UNIVERSIDAD

NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(UNIVERSIDAD DEL PERÚ, DECANA DE AMÉRICA)

FACULTAD DE QUÍMICA E INGENIERÍA QUÍMICA

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ANALÍTICA E INSTRUMENTACIÓN

INFORME N°6
CROMATOGRAFÍA DE GASES
“Determinación de alcoholes”

Profesor: Gerardo De Lama Castillo

Apellidos y Nombres: Anchelia Medina ,Jefferson Smith 15070151

Alarcón Ortiz, Jhonatan David 17070129

13/08/2020
1. RESUMEN
El objetivo de este laboratorio es conocer los general, los componentes más afines a la fase
principios del manejo de equipos para el estacionaria avanzan lentamente (más
análisis por cromatografía de gases para dos retenidos) mientras que los más afines a la
muestras del pisco, para lo cual se procedió fase móvil (menos retenidos) se mueven con
preparando tres patrones de metanol a 100 mayor rapidez. Por consecuencia, el medio
ppm, 200 ppm, 400 ppm , luego se procedió a cromatográfico (columna, placa o papel)
la preparación de las dos muestras de pisco funciona como un controlador de la velocidad
usando volúmenes de 20 y 10 ml para cada de cada sustancia que constituye la mezcla,
fiola de 25 ml , para todos los casos se usó el logrando así su separación y mediante el uso
patrón interno n-butanol , dando como de un detector, su caracterización química.
resultado 5 gráficas cuyas áreas sirvieron para
elaborar una ecuación que relaciona la 3. MARCO TEÓRICO
concentración del analito en mg/L y la relación La cromatografía de gases es una técnica
de áreas. Luego de proceder con los cálculos cromatográfica en la que la muestra se
se obtuvo el porcentaje de metanol de cada volatiliza y se inyecta en la cabeza de un
muestra, 0.046703684% para la muestra de mechero de una columna cromatográfica. La
20 ml y 0.047327625% para la muestra 10 ml. elución se produce por el flujo de una fase
Palabras clave:cromatografía,patrón móvil de gas inerte. A diferencia de los otros
interno,pisco. tipos de cromatografía, la fase móvil no
interactúa con las moléculas del analito; su
única función es la de transportar el analito a
2.INTRODUCCIÓN través de la columna. Existen dos tipos de
En 1906, el botánico Ruso M. Tswett realizó cromatografía de gases (GC): la cromatografía
un experimento que condujo al descubrimiento gas-sólido (GSC) y la cromatografía gas-
de lo que hoy conocemos como líquido (GLC), siendo esta última la que se
cromatografía. Colocó un extracto de utiliza más ampliamente, y que se puede
pigmentos vegetales en la parte superior de llamar simplemente cromatografía de gases
una columna de vidrio rellena de carbonato de (GC). En la GSC la fase estacionaria es sólida
calcio (CaCO3). Al agregar éter, observó que y la retención de los analitos en ella se
la mezcla original se separaba en diversas produce mediante el proceso de adsorción.
bandas coloridas que descendían a través de Precisamente este proceso de adsorción, que
la columna a diferentes velocidades. no es lineal, es el que ha provocado que este
Un rasgo característico de la cromatografía es tipo de cromatografía tenga aplicación
la presencia de dos fases; dispuestas de tal limitada, ya que la retención del analito sobre
manera que mientras una permanece la superficie es semipermanente y se obtienen
estacionaria dentro del sistema (fase picos de elución con colas. Su única
estacionaria), la otra se desplaza a lo largo de aplicación es la separación de especies
él (fase móvil). La clave de la separación en gaseosas de bajo peso molecular. La GLC
cromatografía es que la velocidad con la que utiliza como fase estacionaria moléculas de
se mueve cada sustancia depende de su líquido inmovilizadas sobre la superficie de un
afinidad relativa por ambas fases (equilibrio de sólido inerte. La GC se lleva a cabo en un
distribución). En el experimento de Tswett, la cromatógrafo de gases. Este consta de
separación de los pigmentos vegetales se diversos componentes como el gas portador,
logró gracias a que cada uno de ellos tenía el sistema de inyección de muestra, la
una afinidad diferente por las fases. En columna (generalmente dentro de un horno), y
el detector
4.DETALLES EXPERIMENTALES enrasar se añadió 800 μL de solución
estándar interno; se enrasó la fiola con etanol
Parámetros Cromatográficos: al 40%, la homogenización de la solución se
realizó por inversión.
Columna Capilar: SPB - 608; Longitud: 30 m x
Estándar 3: Se midió 10 mL de solución stock
0,53 nm DI x 0,5 μm; Fase móvil:
en fiola de 25 mL; antes de enrasar se añadió
N2 ;Detector: FID; Temperatura del Horno: 400 μL de solución estándar interno; se
100º C; Temperatura del Detector: 200ºC ; enrasó la fiola con etanol al 40% %, la
Temperatura del Inyector: 150ºC; Volumen de homogenización de la solución se realizó por
inyección: 0,1 μL. inversión.

4.1 Preparación de la solución patrón stock 4.3 Preparación de las soluciones de la

y estándar interno muestra

Estándar interno: Se midió 386 uL de n- Preparación de la muestra: En una fiola de

butanol y se llevó a fiola de 25 mL para 25 mL se adicionó 20 mL de pisco, y en otra
enrasar con etanol al 40%, la homogenización fiola 10 mL de pisco, luego se añadió 400 μL
de la solución se realizó por inversión. de solución estándar interno (n-butanol) a
cada fiola y se enrasó con agua bidestilada, la
Solución stock: Se midió 127 uL de metanol(ρ homogenización de la solución se realizó por
= 0,7915) y se llevó a fiola de 100 mL para inversión.
enrasar con etanol al 40%, la homogenización
de la solución se realizó por inversión. 4.4 Determinación del contenido de
Metanol en mg/L y en %V/V MeOH
4.2 Preparación de las soluciones para la
curva de calibración Para determinar el contenido de Metanol en
mg/L y en %V/V de las muestras se graficó
Estándar 1: Se midió 5 mL de la solución primero la curva de calibración(Gráfico 1) de
stock y se llevó a fiola de 50 mL; antes de la relación de las áreas de metanol y n-
enrasar se añadió 800 μL de solución butanol( Tabla 1) de los estándares y sus
estándar interno, se enrasó la fiola con etanol concentraciones de metanol en mg/L(Tabla 2).
al 40% V/V%, la homogenización de la
solución se realizó por inversión. Luego se procede a extrapolar la relación de
las áreas de las muestras en la ecuación
Estándar 2: Se midió 10 mL de la solución obtenida en la curva de calibración. Los
stock y se llevó a fiola de 50 mL; antes de resultados se muestran en la Tabla 3.

Tabla 1. Relaciones de áreas de

estándares y muestras St1 111.37 602 0.185

St2 209.86 613 0.342349

Área
Área Área n- Metanol/Área
Metanol Butanol n-Butanol St3 393.89 599.14 0.657426

Bk 0 0 0
 Muestra1 298.1 615.7 0.484164

Muestra2 151.9 605.8 0.250743

Tabla 2. Concentraciones de los

estándares
Vol
Vol Stock Vol
Stock n- Tota 5.ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE
Metanol Butanol l Metanol %Metan
(ml) (µl) (ml) (mg/L) ol (v/v) RESULTADOS
El coeficiente de determinación resultó
Bk 0 0 0 0 0
0.9987 muy cercano a 1 lo que significa que
St1 5 800 50 100.5205 0.0127 existe un ajuste correcto de los puntos
experimentales a la curva de calibrado.
St2 10 800 50 201.041 0.0254
La concentración(%v/v) del metanol en el
pisco de la primera muestra fue de 0.04671%
St3 10 400 25 402.082 0.0508
y de la segunda muestra fue de 0.04733% con
una diferencia de 0.00062% entre ambas
concentraciones lo que indica que las
técnicas utilizadas fueron precisas.

Tabla 3. Concentraciones de las

muestras y de pisco puro 6.CONCLUSIONES
Las concentraciones de metanol de los piscos
Vol Vol de la Muestra 1 y Muestra 2 son
Mue Stock n- Vol respectivamente 369.659 mg/L y 374.598
stra( Butanol( Tota Metanol( %Metanol
ml) ml) l(ml) mg/L) (v/v)
mg/L ambos inferiores al límite máximo
permitido de 1500 mg/L del Reglamento de la
Muestra Denominación de Origen Pisco (Consejo
1 20 400 25 295.728 0.03736
Regulador de la D.O. Pisco, 2011) de lo que
Muestra 25 se concluye que el pisco analizado es apto
2 10 400 149.839 0.01893 para consumo humano.
Pisco
puro de 7.REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Muestra
1 − − − 369.659 0.04671
● CONSEJO REGULADOR DE LA
Pisco DENOMINACIÓN DE ORIGEN
puro de
Muestra
PISCO. 2011. Reglamento de la
2 − − − 374.598 0.04733 Denominación de Origen Pisco. Lima-
Perú.
● SKOOG, DOUGLAS A.; HOLLER, F.
Gráfico 1
JAMES; CROUCH, STANLEY R.
 (2007). Principios del análisis
instrumental.
● LEANDRO CASTAÑO D. , MURILLO
P. , MENDEZ A. , JOLI J.
Composición de ácidos grasos de
sacha inchi (plukenetia volúbilis
linneo) y su relación con la
bioactividad del vegetal 2012
● CALONGE M, PÉREZ-PERTEJO Y,
ORDÓÑEZ C, REGUERA RM,
BALAÑA-FOUCE R Y ORDÓÑEZ D.
(2010). Determinación de residuos de
siete insecticidas organofosforados en
frutas mediante cromatografía de
gases con detector de
nitrógenofósforo y confirmación por
espectrometría de masas
● ÁNGELA. M. LÓPEZ C. , WILLIAM. F.
GARZÓN M. , MILTON ROSERO-
MOREANO , GONZALO TABORDA
O. (2015). Análisis de cocaína en
diferentes muestras por cromatografía
de gases con detector de ionización
de llama (CG-FID).
● DIEGO A. AHUMADA , LLARYS W.
APARICIO , JEAN C. FUENTES ,
JAIRO A. GUERRERO , BRENDA I.
CHECA. (2012). Comparación de dos
aproximaciones para la estimación de 8.ANEXOS
la incertidumbre en análisis de 8.1 Ventajas de la cromatografía de gases
residuos de plaguicidas mediante ● Análisis rápido (minutos)
cromatografía de gases. ● Eficiente, provee alta resolución
● PÉREZ A. , SEGURA A. , GARCÍA R. ● Sensible, detecta fácilmente ppm y
Residuos de plaguicidas frecuentemente ppb
organofosforados en cabezuela de ● No destructivo, acoplamiento en línea
brócoli (Brassica oleracea) (espectrometría de masas)
determinados por cromatografía de ● Análisis cuantitativo con alta exactitud
gases (RSD 1-5%)
● GUTIÉRREZ Y. , MARTÍNEZ M., ● Requiere un volumen de muestreo
ALARCÓN A.(2011). Caracterización pequeño (uL)
química por cromatografía de ● Confiable y relativamente simple
gases/espectrometría de masas de
dos extractos obtenidos de 8.2 Desventajas de la cromatografía de
Phyllanthus orbicularis HBK gases
● Está limitada a muestras volátiles
● No se puede utilizar en muestras
térmicamente lábiles
● Es difícil para muestras
grandes(preparativas)
● Requiere espectroscopía(MS)para
confirmar la identidad de una señal
8.3 Aplicaciones de la cromatografía de mL/min y su relación de 1:5. El flujo de purga
gases en el área agroindustrial indicando del septum de 3,0 mL/min. El detector se
el analito, matriz, columna utilizada, gas utilizó con flujos de 30,0 mL/min de hidrógeno
portador y detector. y 300,0 mL/min de aire a una temperatura de
280 °C.
Determinación de residuos de siete
insecticidas organofosforados en frutas Comparación de dos aproximaciones para
mediante cromatografía de gases con la estimación de la incertidumbre en
detector de nitrógenofósforo y análisis de residuos de plaguicidas
confirmación por espectrometría de masas mediante cromatografía de gases

El análisis de las muestras se hizo mediante El análisis cromatográfico se llevó a cabo en

cromatografía de gases con detector de un cromatógrafo de gases HP6890N con
nitrógeno/fósforo (NPD), acoplado a un inyector automático 7683 Agilent Technologies
detector de espectrometría de masas con control electrónico de presión, equipado
(GC/MS). Se utilizó un cromatógrafo de gases con inyector split/splitless conectado a una
Fisons Instruments mod. 8560, con un columna capilar HP-5 (30 m, 0,32 mm d.i, 0,25
detector de masas modelo MD800, equipado µm) acoplada a un detector de nitrógeno-
con un inyector automático de muestras. fósforo (NPD). Las condiciones
Condiciones cromatográficas: Los plaguicidas cromatográficas empleadas en el análisis de
fueron separados por GC en una columna los plaguicidas fueron las siguientes: volumen
DB17 de 50% fenil-metilpolisiloxano (J & W de inyección 2 µL; inyección en modo splitless
Scientific) de 30 m de longitud por 0.25 mm de pulsado con presión de pulso de 275,8 kPa
diámetro interno y 0.25 µm de espesor de durante 0,3 min; tiempo de purga de 2,00 min,
fase. Para la determinación con detector de flujo de purga 40 mLmin-1 y temperatura de
nitrógeno fósforo (NPD), se utilizaron las inyector de 267 ºC. El gas portador fue helio.
siguientes condiciones cromatográficas.
Volumen de muestra 1 µL en splitless. Los Residuos de plaguicidas organofosforados
gases y sus correspondientes presiones, en cabezuela de brócoli (Brassica oleracea)
utilizados como fase móvil fueron: Helio (100 determinados por cromatografía de gases
kPa), nitrógeno (80 kPa), hidrógeno (50 kPa) y
aire (100 kPa). Los análisis se realizaron en un cromatógrafo
de gases Clarus 500 Perkin–Elmer, equipado
Análisis de cocaína en diferentes muestras con detector termoiónico (nitrógeno–fósforo),
por cromatografía de gases con detector un inyector automático (Perkin–Elmer)
de ionización de llama (CG-FID) operado en modo splitless con un volumen de
muestra de 1.0 µL, una columna capilar Elite 1
El análisis cuantitativo y cualitativo del analito de 15 x 0.25 mm, ID x 0.25 µm de espesor de
(cocaína tR=13,50 ± 0,25 min) se realizó por la película. Se utilizó helio como gas de
medio de estándar de cocaína-HCl (Lipomed arrastre, con una tasa de flujo de 17 mL y una
COC156-HC), realizando una curva de rampa de temperatura de 80 a 280 °C.
calibración con estándar interno (ntetracosano Adicionalmente, las muestras fueron leídas
C24 tR=11,50 ± 0,25 min) y una posterior bajo las mismas condiciones cromatográficas
inyección por la técnica de cromatografíca de con una columna Zebrón ZB–1701 de 30 x
gases acoplada a un detector de ionización de 0.25 mm, ID x 0.25 µm de espesor de la
llama (GC-FID). Se inyectó 1 µL de muestra película. Los resultados fueron utilizados de
en un equipo Shimadzu referencia QP-2010 manera confirmatoria, eliminando los picos
plus. Las condiciones fueron las siguientes: se que aparecían únicamente en una de las
utilizó una columna DB-1 (30 m x 0,25 mm x columnas.
0,25 µm) con He como gas de arrastre y gas
auxiliar a un flujo de 1,4 mL/min y 28,6 mL/min Caracterización química por cromatografía
respectivamente. La temperatura del inyector de gases/espectrometría de masas de dos
fue de 280 °C. El flujo del Split fue de 7,0
extractos obtenidos de Phyllanthus
orbicularis HBK
Los extractos se analizaron por CG acoplada
a EM utilizando un cromatógrafo de gases
Hewlett-Packard 6890 acoplado a un
espectrómetro de masas 5973. Las muestras
se redisolvieron en el mismo disolvente
utilizado para la extracción y se inyectaron
directamente en el equipo (1 µL, modo "split").
La separación se realizó en una columna
SPB-5 (5 m × 0,25 mm × 0,10 µm), utilizando
Helio como gas portador a un flujo de
1mL/min, siendo la temperatura del inyector
de 280 ºC. La temperatura inicial del horno fue
de 60 ºC por 2 min con programación de 4 ºC
por min hasta 100 ºC, incrementando a 10 ºC
por min hasta 290 ºC, la cual se mantuvo por
5min. El espectrómetro de masas fue operado
a 70 eV con un rango de masas desde 45-700
uma, siendo la temperatura de la fuente de
230 ºC. La identificación de los componentes
fue asignada por comparación de sus
espectros de masas con los ofrecidos por la
biblioteca del equipo (Base de datos NIST 98)
y los reportados en la literatura.

Composición de ácidos grasos de sacha

inchi (Plukenetia volúbilis Linneo) y su
relación con la bioactividad del vegetal
La identificación y cuantificación de los ácidos
grasos se llevó a cabo por cromatografía de
gases (CG-FID) y cromatografía de gases
acoplada a espectrometría masas (CG-EM),
previa derivatización a ésteres volátiles. Se
utilizó un cromatógrafo de gases AGILENT
6890N acoplado a masas AGILENT
TECHNOLOGIES NETWORK 5973 Mass
Selective Detector, Columna capilar 5%
difenil, 95% dimetil polisiloxano, WCOT Fused
Silica VF-5ms Varían 30m x 0,25mm x
0,25^m, Inyector: Gas portador: Helio,
Temperatura: 280°C Horno: Temperatura
inicial: 100 °C; temperatura final: 280 °C;
duración total: 53,50 minutos; detector de
masas Modo d-adquisición: scan; Rango de
masas bajo: 40, Rango de masas alto: 600.