Identificación Cualitativa de Monosacaridos y Disacaridos
Identificación Cualitativa de Monosacaridos y Disacaridos
Identificación Cualitativa de Monosacaridos y Disacaridos
UNIVERSIDAD DE SUCRE
FACULTAD DE INGENIERÍA
(INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL)
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
SINCELEJO, SUCRE
2019
RESUMEN
En la práctica de laboratorio se tuvo como objetivo principal la identificación cualitativa de
monosacáridos y disacáridos, teniendo en cuenta características aclaradas por la profesora de
manera teórica. para lograr los objetivos se llevó a cabo varias pruebas, tales como: la prueba
de Molish, Benedict, Fehling A y B, Seliwanoff, Tollens y Bial y se tuvo también que
utilizar reactivos correspondientes a cada prueba y diferentes carbohidratos para obtener los
resultados deseados.
INTRODUCCIÓN
Los carbohidratos son unas biomoléculas que también toman los nombres de hidratos de
carbono, glúcidos, azúcares o sacáridos; Estas moléculas están formadas por tres elementos
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fundamentales: el carbono, el hidrógeno y el oxígeno, este último en una proporción algo más
baja. Su principal función en el organismo de los seres vivos es la de contribuir en el
almacenamiento y en la obtención de energía de forma inmediata, sobre todo al cerebro y al
sistema nervioso. Esto se cumple gracias a una enzima, la amilasa, que ayuda a descomponer
esta molécula en glucosa o azúcar en sangre, que hace posible que el cuerpo utilice la energía
para realizar sus funciones.
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL:
● Identificar cualitativamente monosacaridos y disacaridos.
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OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
● Identificar las propiedades del azúcar a través de la interpretación de los resultados.
● Aplicar pruebas de identificación de monosacáridos.
● Descripción cualitativa de monosacáridos y disacáridos.
MARCO TEÓRICO
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cuando contienen el grupo aldehído o CETOSAS cuando contienen el grupo cetona.
Los monosacáridos naturales pertenecen a la serie D de los azúcares y pueden tener
entre tres y hasta siete átomos de carbono.
DISACÁRIDOS que están formados por dos monosacáridos unidos entre sí por
enlaces glucosídicos.
OLIGOSACÁRIDOS que tienen entre tres y diez monosacáridos unidos también por
enlaces glucosídicos.
POLISACÁRIDOS que son polímeros naturales con varios miles de unidades de
azúcar sencillo ligadas entre sí. [3]
Carbohidratos
El término "carbohidratos", o "hidratos de carbono" procede de la antigua forma de
escribir la fórmula empírica de algunos de los más importantes, como Cn(H2O)n..
Uno de los carbohidratos, la celulosa, es la sustancia orgánica más abundante en el
conjunto de los seres vivos terrestres.
Monosacáridos
Podemos definir los monosacáridos como polihidroxialdehidos y polihidroxicetonas.
Si incluimos también a sus derivados, dependiendo de la amplitud con la que se tome
el término, pueden incuirse o no, evidentemente, distintos tipos de sustancias. En el
campo de la Ciencia de los Alimentos se consideran generalmentre como "derivados"
los polialcoholes obtenidos por reducción, con aplicaciones en gran parte semejantes a
las de sus precursores, y los ácidos y lactonas obtenidos por oxidación de aldosas, del
que el único relevante es la glucono δ-lactona
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Con la excepción de algunos carbohidratos bacterianos, todos los presentes en la
naturaleza pertenecen a la serie D. Los monosacáridos se dividen en aldosas y cetosas,
según tengan un grupo aldehido o un grupo cetona. Aunque existen muchas decenas
de monosacáridos, solamente dos, glucosa y fructosa, son realmente importantes,
como tales, en el mundo de los alimentos. Otros muchos forman parte, eso sí, de
oligosacáridos o polisacáridos que se tratan en otros lugares.
Glucosa
La glucosa, una aldosa, es el monosacárido más importante para la industria
alimentaria. En principio, la glucosa se puede representar en forma abierta.
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Este anillo de seis eslabones puede adoptar dos configuraciones, alfa o beta,
dependiendo de la posición del OH formado en el cierre. La posibilidad de que
existan dos configuraciones da lugar a la aparición de un nuevo carbono asimétrico en
la glucosa.
Las flechas señalan el grupo OH cuya posición condiciona que la estructura sea la de
la alfa-glucosa (izquierda) o la de la beta-glucosa (derecha).
Fructosa
La fructosa es una hexosa y una cetosa, es decir, tiene seis carbonos y un carbonilo de
tipo cetona. En disolución, se enceuntran en equilibrio dos formas piranosa y dos
formas furanosa, además de trazas de la forma abierta. Las predominantes son la b
-furanosa (31%) y b -piranosa (57%). La forma a -furanosa representa el 9% y la a
-piranosa el 3% restante. La proporción de forma abierta es numéricamente
insignificante.
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cromatografía a gran escala. La fructosa pura obtenida así se comercializa
generalmente como polvo cristalino.
La fructosa es un azúcar muy interesante para la industria, dado que, aunque su precio
es superior al de la glucosa, esto se compensa en parte por su mayor poder
edulcorante, superior incluso al de la sacarosa. Además, el dulzor de la fructosa
incorpora una nota "fresca", que lo hace particularmente apreciado. [4]
Disacáridos
Los disacáridos son glúcidos que también reciben el nombre de azúcares dobles.
Tienen funciones importantes en la dieta del hombre como fuentes principales de
energía. Estos pueden ser de origen vegetal, como la sacarosa de la caña de azúcar y
la maltosa presente, y de origen animal como la lactosa presente en la leche de los
mamíferos, entre otros. Los glúcidos o azúcares son los llamados hidratos de carbono
o carbohidratos, que son sustancias solubles en agua compuestas por carbono,
oxígeno e hidrógeno con la fórmula química general (CH2O)n.
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Características y estructura
Al ser carbohidratos, los disacáridos están compuestos por carbono, oxígeno e hidrógeno. En
general, el oxígeno y el hidrógeno en la estructura de la mayor parte de los carbohidratos se
encuentran en la misma proporción en la que están en el agua, es decir, por cada oxígeno hay
dos hidrógenos. Esa es la razón por la que se denominan “hidratos de carbono o
carbohidratos”. Químicamente, los carbohidratos pueden definirse como aldehídos (R-CHO)
o cetonas (R-CO-R) polihidroxilados. Los aldehídos y cetonas tienen un grupo carbonilo
(C=O). En los aldehídos, este grupo está unido al menos a un hidrógeno y, en las cetonas,
este grupo carbonilo no está unido al hidrógeno. Los disacáridos son dos monosacáridos
unidos por un enlace glucosídico.
Sacarosa
Lactosa
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METODOLOGÍA
Por medio de la escucha, visualización y explicación del tema, captamos las ideas principales
dadas por la profesora dentro del lugar de trabajo, para aplicarlas en la práctica. Hicimos la
identificación cualitativa de monosacaridos y disacaridos y las tuvimos en cuenta para
realizar de manera correcta los procedimientos en la práctica.
Identificamos si son monosacaridos y disacaridos, si presentan una reacción positiva o
negativa al momento de mezclar un reactivo con un carbohidrato, esto mediante diferentes
factores, reconociendo, clasificando y estableciendo los diferentes carbohidratos como, la
glucosa, fructosa, sacarosa, extracto de jugo de pera y agua destilada; utilizando materiales de
gran importancia para llevar a cabo los procedimientos; también utilizando diferentes
soluciones como: el ácido sulfúrico para la prueba de Molish, para la prueba de Benedict el
reactivo correspondiente, de igual manera para la prueba de Fehling, Seliwanoff, Tollens y
Bial su reactivo correspondiente, los cuales son sustancias y reactivos que ayudan para llevar
de mejor manera cada parte del procedimiento.
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MATERIALES Y REACTIVOS
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PROCEDIMIENTO
● Prueba de Molish
En primer lugar, se marcaron 5 tubos de ensayo: glucosa, fructosa, sacarosa, agua
destilada y extracto de jugo de pera, trabajando así con ellos durante toda la prueba.
Se adicionan 0.5ml de reactivo de molish a los 5 diferentes tubos de ensayo
conteniendo cada uno 1ml de cada carbohidrato, luego se adiciono cuidadosamente en
cada tubo 1ml de ácido sulfúrico sin agitar.
● Prueba de Benedict
En la prueba benedict se utilizaron 5 tubos de ensayo, los cuales corresponden a cada
solución de carbohidratos, se le adiciono 1 ml de cada solución y 0,5ml del reactivo
de benedict; seguidamente se calentó a baño maría durante 3 minutos.
● Prueba de Fehling
En la prueba fehling, se adicionan 0.5ml del reactivo a cada uno de los 5 tubos de
ensayo conteniendo cada uno 1 ml de los carbohidratos; luego cada muestra se calentó
en baño maría durante 3 minutos.
● Prueba de Seliwanoff
Para la prueba de seliwanoff, el procedimiento fue igual que el anterior, solo que en
esta prueba se le adiciono fue 0.5 ml del reactivo de seliwanoff y solo se calentaron
2 minutos en el baño de maria.
● Prueba de Tollens
Para esta prueba de tollens, fueron utilizados 5 tubos de ensayo: el de la glucosa,
fructosa, sacarosa, el extracto de jugo de pera y agua destilada, más el reactivo, se
dejó en baño maria durante 5 a 10 minutos.
● Prueba de Bial
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Para esta última prueba de bial, se tomarán 4 tubos de ensayo con 1ml de muestra
glucosa, fructosa, ribosa y lactosa, 2.0 ml de Bial y se procedió a disolver con 1.5g de
HCL y 200ml de agua destilada, luego de este, se le adicionan 8 gotas de solución de
FeCL3 6H2O y se calentó en baño de maria hasta obtener un color azul verdoso.
RESULTADOS
REACTIVOS RESULTADOS
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Sacarosa: Antes de calentar, tenía un color azul; después de
calentar conservó el mismo color.
FEHLING
Extracto de jugo de pera: Antes de calentar, tenía un color
café; después de calentar un color rojizo.
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BIAL Ribosa: 1 ml de glucosa + 2.0 ml del reactivo Bial, se calentó y
quedó azul verdoso, entonces es positivo.
ANÁLISIS DE RESULTADOS
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de pera, reflejado en el cambio de color; mientras que la sacarosa y el agua destilada
nos dio una reacción negativa, esto debido a que no se produjo una oxidación por lo
que se mantuvo el color azul en toda la reacción.
● Prueba de seliwanoff: Al introducir las muestras en los tubos de ensayo con las 5
gotas de Seliwanoff e introducirlo en el baño de maría se obtuvo que tanto las aldosas
como las cetosas en presencia de ácidos minerales y en un medio caliente sufren
procesos de deshidratación, lo cual como producto un anillo pentagonal de furfural o
hidroximetilfurfural, según sea el monosacárido pentosa o hexosa, los fusfurales
condensados dan una coloración roja, la fructosa al ser una cetohexosa da un resultado
positivo, también el extracto de jugo de pera y la sacarosa nos dio positivo porque se
dejo mucho tiempo en el baño de maría y se produjo una hidrólisis ácida en donde la
sacarosa libera fructosa. La glucosa no reaccionó tampoco porque no pertenece al
grupo de las cetosas sino al de las aldosas como también el agua.
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sacarosa, mientras que la glucosa y extracto de agua no presentó reacción porque
pertenece al grupo de las hexosas.
CONCLUSIÓN
En esta práctica llegamos a conocer la importancia de cada una de las pruebas que
realizamos, y así poder conocer carbohidratos, pentosas, aldosas, cetosas, acción reductora
de azúcares.
CUESTIONARIO
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1. ¿Cuál es el fundamento de cada uno de los ensayos utilizados para la identificación de
carbohidratos?
RTA:/
● Prueba de Molish: Este es un ensayo para reconocimiento general de carbohidratos
en el que los polisacáridos y disacáridos se hidrolizan con ácido sulfúrico concentrado
hasta monosacáridos y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil
furfural los cuales reaccionan con α-naftol formando un color púrpura violeta.
● Prueba de Benedict: Este ensayo permite el reconocimiento de carbohidratos
reductores, al igual que el reactivo de Fehling, el de Benedict contiene ion cúprico en
medio alcalino que se reduce hasta óxido cuproso en presencia de azúcares con el
hidroxilo hemiacetálico libre.
● Prueba de Fehling: Esta prueba plantea la reacción de identificación de azucares
reductores. Se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de un aldehído.
Se oxida a un ácido carboxílico y reduce el Sulfato de Cobre en medio alcalino a
óxido cuproso, que forma un precipitado de color rojo. Lo importante de la reacción
es que el aldehído del carbohidrato puede detectarse fácilmente aunque exista en muy
pequeña cantidad.
● Prueba de Seliwanoff: Este ensayo es específico para cetosas y se basa en la
conversión de las cetosas en 5- hidro-metil-furfural y su posterior condensación con
resorcinol formando así complejos coloreados.
● Prueba de Tollens: (Ag (NH3)2+), es un agente de oxidación suave, su solución de
Nitrato de plata es transparente e incolora de pH básico. Para evitar en el Test de
diagnóstico la precipitación de iones de Plata como Hidróxido de Plata insoluble, se
agregan unas gotas de una solución de Amoniaco, que con los iones de plata forma un
complejo llamado Diamina-Plata (I) que es soluble en agua. Al oxidar un Aldehído
con el reactivo de Tollens, se produce el correspondiente Ácido Carboxílico y los
iones de Plata se reducen simultáneamente a Plata metálica.
● Prueba de Bial: El reactivo de Bial contiene orcinol en ácido clorhídrico, el cual
forma complejos de coloración sólo con las pentosas. De otro lado una propiedad
importante que permite identificar los carbohidratos, y determinar el grado de pureza
de los mismos, particularmente monosacáridos es la rotación óptica ocasionada por la
presencia de centros asimétricos o quirales en la estructura molecular, los cuales
desvían el plano de luz polarizada. Esta propiedad no es exclusiva de los
carbohidratos pues la presentan todas aquellas sustancias denominadas óptimamente
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activas, por tener en su estructura centros quirales. Para la medición de la rotación
óptica los factores importantes a tener en cuenta son: La longitud de onda de luz
polarizada, la cantidad de material óptimamente activo, y la naturaleza del solvente
cuando se usa. Los cambios en la temperatura ocasionan solo pequeñas variaciones en
las medidas de la rotación.
● Prueba de Benedict
● Prueba de Fehling
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● Prueba de Seliwanoff
● Prueba de Tollens
● Prueba de Bial
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4. Escriba las reacciones siguientes:
A. Oxidación del grupo carbonilo para producir azúcares ácidos.
C. Sustitución de uno o más –OH por otros grupos químicos, H, amino NH2,
fosfoazúcares, sulfoazúcares.
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5. Comparación de disacáridos más importantes: sacarosa, lactosa, maltosa, trealosa;
teniendo en cuenta todas las características estudiadas previamente.
RTA:/
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carbón de la otra. Por ello este compuesto también se llama alfa glucopiranosil(1-
4)alfa glucopiranosa. Presenta en su estructura el OH hemiacetálico por lo que es un
azúcar reductor, da la reacción de Maillard y la reacción de Benedict.
● Trealosa: La trealosa es un azúcar doble (disacárido), formado de dos moléculas de
glucosa donde la unión glucosídica de tipo α (1-1) involucra los grupos OH de los dos
carbonos anoméricos. Partiendo de dos glucosas reductoras dulces se consigue un
disacárido no reductor, con un bajo poder edulcorante.
ANEXOS
● Prueba de molish
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(Página 13)
● Prueba de benedict
(Página 13)
● Prueba de fehling
(Página
13)
● Prueba de seliwanoff
23
(Página 14)
● Prueba de tollens
(Página
14)
● Prueba de bial
(Página
14)
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BIBLIOGRAFÍAS
http://bdigital.unal.edu.co/55024/7/TatianaAlejandraHuertasN.2016.pdf
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