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    Produccion de Amoniaco A Partir de Arginina

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    El documento describe varias pruebas bioquímicas utilizadas para identificar bacterias, incluyendo pruebas que detectan la producción de amoniaco a partir de arginina, la fermentación de azúcares, la producción de acetoina a partir de glucosa, y la hidrólisis de lactosa, esculina y gelatina. Cada prueba involucra un sustrato, enzima y producto específicos así como un revelador para detectar cambios químicos.

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    Produccion de Amoniaco A Partir de Arginina

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    El documento describe varias pruebas bioquímicas utilizadas para identificar bacterias, incluyendo pruebas que detectan la producción de amoniaco a partir de arginina, la fermentación de azúcares, la producción de acetoina a partir de glucosa, y la hidrólisis de lactosa, esculina y gelatina. Cada prueba involucra un sustrato, enzima y producto específicos así como un revelador para detectar cambios químicos.

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    PRODUCCION DE AMONIACO A PARTIR DE ARGININA.docx

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    PRODUCCION DE AMONIACO A PARTIR DE ARGININA

    Sustrato: Arginina (caldo)

    Enzima: Hidrolasa o Descarboxilasa

    Producto: Amoniaco

    Revelador: Reactivo Nessier

    Fundamento: Detecta la hidrólisis de la arginina mediante la enzima que transforma este


    aminoácido en citrulina, con liberación de amoniaco.

    Reacción:

    FERMENTACION DE AZUCARES

    Sustrato: Carbohidrato

    Enzima: Deshidrogenasa

    Producto: Ácidos orgánicos

    Revelador: Indicador de pH

    Fundamento: Diferenciación de enterobacterias en base a su capacidad fermentativa de


    carbohidratos.

    Reacción:
    MIO

    Sustrato: Orinitina

    Enzima: Descarboxilasa

    Producto: Movilidad, producción de indol y descarboxilación de ornitina

    Revelador: Visible

    Fundamento: Para la identificación de Endobacterias. Este medio sirve para observar la movilidad,
    la producción de indol y descarboxilación de la ornitina.

    Reacción:

    PRODUCCION DE ACETOINA

    Sustrato: Glucosa fosfato (caldo)

    Enzima: Varias (ruta metabolica)

    Producto: Acetoína

    Revelador: Alfa naftol y KOH 40%

    Fundamento. Determinar la capacidad de algunos organismos de producir un producto final


    neutro de acetilmetilcarbinol (acetoína); a partir de la fermentación de glucosa.

    Reaccion:
    Prueba bioquímica: Actividad reductora (Leche tornasolada)

    Sustrato: Lactosa

    Enzima – analito: β-galactosidasa

    Producto: Ácido lactico

    Revelador: cambio de pH por acumulación de ácido láctico (Tornasol)


    Fundamento: Las bacterias hidrolizan la lactosa en glucosa y galactosa por medio la enzima β-
    galactosidasa, posteriormente la glucosa es fermentada obteniendo como productos CO2 , H y
    ácido láctico el cual acidifica el medio y provoca un vire en el medio por medio del indicador
    tornasol de azul a rojo.

    Prueba bioquímica: Hidrolisis de esculina

    Sustrato: Esculina (β – D – glucosa -6,7- dhidroxicumarina)

    Enzima – analito: β – Galactosidasa

    Producto: Glucosa y 6,7 dihidroxicumarina (Esculetina)

    Revelador: iones hierro

    Fundamento: La esculina es hidrolizada a glucosa y esculetina, la esculetina reacción con los iones
    de hierro presentes en el medio de cultivo para formar un compuesto de color negro.

    Prueba bioquímica: Hidrolisis de gelatina

    Sustrato: Gelatina (proteína)

    Enzima – analito: gelatinasa (proteasa exoenzima)

    Producto: Aminoácidos

    Revelador: no requiere, puede emplearse el carbón activado

    Fundamento: La gelatina es uan proteína que tiene la capacidad de gelificar, cuando es hidrolizad
    se descompone en sus aminoácidos y pierde su característica de gelificar, la gelatina se adhiere a
    el carbón activado por lo que al ser hidrolizada se pierde su adherencia.

    Prueba bioquímica: Tolerancia a la sal

    Sustrato: Cloruro de sodio

    Enzima – analito: No hay

    Producto: No hay

    Revelador: No hay

    Fundamento: capacidad de desarrollarse en cantidades variables de cloruro de sodio, dado que las
    bacterias no pueden la actividad del agua de su citoplasma más a alto que su exterior por lo que
    estos microorganismos en concentraciones relativamente altas de sal mantengan su citoplasma
    isosmótico.
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