2020

Laboratorio de Microbiología

TEMA: NORMAS DE SEGURIDAD Y MATERIALES DE LABORATORIO

INTEGRANTES:
Calixto Espiritu Jair

Fonseca Tello Amner Rudhy

Mitma Gómez lesly

Valdivia Muñoz Kelvin Anibal

CALLAO- PERU
2020
 ÍNDICE
1. INTRODUCCIÓN ............................................................................................................................. 1

2. OBJETIVOS ...................................................................................................................................... 2

3. MARCO TEÓRICO
3.1 Principio de bioseguridad
3.2 Bioseguridad
3.3 Desinfección y agentes desinfectantes
3.4 Esterilización
3.5 Lavado y esterilización de objetos de vidrio
3.6
4. EQUIPO Y MATERIALES DE LABORATORIO
4.1 El microscopio
4.2 La incubadora
4.3 La estufa
4.4 Autoclave
4.5 Contador de colonias
4.6 Placas Petri
4.7 Cabinas de bioseguridad
5. CONCLUSIONES
6. DISCUSIÓN
7. RECOMENDACIONES
8. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
9. CUESTIONARIO

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1. INTRODUCCIÓN

Los laboratorios de microbiología constituyen ambientes de trabajo especiales, que pueden presentar
riesgos de enfermedades infecciosas para las personas que se encuentren en o cerca de ellos. Algunos de
estos son patógenos o con potencial de convertirse en ellos. De acuerdo a lo anterior, es importante que
el personal que labora en las instalaciones conozca y aplique todos los conceptos de Bioseguridad. El
trabajo diario en el laboratorio es un trabajo de grupo, en donde la actitud de cada uno de los integrantes
ante las prácticas, así como el entrenamiento que posean en las técnicas requeridas para el manejo de
material contaminado, determinan su propia seguridad, así como la de sus compañeros y la de la
colectividad en general.

La bioseguridad en el laboratorio se refiere al conjunto de medidas preventivas destinadas a proteger la

salud de las personas que allí trabajan. El propósito básico es obtener un ambiente de trabajo seguro y
ordenado.

Para la elaboración de un análisis microbiológico es importante identificar en forma precisa el

microorganismo involucrado, para ello debemos obtener un cultivo axenico evitando a contaminación
de origen ambiental. Siendo entonces indispensable un resultado veraz por parte del laboratorio;
debemos descartar o eliminar falsos positivos causadas por esta clase de microbiota. Para realizar una
excelente práctica debemos comprender los principales básicos de la esterilización. La destrucción
completa de todos los microorganismos presentes sobre cualquier material o dentro de él es
indispensable en todos los procedimientos analíticos como la preparación e medios de cultivo y otros
materiales.

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2. OBJETIVOS

Dar a conocer lo importante que es conocer y aplicar las normas de seguridad dentro del
laboratorio de microbiología.
Conocer los Aspectos Básicos de la Bioseguridad y reglas generales de trabajo para el desarrollo
de actividades en el laboratorio de microbiología.
Reconocer las metodologías para la desinfección de superficies e implementos del laboratorio.
Aplicar métodos utilizados para la esterilización de medios de cultivo, materiales y accesorios
utilizados en el laboratorio
Reconocer los diferentes materiales y equipos que se usan en el laboratorio para el desarrollo de las
prácticas programadas.

3. MARCO TEORICO
3.1 PRINCIPIOS DE BIOSEGURIDAD

La seguridad en el laboratorio se puede definir como: "La situación carente de riesgo o con un riesgo
limitado, que resulta del cumplimiento de un conjunto de normas y prácticas para lograr este fin"
Bioseguridad: La seguridad biológica o bioseguridad, es la aplicación del conocimiento, de las técnicas
y de los equipos necesarios para prevenir la exposición del personal, del área de laboratorio y del
medio ambiente a agentes potencialmente infecciosos o biopeligrosos. Agentes Biopeligrosos: Son
todos aquellos agentes biológicos y materiales que son potencialmente peligrosos para los seres
humanos, los animales y las plantas. Entre ellos podemos citar: bacterias, virus, hongos, parásitos,
productos recombinantes, alérgenos, priones, etc.

Medidas generales de seguridad

Barrera La seguridad como prevención viene definida por una serie de barreras. Si estas fallan y ocurre
un accidente, es preciso efectuar un tratamiento precoz y adecuado para evitar un daño mayor y
posteriormente hacer un diagnóstico del fallo. Las barreras se rompen por fallos humanos y/o errores
mecánicos.

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 Barreras primarias: Las localizadas en tomo al origen del riesgo, como son: - Contenedores,
equipo e instrumental correcto y "buena práctica” (la técnica de trabajo ordenada v rigurosa es
probablemente la mejor protección que existe) - Uso de desinfectantes y cabinas de seguridad.
Barreras secundarias: Localizadas en el círculo del operador, incluirán: Programas de salud
laboral. -Vestimenta: uso de ropa adecuada, guantes, gafas, pelo recogido.
No frotarse los ojos o la nariz con las manos contaminadas.
No inhalar los aerosoles producidos durante la centrifugación, la sedimentación o el derrame de
cultivos líquidos.
Evitar ingerir microorganismos por accidente, al llevarse los dedos o el lápiz a la boca. -No
sufrir inoculación percutánea, por ejemplo, al pincharse con una aguja.
No comer, beber, fumar o aplicarse cosméticos.
No colocarse o quitarse lentes de contacto.
No pipetear con la boca. -Las heridas en las manos deben vigilarse, ya que pueden ser una
puerta de entrada a la infección. En caso de tenerlas, deben cubrirse adecuadamente con
material resistente al agua.
Lavarse a conciencia las manos y otras superficies de la piel tras quitarse los guantes e
inmediatamente después de cualquier contaminación.

3.2 BIOSEGURIDAD

Normas Generales para el Trabajo de Laboratorio:

1. El ingreso al laboratorio, debe estar regulado por el responsable del mismo y limitado al personal

autorizado.

2. El personal que ingresa a las instalaciones debe responsabilizar del cumplimiento de las normas

de bioseguridad

3. El laboratorio siempre debe permanecer LIMPIO Y ORDENADO, durante la ejecución de la

preparación de las muestras, siembra y lectura de las pruebas experimentales.

4. Todas las áreas deben estar rotuladas con la señal de riesgo biológico.

5. No pipetee con la boca, utilice para ellos bombas pipeteadoras o el dispositivo adecuado.

4
6. Ingrese al laboratorio con mandil blanco, abotonado y limpio.

7. Las mesas de trabajo deben permanecer libres de objetos y pertenencias personales.

8. Las puertas y ventanas deben permanecer cerradas durante el desarrollo de las prácticas.

9. Lave correctamente las manos al inicio y final de las prácticas según anexo 02.

10. AL INICIO Y AL FINALIZAR las pruebas experimentales limpie la superficie de trabajo con

solución desinfectante y ubique adecuadamente los bancos y materiales y equipos utilizados.

11. Las personas con cabello largo deben recogerlo al inicio de las actividades, así como utilizar,

mandil blanco y el uso de mascarilla según anexo 03.

12. Prohibido comer, beber, aplicarse cosméticos, utilizar zapatos cerrados y mantener las uñas

cortas, limpias y sin esmalte.

13. No manipule equipos sin la autorización respectiva y menos si no posee las destrezas para

hacerlo.

14. Realice el transporte de muestras dentro o entre laboratorios en los recipientes apropiados (cajas

herméticas o hielo seco), con los cuales se eviten salpicaduras y sean de fácil desinfección.

15. Al finalizar las practicas, disponga el material contaminado o limpio en sus respectivos lugares

pero No sobre las mesas de trabajo.

16. Evitar el contacto de la piel con material infeccioso. El uso de guantes es adecuado para la

manipulación de muestras o cultivos de patógenos. Si a utilizado guantes, deberá desecharlos

antes de salir del trabajo y NO tocar implementos, puertas, equipos o materiales con ellos

puestos.

17. Los derrames y accidentes deben ser informados inmediatamente al profesor del laboratorio.

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 18. Cada grupo de trabajo debe contar con su equipo básico de trabajo (jabón desinfectante, lápiz o

marcador de vidrio, papel toalla, asa bacteriológica, guantes pipetas de 1, 5 y 10 mL, medios de

cultivo de acuerdo a lo solicitado por el docente, 06 placas Petri, Probetas de 10 mL, Frasco de

vidrio1 L).

3.3 DESINFECCION Y AGENTES DESINFECTANTES

en este proceso se eliminan los agentes patógenos reconocidos, pero no necesariamente todas las
formas de vida microbianas. Es un término relativo, donde existen diversos niveles de desinfección,
desde una esterilización química, a una mínima reducción del número de microorganismos
contaminantes. Estos procedimientos se aplican únicamente a objetos inanimados.
a) Reducir el mayor número de microrganismos (al menos todos los patógenos).

b) No debe ser corrosivo, toxico o irritante para los tejidos

c) Debe ser soluble en agua.

Para el laboratorio de microbiología existen diferentes moléculas que pueden ser utilizadas con fines
de desinfección.

Agentes desinfectantes comúnmente utilizados en microbiología y sus mecanismos de acción.

Realizar los cálculos para la preparación de las siguientes soluciones:

C1* V1= C2*V2

C1: Concentración de la lejía a usar (52500 ppm)

V1: Volumen de lejía
C2: Concentración de lejía requerida de acuerdo al área a desinfectar (50, 100, 200, 400 ppm).
V2: Volumen de agua que se requiere preparar (1, 2, 5,10, 20 litros).

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3.4ESTERILIZACION
es el proceso mediante el cual se alcanza la muerte de todas las formas de vida microbianas,
incluyendo bacterias y sus formas esporuladas altamente resistentes, hongos y sus esporos, y virus. Se
entiende por muerte, la pérdida irreversible de la capacidad reproductiva del microorganismo.
(¿deberían estar incluidos dentro de esta definición la eliminación de estructuras como los priones?) Se
trata de un término absoluto, donde un objeto está estéril o no lo está, sin rangos intermedios.

3.5LAVADO Y ESTERILIZACION DE MATERIALES DE VIDRIO

Los microorganismos pueden producir enfermedades cuando infectan personas, animales y plantas
y cuya gravedad oscila entre una infección débil, intoxicación e incluso la muerte. Las buenas prácticas
de laboratorio exigen el uso de piezas de vidrio limpias, dado que, aunque se tomen los mayores
recaudos al completar los procesos, el empleo de instrumentos de vidrio sucios puede arrojar
resultados erróneos. En todo momento, resulta fundamental que el material de vidrio se encuentre
física y químicamente limpio y, en muchos casos, debe estar estéril. El material no debe tener ningún
residuo de grasa. El criterio más seguro de limpieza se logra humedeciendo la superficie de manera
uniforme con agua destilada. Esto resulta especialmente importante en el material de vidrio empleado
para medir el volumen de los líquidos. La grasa y otros materiales contaminantes impiden que se
pueda humedecer el vidrio de forma uniforme. A su vez, esto altera el volumen de residuo que se
adhiere a las paredes del recipiente de vidrio y, por lo tanto, afecta el volumen del líquido medido o
suministrado. Además, en el caso de las pipetas y buretas, se distorsiona el menisco y no se pueden
realizar los ajustes correctos. Es posible que la presencia de pequeñas cantidades de impurezas también
altere el menisco.

. Las principales razones para controlar la

contaminación y el crecimiento microbiano. Las principales razones para controlar a los
microorganismos pueden resumirse de la siguiente forma:
• Para evitar la transmisión de las enfermedades y las infecciones.
• Para eliminar los microorganismos de un hospedador que está infectado.
• Para eliminar microorganismos de diferentes materiales y así evitar su deterioro y alteración.
Se utilizan varios términos específicos para escribir a estos agentes y procesos:

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 Esterilización: Se denomina esterilización al proceso por el cual se obtiene un producto libre de
microorganismos viables. El proceso de esterilización debe ser diseñado, validado y llevado a cabo
para asegurar que es capaz de eliminar la carga microbiana del producto o un microorganismo más
resistente.
Figura 1: Esterilización de asas de siembra

Fuente:https://www.google.com/search?q=esterilizacion+de+asa+de+siembra&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=
2ahUKEwi1ub7L8qrpAhXvguAKHbv8ALkQ_AUoAXoECA8QAw&biw=1600&bih=708#imgrc=vRQF3DtKgmcA5M

Desinfectante: Un agente, usualmente un producto químico que mata las células vegetativas

pero no necesariamente las formas esporuladas de los microorganismos productores de

enfermedades, se denomina un desinfectante.

Antiséptico: Una sustancia que se opone a la infección (sepsis) o previene crecimiento o acción

de los microorganismos, bien sea destruyendo o bien inhibiendo su crecimiento o actividad, se

denomina un antiséptico. El término está usualmente asociado a sustancias aplicadas al cuerpo.

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Higienización: Un agente que reduce la población microbiana hasta niveles que se juzgan

seguros para las exigencias de la salud pública se denomina un higienizaste. Usualmente es un

agente químico que mata el 99.9% de las bacterias en crecimiento. Los higienizantes suelen

aplicarse a objetos inanimados y generalmente se emplean en el cuidado diario de equipos y

utensilios en las plantas lecheras y de preparación de alimentos, así como para los vasos, platos

y utensilios en los restaurantes. El proceso de desinfección producirá higienización.

Germicida (microbicida): Un agente que mata las células vegetativas, pero no necesariamente

las formas esporuladas de los gérmenes se llaman germicida (microbicida). En la práctica,

germicida es casi sinónimo de desinfectante. Pero

Un germicida se usa generalmente para toda clase de gérmenes microbios y para cualquier

aplicación.

Bactericida: Un agente que mata las formas vegetativas de las bacterias. Del mismo modo, los

términos fungicida, viricida y esporocida se refieren a agentes que matan a los hongos, virus y

esporas respectivamente.

Bacteriostasis: Una condición en la que se previene (se inhibe) el crecimiento de las bacterias

se denomina bacteriostasis (adjetivo: bacteriostático. Del mismo modo, fungistático describe la

acción de un agente que detiene el crecimiento de los hongos. Inhibición del crecimiento de

las bacterias sin destruirlas.Agente Antimicrobiano: El término de agente antimicrobiano se refiere a

un agente que interfiere con el crecimiento y metabolismo de los microbios. En el uso común, el

término denota inhibición de crecimiento y cuando se refiere a grupos específicos de organismos,

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 suelen usarse con frecuencia los términos tales como antibacteriano o anti fúngico. Algunos agentes

antimicrobianos se utilizan específicamente para el tratamiento de infecciones, estos se

denominan agentes terapéuticos.

4. EQUIPOS Y MATERIALES DE LABORATORIO

4.1 EL MICROSCOPIO

El invento del microscopio fue el punto de partida, que dio lugar el surgimiento de la microbiología
como ciencia, estando su desarrollo influido a gran medida, por el perfeccionamiento de las técnicas
microscópicas. Son instrumentos ópticos o electrónicos con u elevado poder resolutivo, que posibilita la
observación de microorganismo, células y otras estructuras microscópicas, al proporcionar una imagen
aumentada virtualmente del tamaño real a total magnitud que posibilitan su observación a través de su
empleo.

Los microscópicos ópticos se clasifican en simples y compuesto, el primero esta formado por una sola
lente convergente, que proporciona una imagen virtual, debido a su limita capacidad de ampliación, no
se puede observar con ellos objetos microscópicos muy pequeños cuyos detalles escapan a la agudeza
visual del ojo humano.

A diferencia de los microscopios simples, los compuestos funcionan mediante la combinación de varias
lentes, que conjuntamente con una fuente de iluminación, forman parte del sistema óptico, que tiene
como soporte a un sistema mecánico, provisto de diversas piezas y aditamentos que deben ser
manipulados para lograr y mantener el enfoque de la preparación, recorrerla y observar la cantidad de
campos microscópicos que sean pertinentes.

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0
DESCRIPCIÓN DE LAS PARTES DEL MICROSCOPIO

PARTE MECÁNICA

Pie base o soporte basal: Es una pieza maciza y pesada para asegurar la estabilidad del aparato y

servir de soporte a sus demás partes.

Platina: Es una pieza metálica redonda o cuadrada, donde se colocan las preparaciones; tiene en el

centro una abertura por la cual pasan los rayos luminosos procedentes del sistema de iluminación.

En los microscopios corrientes puede estar fija o adosada a un carro con los tornillos de cremallera

que permiten dos movimientos de traslación para controlarla, y también, si los tornillos están

graduados para medir sus desplazamientos.

Tubo: En él está instalado el sistema óptico. Está constituido por dos tubos o cuerpos. Uno de ellos

externo, en el cual se encuentran la cremallera y el ocular y otro interno adosado al interior, donde

está el objetivo. Son corrientes en los aparatos modernos los binoculares, que facilitan la visión con

ambos ojos.

Revolver: Pieza circular y giratoria. En ella se insertan en sentido anti horario los objetivos; sin

embargo su movimiento, para colocar en posición un objetivo, debe ser en sentido horario.

Brazo o soporte vertical: Parte por medio de la cual debe asirse el microscopio para transportarlo

de un lugar a otro.

Carro o escuadra, Pinzas: Parte mecánica accionable, mediante dos tornillos que permiten

movimientos laterales o longitudinales para colocar la preparación en posición de observación. En

algunos casos son reemplazables por pinzas.

Tornillo micrométrico: Tornillo de paso largo y por el cual se ejecutan desplazamientos a veces

imperceptibles a simple vista.

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Tornillo micrométrico: En contraposición al anterior su paso es pequeñísimo y sus

desplazamientos a veces imperceptibles. Debe utilizarse con sumo cuidado.

PARTE ÓPTICA

Objetivos: Son uno de los elementos más importantes del microscopio. Están formados por la

reunión de varias lentes para corregir las aberraciones. Deben tratarse con mucho cuidado, pues

cualquier golpe puede variar la posición de las lentes y averiarlas. Se atornillan a la parte del tubo o

al revolver porta-objetivos.

Objetivos: Son uno de los elementos más importantes del microscopio. Están formados por la

reunión de varias lentes para corregir las aberraciones. Deben tratarse con mucho cuidado, pues

cualquier golpe puede variar la posición de las lentes y averiarlas. Se atornillan a la parte del tubo o

al revolver porta-objetivos.

En cuanto a los objetivos tenemos dos clases:

Objetivos secos: Son los que se emplean más corrientemente. Entre la lente frontal y el porta
objetivos sólo hay aire. A este grupo pertenecen los objetivos de menores aumentos tales como 10X
y 40X.
Objetivos de inmersión: Como se había mencionado anteriormente se llama así a aquellos en los
cuales, para la observación de interponerse entre la lente frontal y la preparación un líquido como
por ejemplo aceite.
Oculares: Los forman dos lentes separados por un diafragma y van montados en la parte superior
del tubo. La lente superior se llama lente ocular; la inferior lente de campo.
Sistema de Iluminación: Se encuentra situado bajo la platina y tiene la misión de iluminar los
objetivos por medio de la luz transmitida, con excepción de los microscopios que utilizan el sistema
de iluminación descrito anteriormente.
Espejo: Redondo y adaptable a las más variables posiciones, tiene una superficie plana y otra
cóncava que pueden intercambiarse a voluntad.
Diafragma: Va montado sobre la platina y permite graduar según la necesidad, la intensidad
luminosa; el más usado hoy es el tipo iris, accionable mediante manecilla lateral.

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 Condensador: Consta de un sistema de lentes colocados bajo la platina. Su función es condensar
el haz de rayos luminosos, permitiendo una iluminación uniforme del campo microscópico. Se
acciona por medio de un tornillo, el cual permite graduar la intensidad.

figura 1: sitema mecanico

Fuente:https://www.google.com/search?q=microscopio+unilocular&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=2ah
UKEwjuvOO_7arpAhVuUN8KHfKZCLIQ_AUoAXoECAwQAw&biw=1600&bih=708#imgrc=X9v9Ur-MNOMo5M

RECOMENDACIONES PARA LA ADECUADA CONSERVACIÓN DEL MICROSCOPIO

No tocar nunca las lentes: Si se ensucian estas, limpiarlas suavemente con papel de seda especial
para lentes.

No dejar el porta-objetos sobre la platina, cuando no se está usando el microscopio.

Limpiar siempre el objetivo de inmersión después de usarlo. Si involuntariamente los objetivos de
pocos aumentos se manchan de aceite, limpiarlos suavemente con papel especial.

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Mantener seca y limpia la platina del microscopio, si se derrama sobre ella algún líquido, secarla con
un paño.

No inclinar el microscopio cuando se está trabajando con aceite de inmersión. Este puede caer al
sistema mecánico de la platina de donde es difícil limpiarlo, o puede gotear al condensador y allí
solidificarse.

Cuando no esté en uso el microscopio, cubrirlo con la funda y guardarlo.

No bajar el tubo del microscopio con el tornillo de enfoque grueso mientras se está mirando por el
Ocular.

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 4.2 INCUBADORA
Es una cámara de temperatura controlada para cultivo de microorganismos.
Se utiliza para facilitar el desarrollo de los microorganismos a su temperatura óptima de crecimiento
(generalmente 35-37º)

Figura: incubadora

Fuente:https://www.google.com/search?q=incubadora+quimica&tbm=isch&ved=2ahUKEwiy9aWK86rpAhULVzABHfv
gCBQQ2cCegQIABAA&oq=incubadora+quimica&gs_lcp=CgNpbWcQAzICCAA6BAgAEEM6BggAEAgQHjoECAAQGDoGCA
AQChAYUI8PWOoWYPEXaABwAHgAgAGBBYgBixOSAQkyLTIuMS4xLjKYAQCgAQGqAQtnd3Mtd2l6LWltZw&sclient=img
&ei=l8q4XvLNC4uuwbkP-8GjoAE&bih=708&biw=1600#imgrc=OmYYNfGeQoSQSM

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 4.3. ESTUFA: es un equipo que se utiliza para secar y esterilizar recipientes de vidrio y metal
en el laboratorio, se identifica también con el nombre de horno de secado.

Figura: estufa

Fuente:https://www.google.com/search?q=estufa+de+quimica&tbm=isch&ved=2ahUKEwjgqfG986rpAhWqTDABHU
JXBxcQ2-
cCegQIABAA&oq=estufa+de+quimica&gs_lcp=CgNpbWcQAzICCAAyBggAEAgQHjIECAAQHjIGCAAQCBAeOgQIABBDUNI
KWJYVYIwWaABwAHgAgAGMAogB3gySAQMyLTeYAQCgAQGqAQtnd3Mtd2l6LWltZw&sclient=img&ei=A8u4XqCcF6qZ
wbkPwq6duAE&bih=708&biw=1600#imgrc=X-RIwxfZukq7tM

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 4.4. AUTOCLAVE: Es un sistema cerrado donde se forma vapor de agua que se somete a una presión
elevada, una atmósfera, lo que hace que el agua alcance una temperatura de 121ºC causando la
desnaturalización de enzimas lo que conlleva a la muerte de los microorganismos y la destrucción de las
esporas. Habitualmente, se esteriliza a 121ºC durante 20 minutos.

Figura: autoclave

Fuente:https://www.google.com/search?q=autoclave&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=2ahUKEwj-
pJvz86rpAhXLneAKHSJWDxQQ_AUoAXoECBIQAw&biw=1600&bih=708#imgrc=jOXp89k4hrg7lM

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4.5 CONTADOR DE COLONIAS: Los contadores de colonias determinan el número de colonias
presentes en placas de muestra para una eficiencia de trabajo maximizada. Estos equipos aceleran la
investigación médica y biológica que requieren tasas de crecimiento de microorganismos. Al ser capaces
de medir la concentración de muestra, permiten añadir a los cultivos las cantidades de reactivos químicos
de manera exacta según las ratios necesarias. Los contadores de colonias son más precisos que los
cálculos manuales y también tienen software para exportar imágenes e información para su análisis
posterior.

.Figura: contador de colonias

Fuente:https://www.google.com/search?q=contador+de+colonias&tbm=isch&ved=2ahUKEwiZ5bD186rpAhXl
RDABHRnaDV0Q2-
cCegQIABAA&oq=contador+de&gs_lcp=CgNpbWcQARgAMgQIABBDMgIIADICCAAyAggAMgIIADICCAAyAggAM
gIIADICCAAyAggAOgUIABCDAVCkqAZYjMgGYMLQBmgCcAB4AIAB6gGIAe4VkgEEMi0xM5gBAKABAaoBC2d3cy1
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4.6 PLACAS PETRI: es un recipiente que se usa en el laboratorio, el cual tiene una forma cilíndrica y
está elaborado en vidrio. Este recipiente posee una tapa cilíndrica la cual tiene un diámetro un poco
mayor de manera tal de que pueda encajar sobre el otro recipiente.

Su uso es muy común en el laboratorio de microbiología para realizar los cultivos de bacterias,
examinar el comportamiento de pequeños animales, entre muchos otros usos.

Cuando se desea estudiar un cultivo de bacterias, es necesario realizar lo que se llama siembra de lo
que se quiere cultivar, para ello, se debe colocar en el recipiente de la parte inferior cierta cantidad de
bacterias.

Figura: placas de Petri

fuente:https://www.google.com/search?q=placas+de+petri&tbm=isch&ved=2ahUKEwighOep9KrpAhWFtTEK
HVCyCAcQ2-
cCegQIABAA&oq=placas+de+&gs_lcp=CgNpbWcQARgAMgQIABBDMgIIADICCAAyAggAMgIIADICCAAyAggAMgII
ADICCAAyAggAUJC3BVjwwQVg4M0FaABwAHgAgAHsAYgBkRGSAQQyLTEwmAEAoAEBqgELZ3dzLXdpei1pbWc&
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4.7 CABINA DE BIOSEGURIDAD (BSC): Es equipo diseñado para controlar los aerosoles y
micropartículas asociados al manejo del material biológico, potencialmente tóxicos o infecciosos, que
se generan en los laboratorios como resultado de actividades como la agitación y centrifugación, el uso
y manejo de pipetas, la apertura de recipientes con presiones internas diferentes a la atmosférica,
utilizando condiciones apropiadas de ventilación.

Las cabinas se han diseñado para proteger al usuario, al ambiente y la muestra con la que se trabaja. Se
las conoce también como Cabinas de flujo laminar y/o gabinetes de bioseguridad.

También llamado un gabinete de seguridad biológica o cabina

de seguridad microbiológica -es una, ventilado cerrado de laboratorio del área de trabajo para

trabajar de forma segura con los materiales contaminados con (o potencialmente contaminados con)

los microorganismos patógenos que requieren un definido nivel de bioseguridad.

Poner en marcha la cabina de bioseguridad

1. Preparar el área de trabajo

2. Apagar la lámpara UV.

3. Encender la luz fluorescente

4. Verificar que la posición del marco de la ventana frontal es la correcta (la abertura frontal varía entre
8 y 10”,20,32 y 25,4 cm)

5. Verificar que las rejillas de retorno del aire (frontales y traseras) se encuentren libres de
obstrucciones

6. Encender el ventilador de la cabina de bioseguridad

7. Permitir que el aire fluya libremente al menos por cinco minutos. algunos especialistas recomiendan
esperar

15 minutos

8. Verificar la lectura del manómetro indicador de presión

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 Figura: cabina de bioseguridad

Fuente:https://www.google.com/search?q=cabina+de+bioseguridad&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=2a
hUKEwiMgL_89KrpAhXpnuAKHU2OCqcQ_AUoAXoECBAQAw&biw=1600&bih=708#imgrc=d9BaeJWWNWCMX
M

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5.CONCLUSIONES
Los estudiantes de los laboratorios de microbiología trabajan con microrganismos infecciosos o con
materiales que los contiene.
Algunos de estos microorganismos son patógenos o con potencial de convertirse en ellos. De acuerdo
a lo anterior, es importante que el personal que labora en las instalaciones conozca y aplique todos
los conceptos de Bioseguridad
La destrucción completa de todos los microrganismos presentes sobre cualquier material o dentro de
él es indispensable en todos los procedimientos analíticos como la preparación e medios de cultivo
y otros materiales.
La autoclave es el mecanismo de destrucción microbiana más efectivo y bien utilizado asegura
esterilización (destruye la forma de vida vegetativa y esporulada).
Recordar que todo equipo está diseñado con un propósito final, el cual es facilitar y ayudar las
experiencias en el laboratorio. Por ello el correcto funcionamiento y operación en gran medida
depende del cuidado que le demos a cada instrumento.

6.RECOMENDACIONES
GENERALES

No pipetee con la boca, utilice para ellos bombas pipeteadoras o el dispositivo

adecuado.
No manipule equipos sin la autorización respectiva y menos si no posee las destrezas
para hacerlo.
Ingrese al laboratorio con mandil blanco, abotonado y limpio.
Realice el transporte de muestras dentro o entre laboratorios en los recipientes
apropiados (cajas herméticas o hielo seco), con los cuales se eviten salpicaduras y
sean de fácil desinfección.
Los derrames y accidentes deben ser informados inmediatamente al profesor del
laboratorio.

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2
 EL MICROSCOIPIO

Es mejor utilizar un microscopio de dos lentes (compuesto) ya que proporciona un aumento de

percepción visual mayor que uno de un lente (simple).
Deben tratarse con mucho cuidado, pues cualquier golpe puede variar la posición de las lentes y
averiarlas. Se atornillan a la parte del tubo o al revolver porta-objetivos.
No tocar nunca las lentes: Si se ensucian estas, limpiarlas suavemente con papel de seda especial
para lentes.
No dejar el porta-objetos sobre la platina, cuando no se está usando el microscopio.
Limpiar siempre el objetivo de inmersión después de usarlo. Si involuntariamente los objetivos de
pocos aumentos se manchan de aceite, limpiarlos suavemente con papel especial.
Mantener seca y limpia la platina del microscopio, si se derrama sobre ella algún líquido, secarla con
un paño.
No inclinar el microscopio cuando se está trabajando con aceite de inmersión. Este puede caer al
sistema mecánico de la platina de donde es difícil limpiarlo, o puede gotear al condensador y allí
solidificarse.
Cuando no esté en uso el microscopio, cubrirlo con la funda y guardarlo.
No bajar el tubo del microscopio con el tornillo de enfoque grueso mientras se está mirando por el
ocular.

INCUBADORA

No utilizar una incubadora en presencia de materiales inflamables o combustibles, debido a que en el

interior del equipo existen componentes que en operación podrían actuar como fuentes de ignición.
Evitar el derrame de soluciones acidas en el interior. Estas deterioran los materiales internos de la cámara
de incubación. Procurar manejar sustancias cuyo PH sea neutro en lo posible.
Evitar colocar recipientes sobre la cubierta interior que protege los elementos calefactores resistivos.
Emplear anteojos de seguridad, guantes y pinzas para colocar y retirar recipientes.
Evitar permanecer frente a una incubadora que se encuentre con la puerta abierta, algunas sustancias
emiten humos o vapores no recomendables para respirar.
Es preferible calibrar la incubadora en el lugar de instalación.

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 Verificar la temperatura de operación en horas matutinas y vespertinas con instrumentos certificados
como termómetros, etc.
Verificar que la temperatura de la incubadora no varíe más de un grado centígrado.

ESTUFA U HORNO DE SECADO

La esterilización que se realiza en la estufa es mayormente producida por el calor seco a 180°C .
Lavar todos los materiales a poner en la estufa.

AUTOCLAVE

No esterilizar o usar el autoclave con artículos que contengan materiales corrosivos, solventes, volátiles
o radioactivos.
Al momento de cargar el autoclave, hacerlo de acuerdo con las recomendaciones del fabricante y no
sobrecargarlo.
Colocar los líquidos en una bandeja de plástico resistente al calor, en una rejilla o estante y nunca deben
colocarse directamente a la superficie interior de la cámara del autoclave.
Colocar correctamente el ciclo para esterilizar los artículos esterilizados y asegurarse de cerrar la puerta.
Al momento de abrirlo después de colocar los materiales mantener la cabeza y cara alejados de la puerta.

CONTADOR DE COLONIAS

Recordar que solo se debe de usar la unidad únicamente para el propósito para el cual fue diseñado.
No utilizar el equipo con fluidos que puedan desprender vapores o formar mesclas explosivas,
inflamables o abrasivas.
Limpiar el equipo solamente con una tolla húmeda, evitar utilizar productos abrasivos.
Para dicha limpieza verificar que el aparato este apagado.
Si en caso se requiere mantenimiento técnico como reparación o sustitución de piezas, consulta con
personal calificado para tal fin.

PLACAS PETRI

Se deben de utilizar con precaución, ya que se debe evitar el contacto con organismos biológicos en caso
de trabajar con ellos.
Utilizar implementos de protección antes de trabajar con organismos biológicos.

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CABINA DE BIOSEGURIDAD

Se recomienda ubicar todo el material a utilizar en el interior de la Cabina antes de empezar a trabajar.
De esta formase evita que nada pase hacia dentro o hacia fuera de la misma hasta que el trabajo haya
terminado.
No es recomendable el uso de mecheros Bunsen o similares, puesto que su incorrecta ubicación en el
interior de la Cabina puede provocar desviaciones y turbulencias del flujo laminar y quemar los filtros
HEPA. Cuando su uso sea necesario deberá estudiarse su ubicación de modo que las turbulencias
provocadas por el calor de la llama influyan lo menos posible en la zona estéril de trabajo.
Es recomendable el uso de micro incineradores eléctricos para la esterilización de asas de siembra
microbiológicas, aunque es preferible que éstas sean desechables.
Es recomendable que el material a introducir en la Cabina esté libre de partículas, por ello debería
limpiarse cuidadosamente antes de su introducción en la misma.
No es aconsejable introducir en la zona de trabajo materiales que emitan fácilmente partículas tales
como: papel, madera, cartón, lápices, goma de borrar, etc.
Es preferible utilizar tubos y/o frascos con tapones de rosca en lugar de tapones de algodón, ya que estos
desprenden fibras.
No se deben utilizar las Cabinas como almacén de materiales y equipos de laboratorio.
Todos los productos de desecho (asas de siembra, placas de cultivo, medios de cultivo, muestras, etc.),
se evacuarán de la Cabina en recipientes impermeables y aptos para ser esterilizados.

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7. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

CLARK, R. P. The Performance, Installation, Testing and Limitations of Microbiological Safety

Cabinets Leeds. Series Editor Dr. D. Hughes (University of Leeds). 1983. pp: 110

AIHA Biohazards Committee Biohazards Reference Manual Akron (Ohio). American Industrial
Association. 1986. pp:160

ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD Manual de Bioseguridad en el Laboratorio Ginebra.

OMS. 1983

DEPARTMENT OF HEALTH AND SOCIAL SECURITY Code of Practice for Prevention of

Infection in Clinical Laboratories and Pst-mortem Rooms London. HMSO. 1980. pp: 85

CLARK, R. P. Containment facilities for pathological material Environmental International. 1982,

Vol 8, pp: 387 – 394

BRIGGS, G. & RUNKLE, R. S. Laboratory design for microbiological safety Applied Microbiology.
1967, Mar. pp: 378 – 389

CORIELL, L. L. & McGARRITY, G. J. Biohazard hood to prevent infection during microbiological

procedures Applied Microbiology. 1968. Dec. pp: 1895 – 1900

COLLINS, C. H. Safety in microbiology: a review Biotechnology and Genetic Engineering Reviews.

1984. Vol. 1. pp: 141 – 164

FEINER, B. Occupational biohazards Dangerous Propierties of Industrial Materials. Section 4. Sixth

Editión. 1984

U. S. Department of Health, Education and Welfare Selecting a biological safety cabinet Bethesda,
Maryland 20014. 1986

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9.Cuestionario:
1. ¿Qué es la bioseguridad, de cuántos niveles consta y qué características posee cada uno de
estos niveles?

BIOSEGURIDAD
la bioseguridad consiste en proteger las condiciones de vida de la acción de agentes biológicos,
químicos o físicos.

El concepto, de este modo, hace referencia a garantizar que los recursos biológicos no sufran daños por
el accionar de actores externos. Su finalidad es minimizar los riesgos y prevenir los impactos
negativos.

Puede decirse que la bioseguridad consiste en preservar el estado de los seres vivos: animales
(incluyendo al ser humano), plantas o un hábitat en general. Así se resguarda la salud de la
contaminación, las epidemias, los ataques biológicos u otras amenazas.

Podemos describir cuatro niveles de bioseguridad según las combinaciones de prácticas y técnicas de
laboratorio, equipos de seguridad e instalaciones. Cada combinación es específicamente apropiada para
las operaciones llevadas a cabo, las vías de transmisión documentadas o sospechadas de los agentes
infecciosos, y la función o la actividad de la instalación.

Nivel de Bioseguridad 1 (BSL-1)

También conocido como nivel básico 1.

Las prácticas, los equipos de seguridad, el diseño y la construcción de la instalación del Nivel de
Bioseguridad 1 son adecuados para la educación o capacitación secundaria o universitaria, y para
aquellas instalaciones en las que se trabaja con cepas definidas y caracterizadas de microorganismos
viables que no se conocen como generadores de enfermedad sistémica en humanos adultos sanos.

El BSL-1 representa un nivel básico que se fundamenta en prácticas microbiológicas estándar sin
ninguna barrera primaria o secundaria especialmente recomendada, salvo una pileta para lavado de
manos.

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Nivel de Bioseguridad 2 (BSL-2)
También conocido como nivel básico 2.

Las prácticas, los equipos, el diseño y la construcción de instalaciones del Nivel de Bioseguridad 2 son
aplicables a laboratorios educativos, de diagnóstico, clínicos u otros laboratorios donde se trabaja con
un amplio espectro de agentes de riesgo moderado que se encuentran presentes en la comunidad y que
están asociados con enfermedad humana de variada gravedad.

Con buenas técnicas microbiológicas, estos agentes se pueden utilizar en forma segura en actividades
realizadas en una mesa de trabajo, siempre que no se produzcan salpicaduras o aerosoles en cuyo caso
se utilizará CSB.

Se deben utilizar las demás barreras primarias que correspondan, tales como máscaras contra
salpicaduras, protección facial, batas y guantes y contar con barreras secundarias, tales como piletas
para lavado de manos e instalaciones de descontaminación de desechos a fin de reducir la
contaminación potencial del medio ambiente.

Nivel de Bioseguridad 3 (BSL-3)

También conocido como nivel de contención.

Las prácticas, equipos de seguridad y el diseño y la construcción de las instalaciones del Nivel de
Bioseguridad 3 pueden aplicarse a instalaciones clínicas, de producción, investigación, educación o
diagnóstico, donde se trabaja con agentes exóticos o indígenas con potencial de transmisión
respiratoria, y que pueden provocar una infección grave y potencialmente letal.
Al manipular agentes del Nivel de Bioseguridad 3 se pone mayor énfasis en las barreras primarias y
secundarias para proteger al personal en áreas contiguas, a la comunidad y al medio ambiente de la
exposición a aerosoles potencialmente infecciosos.
Por ejemplo, todas las manipulaciones de laboratorio se deben llevar a cabo en CSB u otros equipos
cerrados. Las barreras secundarias para este nivel incluyen el acceso controlado al laboratorio y
requisitos de ventilación que minimizan la liberación de aerosoles infecciosos desde el laboratorio,
como lo es un gradiente de presión negativa que crea un flujo de aire dirigido al interior de la
instalación.

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Nivel de Bioseguridad 4 (BSL-4)
También conocido como nivel de contención máxima.
Las prácticas, equipos de seguridad, y el diseño y la construcción de instalaciones del Nivel de
Bioseguridad 4 son aplicables al trabajo con agentes peligrosos o tóxicos que representan un alto
riesgo individual de enfermedades que ponen en peligro la vida, que pueden transmitirse a través de
aerosoles y para las cuales no existen vacunas o terapias disponibles.
Los agentes con una relación antigénica cercana o idéntica a los agentes de los Niveles de
Bioseguridad 4 deben manejarse conforme a las recomendaciones de este nivel. Cuando se han
obtenido datos suficientes, el trabajo con estos agentes puede continuarse a este nivel o a un nivel
inferior. El aislamiento completo del personal de laboratorio de los materiales infecciosos en aerosol se
logra principalmente trabajando en un CSB Clase III o en un traje de cuerpo entero, con provisión de
aire y presión positiva. Por lo general, la instalación del Nivel de Bioseguridad 4 es un edificio
separado o una zona totalmente aislada con sistemas de gestión de desechos y requisitos de ventilación
especializados y complejos para prevenir la liberación de agentes viables al medio ambiente.

Figura: niveles de Bioseguridad

Fuente:https://www.google.com/search?q=niveles+de+bioseguridad+1&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=
2ahUKEwiwrd_pKrpAhVCheAKHZU_A8QQ_AUoAXoECA4QAw&biw=1600&bih=708#imgrc=e4VvxgcitWenBM&
imgdii=fIuYrf-grtu0XM

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2. Mencione las diferencias entre un laboratorio de microbiología y un laboratorio convencional.

Laboratorio microbiología Laboratorio

convencional

Materiales pocos convencionales, tiene equipo Materiales convencionales;

personalizados bajo parámetros requeridos, como, por ejemplo, balanza,
como, por ejemplo, contador de colonias, pipetas, gradillas, tubos de
autoclave, asa de siembra, etc. ensayo, etc.

La esterilización, lavado y desinfección de los

materiales son obligatorios, por lo cual es preciso
extremar las precauciones para evitar Los materiales son lavados y
contaminaciones. secados y en su mayoría no
necesitan un proceso de
Todas las muestras deben ser manejadas con
esterilización para su próximo
precaución por su potencial patogenicidad. uso.

Uso obligatorio del uniforme de trabajo, ya que Uso obligatorio del uniforme
la muestra problema puede llegar a contaminarse de trabajo, pero no conlleva a
y contar con un protocolo de desinfección al una posible contaminación con
entrar y salid del laboratorio. las reacciones que se trabajan.

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3. ¿Cuáles son los riesgos y problemáticas en el grupo que se tendrán al no seguir las
indicaciones recomendadas?
Con el objeto de implementar la gestión de riesgos y velar por el cumplimiento de los procesos que en
ella se consideran, se recomienda designar en el laboratorio una persona responsable o encargada. En
primera instancia, el Director del laboratorio o el Encargado de laboratorio serían los llamados a realizar
esta tarea. Es importante que la persona, a quien se asigne esta responsabilidad, tenga las competencias
necesarias y esté familiarizada con los agentes o sustancias manejadas en el laboratorio.

Riesgo: Probabilidad de ocurrencia de un peligro.

Peligro: Capacidad intrínseca o potencial de producir un daño. Se refiere a la fuente potencial de daño.
En el laboratorio el peligro principal son los agentes que se manipulan, sin embargo, deben considerarse
otros riesgos que pudieran estar presentes en el lugar de trabajo.

Agentes de riesgo: Elementos que pueden causar un daño en un ámbito específico. En un laboratorio nos
podemos encontrar con los siguientes agentes de riesgo:

Biológicos (ej. microorganismos, muestras humanas o animales, organismos genéticamente

modificados).
Químicos (ej. tóxicos, corrosivos, irritantes, peligrosos para el medio ambiente).
Radiológicos (ej. radiaciones ionizantes, no ionizantes).

En general si no se toma las medidas, normas y los implementos adecuadamente la problemática

principal que se genera es un riesgo a la salud del grupo en si al trabajar en el laboratorio.

4. En que ocasiones se usa la campana de Bioseguridad

La campana de bioseguridad se va a usar para trabajar de forma segura cuando tengamos materiales
contaminados o potencialmente contaminados tale como los microrganismos patógenos que requieren
un definido nivel de bioseguridad, pero generalmente en ocasiones en las cuales se requiere tener un
área de trabajo libre de partículas o de probables contaminantes que puedan alterar el producto o el
proceso con el cual se trabaja, y así evitar afectar la saluda del trabajador operario, o dañar el medio
ambiente.

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