Práctica 05 - Esterilización

UNIVERSIDAD NACIONAL DE
FRONTERA
FACULTAD DE INGENIERÍA DE INDUSTRIAS
ALIMENTARIAS
MICROBIOOGÍA DE LOS ALIMENTOS
GUÍA DE PRÁCTICAS
V CICLO
DOCENTE: BLGO. OSCAR JULIAN BERRIOS TAUCCAYA
SULLANA – PERÚ
2020
PRACTICA 04
PREPARACION Y ESTERILIZACION DE MATERIALES DE LABORATORIO
I. INTRODUCCIÓN
La esterilización es un proceso a través del cual se logra la destrucción total de los microorganismos
viables presentes en un determinado material. Este procedimiento es de gran utilidad dentro del campo
microbiológico y en las prácticas de laboratorio, ya que existen muchos procesos que requieren la
utilización de materiales estériles. Entre estos podemos destacar:
 La esterilización de equipos quirúrgicos y otros materiales de uso de prácticas de laboratorio con el

propósito de reducir el riesgo de infecciones en estudiantes que practiquen con dichos materiales.
 El acondicionamiento de los materiales como: pipeta, tubos de ensayo, placas de Petri, pinzas, matraz, etc.)
que va ser utilizado en los laboratorios de microbiología.
 La preparación de medios de cultivo que serán empleados con diferentes propósitos (cultivo de
microorganismos, control de ambiente, equipos o personal, análisis microbiológico de medicamentos,
cosméticos alimentos, etc.).
II. OBJETIVOS
2.1. General
Identificar los diferentes métodos de esterilización de los materiales de laboratorio de Microbiología de los
alimentos.
III. FUNDAMENTO TEÓRICO
El material a esterilizar se deberá de empacar correctamente con papel kraft, una de las razones de la
importancia del papel es que se puede adaptar a diferentes usos como: impedir el ingreso de
microorganismos al interior, sellar en forma completa para evitar contaminación, soportar la tracción
y manipulación habitual sin sufrir deterioro y hacer permeable al método de esterilización
seleccionado.
Para materiales que deben permanecer secos como ciertos instrumentos de vidrio de laboratorio tales
como: cajas de Petri, pipetas, así como aceites, polvos (por ser impermeables al vapor), los materiales
que no se pueden esterilizar por calor seco son: materiales textil (algodón, sedas, lino, etc.). Todo
material que se altere a la temperatura de trabajo se dispone de homos eléctricos por los que circula
aire caliente, en vista, de que el calor es menos eficaz en materiales secos, se acostumbra a aplicar una
temperatura de 160-C a 170-C durante una hora a más.
Esterilización previa
Será necesaria cuando el material y/ o equipos hayan sido utilizados con material infeccioso o presunto
infeccioso, por ejemplo placas de Petri inoculadas, tubos conteniendo cultivos de microorganismos,
frascos empleados en el cepario, etc. Serán esterilizados en autoclave a 1 atm. de presión durante 15 –
30 minutos.
Para las pipetas, micropipetas y tubos de hemólisis puede emplearse este método o sumergirlas
inmediatamente después de ser utilizadas en solución desinfectante de formol al 10 % durante una
hora.
Limpieza previa
Se realizará para eliminar las partes gruesas de suciedad o residuos no infecciosos (resto de pegamento,
cinta adhesiva, carbono, tinta de rotulado, etc.). Se empleará el raspado con espátulas, cepillo, esponjas
metálicas, paños, etc. Se enjuagará repetidas veces bajo el chorro de agua corriente a presión
(conectando a la canilla un tapón perforado o tapando parcialmente con un dedo). Se aconseja un
último enjuague con agua destilada. Se dejará secar en canasto o rejilla de alambre boca abajo a
temperatura ambiente o estufa a 80 a 90 °C.
El material de vidrio que luego de este tratamiento aún quedase manchado será sumergido en una
solución sulfocrómica durante 24 hs (Este procedimiento lo realiza personal especializado).
Preparación del material de vidrio
Este acondicionamiento debe realizarse de manera tal de asegurar la perfecta esterilización del mismo en todos
sus puntos y evitar la posterior contaminación.
IV. MATERIALES, REACTIVOS Y MUESTRAS

V.
5.1. Materiales y equipos
5.1.1. Equipos:
1. Mecheros.
2. Autoclave.
3. Estufa.
5.1.2. Materiales:
1. Caja de Petri.
2. Aza de siembra.
3. Espátulas metálicas.
4. Probeta de 100, 250, 500 y 1000 ml.
5. Tubos de ensayo.
6. Pinzas.
7. Tijeras.
8. Vaso Erlenmeyer de 50, 100, 250 y 500 ml.
9. Vaso Matraz de 250, 500 y 1000 ml.
10. Pipetas de 1, 5, 10 y 25 ml.
11. Escobillas de lavado para tubos, pipetas y probetas.
12. Asas y agujas de siembra microbiológicos.
13. Esponja de lavado.
14. Papel kraft
15. Algodón.
16. Gasa.
17. Pabilo.
18. Cinta adhesiva.
19. Franela o trapo de limpieza.
5.2. Reactivos
1. Agua destilada.
2. Alcohol al 70%.
3. Solución clorada al 5%.
4. Detergente.
5.3. Material biológico
1. No aplica.
VI. PROCEDIMIENTO
6.1. Preparación de material
1. Todo el material a esterilizar (vidrio o metal), debe de ser lavado con detergente y enjuagar, en
primer lugar con agua abundante de caño o grifo, para luego ser enjuagado con agua destilada.
2. Dejar secar a temperatura ambiente o llevarlo a estufa a una temperatura de 80 a 90 °C por un
tiempo de 15 a 20 minutos.
3. Una vez el material limpio y seco, ya está listo para su acondicionamiento para su esterilización.
5.1. Acondicionamiento
6.1.1. Placas Petri
Realizar según las indicaciones del docente.

6.1.2. Matraz
6.1.3. Tubos de ensayo

6.1.4. Pipetas
6.1.5. Vaso precipitado y probetas
6.1.6. Material de metal

6.1.7. Asas y agujas de siembra microbiológicas.
VII. FORMATO DE PRESENTACIÓN DE RESULTADOS
1) Señalar las diferentes técnicas de esterilización.

2) Señalar las diferentes técnicas de acondicionamiento del material. .
3) Señalar los parámetros óptimos en los diferentes equipos de esterilización.
VIII. CUESTIONAMIENTOS
1) Defina los términos y realice una comparación entre ellos. Sepsia, Asepsia, Desinfección y esterilización.
2) Señale los agentes desinfectantes comerciales y hable de su acción o función.
3) Hable sobre los equipos y/o sustancias esterilizantes.
4) ¿Cuál es la finalidad de empaquetar los materiales a esterilizar?
5) Cuándo tengo material de plástico o de goma, ¿cuál sería el método de esterilización?
6) Señale cuales son las unidades de presión y de estas cual se utiliza en el autoclave.

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PREPARACION Y ESTERILIZACION DE MATERIALES DE LABORATORIO

 La esterilización de equipos quirúrgicos y otros materiales de uso de prácticas de laboratorio con el

III. FUNDAMENTO TEÓRICO

Preparación del material de vidrio

IV. MATERIALES, REACTIVOS Y MUESTRAS

5.1. Materiales y equipos

5.3. Material biológico

6.1. Preparación de material

6.1.1. Placas Petri

Realizar según las indicaciones del docente.

Realizar según las indicaciones del docente.

6.1.3. Tubos de ensayo

Realizar según las indicaciones del docente.

Realizar según las indicaciones del docente.

6.1.5. Vaso precipitado y probetas

Realizar según las indicaciones del docente.

6.1.6. Material de metal

Realizar según las indicaciones del docente.

Realizar según las indicaciones del docente.

VII. FORMATO DE PRESENTACIÓN DE RESULTADOS

1) Señalar las diferentes técnicas de esterilización.

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