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    Prueba Celular - Dilmer Fa

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    SUNILDA MARIANELLA MALCA HERNANDEZ
    Este documento presenta una tabla de tipificación ABO y procedimientos para la determinación de grupos sanguíneos ABO-RH. La tabla muestra los resultados esperados de las pruebas celular y serica para cada grupo sanguíneo. Los procedimientos describen cómo realizar las pruebas en lámina para determinar el grupo sanguíneo globular y sérico de una muestra, incluida la interpretación de los resultados.

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    Este documento presenta una tabla de tipificación ABO y procedimientos para la determinación de grupos sanguíneos ABO-RH. La tabla muestra los resultados esperados de las pruebas celular y serica para cada grupo sanguíneo. Los procedimientos describen cómo realizar las pruebas en lámina para determinar el grupo sanguíneo globular y sérico de una muestra, incluida la interpretación de los resultados.

    Título original

    PRUEBA CELULAR- DILMER FA

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    Este documento presenta una tabla de tipificación ABO y procedimientos para la determinación de grupos sanguíneos ABO-RH. La tabla muestra los resultados esperados de las pruebas celular y serica para cada grupo sanguíneo. Los procedimientos describen cómo realizar las pruebas en lámina para determinar el grupo sanguíneo globular y sérico de una muestra, incluida la interpretación de los resultados.

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    Adjunto: Tabla de Tipificación ABO

    PRUEBA CELULAR PRUEBA SERICA


    GLOBULOS ROJOS SUERO DESCONOCIDO
    DESCONOCIDOS
    Anti-A Anti-B Anti-AB A1 B O Interpretación
    0 0 0 + + 0 O
    + 0 + 0 + O A
    0 + + + 0 0 B
    + + + 0 0 0 AB

    4.1.2 DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUINEO GLOBULAR ABO-RH EN TUBO. DETERMINACIÓN DE


    GRUPO SERICO ABO EN TUBO

    A. OBJETIVOS

    Determinar el Grupo Globular ABO-RH, mediante el uso de antisueros específicos, que actúen
    aglutinando las células portadoras del antígeno respectivo. Correlación con el grupo sérico con
    células de tipificación conocida.

    B. COMPETENCIAS

    Determina adecuadamente el grupo globular.

    C. MUESTRA

    Sangre entera anticuagulada y suero o plasma.

    D. MATERIALES Y EQUIPOS

    Reactivos: Sueros comerciales Anti A, Anti B monocional y Anti D policional o monocional.

    Todos los reactivos deben usarse de acuerdo con las instrucciones del fabricante Glóbulos Rojos
    A1 Y B al 5% opcional A2.

    Equipos: Centrifuga de inmunohematología, aglutinoscopio, tubos 12x75, pipetas pasteur, sol-


    Salina.

    D. PROCEDIMIENTO

    Según Manual Técnico Asociación Americana de Bancos de Sangre 15ava Edición.


    PROCEDIMIENTO EN LAMINA FACE CELULAR
    1 Rotular la placa o lamina escavada identificando la muestra.
    2 Colocar una gota de Anti-A en un pozo
    3 Colocar una gota de Anti-B en otro pozo
    4 Colocar una gota de Anti-D en un tercer pozo
    5 Agregar una gota de glóbulos rojos en estudio
    6 Mezclar con la ayuda de una bagueta
    7 Observar la presencia de aglutación a partir de los 10 seg. Hasta los 2
    minutos.
    8 Leer, interpretar y registrar los resultados.

    PROCEDIMIENTO EN LAMINA FASE SERICA


    1 Rotular la lámina.
    2 Colocar una gota de glóbulo rojo A en un pozo o en la placa
    3 Colocar una gota de glóbulo rojo B en un pozo o en la placa
    4 Agregar 2 gotas de suero o plasma en cada pozo de los numerales 2 y
    3.
    5 Agregar una gota de células A2 si correspondiera a un sub-tipo de A.
    observar.
    6 Mezclar con ayuda de una bagueta.
    7 Observar la presencia de alutaciones a partir de 10 seg. Hasta los 2
    minutos.
    8 Leer, interpretar y registrar los resultados.
    9 Compara los resultados de la prueba con los obtenidos en la fase
    celular.

    INTERPRETACIÓN
    La aglutación de los glóbulos rojos constituye resultados positivos.
    La resuspención de las células constituyen un resultado negativo.
    GUIA DE PRACTICA N° 4

    PROCEDIMIENTOS INMUNOHEMATOLOGICOS II

    4.1. DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEO ABO-RH EN LAMINA

    A. OBJETIVOS

    Determinar el grupo globular ABO-RH en pacientes, mediante el uso de antisueros específicos, que
    actúen aglutinando las células portadoras del antígeno respectivo. Correlación con el grupo sérico
    con células de tipificación conocida.

    B. COMPETENCIAS

    Determina adecuadamente el grupo globular.

    C. MUESTRAS

    Sangre entera anticuagulada y suero o plasma.

    B. MATERIALES Y EQUIPOS

    Sueros comerciales Anti A, Anti B, Anti-AB (opcional)

    Anti D posicional o monocional todos reactivos deben usarse de acuerdo con las instrucciones del
    fabricante.

    G. Glóbulos rojos A1 Y B al 40% opcional A2 comerciales o preparados en el laboratorio.

    Placa de vidrio o Placa escavada, pipetas Pasteur, Vegetas.

    E. PROCEDIMIENTO

    Según Manual Técnico Asociación Americana de Bancos de Sangre 15ava Edición.

    Según Sistema de Gestión de la Calidad del PRONAHEBAS- Guía de Procedimientos Operativos


    Estándar NORMA TÉCNICA N° 014- MINSA DGSP- V.01 LIMA-PERU 2004.
    INTERPRETACIÓN
    Tiempos Óptimos de Reacción
    ANTISUERO CÉLULAS USADAS AVIDEZ
    ANTI A A1 15”
    A2 30”
    ANTI B A1B 30”
    A2B 45”
    ANTI B B 15”
    ANTI Rho (D) R1 R1 DCE/ D CE 30”
    R2 R2 DcE/ D cE 30”

    3.4 DETERMINCIÓN DE LA ESPECIFICIDAD

    A. OBJETIVOS

    Determinar la capacidad de reacción de un anticuerpo frente a sus correspondientes


    determinantes antigénicos.

    B. COMPETENCIAS.

    Determina la especificidad de los antisueros.

    C. MATERIALES Y EQUIPOS

    Antisueros Anti A, Anti B, Anti AB Y Anti D

    Glóbulos rojos A1, B Y D positivo.

    Tubos 12*75 mm

    Pipetas Pasteur, aglutinoscopio, Baño María, Centrifugas.

    D. PROCEDIMIENRO

    Según Sistema de Gestión de la Calidad del PRONAHEBAS – Guía de Procedimientos Operativos


    Estándar NORMA TÉCNICA N° 014- MISNA- DGSP- V. 01 LIMA- PERÚ 2004.
    PROCEDIMIENTO
    1 Rotula 3 series de tubos cada una como: A, B Y D
    2 Añadir una gota de anti A a los tubos rotulados “A”y una gota de
    hematíes A1.
    3 Añadir una gota de anti B a los tubos rotulados “B” y una gota de
    hematíes B.
    4 Añadir una gota de anti D a los tubos rotulados “D” y una gota de
    hematíes D.
    5 Centrifugar a 3500rpm por 15c
    6 Leer

    INTERPRETACIÓN
    Aglutinación: Reacción del anticuerpo con su antígeno especifico.

    TITULACIÓN
    8 Hacer una suspensión al 2% en solución salina isotónica de células
    A, B, AB.
    9 Colocar en una gradilla una serie de 11 tubos de ensayo por cada
    reactivo aprobar.
    10 Marcar los tubos como p, 2,4,8,16,32,64,128,256,512,1024.
    11 Agregar a cada una uno de ellos excepto al primero, 01 ml (2 gts)
    de diluyente de suero.
    12 Agregar 01ml ( 2gts) del antisuero aprobar al tubo 2 y al P
    únicamente.
    13 Mezclar perfectamente el contenido del bubo 2 y transferir 01 ml
    (2 gts) de esa solución al tubo siguiente, repetir este
    procedimiento hasta el último tubo.
    14 Desechar 0.1 ml (2gts) del ultimo tubo.
    15 Agragar 0.1 ml (2gts) de celular conocidas a todos los tubos
    16 Mezclar y centrifugar 25 segundos a 3500 rpm
    17 Leer y anotar los resultados en cruces, dar puntaje y sumar estos.
    CRUCES SCORE CARACTERISTICAS
    4+ 10 Un botón sólido de eritrocitos, fondo claro
    3+ 8 Un grumo grande y varios muy pequeños o
    varios grumos grandes, fondo claro.
    2+ 6 Varios grumos de tamaño mediano, fondo claro.
    1+ 4 Grumos pequeños y muchos eritrocitos libres,
    fondo turbio.
    ½+ 3 Arenilla, fondo turbio.

    VALORES REFERENCIALES
    ANTISUERO CELULAS USADAS TITULO MINIMO
    ANTI A A1 256 dils
    A2 128 dils
    ANTI B B 256 dils
    ANTI Rho (D) R1R1 DCE/DCE 32 dils
    R2R2 DcE/DcE 32 dils
    3.3. CONTROL DE CALIDAD DE LOS REACTIVOS DE INMUNOHEMATOLOGÍA.

    3.3.1 DETERMINACION DE LA AVIDEZ

    A. OBJETIVOS

    Determinar la velocidad de fijación de un antígeno con su anticuerpo.

    B. COMPETENCIAS

    Determina la validez de los antisueros.

    C. MATERIALES Y EQUIPOS

    Antisueros Anti A, Anti B, Anti AB Y Lectina A1

    Hematíes B al 50%

    Hematíes O al 50%

    Hematíes A1 al 50%

    D. PROCEDIMIENTO

    Según Sistema de Gestión de la Calidad del PRONAHEBAS – Guía de Procedimientos Operativos


    Estándar NORMA TÉCNICA N° 014- MISNA- DGSP- V. 01 LIMA- PERÚ 2004.

    PROCEDIMIENTO
    1 Colocar en una lámina de vidrio una gota de reactivo a evaluar
    2 Colocar una gota de hematíes específicos a aproximadamente 1 cm de
    reactivo a evaluar.
    3 Mezclar determinando un circulo de no más de 2cm de diámetro, accionando
    en forma simultánea al cronometro.
    4 Continuar la mezcla por balanceo de lámina hasta ver aglutinación.
    5 Anotar el tiempo de inicio de aglutinación
    6 Repetir 5 veces el procedimiento y sacar un promedio.

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