Universidad Mayor De San Andrés

Facultad ingeniería
Carrera de Ingenieria Quimica

LABORATORIO DE
QUIMICA ANALITICA
CUANTITATIVA

ESPECTROFOTOMETRIA

Docente : Ing. Esperanza Del Carmen Diaz Garcia

Nombre: Yujra Flores Edzon
Carrera: Ing. Química
Fecha: 19/06/2020

La Paz - Bolivia
2020

ESPECTROFOTOMETRIA
1. OBJETIVOS

1.1. OBJETIVO GENERAL

- Determinar la concentración de la solución de permanganato de potasio

1.2. OBJETIVOS ESPECIFICOS

- Aprender los conceptos básicos de la espectrofotometría y la ley de Lambert-Beer

- Realizar la gráfica de absorbancia vs concentración del permang8anato de potasio.

- Aprender las diversas utilidades que posee es el espectrofotómetro.

- Aprender distintos métodos para determinar la concentración de una muestra de
concentración desconocida

2. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

2.1. EQUIPOS

1 Balanza analitica

1 Espectrofotometro
2.2. MATERIALES

4 Matraces aforado 25ml

4 Metraces aforado 50ml

1 Matraz aforado 100ml

1 Matraz aforado 250ml

2 Vasos de precipitado 600ml

2 Vasos de precipitado 250ml

5 Vasos de precipitado 100ml

2 pipetas 1ml

2 Pipetas 2ml
 2 Pipetas 5ml

1 Pipeta 10ml

1 Pipeta 25ml

2 Espatulas

2 Vidrio de reloj

2 Varillas de vidrio

1 Piceta

1 cepillo

2.3. REACTIVOS

1 Permanganato de potasio KmnO4

2 Agua destilada

3. MARCO TEORICO

3.1. Espectrofotometría:

La espectrofotometría es la medición de la cantidad de energía radiante que absorbe o

transmite un sistema químico en función de la longitud de onda; es el método de
análisis óptico más usado en las investigaciones químicas y bioquímicas. El
espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida o
transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una
que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.

En esta técnica se mide la cantidad de luz absorbida como función de la longitud de

onda utilizada. La absorción de las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas
depende de la estructura de las moléculas, y es característica de cada sustancia
química.

La espectrofotometría ultravioleta-visible utiliza haces de radiación del espectro

electromagnético, en el rango UV de 180 a 380 nm, y en el de la luz visible de 380 a
 780 nm, por lo que es de gran utilidad para caracterizar los materiales en la región
ultravioleta y visible del espectro.

La espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones

biológicas. El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación
absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de
soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.

Todas las sustancias pueden absorber energía radiante, aun el vidrio que parece ser
completamente transparente absorbe longitud de ondas que pertenecen al espectro
visible; el agua absorbe fuertemente en la región del infrarrojo.

La absorción de las radiaciones ultravioleta, visibles e infrarrojas depende de la

estructura de las moléculas, y es característica para cada sustancia química.

Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energía es absorbida; la energía

radiante no puede producir ningún efecto sin ser absorbida.

El color de las sustancias se debe a que éstas absorben ciertas longitudes de onda de
la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas
longitudes de onda no absorbida.

3.2. Espectrofotómetro
El espectrofotómetro permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una
solución que contiene una cantidad desconocida de soluto y una que contiene una
cantidad conocida de la misma sustancia.
Se compone de las siguientes partes:

Fuente de luz.- La fuente de luz ilumina la muestra química o biológica, pero para que
realice su función debe cumplir con las siguientes condiciones: estabilidad,
direccionabilidad, distribución de energía espectral continua y larga vida.

Las fuentes de luz que puede tener un espectrofotómetro son:

- Lámpara de wolframio (también llamado tungsteno)
- Lámpara de arco de xenón
- Lámpara de deuterio que es utilizada en los laboratorios atómicos

Monocromador.- El monocromador de un espectrofotómetro aísla las radiaciones de

longitud de onda deseada, logrando obtener luz monocromática.

Un monocromador está constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y

el elemento de dispersión.

Colimador.- El colimador es un lente que lleva el haz de luz entrante con una
determinada longitud de onda hacia un prisma, el cual separa todas las longitudes de
onda de ese haz logrando que se redireccione hacia la rendija de salida.

Compartimiento de muestra.- En el compartimento de muestra es donde se lleva a

cabo la interacción R.E.M. con la materia.

Detector.- El detector se encarga de evidenciar una radiación para que posteriormente

sea estudiada y saber a qué tipo de respuesta se enfrentarán (fotones o calor).

Registrador.- Convierte el fenómeno físico en números proporcionales al analito en

cuestión.

Fotodetectores.- Los fotodetectores de un espectrofotómetro perciben la señal en

forma simultánea en 16 longitudes de onda y cubren al espectro visible, de esta
manera se reduce el tiempo de medida y minimiza las partes móviles del equipo.
 3.3. . Métodos fotométricos de análisis:

La Radiación Electromagnética es una forma de Energía radiante que se propaga en

forma de ondas. En este fenómeno ondulatorio se define:

a) Longitud de onda (l): es la distancia entre dos máximos de un ciclo completo del
movimiento ondulatorio. Se expresa, según el S.I. en nanómetros (nm) y sus
equivalencias son: 1nm = 1mm =10 A0 = 10-9m.

b) Frecuencia (n): es el número de ciclos por segundo. Es inversa a la longitud de

onda. Su fórmula es: n = c/l, y se mide en ciclos por segundo o hertzios.

c) Fotones: la luz está formada por fotones, y estos son paquetes discontinuos de E. La
E de un fotón depende de la frecuencia y de la longitud de onda, según la siguiente
expresión: E = h x n = h x c/n (h = Cte. de Planck = 6,62.10-27erg/seg.). La Energía
Electromagnética se mide el Ergios. La relación entre la longitud de onda y la Energía
es inversa, por lo tanto a menor longitud de onda mayor Energía y viceversa.

d) Espectro Electromagnético: cubre un amplio intervalo de E radiante, desde los rayos

g de longitud de onda corta hasta las ondas de radio, de longitud de onda larga. Se
divide en varias regiones, las más interesantes para nosotros son:

- Región Ultravioleta: l = 10-380 nm

- Región Visible: l = 380-780 nm

- Región Infrarroja: l = 780-30.000 nm

En la Región Visible, la luz se descompone en colores. La luz blanca contiene todo el

espectro de longitudes de onda. Si interacciona con una molécula puede ser
dispersada o absorbida.

3,3.1. Fenómenos de interacción entre luz y materia:

3.3.1.1. Fenómeno de absorción:

Cuando una partícula que se encuentra en estado de reposo o estado fundamental

interacciona con un haz de luz, absorbe E y se transforma en una partícula en estado
excitado. La molécula absorbe la E de la onda y aumenta su energía, y ese aumento
de energía es igual a la E de la Radiación Electromagnética absorbida (E = h.v). La
partícula en estado excitado tiende a volver de forma espontánea a su estado de
reposo desprendiendo la E absorbida en forma de calor.
“Espectro de Absorción”. Cada especie absorbente, que recibe el nombre de
cromógeno, tiene un determinado espectro de absorción. El espectro de absorción es
un gráfico donde se representa en ordenadas la Absorbancia y en abscisas la longitud
de onda. La medida de la cantidad de luz absorbida por una solución es el
fundamento de la espectrofotometría de absorción.

Por eso es importante trabajar a la longitud de onda a la que la sustancia estudiada

absorbe la mayor cantidad de luz (a mayor cantidad de luz, mayor cantidad de
sustancia).

3.3.1.2. Fenómeno de emisión:

Algunos compuestos, tras ser excitados por la luz, vuelven al estado fundamental
produciendo la emisión de energía radiante. En este caso, lo que se mide es la
energía emitida y, en este fenómeno se basa la “fotometría de llama” o la
“fluorescencia”.

3.4. Transmitancia y Absorvancia:

‘’A mayor concentración, menos transmitancia, mayor absorbancia’’.

2.4. Ventajas de la espectrofotometría:

Las principales ventajas de la espectrofotometría son:

• Sensibilidad relativa elevada.

• Facilidad para realizar mediciones rápidas.

• Grado de especificidad relativamente elevado.

3.5. Ley de Beer:

La Ley de Beer afirma que la cantidad de luz absorbida por un cuerpo depende de la
concentración en la solución.

Por ejemplo, en un vaso de vidrio tenemos agua con azúcar disuelta y en otro vaso
tenemos la misma cantidad de agua pero con mayor cantidad de azúcar en solución.
El detector es una celda fotoeléctrica, y lo que se mide es la concentración de la
solución de azúcar.

Según la ley de Beer, si hiciéramos que un rayo de luz atravesara el primer vaso, la
cantidad de luz que saldría del otro lado sería mayor que si repitiéramos esto en el
segundo, ya que en este último las ondas electromagnéticas chocan contra un mayor
número de átomos o/y moléculas y son absorbidos por estos.

3.6. Ley de Lambert:

La Ley de Lambert dice que la cantidad de luz absorbida por un objeto depende de la
distancia recorrida por la luz.

Por ejemplo, retomando el ejemplo de los vasos, pensemos que ambos tienen la
misma cantidad de agua y la misma concentración de azúcar; pero el segundo tiene
un diámetro mayor que el otro.

Según la ley de Lambert, si hiciéramos que un rayo de luz atravesara el primer vaso, la
cantidad de luz que saldría del otro lado seria mayor que si repitiéramos esto en el
segundo, ya que en este último las ondas electromagnéticas chocan contra un mayor
número de átomos o/y moléculas y son absorbidos por estos, tal como se explicó en
la ley de Beer.

3.7. Limitaciones a la Aplicabilidad de la Ley de Beer:

*Se llaman desviaciones o limitaciones aparentes porque reflejan dificultades
experimentales más que alguna insuficiencia de la Ley de Beer por sí misma.

Limitaciones reales de la ley de Beer:

La ley de Beer es solamente aplicable a disoluciones en las cuales las interacciones,

dependientes de la concentración, entre moléculas o iones absorbentes sean
mínimas. Estas interacciones, que generalmente comienzan a aparecer a
concentraciones superiores a 0’01M, alteran las absortividades molares, , y, por
tanto, conducen a una relación no lineal entre A y c.

También surgen desviaciones reales debido a que la  de una sustancia depende del
índice de refracción de la disolución, que a su vez es dependiente de la concentración
de analito, cuando las concentraciones son mayores de 0’01M.

Desviaciones químicas:

Se producen desviaciones aparentes de la Ley de Beer cuando las especies

absorbentes experimentan disociación, asociación o reacción con el disolvente,
originando productos con características absorbentes distintas de las del analito.
Estos efectos que producen una alteración del equilibrio químico pueden ser debidos
al pH, presencia de complejantes, reacciones laterales, etc.

3.8. Aplicaciones:
Las aplicaciones principales son:

- Determinar la cantidad de concentración en una solución de algún compuesto

utilizando las fórmulas ya mencionadas;

- Ayudar en la determinación de estructuras moleculares;

- La identificación de unidades estructurales específicas, ya que estas tienen distintos

tipos de absorbancia (grupos funcionales o isomerías);

- Determinar constantes de disociación de indicadores ácido-base.

3.9. Tipos de espectrofotometría:

- Espectrofotometría de absorción molecular VIS-UV. 13,

- Espectrofotometría de absorción molecular IR.15.

- Espectrofotometría de absorción y emisión atómica.

- Espectrofotometría con atomizadores electrotérmicos.

- Espectrofotometría de emisión con plasma.

- Espectrofotometría de fluorescencia molecular

3.10. Colores de la luz visible:

4. PROCEDIMIENTO

4.1. ANALISIS DE LOS VIDEOS

Espectrofotometria Ultravioleta Visible.

Se denomina espectrofotometria a la medicion de cantidad de energia radiante que

absorbe un sistema quimico en funcion en la longitud de onda de la radiacion.

la espectrofotometria es basicamente una tecnica elemental utilizada para detenciones

especificas de moleculas se caracterizan por su precision, sencibiblidad y su
aplicabilidad a moleculas de distanta naturaleza ya se han contaminadas de
biomoleculas.

La espectrofotometria Ultravioleta Visible es tecnica analitica que permite determinar la

concentracion de un compuesto, se basa en que las moleculas absorben la
radiaciones magneticas y a su la cantidad de luz absorbida

para este tipo de medidas se emplea un espectrofotometro en cual la longitud de onda

esta comprendida entre los 100 – 800nm.

Determinación de cromo y manganeso en aceros mediante

espectrometría de absorción molecular

P
T=
P0
transmitancia: fraccion de la radiacion incidente transmitida por la disolucion
0≤T≤1

A : absorbancia 0≤A≤2

P T
A=log =−LogT =−log100 =2−log %T
P0 100

Ley de Beer: es aplicable a especies, ya que las absorbancias son aditivas.

A=abC donde: A= absotividad

B= camino optico 1cm

C= concentracion

- Preparacion de la muestra
 - Preparacion de la muestra
INICIO 0,15 gramos de muestra 30ml de H2O
calentar

Acero F553 6ml de H2SO4 cdo hasta

dil.

15ml de H3PO4 cdo

Calentar ebull. Enfriar H2O Añadir 5ml

HNO3

Calentar

Enfriar 5ml calentar añadir porciones 20ml

AgNO3 al 1% suavemente de K2S2O8

enfriar Calentar ebull Enfriar con Calentar ebull. 5

min

5 min 0.5g de KIO4

enrazar a 100ml FIN

5. DATOS, CALCULOS Y RESULTADOS

C (M) Absorbancia
0 0
2,00×10−5 0,251
4,00×10−5 0,492
6,00×10−5 0,695
8,00×10−5 0,943
10,00×10−5 1,205

a)
 C vs ABS
1.4

1.2
f(x) = 11862.86 x + 0
1 R² = 1
ABSORBANCIA

0.8

0.6

0.4

0.2

0
0 0 0 0 0 0 0
CONCENTRACION

b)

y = 11863*X + 0.0045

R² = 0.9989

c) absorbancia de 0,555. Y=0.555

X=[C]= concentracion

0.555 = 11863*X + 0.0045

[C ]= 4.64X10-5 [M]

desviacion estandar Sx = 0.0000374

[C] = 4.64X10-5 [M]

E = 0.000039
d) V = 10ml de muestra

V = 250 ml solucion

[C] = 5.21X10-5 [M]

 E = 0.000054

6. CONCLUSIONES

- Se sabe que los métodos espectroscópicos de análisis se basan en la medición de la

radiación electromagnética que es absorbida o emitida por una sustancia.

- Se puede observar que existe un pequeña diferencia en las dos concentraciones

calcculadas esta diferencia puede ser a causa de errores de nedicion en la
absorbancia o errores sisteamticos.

- Hemos concluido que a mayor concentración de soluto mayor va ser la absorción de

dicha solución.

- Se debe tener el cuidado, posterior a la cuantificación, de multiplicar la concentración

por el número de veces que se diluyo la muestra a analizar para así obtener el
resultado que requeríamos

- Finalmente es importante considerar que, si bien se prepara una curva de calibración

con límites de linealidad determinados, en más de algún caso la muestra a analizar
puede tener concentraciones que se encuentren por sobre ese límite de dilución. En
caso que ocurriera esto, lo más conveniente seria separar la muestra en varios
recipientes y diluir cada uno de ellos en diferentes medidas, para así tener una que se
pueda ubicar dentro del límite de linealidad y que por ende sea cuantificable.