Practica 5

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA
TEMA: Laboratorio N°5
CURSO: Interpretación y análisis clínicos
PROFESOR: Neuman Pineda Pérez

PRACTICA N°5: TIEMPO DE COAGULACION, TIEMPO DE
SANGRIA, TIEMPODE PROTROMBINA, DOSAJE DE
FIBRINOGENO.
1. MARCO TEORICO
La hemostasia
La hemostasia es el fenómeno fisiológico que detiene el sangrado. La hemostasia es un

mecanismo de defensa que junto con la respuesta inflamatoria y de reparación ayudan a
proteger la integridad del sistema vascular después de una lesión tisular.
En condiciones normales la sangre circula en fase líquida en todo el organismo. Después

de una lesión vascular la sangre se coagula sólo en el sitio de la lesión para sellar
únicamente el área. La transformación de sangre líquida en coagulo sólido está regulada
por el sistema hemostático y depende de una interacción compleja entre la sangre (que
contiene las células y los factores que intervienen en la coagulación) y pared vascular (el
endotelio vascular tiene un papel fundamental dentro de la coagulación y la fibrinolisis, y
en condiciones fisiológicas tiene propiedades anticoagulantes, pero puede presentar
propiedades procoagulantes cuando se rompe el equilibrio).
Por una parte, está el sistema de la coagulación que junto con sus mecanismos de
retroalimentación asegura la eficacia hemostática y, por otro lado, hay el sistema
fibrinolítico que actúa como regulador del sistema de la coagulación, eliminando la fibrina
no necesaria para la hemostasia. El sistema tiene mecanismos de seguridad: cada
componente es inactivo y se tiene que activar, la mayoría de los componentes forman
complejos con la superficie de las membranas que están localizados sólo en la región del
vaso lesionado y, finalmente, existen los inhibidores del proceso para evitar una activación
de la coagulación y fibrinolisis más allá de la lesión. La hemostasia resultante siempre
depende del equilibrio entre ambos sistemas, así vemos que:
• En las personas sanas el equilibrio es perfecto.

• Si disminuyen los factores de coagulación o el potencial fibrinolítico sobrepasa el
potencial de coagulación se producirá una hemorragia.
• Si el potencial de coagulación sobrepasa el fibrinolítico o bien disminuyen los factores
inhibidores de la coagulación se producirá una trombosis.
Cascada de coagulación
Modelo de la vía extrínseca
El papel principal del modelo del factor tisular es generar una «explosión de trombina», un
proceso en el que la trombina es liberada muy rápidamente. El FVlla circula en una
cantidad más alta que cualquier otro factor coagulante.
Este proceso incluye los siguientes pasos:
1. Siguiendo el daño al vaso sanguíneo, el FVII deja a la circulación y entra en

contacto con el factor tisular (FT) expresado en células que contienen factor
tisular. Estas células incluyen a los leucocitos y a los fibroblastos estromales y
forman el complejo activado TF-FVlla. El TF-FVlla activa el FIX y el FX.
2. El mismo FVII es activado por la trombina. El FXla, el FXlla y el FXa.
3. La activación de FX (para formar FXa) por el TF-FVlla es casi inmediatamente
inhabitado por el inhibidor de factor tisular (TFPI).
4. El FXa y su co-factor FVa forman el complejo protombinasa, que activa la
protrombina en trombina. Luego, la trombina activa a los otros componentes de
la cascada de coagulación, incluyendo al FV y al FVIII, y activa y libera FVIII
para que no se una al vWF. FVlla es el co-factor de FIXa y juntos forman el
complejo tenasa. Este activa al FX y el ciclo continúa.
Modelo de la vía intrínseca
La vía intrínseca es iniciada cuando se hace contacto entre la sangre y la superficie

expuesta negativamente cargada.
Esta activación de contacto comienza con la formación del complejo primario de colágeno
por HMWK (por sus siglas en inglés) o cininógeno de alto peso molecular, el factor
Fletcher y el factor de coagulación XII.
El factor Fletcher es convertido en calicreína, y el factor de coagulación XII se convierte

en FXlla. La FXlla convierte a la FXI en Fxla. El Factor Xla activa al FIX, junto con su co-
factor FVlla para formar el complejo tenase. Este factor a su vez activa el FX al FXa
Tiempo de coagulación (método de Lee White)
Antiguamente se empleaba como método de pesquisa de alteraciones del
mecanismo intrínseco de la coagulación y para monitorear la terapia con heparina.
Hoy se conoce que este método tiene poca reproducibilidad y es sensible solo a
deficiencias graves de factores de la coagulación; por lo tanto, su uso en el
laboratorio está limitado.
Tiempo de sangría.
También llamado Tiempo de sangrado, es un examen de sangre que analiza qué
tan rápido se cierran los vasos sanguíneos pequeños en la piel para detener el
sangrado. El tiempo de sangrado constituye la mejor prueba para detectar
alteraciones de la función plaquetaria y es uno de los principales estudios en los
trastornos de la coagulación. La duración del sangrado de un capilar depende de
la calidad y cantidad de plaquetas y de la vasoconstricción. plaquetas.
Tiempo de trombina
Esta prueba permite explorar de forma rápida y simple el tiempo para la formación
de fibrina. Este indicador se mantiene normal en deficiencias del factor XIII; debe
ser determinado antes de cualquier cuantificación analítica en caso de
prolongación inexplicable de los test globales (TP, TPTA).
2. COMPETENCIAS
 Aplica las técnicas apropiadas para determinar el tiempo de coagulación,

tiempo de sangría y tiempo de protrombina.
 Hacer la interpretación clínica y correlacionar las coagulopatías.
3. MATERIALES Y EQUIPOS
 Laminas portaobjeto
 Cronometro
 Tira de papeles secantes
 Tubo cónico graduado
 Aguja
 Ligadura
 Algodón
 Lanceta
 Baño maría
 Anticoagulante de Wintrobe
 Reactivo de tromboplastina
4. PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTO 1: Tiempo de coagulación

“Método de Burker”
 Sangre capilar
 Extraer sangre capilar y colocar dos gotas en un portaobjeto
 Dejar reposar por 30 segundos.
 Con ayuda de un estilete levantar la gota de sangre
 Observar y tomar el tiempo en el cual se forma los filamentos de
fibrinógenos.
PROCEDIMIENTO 2: Tiempo de coagulación
“Método de Lee y White”
 Sangre venosa
 Extraer 2ml de sangre venosa en un tubo de ensayo
 Inclinar el tubo de ensayo a 45°
 Tomar el tiempo que demora en coagular la sangre.
PROCEDIMIENTO 3: Tiempo de sangría
“Método de Duke”
 Sangre capilar
 Tomar sangre del lóbulo de la oreja
 Cada 30 segundos limpiar suavemente la sangre que se forma hasta que termine
la sangría.
 Tomar el tiempo transcurrido
PROCEDIMIENTO 4: Retracción del

coagulo
“Método de Mac Farland”
 Tomar sangre venosa 4 ml en un tubo graduado

 Colocar el espiral con tapón en el tubo
 Incubar a 37° por una hora
 Retirar el tapón con espiral del tubo.
 Medir el suero que queda en el tubo
5. CUESTIONARIO
 ¿Cuál es el fundamento del tiempo de coagulación?
El tiempo necesario para que la primera sangre se coagule en tubo es la medida

de la actividad total des sistema intrínseco de la coagulación. La inspección
periódica del coagulo permite la valoración de las propiedades físicas del coagulo
(tamaño, aspecto y fuerza mecánica).
 ¿Cuál es el fundamento del tiempo de sangría?

Cuando se produce injuria tisular quedan expuestos los componentes del
subendotelio (fundamentalmente colágeno tipo IV y V) donde las plaquetas se
adhieren y luego se agregan. El tiempo de sangría se basa en esta propiedad y
mide el tiempo que tarda en cohibirse la salida de sangre provocada por una
incisión estandarizada realizada en los vasos superficiales pequeños.
Es una prueba global de la hemostasia primaria. Está influenciada por factores
técnicos que se deben estandarizar cuidadosamente profundidad, ubicación y
dirección de la incisión; también depende del tipo de piel del paciente y la habilidad
del operador.
El TS depende fundamentalmente de la calidad y cantidad plaquetaria. Por lo
tanto, en presencia de trombocitopenia (menor de 80.000 mm3) el TS debe
interpretarse con cuidado.
 ¿Cuál es el fundamento bioquímico del proceso de retracción

del coagulo?
Al coagularse en forma espontánea la sangre, se forma una masa solida con todos
los componentes sanguíneos. Con el tiempo, la acción de las plaquetas sobre la
red de fibrina retrae el coagulo reduciendo su masa. La retracción del coagulo
depende de fibrinógeno y las plaquetas
 ¿Cuál es el fundamento del dosaje de fibrinógeno?
El fibrinógeno, en presencia de un exceso de trombina, se transforma en fibrina. El

tiempo de formación del coágulo es inversamente proporcional a la concentración
de fibrinógeno presente en la muestra de plasma.
La cuantificación del fibrinógeno se puede realizar por métodos cronométricos, que

exploran la funcionalidad del fibrinógeno, y por métodos antigénicos, que solo
exploran su concentración.
6. REFERNCIA BILIOGRAFICA
 Robbins S, Cotran R. Manual de patología estructural y funcional. 6°

edición. Madrid: Interamericana; 1999.
 Wintrobe M, Maxbell M. Hematología clínica. 6° edición. Buenos Aires:

Interamericana; 2000.

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PROFESOR: Neuman Pineda Pérez

La hemostasia es el fenómeno fisiológico que detiene el sangrado. La hemostasia es un

En condiciones normales la sangre circula en fase líquida en todo el organismo. Después

• En las personas sanas el equilibrio es perfecto.

• Si el potencial de coagulación sobrepasa el fibrinolítico o bien disminuyen los factores

inhibidores de la coagulación se producirá una trombosis.

Modelo de la vía extrínseca

Este proceso incluye los siguientes pasos:

1. Siguiendo el daño al vaso sanguíneo, el FVII deja a la circulación y entra en

La vía intrínseca es iniciada cuando se hace contacto entre la sangre y la superficie

El factor Fletcher es convertido en calicreína, y el factor de coagulación XII se convierte

 Aplica las técnicas apropiadas para determinar el tiempo de coagulación,

PROCEDIMIENTO 1: Tiempo de coagulación

PROCEDIMIENTO 2: Tiempo de coagulación

“Método de Lee y White”

PROCEDIMIENTO 4: Retracción del

“Método de Mac Farland”

 Tomar sangre venosa 4 ml en un tubo graduado

 ¿Cuál es el fundamento del tiempo de coagulación?

El tiempo necesario para que la primera sangre se coagule en tubo es la medida

 ¿Cuál es el fundamento del tiempo de sangría?

 ¿Cuál es el fundamento bioquímico del proceso de retracción

 ¿Cuál es el fundamento del dosaje de fibrinógeno?

El fibrinógeno, en presencia de un exceso de trombina, se transforma en fibrina. El

La cuantificación del fibrinógeno se puede realizar por métodos cronométricos, que

 Robbins S, Cotran R. Manual de patología estructural y funcional. 6°

 Wintrobe M, Maxbell M. Hematología clínica. 6° edición. Buenos Aires:

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