Determinacion de Colesterol en La Yema de Huevo

INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS
BIOQUÍMICA GENERAL
PRÁCTICA: SEPARACIÓN DE FOSFOLÍPIDOS POR CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA Y
DETERMINACION DE COLESTEROL EN LA YEMA DE HUEVO
Alumnas: GRUPO: 4QV2 SECCIÓN 2
INTRODUCCIÓN:
Los lípidos son un grupo heterogéneo de biomoléculas
relativamente insolubles en agua y solubles en solvente
no polares como el éter, cloroformo y benceno. Esta
No. Tubo Absorbencia Colesterol
heterogeneidad se refiere tanto a la estructura química
1 0.060 20
como a sus funciones biológicas. A este grupo de
2 0.127 40
biomoléculas pertenecen los aceites, ceras y 3 0.192 60
compuestos relacionados. Los triacilglicéridos (grasas) 4 0.253 80
son compuestos que están conformados químicamente 5 0.317 100
por una molécula de glicerol esterificada a tres ácidos Pb 0.268 84
grasos. La función principal de éstos es de reserva
energética.
La complejidad de las mezclas de lípidos que se
 La curva tipo se encuentra anexa al trabajo, al
encuentran en los productos naturales hace imposible
igual que los cálculos que se realizaron para
la caracterización de sus componentes por análisis
obtener la concentración de colesterol
cualitativo. Los antiguos métodos para separar e
identificar los lípidos se basaban en los procedimientos
químicos clásicos de cristalización, destilación y
DISCUSIÓN:
excitación por solventes, sin embargo, en la actualidad
estos procedimientos han sido desplazados por la Para poder determinar la cantidad de colesterol
cromatografía. presente en la muestra se realizo una curva tipo
OBJETIVOS: utilizando una concentración estándar de fosfolípido
Extraer e identificar los fosfolípidos presentes en
una muestra de yema de huevo aplicando la
técnica de separación por cromatografía en capa PREGUNTAS EXTRA:
fina y el método de Lieberman-Burchard ¿QUÉ ES LA ESFINGOMIELINA?
RESULTADOS:
Las esfingomielinas contienen fosfocolina o
Fosfolípido RF (teórico) RF(práctico) fosfoetanolamina como grupo de cabeza polar, por lo
Lisofatidil 0.17 que se clasifican como fosfolípidos junto con los
colina
glicerofosfolípidos. Las esfingomielinas se parecen, por
Esfingomielina 0.26
supuesto, a las fosfatidilcolinas en sus propiedades
Fosfatidil colina 0.33
generales y en su estructura tridimensional y también
Fosfatidil serina 0.33
por no tener carga neta en sus grupos de cabeza
Fosfatidil 0.71
etanolamina polares. Las esfingomielinas se hallan presentes en las
Lípidos neutros 1.0 membranas plasmáticas de las células animales. Son
especial mente abundantes en la mielina, una vaina que
rodea y aísla los axones de algunas neuronas; de ahí el
nombre “esfingomielinas”
FUNDAMENTA EL PROCEDIMIENTO DE LA EXTRACCION
DE FOSFOLIPIDOS QUE SE REALIZO EN EL
LABORATORIO
Los lípidos son un grupo diverso de moléculas que

cumplen variadas funciones celulares que van desde
formar parte de las membranas celulares, constituir una
de las principales formas de reserva energética hasta
intervenir en complejos sistemas de señalización
celular. Desde el punto vista químico se los define como
un grupo heterogéneo de moléculas que se caracterizan
por ser solubles en solventes orgánicos y por presentar
una baja solubilidad agua, por esta razón se hace uso de
la solución de cloroformo-metanol para realizar una
extracción por solventes de los lípidos en general que se
encuentren presentes en la muestra de yema de huevo.
Una vez que se realizo la extracción general de los

lípidos se busco aislar solo los fosfolípidos, para ello se
utilizo el KCL
CONCLUSIÓNES:
REFERENCIAS:
Nelson D.L., Cox M.M., “Lehninger, Principios de

Bioquimica” 3ª Ed. Omega., pp 113-116, (2000)
Mertz E.T “Bioquimica” Editorial Publicaciones Cultural,

S.A. de C.V, pp 72-75 10ª Reimpresion (1992)
CALCULOS
Cálculos de RF
 Yodo:
 Ninhidrina:
 Bismuto:
 Molibdato:
Operaciones realizadas para el cálculo de la concentración en microgramos de colesterol en una muestra de yema de
huevo.
Tubo 1: Tubo 3: Tubo 5:
0.25×80=20 0.75×80=60 1.25×80=100
Tubo 2= Tubo 4:
0.50×80=40 1×80=80
Tubo PB:
De acuerdo con la ecuación de la recta
obtenida de la curva tipo, se despejo el valor
de x para poder obtener la concentración de
colesterol presente en nuestro tubo problema.
y+ 0.001
=84
0.0032

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Alumnas: GRUPO: 4QV2 SECCIÓN 2

Los lípidos son un grupo diverso de moléculas que

Una vez que se realizo la extracción general de los

Nelson D.L., Cox M.M., “Lehninger, Principios de

Mertz E.T “Bioquimica” Editorial Publicaciones Cultural,

Tubo 1: Tubo 3: Tubo 5:

0.25×80=20 0.75×80=60 1.25×80=100

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