura 20. Fumigación en Figura 21. Fumigación en

sector del Playón. Puerto Carmen. Cocochi.

Figura 22. Medición del Figura 23. Fumigación Figura 24. Fumigación con
plástico. con B. thuringiensis. Beauveria bassiana.

Figura 25. Fumigación con Figura 26. Fumigación en Figura 27. Toma de datos
entomopatógenos. el sector del Charal. después de la aplicación.

Fuente: Elaboración Propia.

Anexo 6. Características del cuerno caudal en cada estadío larval de Erinnyis ello, guía
para la identificación de larvas.

Estadío Cuerno Figura Detalle

caudal

Largo, fino y de
diámetro
uniforme
I (parecido a una
seta) de
pigmentación
negra.

Largo y fino,
pero de
diámetro más
II amplio en la
base, donde
comienza a
disminuirse la
pigmentación
negra.

Largo y en
III forma de cono
perfecto de
color crema
claro.

Largo y grueso,
IV imperfecto en el
tercio superior,
de color crema
claro.

V Grueso y
truncado

Fuente: Elaboración propia.

Anexo 7. Diferenciación sexual de Erinnyis ello, en estado pupal.

Gonoporo
(abertura genital)

Abertura anal

Cremaster

Fuente: CIAT, 1989.

Anexo 8. Influencia de la temperatura en el desarrollo de Erinnyis ello.

Días promedio de desarrollo de E. ello

120
100
huevo
80
larva
60
prepupa
40
pupa
20
0
15 20 25 30

Temperatura constante

Fuente: CIAT, 1989.

 Anexo 9. CRECIMIENTO DEL HONGO
Beauveria bassiana en el laboratorio del Instituto de
Investigaciones Fármaco Bioquímicas (IIFB)

(12 Días)

T Nro. Numero de días evaluados Forma Color Maduración

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Disco Blanco Blanco Cremoso

H.
1 1.4 2.6 3.5 4.4 5.4 6.0 6.8 7.3 7.6 8.0 8.5 Disco Blanco Blanco Cremoso

2 1.2 1.7 2.0 2.3 3.0 3.5 3.7 4.1 4.2 4.3 4.5 Disco Blanco Blanco Cremoso
A 3 1.0 1.6 2.1 2.7 3.3 3.9 4.4 4.8 5.5 6.2 6.7 Disco Blanco Blanco Cremoso
P 4 1.3 1.5 1.9 2.1 2.7 3.2 3.7 4.2 4.8 5.3 5.5 Disco Blanco Blanco Cremoso
L 5 1.4 1.8 2.4 2.7 3.1 3.5 4.0 4.3 4.5 4.9 5.2 Disco Blanco Blanco Cremoso
I 6 0.9 1.4 1.9 2.4 2.7 3.0 3.6 4.0 4.6 5.1 5.7 Disco Blanco Blanco Cremoso
C 7 0.6 1.0 1.3 1.7 2.0 2.4 2.9 3.3 3.7 4.1 4.7 Disco Blanco Blanco Cremoso
A 8 1.0 1.2 1.5 1.8 2.1 2.3 2.6 2.8 3.1 3.6 3.9 Disco Blanco Blanco Cremoso
D 9 1.5 2.1 2.6 3.1 3.7 4.2 4.7 5.0 5.6 6.0 6.3 Disco Blanco Blanco Cremoso
O 10 0.4 0.7 1.1 1.5 1.8 2.0 2.3 2.5 2.8 3.0 3.2 Disco Blanco Blanco Cremoso
FUENTE: Elaboración propia.

Anexo 10. ANVAS de efectos simples (Interacción Entomopatógeno x Dosis)

Para el estudio de laboratorio:

Cuadro 12. ANVA para el primer estadío

Fuente de variación G.L. S.C. C.M. F Cal. Pr > F (5%)

AB1 1 0,000 0,000 0,00920851 0,925135501 NS

AB2 1 0,005 0,005 0,64213841 1,363652696 NS
AB3 1 0,003 0,003 0,36421508 1,921062928 NS
Error 12 0,099 0,008
G.L. = Grados de libertad; S.C. = Suma de Cuadrados; C.M. = Cuadrado medio; F Cal. = F calculada; Pr> F =
Probabilidad de F; ns = no significativo.
Cuadro 13. ANVA para el segundo estadío

Fuente de variación G.L. S.C. C.M. F Cal. Pr > F (5%)

AB1 1 0,005 0,005 0,71927225 0,412980058 *

AB2 1 0,005 0,005 0,71927225 0,825960115 NS
AB3 1 0,000 0,000 0,01031464 1,746742516 NS
Error 12 0,089 0,007
G.L. = Grados de libertad; S.C. = Suma de Cuadrados; C.M. = Cuadrado medio; F Cal. = F calculada; Pr> F =
Probabilidad de F; ns = no significativo.

Cuadro 14. ANVA para el tercer estadío

Fuente de variación G.L. S.C. C.M. F Cal Pr > F (5%)

AB1 1 0,003 0,003 0,57479835 0,462988732 NS

AB2 1 0,014 0,014 2,67548692 0,59083317 NS
AB3 1 0,014 0,014 2,67548692 0,718677609 NS
Error 12 0,064 0,005
G.L. = Grados de libertad; S.C. = Suma de Cuadrados; C.M. = Cuadrado medio; F Cal. = F calculada; Pr> F =
Probabilidad de F; ** = Altamente significativo; no significativo.

Para el estudio de Campo:

Cuadro 24. ANVA para el primer estadío

Fuente de variación G.L. S.C. C.M. F Cal. Pr > F (5%)

AB1 1 1,012 1,012 69,1024121 3,30992E-05 **

AB2 1 0,004 0,004 0,28904416 0,605495026 NS
AB3 1 0,006 0,006 0,38031596 1,160069107 NS
Error 8 0,117 0,015
G.L. = Grados de libertad; S.C. = Suma de Cuadrados; C.M. = Cuadrado medio; F Cal. = F calculada; Pr> F =
Probabilidad de F; ** = Altamente significativo; ns = no significativo.
Cuadro 25. ANVA para el segundo estadío

Fuente de variación G.L. S.C. C.M. F Cal. Pr > F (5%)

AB1 1 0,874 0,874 19,8162628 0,002134908 **

AB2 1 0,229 0,229 5,20257833 0,054131827 *
AB3 1 0,015 0,015 0,34510463 0,627232179 NS
Error 8 0,353 0,044
G.L. = Grados de libertad; S.C. = Suma de Cuadrados; C.M. = Cuadrado medio; F Cal. = F calculada; Pr> F =
Probabilidad de F; ** = Altamente significativo; * = significativo; ns = no significativo.

Cuadro 26. ANVA para el tercer estadío

Fuente de variación G.L. S.C. C.M. F Cal. Pr > F (5%)

AB1 1 0,246 0,246 12,4327455 0,007777239 **

AB2 1 0,302 0,302 15,2456251 0,012292739 **
AB3 1 0,376 0,376 18,9755547 0,014718075 **
Error 8 0,158 0,020
G.L. = Grados de libertad; S.C. = Suma de Cuadrados; C.M. = Cuadrado medio; F Cal. = F calculada; Pr> F =
Probabilidad de F; ** = Altamente significativo; ns = no significativo.

Cuadro 27. ANVA para el cuarto estadío

Fuente de variación G.L. S.C. C.M. F Cal. Pr > F (5%)

AB1 1 0,016 0,016 1,88319445 0,207213221 *

AB2 1 0,016 0,016 1,88319445 0,414426442 *
AB3 1 0,241 0,241 28,4179957 0,415128252 **
Error 8 0,068 0,008
G.L. = Grados de libertad; S.C. = Suma de Cuadrados; C.M. = Cuadrado medio; F Cal. = F calculada; Pr> F =
Probabilidad de F; ** = Altamente significativo; * = significativo; ns = no significativo.