ENZIMAS DE IMPORTANCIA CLÍNICA Enzimas de secrecion, que ejercen su actividad

Las enzimas son empleadas en los laboratorios fuera de las celulas que las
clinicos y en las investigaciones biomedicas originaron, por ejemplo se producen en glandulas
como reactivos biologicos para la determinacion exocrinas, como pancreas
de analitos, y la medicion de sus niveles (enzimas o fermentos digestivos) y prostata, asi
de actividad en el suero u otras muestras como en tejidos como mucosa
biologicas constituyen herramientas eficaces en gastrica y hueso. En adenocarcinoma y osteosarcoma
el diagnostico y pronostico de una enfermedad. se observa un aumento
Enzimas presentes en el plasma sanguíneo importante de la actividad plasmatica de las
Se ha definido el plasma sanguineo como un fosfatasas acida y alcalina
receptaculo pasivo que recibe las enzimas Enzimas celulares del Metabolismo Intermedio,
procedentes de los tejidos y de los elementos que son las que se ubican en los
formes (celulas) de la sangre. distintos componentes celulares y cuya salida se
Con respecto a su clasificacion fisiologica, Buecher produce cuando una causa
habia sugerido una agrupacion en: determinada altera la estructura de la celula. La
a- Enzimas del plasma especificas concentracion en los tejidos de
b- Enzimas del plasma no especificas estas enzimas es miles de veces mas alta que en el
a- Las enzimas del plasma especificas son plasma. Un dano puede
componentes funcionales de la sangre. Estan por conducir a un aumento en la permeabilidad de la
lo comun alli y en un nivel de actividad superior al membrana plasmatica con su
de los tejidos, siendo mantenido su consecuente liberacion a la circulacion general.
nivel constante por secrecion activa de uno o mas Algunas de las enzimas que
organos. A este grupo pertenecen la corresponden a este grupo son: aspartato amino
seudocolinesterasa, ceruloplasmina, transferasa (AST) o glutamicooxalacetico
lipoproteinlipasa, asi como las enzimas que transaminasa (GOT), alanina amino transferasa
intervienen en la coagulacion sanguinea. La (ALT) o glutamico
determinacion de la actividad de estas piruvico transaminasa (GPT), lactato
Tema 7: Enzimas. Enzimologia Clinica deshidrogenasa (LDH), creatin quinasa (CK),
Curso Bioquimica Lic. en Enfermeria. UNSL 5 amilasa, γ-glutamiltranspeptidasa (γ-GT), 5
enzimas tiene interes clinico en le evaluacion tanto ´nucleotidasa y aldolasa (ALS). A veces
de la funcion propia de la enzima en el la alteracion consiste en un simple cambio a nivel de
estudio como de la funcion del tejido que la la membrana celular, que
sintetiza. posibilita la salida de aquellas enzimas presentes en
b- Las enzimas del plasma no especificas: no el citoplasma de la celula.
desempenan funcion biologica en el plasma; Otras veces, determinadas estructuras intracelulares,
no son, por tanto, constituyentes funcionales como las mitocondrias por
plasmaticos y solo se aprecia una muy ejemplo, resultan danadas y permiten la salida de
pequena actividad en condiciones normales, enzimas que tienen esa
debido a la renovacion celular natural o localizacion. Cuanto mayor sea el area lesionada y
pequenos traumatismos espontaneos. Su presencia mas intensa la agresion, mas
en plasma en niveles mas altos de lo debe esperarse el incremento de la actividad
normal sugiere un aumento en la velocidad de enzimatica en el suero. Aun cuando
destruccion celular y tisular. La desde el punto de vista biologico son muchas las
determinacion de estos niveles de enzimas enzimas importantes, el interes
plasmaticas puede proveer informacion valiosa clinico se centra en el estudio de aquellas cuyas
para diagnostico y pronostico. Sin embargo, variaciones que son caracteristicas,
niveles elevados de enzimas en plasma no es decir, indicadoras de enfermedad o por lo menos,
solo pueden ser interpretados como evidencia de de determinadas alteraciones
necrosis celular ya que tambien la funcionales. Las mismas acontecen en el transcurso
realizacion de ejercicio vigoroso libera cantidades de diversas noxas, por lo cual
significativas de enzimas musculares. las enzimas adquieren valor diagnostico y a veces
Las enzimas del plasma no especificas: pueden pronostico.
clasificarse en:
Distribucion de las enzimas en las celulas: hay Presencia de microorganismos: la presencia de
enzimas 100% citoplasmaticas es bacterias, virus, hongos, asi como
decir que solo se encuentran en el citosol (lactico protozoos y helmintos. El ataque directo de ellos
deshidrogensa, GPT). Hay otras sobre las membranas celulares
enzimas que estan en un cierto porcentaje en una promovera tambien la salida de enzimas
organela y otro porcentaje en el intracelulares a la circulacion sanguinea.
citoplasma: por ejemplo la GOT (60% en Agentes químicos, físicos y farmacológicos: la
citoplasma y 40% en mitocondria); la contaminacion ambiental es fuente
malato deshidrogenasa 50% en citoplasma y 50% de agentes quimicos que resultan inhibidores de
en mitocondria); otras solo diversos procesos metabolicos, por
mitocondriales (glutamato deshidrogenasa) ejemplo mercurio y plomo. El alcoholismo y el
Tema 7: Enzimas. Enzimologia Clinica tabaquismo pueden conducir a una
Curso Bioquimica Lic. en Enfermeria. UNSL 6 alteracion de los niveles sericos de las enzimas. Por
Definición: Noxas: (la palabra noxa proviene del latin
ejemplo en el alcoholismo se observa el
demage : dano). Noxa significa Dano. Se
fenomeno de la induccion enzimatica (mayor sintesis
denomina noxa a cualquier elemento que produce un
dano sobre la integridad de una celula u de proteina enzima), que puede
organismo. Las causas pueden ser fisicas, quimicas, aumentar la produccion de enzimas como la GGT
bacteriologicas, virales o parasitarias. (gama glutamil transferasa) y por tanto
ENZIMAS CELULARES DEL METABOLISMO la elevacion de sus niveles sericos.
INTERMEDIO: MECANISMOS DE Los farmacos tambien pueden alterar los niveles
LIBERACIÓN AL PLASMA SANGUINEO sericos de las enzimas al actuar por
La membrana plasmatica constituye un medio de diferentes mecanismos: liberacion de enzimas de
retencion de las enzimas intracelulares. membrana, induccion o represion de la
El mantenimiento de la integridad de la sintesis enzimatica o por modificaciones del flujo
membrana plasmatica depende en gran medida biliar. Un ejemplo del primer caso es la
de la actividad metabolica, la cual genera la imipramina que por su accion detergente sobre las
energia necesaria para los diferentes procesos membranas de los hepatocitos provoca
vitales que se realizan en la celula. Si por cualquier un aumento de la GGT serica; en el caso del
causa se altera la produccion de fenobarbital se induce la sintesis de la GGT y
energia, ya sea por una disminucion de los se perturba el flujo biliar, desorganizando las
sustratos oxidables o de oxigeno, o bien por estructuras lipidicas de las membranas de
errores metabolicos congenitos que impidan un los hepatocitos; y por ultimo, los anticonvulsivos al
metabolismo normal, se promueve el igual que la mayoria de los farmacos
recambio celular o el escape de las enzimas de liposolubles son inductores enzimaticos y producen
celulas sanas. Entre las principales noxas un aumento de mas de un 70% de la
que causan dano o muerte celular se encuentran ALT serica y mas de un 200% de la GGT.
las siguientes: Tema 7: Enzimas. Enzimologia Clinica
Hipoxia Curso Bioquimica Lic. en Enfermeria. UNSL 7
Presencia de microorganismos (bacterias, Mecanismos inmunitarios: Los procesos
parasitos, virus) autoinmunes, alergias, anafilaxis, generan
citotoxicidad y formacion de complejos inmunitarios
Agentes quimicos, fisicos y farmacologicos
con destruccion de tipos celulares
Mecanismos inmunitarios
especificos.
Trastornos nutricionales
Trastornos nutricionales: Por ejemplo en la
Hipoxia: La hipoxia (o falta de tension celular de malnutricion proteico-calorica, y en las
oxigeno) en las celulas o tejidos deficiencias de vitaminas y/o minerales.
puede atribuirse a diferentes causas, por ejemplo FACTORES QUE DETERMINAN LA
la deficiencia en el transporte del CONCENTRACION Y ACTIVIDAD
oxigeno como sucede en las anemias; oxigenacion ENZIMATICA EN SUERO
deficiente debida a un fallo Al producirse el dano o la muerte celular, las
cardiorespiratorio, por estrechamiento (ej. moleculas pequenas son las primeras en
aterosclerosis) o bloqueo (trombosis) de las liberarse y escapar a la circulacion, posteriormente
arterias o venas. las macromoleculas, entre las que se
encuentran las enzimas, y finalmente todo el previamente liberadas seria utilizada, no para su
contenido celular. La liberacion y velocidad funcion primitiva, sino como integrante
de aparicion de las enzimas en la circulacion de un “pool” (reservorio) de aminoacidos.
depende de la localizacion intracelular y de La cantidad y duracion de la actividad enzimatica
las caracteristicas del organo o tejido danado. La suministran datos acerca del alcance del
aparicion o aumento en suero de las dano del tejido. Una actividad enzimatica
enzimas del citosol refleja solo un dano de la aumentada durante un tiempo prolongado
membrana, mientras que el aumento de las sugiere un dano cronico, por el contrario en el caso
enzimas localizadas en organelas, aporta de las enfermedades agudas tiene
informacion acerca de procesos destructivos y lugar un rapido aumento y un rapido descenso de la
necrosis celular. actividad enzimatica. La utilizacion
La aparicion de las enzimas en el suero depende Tema 7: Enzimas. Enzimologia Clinica
de la forma en que logren el paso desde el Curso Bioquimica Lic. en Enfermeria. UNSL 8
liquido intersticial a la sangre, lo que varia de un de las enzimas en el diagnostico clinico depende de
tejido a otro. Por ejemplo, el higado es un su vida media despues de su salida
organo altamente vascularizado con capilares muy del interior de la celula. La vida media de las
permeables por lo que permite el paso enzimas en el plasma varia de 6 a 48 h.
directo de las enzimas a la sangre, mientras que en ENZIMAS FRECUENTEMENTE ANALIZADAS:
el caso del musculo esqueletico con Transaminasas hepaticas (ALT o GPT y AST o
capilares muy poco permeables, las enzimas pasan GOT)
a la sangre a traves de la linfa. • alfa−Amilasa
Ademas de conocer la localizacion intracelular de • Creatin fosfoquinasa (CPK)
las enzimas y su paso a la sangre, es • Fosfatasa acida (AcP)
importante tambien como se realiza el proceso de • Fosfatasa alcalina (ALP)
clarificacion de las enzimas que llegan al • Gama glutamil transpeptidasa (GGT)
torrente circulatorio. • Lactico deshidrogenasa (LDH)
Clarificacion o depuracion de las enzimas • 5’-nucleotidasa (NTP)
volcadas al plasma por noxas celulares: El peso Lactato deshidrogenasa (LDH)
molecular de la mayoria de las enzimas impide Los niveles sericos aumentados de LDH se observan
que puedan ser filtradas por el glomerulo en muchas circunstancias como ser
en los rinones sanos, por lo que la excrecion a anemias megaloblasticas,infarto de miocardio y
traves de la orina no es la via principal de pulmonar, etc. El gran numero de
eliminacion de las enzimas presentes en el plasma. situaciones que aumenta la actividad de LDH hace
Una excepcion la constituye la amilasa relativa su utilidad diagnostica. Sin
de gran valor en las enfermedades pancreaticas, embargo, es muy util en el seguimiento de la
que por su pequeno peso molecular (40 quimioterapia del cancer puesto que la
kDa) atraviesa los glomerulos renales y aumenta respuesta en la terapeutica se acompana por una
su excrecion por la orina. disminucion del nivel serico de esta
En definitiva, las vías de eliminación de enzimas enzima. La determinacion de la actividad de LDH es
séricas son: util en el diagnostico del infarto de
a- Eliminacion renal: se cumple para aquellas de miocardio y pulmonar. Son muy caracteristicos los
bajo peso molecular. Ej: amilasa y algunas niveles de LDH elevados en los casos
fosfatasas de infarto de miocardio y se observan valores altos
b- Inactivacion serica: existen inactivadores o ya a las pocas horas del comienzo del
inhibidores para varias enzimas: Ej: tripsina, aparente infarto. Por si sola, la determinacion de
quimiotripsina. Luego son eliminadas LDH no es determinante de lesion de
rapidamente, con la participacion del sistema ningun organo en particular. Hay que tener en
reticulo endotelial en un proceso de endocitosis cuenta que es necesario evitar la hemolisis
mediada por receptor. de la muestra de sangre, para una correcta
c- Para algunas enzimas existe recaptacion por determinacion.
parte de los tejidos convalecientes, al Transaminasas
restablecerse anatomica y fisiologicamente. Esta La GOT esta elevada en suero en pacientes con
pequenisima parte de las enzimas enfermedades hepatobiliares,
cardiovasculares y miopatias. La GPT esta elevada corazon. Usualmente implica un sindrome clinico
en el suero de enfermos hepaticos. clasico, caracterizado por el comienzo
Tema 7: Enzimas. Enzimologia Clinica subito de los sintomas tipicos, seguidos de
Curso Bioquimica Lic. en Enfermeria. UNSL 9 alteraciones electrocardiograficas e incrementos
Fosfatasas transitorios de los niveles sericos de las enzimas
Fosfatasa alcalina: se encuentra aumentada en las liberadas por el miocardio. En dicho
enfermedades hepaticas. Los ninos sindrome la oclusion trombotica subita y total de una
en crecimiento y las mujeres embarazadas en el arteria coronaria, causa un infarto
tercer trimestre presentan valores que generalmente compromete todo el espesor del
“fisiologicamente” elevados de fosfatasa alcalina segmento de la pared ventricular
en suero. irrigado por la arteria comprometida.
La determinacion de la fosfatasa alcalina es suero Tema 7: Enzimas. Enzimologia Clinica
es util para reconocer las Curso Bioquimica Lic. en Enfermeria. UNSL 11
enfermedades oseas, sobre todo la osteitis Cambios enzimaticos en el IAM:
deformante, hipoparatiroidismo y neoplasias Las celulas miocardicas lesionadas irreversiblemente
oseas. La elevacion de la fosfatasa alcalina serica liberan ciertas enzimas a la
en algunas enfermedades hepaticas circulacion y su medicion nos proporciona una
puede ser distinguida mediante otras pruebas de herramienta de gran utilidad para el
laboratorio y por sus rasgos clinicos. diagnostico del infarto agudo del miocardio. La
Fosfatasa ácida: se observan valores elevados en figura nos ilustra el comportamiento
pacientes con carcinoma prostatico. general de la isoenzima MB de la creatin kinasa (CK),
En la mayoria de los casos los cambios que se la lactico deshidrogenasa (LDH) y la
observan en los niveles de actividad o la aspartato aminotransferasa desde el comienzo del
concentracion de las enzimas del plasma permiten dolor precordial en los pacientes con
inferir la localizacion y la naturaleza de infarto agudo.
los cambios patologicos que se producen en Lactico deshidrogenasa (LDH): la actividad total
determinados tejidos del cuerpo. de esta enzima supera el rango
Sin embargo, hay que tener en cuenta que muchos normal a las 24-48 horas luego del comienzo del
procesos fisiologicos normales pueden infarto, tiene un pico entre el
provocar aumentos en el suero de algunas tercero y el sexto dia, para regresar a valores
enzimas, que no se relacionan con una normales cerca del dia catorce. La
enfermedad. Son ejemplo de ello, el aumento en elevacion de esta enzima es un indicador muy
los niveles y actividad de fosfatasa sensible pero poco especifico de
alcalina (FAL) por los osteoblastos productores de infarto del miocardio, pues algunas entidades
hueso en los ninos en estado de pueden producir incrementos
crecimiento, lo que debe diferenciarse de un plasmaticos de LDH, como sucede en los pacientes
aumento de FAL por actividad osteoblastica con hemolisis, anemia
aumentada en varias enfermedades oseas. megaloblastica, leucemia, enfermedad o congestion
ENZIMOLOGÍA DE LAS ENFERMEDADES hepatica, enfermedad renal,
DEL CORAZÓN, HÍGADO Y tumores, embolismo pulmonar, miocarditis,
PÁNCREAS enfermedades del musculo
Las enfermedades del corazon, higado y pancreas esqueletico. Existen 5 isoenzimas de LDH
son las que con mayor frecuencia (numeradas de 1 a 5 de acuerdo con su
aparecen en la poblacion, por ello la importancia capacidad de migracion electroforetica), cuya
de la aplicacion de la enzimologia al medicion puede mejorar la
diagnostico y evolucion de estas enfermedades. capacidad diagnostica del estudio, pues la LDH1 se
Tema 7: Enzimas. Enzimologia Clinica encuentra principalmente en el
Curso Bioquimica Lic. en Enfermeria. UNSL 10 corazon, mientras que la LDH4 y la LDH5 estan en el
CORAZON: higado y el musculo
El termino infarto agudo del miocardio (IAM) se esqueletico. La elevacion de LDH1 precede a la
refiere a la muerte del tejido cardiaco elevacion de LDH total en
resultante de la ausencia del flujo sanguineo a las aproximadamente 8 horas, sin embargo, como la
celulas musculares del hemolisis puede tambien
incrementar los niveles de esta isoenzima, se debe Dano Hepatico agudo: por ejemplo durante la
tener mucho cuidado en el infeccion con el virus de la Hepatitis A
manejo de la sangre al obtener la muestra para (VHA)
analisis en el laboratorio. La - Enzimas plasmáticas usadas como marcadoras de
medicion de las isoenzimas de LDH puede ser inflamación:
muy util cuando se espera que los ASAT (GOT) y ALAT (GPT): La concentracion de
niveles de CK-MB se encuentren bajos (infartos de estas enzimas en el interior del
2 a 4 dias de evolucion), pero la hepatocito es muy elevada y cada vez que se altera
titulacion rutinaria de estas isoenzimas no se difusamente la permeabilidad de la
justifica en todos los pacientes. membrana citoplasmatica, sea por necrosis o por
Rango Normal inflamacion, las transaminasas
Tema 7: Enzimas. Enzimologia Clinica experimentan un aumento de actividad en sangre
Curso Bioquimica Lic. en Enfermeria. UNSL 12 periferica. Los requisitos indispensables
Perfil plasmatico tipico de las enzimas liberadas para una elevacion cuantitativamente importante de
durante un infarto agudo del miocardio: transaminasas son que el dano sea
Aspartato aminotransferasa (AST): los niveles difuso y agudo. Constituyen el examen de mayor
plasmaticos de esta enzima utilidad frente a la sospecha de una
(anteriormente conocida como transferasa serica inflamacion hepatica y habitualmente ponen el sello
del acido glutamico oxalacetico - del diagnostico de un dano hepatico
GOT) se empiezan a elevar a las 8 a 12 horas del agudo. La actividad en plasma alcanza niveles sobre
infarto, alcanzan un pico a las 18 a 500 mU/ml y habitualmente sobre
Creatin kinasa (CK): la actividad de esta enzima 1000 mU/ml. Su normalizacion completa es
supera el rango normal entre 4 y 8 posterior a la desaparicion de la ictericia. Ver
horas de iniciados los sintomas de infarto agudo figura.
del miocardio, declinando a Tema 7: Enzimas. Enzimologia Clinica
valores basales cerca del tercero o cuarto dia. El Curso Bioquimica Lic. en Enfermeria. UNSL 13
pico enzimatico es variable, pues Enzimas marcadoras de colestasia:
puede ser precoz (8 horas) o muy tardio (58 horas). - Las fosfatasas alcalinas hepaticas (FA) son un
Aunque la media del pico de grupo de enzimas ubicadas
actividad de CK es de 24 horas. Aunque la preferentemente en la membrana canalicular del
elevacion plasmatica de los niveles hepatocito. Su sintesis esta regulada por
totales de CK es muy sensible para el diagnostico la presencia de sales biliares; un aumento de la
de infarto, existen cerca de un concentracion intracelular de sales biliares
15% de falsos positivos que se presentan en estimula la sintesis de FA y por esta razon se elevan
pacientes con enfermedades en la colestasia intra o extracelular. En
musculares, intoxicacion alcoholica, diabetes, ambos casos existe un incremento de la
trauma musculo-esqueletico, ejercicio concentracion intracelular de sales biliares. Pueden
extenuante, convulsiones, inyecciones elevarse en procesos expansivos locales (tumorales o
intramusculares, embolismo pulmonar, etc. inflamatorios), en los que la
Por lo cual se recurre a las isoenzimas de CK como concentracion de sales biliares aumenta en forma
ayuda diagnostica de sectorial.
invaluable utilidad hoy en dia. Las tecnicas de En la hepatitis aguda, es corriente encontrar discretas
electroforesis han permitido indicar alzas en la concentracion de FA
tres isoenzimas de CK: MM, BB y MB; la BB se como expresion de mayor o menor grado de
encuentra principalmente en rinon y colestasia que siempre esta presente. Sin
cerebro, la MM en el musculo esqueletico, embargo, una elevacion importante de FA debe
mientras que la isoenzima MB se detecta hacer pensar en un dano hepatico
principalmente en el corazon. La medicion de esta predominantemente colestasico o en una obstruccion
isoenzima continua siendo el al flujo biliar.
metodo bioquimico mas aceptado para el - La GGT o gama glutamil transferasa se eleva por
diagnostico del infarto agudo del mecanismos no bien establecidos pero
miocardio. probablemente similares a los de las FA. Es ademas
HIGADO inducible por agentes externos. Se
trata de un marcador muy sensible pero de poca Es importante destacar que la amilasa puede estar
especificidad. El alcohol induce distorsionada en presencia de altos
manifiestamente su sintesis por lo que es de niveles de trigliceridos, por lo tanto la amilasemia es
utilidad en el control de la abstinencia util en etapas precoces de la PA o
alcoholica. arroja valores muy elevados. El hallazgo de valores
PANCREAS: normales no excluye el diagnostico y
El pancreas es un organo muy rico en enzimas la magnitud de la amilasemia no guarda relacion con
almacenadas principalmente en formas la gravedad de la PA (No es
inactivas o zimogenos, que se activan en el especifica, existen otras patologias que tambien
intestino para la digestion de los alimentos. provocan su elevacion, ej: cirrosis,
La Pancreatitis Aguda (PA) se define como insuficiencia renal, obstruccion intestinal).
inflamacion del pancreas y del tejido - Lipasa: su determinacion presenta una mayor
peripancreatico especificidad para pancreatitis (96%), con
en forma aguda. . Tema 7: Enzimas. Enzimologia Clinica
GOT Curso Bioquimica Lic. en Enfermeria. UNSL 15
GPT una sensibilidad de 94%. Se eleva despues que la
Tema 7: Enzimas. Enzimologia Clinica amilasa y permanece elevada en el
Curso Bioquimica Lic. en Enfermeria. UNSL 14 plasma por mas tiempo, incluso hasta dos semanas
Es importante distinguir entre su forma leve y de iniciado el cuadro.
grave. La primera se caracteriza por la - Un marcador que se ha venido utilizando en los
presencia de inflamacion local que se traduce en ultimos anos, lo constituye el
edema de la glandula y con minima tripsinogeno. El tripsinogeno se encuentra en dos
repercusion sistemica. En la pancreatitis aguda formas isoenzimaticas, el tripsinogeno-1
grave en cambio, la glandula puede tener o cationico y el tripsinogeno-2 o anionico. Durante
necrosis, formaciones de pseudoquistes o PA se favorece la salida de enzimas
abscesos, y muchas veces aparece falla organica pancreaticas a la circulacion entre las que se
con repercusion sistemica importante. encuentran el tripsinogeno-2 que puede ser
La etiologia mas frecuente de pancreatitis aguda es valorado en el suero y la orina.
la biliar, por obstruccion del coledoco ENZIMURIA
por calculos biliares. La segunda se debe La utilizacion de las enzimas en la orina es limitada
principalmente al abuso del consumo del ya que debe asegurarse que su
alcohol. presencia no procede de eritrocitos, leucocitos,
Otras causas menos frecuentes incluyen: el celulas epiteliales y microorganismos.
traumatismo abdominal, hipercalcemia, Las enzimas presentes en la orina pueden tener por
hipertrigliceridemia, farmacos, infecciones virales, tanto diferentes origenes:
transgresion alimentaria o idiopatica. - Procedentes del rinon por destruccion celular.
Es precisamente la activacion del tripsinogeno en - Reacciones de rechazo al trasplante de rinon.
las celulas acinares del pancreas y no en - En un rinon sano, su presencia en la orina esta
el duodeno lo que favorece la activacion de otras limitada por los pesos moleculares.
enzimas pancreaticas que inician el Las proteinas con un peso molecular menor de 60
proceso de autodigestion del pancreas. kDa pueden ser filtradas por el rinon y
Enzimas pancreáticas en plasma: Existe un alza se excretan en la orina.
significativamente de la lipasa, amilasa y La presencia de enzimas en la orina puede servir
tripsina. En clinica un alza en la lipasemia mayor a tambien como criterio de evolucion en
3 veces o de la amilasemia mas de 4 las afecciones renales agudas.
veces, tienen una alta sensibilidad y especificidad.
Pá gina1
- -Amilasa: se eleva en el plasma entre 2 a 12
veces de su valor normal en la PA. El alza es
ENZIMAS
Distribución de las enzimas en los
un evento precoz y transitorio, de tal forma que se
espacios extra e intracelular
eleva al inicio y dura hasta el tercer a
En la célula las ez pueden encontrarse en el líquido
quinto dia de evolucion. Luego puede regresar a celular (citosol) o bien pueden estar fijadas a
valores normales o mantenerse elevada. determinadas organelas (ej. Adheridas a las
mitocondrias).
Hay enzimas 100 % citoplasmáticas es decir que se bioquímico de un individuo. Por ejemplo hay
encuentran solamente en el citosol, a estas se las llama aloenzimas de la Glucosa-6-Fosfato
uniloculadas. Por ejemplo GPT (glutámico-pirúvico Deshidrogenasa y de la Pseudocolinestearasa.
transaminasa) ó LDH (láctico deshidrogenasa). Fundamentos clínicos de la
Otras enzimas están en un cierto porcentaje en las enzimología
organelas y otro porcentaje en el citoplasma, es decir Las ez plasmáticas se clasifican de acuerdo a Bücher en
que son biloculadas, como la GOT (glutámico-pirúvico 3 grandes grupos:
transaminasa) que está 60% en el citoplasma y 40% en Enzimas Plasmoespecíficas:
mitocondria, MDH (malato deshidrogenasa) 50 % en Serían las enzimas que tienen su lugar de acción en el
citoplasma y 50% en mitocondria. plasma.
En las células somáticas normales, las actividades Estas enzimas son sintetizadas en determinados tejidos
catalíticas de las numerosas enzimas se mantienen muy y vertidas a la sangre activamente, que es su lugar de
constantes, ya que existe un equilibrio entre la síntesis acción, donde se encuentran su sustrato y su coenzima.
y la degradación enzimática, pero constantemente Por ejemplo las enzimas del complejo protrombínico,
llegan al espacio extracelular pequeñísimas cantidades lipoproteinlipasa, plasminógeno y pseudocolinesterasa.
de muchas enzimas intracelulares. En muchas Este grupo de enzimas son sintetizadas
enfermedades orgánicas está aumentada la salida de fundamentalmente por el hepatocito y son muy activas
enzimas desde el interior celular, esto puede deberse en el plasma (a diferencia de otras que si están
por un aumento de la permeabilidad de las membranas aumentadas indican daño). Entonces de este grupo de
celulares, o bien por disolución de la estructura celular. ez nos interesa saber sus valores inferiores; porque una
De esta manera se originan modificaciones del nivel disminución de su actividad (normalmente alta en
enzimático en el plasma sanguíneo, de indudable valor suero) indica una alteración en la síntesis, y como la
que ayudan a realizar un diagnóstico. mayoría son producidas en el hígado esto nos estaría
Variantes enzimáticas indicando una alteración de la funcionalidad hepática.
Las enzimas se subdividen en 3 grupos: Enzimas secretadas o exocitoenzimas
1) Isoenzimas: son variaciones en la molécula de la Son enzimas secretadas por glándulas ó tejidos muy
enzima que le da características físico-químicas especializados, su lugar de acción está alejado, es el
(distinto pH, distinto Km, diferente acción de caso de las enzimas digestivas segregadas por el
inhibidores y activadores) e inmunológicas páncreas y que van al duodeno a ejercer su acción,
diferentes, localización o lugares de origen como por ejemplo la amilasa, lipasa, tripsina, etc.
diferentes; de modo que realizan el mismo tipo de Clínicamente, estas enzimas en sangre están en baja
reacción y actúan sobre el mismo sustrato pero en actividad. Aumentarían sus niveles en la patología
condiciones distintas. Las causas de estas aguda como la pancreatitis y en casos de patología
múltiples formas enzimáticas pueden ser 3: crónica, donde la glándula está hipofuncionante, por lo
La información genética para estas moléculas que su actividad estaría disminuida en su lugar de
enzimáticas están localizadas en distintos acción; en este caso en duodeno.
genes. Por ejemplo la MDH tiene 3 Enzimas celulares o endocitoenzimas
isoenzimas que están codificadas en los Son todas las enzimas que tienen su lugar de acción
cromosomas 1, 4 y 6. dentro de la misma célula que las sintetiza, no tienen
Cuando los monómeros constituyentes de una acción en plasma por falta de sustrato y de coenzima.
ez (ez oligoméricas) están codificadas en Se dividen es 2 grupos:
genes diferentes. Por ejemplo la LDH, tiene 2 CATEDRA DE BIOQUIMICA – FACULTAD DE MEDICINA - UNNE
monómeros el M se encuentra en el Pá gina 2
cromosoma 11 y el H se encuentra en el
ENZIMAS
cromosoma 12.
1) Ubicuas: Son todas las que intervienen en el
Mutaciones: hay genes que codifican para
metabolismo general como por ejemplo LDH,
ciertas ez que están predispuestos a mutar más
MDH, ALT o Alanina-aminotransferasa, AST o
que otros. Por ejemplo la Glutámico
Aspartato-aminotransferasa. A estas ez se las
Deshidrogenasa (GLDH), presenta hasta 50
denomina comúnmente transaminasas y su otra
formas diferentes, todas son normales, pero
sinonimia es GPT y GOT.
difieren en algunos aminoácidos, estas
2) Organoespecíficas: Enzimas especificas de
diferencias aminoacídicas se deben a
determinados órganos ó tejidos que actúan en
mutaciones puntuales.
procesos metabólicos específicos de ciertos
2) Heteroenzimas: enzimas de función semejante,
tejidos. Por ejemplo la GLDH, y SDH.
específica de las diversas especies biológicas, por
ejemplo la LDH del hombre y del conejo. División de las enzimas que aparecen
3) Aloenzimas: variante de ez e isoez condicionadas en el plasma según su origen
genéticamente que solo aparecen en determinados Grupo Ejemplos
Especificas del plasma
individuos de una misma especie. La mayoría de
Protrombina,
las aloenzimas no conducen a las manifestaciones
plasminógeno,
patológicas. Sirven para caracterizar el tipo
ceruloplasmina, Transaminasas
lipoproteinlipasa, Son enzimas que realizan reacciones de
pseudocolinstearasa transaminación (consiste en la transferencia del grupo
De secreción amino de una aminoácido dador a un cetoácido aceptor;
Amilasa pancreática, salival, convirtiéndose el aminoácido dador en un cetoácido y
fosfatasa prostática, el cetoácido aceptor en un aminoácido) dando lugar a
pepsinógeno. aminoácidos y cetoácidos distintos de los originales.
Enzimas
En el hígado se han detectado no menos de 60
celulares
reacciones de transaminación, pero las únicas
De vías
transaminasas con valor clínico son la GOT y la GPT.
principales
LDH; MDH; Glicerol-3-
Estas enzimas no son específicas del hígado y se hallan
fosfato Deshidrogenasa; 1,6 también en músculo, corazón, páncreas y cerebro. La
difosfo-fructo-aldolasa; GOT está constituida por dos isoenzimas, una
GOT; GPT. citoplasmática y otra mitocondrial, mientras que la
Organoespecificas GPT es exclusivamente citoplasmática.
Ez del ciclo de la urea; Las concentraciones normales de estas enzimas en
glucosa-6-fosfatasa; 5´ND. plasma traducen la normal destrucción de las células
Para la valoración enzimática hay que tener en que las contienen, el cociente normal GOT/GPT es de
cuenta: aproximadamente 1,3.
a) Distribución de las enzimas; o sea conocer la En todas las enfermedades hepáticas que cursan con
topología enzimática frente a un aumento de una necrosis celular existe hipertransaminasemia, más
enzima para saber que correlación clínica tiene. intensa cuanto más aguda sea la lesión. Las hepatitis
b) Localización de las enzimas dentro de la célula; víricas y tóxicas, y más raramente la insuficiencia
para poder entender que tipo de daño sufrió la cardíaca de instauración súbita y el hígado de shock,
misma. Por ejemplo si encontramos un aumento de suelen producir niveles más de 10 veces superiores a
enzimas citoplasmáticas indica que la alteración no los normales.
es tan severa, pero si además aumentan las El hallazgo de una elevación moderada de las
enzimas mitocondriales significa que existen en transaminasas (menos de 10 veces los valores
ese tejido focos necróticos que permiten el pasaje normales) es más difícil de interpretar y puede
de las mismas que solamente aparecen en sangre corresponder a una hepatitis crónica, a una hepatitis
en casos de necrosis intracelular. aguda de poca intensidad, a la fase de regresión de una
c) Conocer el tiempo de vida media de esa enzima; hepatitis aguda, pero también a una cirrosis, a una
para poder interpretar los tiempos de desaparición enfermedad biliar o a muchos otros procesos. Un
de esas actividades enzimáticas aumentadas. Por cociente GOT/GPT superior a la unidad con
ejemplo si estamos frente al aumento plasmático hipertransaminasemia moderada sugiere una
de una enzima de vida media larga, llevará más hepatopatía alcohólica o neoplásica.
tiempo la normalización de sus valores desde el Gammaglutamiltranspeptidasa
momento de su entrada al plasma. En cambio, si La GT, conocida también como gammaglutamiltransferasa,
están aumentado los valores de cierta ez y su vida cataliza la transferencia de grupos
media es corta, esta se normaliza más rápidamente. gammaglutamil de un péptido a otro o de un péptido a
Determinación de enzimas séricas un aminoácido. El tejido más rico en esta enzima es el
hepáticas riñón, seguido del páncreas, el hígado, el bazo y el
El hígado es una glándula importante porque allí no pulmón. En las células se localiza en las membranas,
solo se realiza la síntesis proteica, sino también la fundamentalmente del retículo endoplásmico liso, en
detoxificación de una serie de compuestos que deben los microsomas, en la fracción soluble del citoplasma y
ser eliminados de nuestro organismo. Contiene un gran en los conductillos biliares. Los valores séricos
número de enzimas, pero las que tienen mayor interés normales de GT difieren en ambos sexos, siendo más
clínico son las transaminasas, la fosfatasa alcalina, la CATEDRA DE BIOQUIMICA – FACULTAD DE MEDICINA - UNNE
gammaglutamiltranspeptidasa y 5´ND. Pá gina 3
Schmidt y colaboradores llegaron a determinar que no ENZIMAS
todas las células del hígado tenían la misma elevados en los varones que en las mujeres.
concentración enzimática, sino que la concentración La GT aumenta en la mayoría de las enfermedades del
dependía del tipo de metabolismo que desarrollaba y hígado, por lo que su especificidad es escasa. La GT
esto está en relación con la disponibilidad de oxigeno es una enzima sumamente sensible, aumenta en menor
que tienen los hepatocitos. Los hepatocitos cercanos al o mayor grado en todas las hepatobiliopatías, los
espacio porta tienen mayor disponibilidad de oxigeno mayores aumentos se ven en procesos obstructivos o
que los hepatocitos cercanos a la vena centrolobulillar, neoplásicos, también está aumentada en hepatitis.
por lo cual es diferente el incremento de enzimas en Los aumentos más importantes se observan en procesos
sangre ya sea que provengan de hepatocitos de la zona tumorales, en la colestasis intrahepática o extrahepática
centrolobulillar o periportal. por proliferación de conductillos biliares, además su
síntesis es inducida por el alcohol y también por crónico, situación en la que las enzimas pancreáticas
barbitúricos Tener en cuenta estos 2 factores cuando se elevan sus niveles en sangre. Sin embargo no existe
solicita su determinación. La actividad de la enzima es relación directa entre la duración y la altura de los
inhibida por estrógenos y progesterona, importante a aumentos de actividad enzimática en suero con la
tener en cuenta porque existe una colestasis del gravedad y pronostico de esta enfermedad. Una enzima
embarazo que cursa con GT normal por estar inhibida que se dosa es la amilasa, ya que en la práctica y en
la ez por esas 2 hormonas que están aumentadas en el condiciones normales, sólo el páncreas y las glándulas
embarazo. La GT es una enzima sumamente sensible, salivales contribuyen de forma significativa al
aumenta en todas las hepatobiliopatías, en menor o mantenimiento de los niveles séricos de esta.
mayor grado. No obstante, además de originarse en el páncreas, esta
La GT es un parámetro muy útil para el control de los enzima proviene de otros órganos, como las trompas de
pacientes alcohólicos, aunque también pueden traducir Falopio, los ovarios, las glándulas salivales, el
la exposición a tóxicos industriales. La interrupción del intestino, el pulmón, la próstata y el hígado. Por esta
consumo de alcohol, en ausencia de otras causas de razón, procesos inflamatorios desarrollados en estos
inducción enzimática, es seguida de una reducción órganos pueden provocar elevaciones de las cifras de
inmediata de los valores plasmáticos de GT, hasta amilasa.
normalizarse completamente al cabo de 6-8 semanas. Debido a la inespecificidad de la ez suele utilizarse
Fosfatasa Alcalina como recurso la detección sérica de la fracción P3 de la
La FAL sérica tiene varios orígenes (hígado, riñón, amilasa (isoenzima de origen exclusivamente
placenta, intestino, huesos, leucocitos), aunque las pancreático, aislada por electroforesis) que ha sido
fuentes más importantes son el hígado, los huesos y el observada de forma casi constante en la pancreatitis
intestino. Durante el crecimiento, los niveles séricos aguda y está prácticamente ausente en los abdómenes
son altos debido al aumento de la fracción ósea, que agudos de otras etiologías.
traduce la actividad osteoblástica en el hueso. Lo Pero además pueden emplearse otras alternativas, como
mismo ocurre durante el embarazo, sobre todo en el es la cuantificación de la lipasa sérica, que es la
tercer trimestre, en el que las elevaciones se deben a segunda determinación más frecuentemente empleada
fosfatasa alcalina de origen placentario. para diagnóstico de la pancreatitis aguda. La lipasa es
La FAL tiene tres isoenzimas porque se origina en tres más específica del páncreas, aunque no totalmente, ya
genes diferentes, una isoenzima de origen placentario, que también es producida por el intestino, la faringe, el
una intestinal y una que se llama no placentaria/no riñón y el bazo que en procesos inflamatorios de
intestinal. alguno de estos provocará elevaciones de la enzima.
Para establecer el origen del aumento de la fosfatasa Otra posibilidad es fraccionar la amilasa en sus
alcalina se recurre a la separación electroforética de sus isoenzimas salival (S) y pancreática (P). La inhibición
isoenzimas. de la isoamilasa tipo S, por un doble anticuerpo
Otro método consiste en la determinación de las monoclonal, es un método sencillo y rápido que
fracciones termoestable (hepática) y termolábil (ósea). permite juzgar la elevación aislada de la enzima de
La modificación de la proporción de ambas fracciones origen pancreático, evitando así el problema de
permite conocer cuál es la responsable de la elevación confusión con hiperamilasemias extrapancreáticas.
de los niveles séricos. Sin embargo, en la práctica es En oposición al aumento de amilasa, que también
suficiente efectuar una valoración indirecta mucho más puede estar elevado en enfermedades no pancreáticas
sencilla, que consiste en la determinación de otras (ejemplo parotiditis) el aumento de lipasa solo puede
enzimas que se elevan en caso de colestasis, como la deberse a afecciones del páncreas.
GT o la 5-nucleotidasa. La amilasa, se filtra por el glomérulo por su bajo peso
El aumento de fosfatasa alcalina de origen hepático molecular, en cambio la lipasa al presentar un alto peso
revela obstrucción biliar intra o extrahepática, con molecular no se filtra y en consecuencia no aparece en
ictericia (coloración amarillenta de piel y mucosas, orina. Por tal motivo, es posible determinar la amilasa
producidas por el aumento de bilirrubina por encima de en orina, recogiendo la muestra de dos horas. Sin
2 mg/dl) o sin ella, o la existencia de un proceso embargo, en ocasiones, es posible detectar niveles
hepático expansivo, infiltrativo o de naturaleza urinarios de amilasa elevados durante algo más de
granulomatosa. tiempo que en sangre, ya que en algunos casos la
Determinación de enzimas séricas elevación de amilasa sérica puede ser fugaz.
Las enzimas pancreáticas pueden ayudar también en el
pancreáticas CATEDRA DE BIOQUIMICA – FACULTAD DE MEDICINA - UNNE
La comprobación de cifras elevadas de las diferentes
enzimas pancreáticas en plasma y orina apoya
Pá gina 4
fuertemente la existencia de una lesión pancreática. ENZIMAS
Este hallazgo, junto con la clínica y los datos obtenidos caso de pancreatitis crónica. En esta enfermedad, la
mediante las técnicas de imagen, constituyen los disminución de los niveles de amilasa total, amilasa
pilares del diagnóstico de la pancreatitis aguda. pancreática, lipasa y tripsina orientan hacia la
Las principales causas de pancreatitis son las existencia de pérdida avanzada de parénquima
enfermedades de las vías biliares y el alcoholismo exócrino. Por el contrario, su elevación, aunque con
intensidad discreta, coincidiendo con brotes de dolor, Estas subunidades pueden combinarse de cinco
señalaría la permanencia de actividad inflamatoria maneras diferentes dando lugar a las isoenzimas
aguda sobre tejido funcionante, aun en el contexto de correspondientes.
enfermedad crónica. El infarto de miocardio es la muerte celular de las
No menos importante es el tener en cuenta que en los miofibrillas causada por falta de aporte sanguíneo a
casos graves de necrosis pancreática pueden disminuir una zona del corazón que en la mayoría de los casos es
rápidamente las actividades enzimáticas elevadas. En a consecuencia de la oclusión aguda y total de la arteria
las determinaciones enzimáticas que no se realizan con que irriga dicho territorio.
suficiente precocidad deja de ser posible el comprobar Esta patología ocasiona diversas alteraciones
actividades elevadas. humorales, como leucocitosis y aumento de la
Determinación de enzimas séricas en velocidad de sedimentación globular (VSG). No
el infarto de miocardio obstante, desde el punto de vista diagnóstico, sólo tiene
Creatininafosfokinasa importancia el aumento en la actividad sérica de ciertas
La CK es una ez dimérica formado por monómeros que enzimas, liberadas al torrente circulatorio como
pueden ser de 2 tipos: M y B. Por lo tanto la CK tiene 3 consecuencia de la necrosis.
isoenzimas: Normalmente en el plasma la concentración de la LDH
CK-MM (localización muscular) o CK 3 1 es menor que la de la LDH 2. En el infarto la
CK-MB (localización cardíaca) o CK2 alteración que se manifiesta es el aumento de LDH1
CK-BB (localización cerebral) o CK1 que llega a valores que superan a la LDH 2. Esta
Los distintos órganos presentan distribuciones alteración aparece precozmente antes que los valores
diferentes de las isoenzimas. En el cerebro solamente de LDH total supere su valor normal y permanece
se observa CK-BB. La barrera hematoencefálica intacta alterado el isoenzimograma tiempo después que los
parece ser impenetrable para la CK, por lo que en valores de LDH total retornaron a la normalidad por
general no debe contarse con la presencia de CK-BB en eso tiene valor para diagnóstico tardío dado que la
el suero. alteración de la LDH1 es patognomónico del infarto, en
En individuos sanos la actividad total de CK en suero cambio la LDH2 es característica de los procesos de
se compone fundamentalmente de CK-MM. hemólisis de los glóbulos rojos.
En el infarto, no solo es de importancia la En la práctica se determinan tres de ellas, CK, GOT y
comprobación de la actividad CK-MB sino también su LDH, la velocidad con que se activan es diferente para
proporción en la actividad total de la CK. Las cada una de ellas. La más precoz es la CK (6-8 hs),
determinaciones de CK y CK-MB ayudan también a intermedia la GOT (16-48 hs) y más tardía la LDH (24-
reconocer precozmente reinfartos o la extensión del 60 hs). Los valores de las dos primeras se normalizan
infarto. Además del infarto pueden encontrarse al cabo de 3-4 días, mientras que la LDH permanece
aumentos de la actividad sérica de la CK y CK-MB en elevada entre 8 y 14 días. Es importante recordar que
otras lesiones del miocardio. p.ej. en miocarditis, estas enzimas no son específicas del corazón, puesto
arritmias graves, intervenciones quirúrgicas. que se encuentran en otros tejidos; por consiguiente, un
La CK está aumentada en esfuerzos físicos, valor anormal de cualquiera de ellas puede deberse a
inyecciones intramusculares, heridas musculares y un proceso distinto al infarto. Así pues, para sustentar
daño hipóxico de los músculos esqueléticos. Este el diagnóstico de necrosis miocárdica se realizan
aumento se debe casi exclusivamente a lesiones de la determinaciones seriadas durante los primeros 3-4 días
musculatura esquelética. y se requiere que muestren la curva de ascenso y su
Láctico Deshidrogenasa normalización típica para cada una de ellas. La
Tipo Composición Localización determinación de las isoenzimas de la CK y de la LDH
LDH1 HHHH facilita el diagnóstico y permite conocer si el aumento
Miocardio, eritrocito, se debe específicamente a un infarto de miocardio, ya
riñón, páncreas que las isoenzimas CK-MB y la LDH1 son casi
LDH2 HHHM exclusivas del corazón. Además, la primera puede estar
Miocardio, eritrocito, anormalmente elevada en algunos casos en que la
riñón actividad de la CK total es normal. Recientemente se
LDH3 HHMM ha demostrado que ciertos marcadores como la
Páncreas, pulmón, mioglobina pueden ser más precoces, y también las
leucocitos troponinas T e I, las cuales son más específicas que las
LDH4 HMMM enzimas utilizadas clásicamente. Los valores máximos
Hígado, músculo de estas enzimas presentan una correlación discreta con
esquelético la extensión de la necrosis y se han utilizado con fines
LDH5 MMMM pronósticos; no obstante, existen muchos factores
Hígado, músculo diferentes que influyen en el grado de actividad
esquelético enzimática, por lo que este parámetro sólo tiene un
Es una ez. tetramérica formada por la combinación de valor orientativo.
dos tipos de cadenas diferentes: las designadas H del CATEDRA DE BIOQUIMICA – FACULTAD DE MEDICINA - UNNE
miocardio y las M del músculo estriado esquelético.
Pá gina 5 niveles de enzimas plasmáticas reflejan cambios que han
ENZIMAS tenido lugar en un tejido u órgano específico.
Desde el punto de vista bioquímico los cambios que se Las enzimas plasmáticas son de dos tipos: las de mayor
producen en esta enfermedad son: concentración circulante, específicas del plasma y con un
Iniciada la isquemia (falta de aporte sanguíneo) se papel funcional en éste; mientras que las del segundo tipo
producen cambios iónicos intracelulares, la célula usa comprenden enzimas plasmáticas inespecíficas, presentes
el oxígeno disuelto en el espacio intersticial. El miocito normalmente a niveles muy bajos sin función alguna
pierde actividad contráctil; conocida en la sangre. En el primer grupo se incluyen las
Se observa una reducción del metabolismo oxidativo enzimas asociadas con la coagulación de la sangre (por ej.,
por ende una disminución de la disponibilidad del trombina), disolución del coágulo de fibrina (plasmina) y
ATP, para compensar esto la célula usa las reservas de
modificación de quilomicrones (lipoproteína lipasa).
creatinina fosfato, allí actúa la CK, la cual es rica en el
Generalmente son sintetizadas en el hígado, pero también se
tejido cardíaco, como consecuencia se observan
encuentran en la sangre en concentraciones equivalentes o
cambios electrocardiográficos inespecíficos;
mayores que en los tejidos.
Posteriormente se produce la activación de la glucólisis
anaeróbica con aumento de la captación de glucosa, Las enzimas específicas no plasmáticas son más importantes
vasodilatación y una pérdida de potasio y fosfato. en las enfermedades de tejidos y órganos. Normalmente, los
Como consecuencia de la activación de la glucólisis niveles plasmáticos son muy bajos o nulos. Una agresión en
anaeróbica se produce un aumento de la concentración forma de cualquier proceso patológico puede provocar
de lactato y protones que ocasiona acidosis celular. cambios en la permeabilidad de la membrana celular o
Estos cambios son reversibles y se producen como un incrementar la muerte celular, dando lugar a la liberación de
intento para tratar de compensar la falta de oxígeno. Si enzimas intracelulares en el plasma. En casos de cambio de
la isquemia se prolonga en el tiempo estas alteraciones permeabilidad las primeras enzimas que aparecerán en el
se tornan irreversibles. plasma serán los de menor peso molecular y cuanto más

Introducción
Los principios de la enzimología encuentran aplicación
práctica en el laboratorio clínico en la medición de los
niveles enzimáticos de las concentraciones de sustrato en
plasma y tejidos de los individuos enfermos. El fundamento
racional de la medición de actividades enzimáticas en
plasma se basa en la premisa de que los cambios en los
grande sea el gradiente de concentración entre los
niveles intra y extracelular, más rápidamente difundirá
la enzima. Las enzimas citoplasmáticas aparecerán en
el plasma antes que las enzimas mitocondriales y
cuanto mayor sea la cantidad de tejido dañado, mayor
será el incremento en el nivel plasmático. Las enzimas
específicas no plasmáticas desaparecen del plasma a
velocidades diferentes, según la estabilidad de la
enzima y su susceptibilidad al sistema reticuloendotelial.

En el diagnóstico de la implicación de un órgano

específico en un proceso patológico será ideal
poder identificar enzimas específicas para cada órgano.
Esto es improbable, ya que el metabolismo de muchos
órganos es muy parecido. La alcohol deshidrogenasa del
hígado y la fosfatasa ácida de la próstata son útiles
para la identificación específica de enfermedades en
estos órganos. Al margen de estos dos ejemplos, hay
muy pocas enzimas que sean específicas de órganos.
Sin embargo, la proporción de diferentes enzimas varía
de tejido a tejido. Este hecho, combinado con un
estudio de la cinética de aparición y desaparición de
determinadas enzimas en el plasma, permite un
diagnóstico de la implicancia de un órgano específico.

Las enzimas plasmáticas no funcionales comprenden a

las que existen en las secreciones exocrinas y a las
enzimas intracelulares verdaderas. Las enzimas
exocrinas, amilasa pancreática, lipasa, fosfatasa
alcalina y fosfatasa ácida prostática, difunden en forma
pasiva al plasma. Las enzimas intracelulares verdaderas
están normalmente ausentes de la circulación.
Facultad de Medicina. U.N.N.E. Cátedra de Bioquímica

Desarrollo
Los valores bajos de enzimas no funcionales que se encuentran por lo general en el plasma, aparentemente
tienen su origen en la destrucción rutinaria normal de los eritrocitos, leucocitos y otras células. Con la
muerte acelerada de éstas células, las enzimas solubles entran en la circulación. Aunque los valores
elevados de enzimas plasmáticas se interpretan generalmente como prueba de necrosis celular, el ejercicio
intenso también da por resultado la liberación de cantidades importantes de enzimas musculares.
Las isoenzimas son enzimas que catalizan la misma reacción, pero que se desplazan de forma diferente en
la electroforesis. Sus propiedades físicas pueden ser también, aunque no necesariamente, diferentes. El
mecanismo más común de formación de isoenzimas supone el ordenamiento de subunidades que
provienen de dos loci genéticos diferentes en distintas combinaciones para formar la enzima polimérica
activa.
Las isoenzimas más importantes que han sido estudiadas para aplicaciones clínicas son:

Creatín fosfo quinasa o CPK

Aparece en forma de dímero con dos tipos de subunidades, la M (tipo músculo) y la B (tipo cerebro). En el
cerebro, ambas subunidades son, desde el punto de vista electroforético del mismo tipo y se designan B.
En el músculo esquelético, las subunidades son ambas del tipo M. Las isoenzimas que contienen las
subunidades del tipo B y del tipo M (MB) sólo se encuentran en el corazón (miocardio).
Otros tejidos contienen cantidades variables de las isoenzimas MM y BB.
Las isoenzimas se numeran empezando por la especie que se desplaza más rápidamente hacia el ánodo
en la electroforesis, y son CPK1 (BB) o “rápida”, CPK2 (MB) o “intermedia” y CPK3 (MM) “lenta”.
La CPK2 no debe superar el 6% de la CPK total. Su valor normal varía con el método usado y oscila entre
las 10-50 UI/ lt. A 30ºC.
Aumenta su actividad:

 En las miopatías congénitas (distrofia muscular progresiva, distrofias miotónicas, etc.) y en las
adquiridas: dermatomiositis, polimiositis, etc., incluidas las traumáticas. Sirve como marcador
bioquímico para la detección de detección de portadores de distrofia muscular progresiva. Se han
observado aumentos de la CPK, incluso de la isoenzima MB, en rabdomiosarcomas, neoplasias
pulmonares y otras.

 En el infarto de miocardio, donde posee un valor diagnóstico, especialmente su fracción MB, en

los primeros días, junto a las transaminasas y a la lactato deshidrogenasa. Es acentuado si existe
shock cardiogénico. La cardiversión aumenta, además, la fracción MM.

 Aumenta también la fracción MB en la cirugía y en los traumatismos cardíacos, así como en algunas
miocarditis. Moderadamente en la insuficiencia cardíaca congestiva.

 En distintas enfermedades: accidente cerebrovascular, hipotiroidismo, embolia periférica, incluso

ocasionalmente neumonías. Igualmente en el shock no cardiogénico (primero, solo MM y luego,
además, la fracción MB) y en el alcoholismo agudo, especialmente si existe delirium tremens.
 Durante las maniobras fisioterápicas con ejercicio de la musculatura esquelética (por ej. profilaxis de
trombosis), pero sobre todo en los grandes esfuerzos físicos, como carreras de maratón, donde E
además de la isoenzima muscular (MM) aumenta la cardíaca (MB). También sucede en los nz
im
síndromes convulsivos.
as
pa
 En grandes quemaduras y en los postoperatorios.
ra
Disminuye en la artritis reumatoide y en otros procesos reumáticos inflamatorios. el
Di
ag
nó
sti
co
Cl
ín
Facultad de Medicina. U.N.N.E. Cátedra de Bioquímica
Lactato deshidrogenasa ó LDH
Es una enzima tetramérica que contiene solo dos subunidades distintas: las designadas H del corazón
(miocardio) y las M del músculo. Estas dos subunidades se combinan de cinco formas diferentes:
 Tipo Composición Localización
LDH1 HHHH Miocardio y eritrocito
LDH2 HHHM Miocardio y eritrocito
LDH3 HHMM Cerebro y riñón
LDH4 HMMM Hígado y músculo esquelético
LDH5 MMMM Músculo esquelético

La deshidrogenasa del ácido láctico presente en el suero normal a concentraciones que oscilan entre 200 y
680 U/ml y en unidades internacionales hasta un máximo de 220 mUI/ml, puede experimentar elevaciones
en los siguientes casos:

 Infarto de miocardio, precozmente, a las 24-36 hs. y en forma bastante constante y acentuada
como para que constituya un signo bioquímico fiel en el diagnóstico. Su aumento se prolonga
bastante días , hasta el 7º o incluso el 16º, cuando ya se normalizó la elevación de las
transaminasas.

 Cáncer diseminado, constantemente. También en los linfomas. Aunque inespecífico, es un índice

de proliferación neoplásico.

 Distrofia muscular progresiva en grado escaso y de modo ocasional.

 Hepatitis aguda con ictericia. A veces, en los procesos hepáticos crónicos.

 Dermatomiositis y accidentes cerebrovasculares.

 A veces en casos de arritmias cardíacas sin infarto y en enfermos nefríticos.

 En distintas hemopatías: crisis hemolíticas, eritroblastosis fetal, anemias megaloblástica,

trombopenias, etc.

 En diversas infecciones: malaria o paludismo, SIDA, especialmente si coexiste con tuberculosis o

neumocistosis, neumonía.
En realidad pasa la deshidrogenasa en exceso a la sangre en toda destrucción hística, traumática, infecciosa
o neoplásica, especialmente del miocardio, pero también de otros músculos estriados, del hígado, de riñón,
de cerebro y de tumores malignos.
Es, por tanto, un signo inespecífico más de organicidad del proceso, pero dada su constante y mayor
elevación en el infarto de miocardio, puede confirmar este diagnóstico si han podido excluirse las otras
causas.
Enzimas para el Diagnóstico Clínico

CPK

Precordial
3
 HBDH

Normal ------------------------------------------------------------------------
LDH

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18
Dolor Días después del episodio

Precordial
3
Nótese en el cuadro como la CPK se eleva rápida pero brevemente; la - hidroxibutírico deshidrogenasa
(HBDH) aumenta lentamente, pero persiste en más tiempo, mientras que la LDH lo hace en menor medida.
Después de la lesión del tejido cardíaco, la rotura celular libera CPK2 a la sangre dentro de las primeras 6-
18 horas después de un infarto, pero la liberación de LDH se retrasa respecto a la aparición de CPK2 en 1-2
días. Normalmente, la actividad de la isoenzima LDH2 es mayor que la de la LDH1; sin embargo, en el caso
de infarto, la actividad de la LDH1 supera a la de la LDH2 en el mismo momento aproximadamente en que
los niveles de CPK2 , vuelven a la línea de base (48-60 horas).
El cambio de las isoenzimas de la LDH junto a una CPK2 incrementada es diagnóstico de un infarto de
miocardio virtualmente en el 100% de los casos. Un aumento en la actividad de la LDH5 es un indicador de
congestión hepática. De este modo, se pueden seguir complicaciones secundarias de la lesión cardiaca.
El método electroforético de determinación de enzimas cardiacas es demasiado lento y poco sensible para
que resulte útil en situaciones de urgencia.

Transaminasas o Aminotransferasas GOT o AST y GPT o ALT

Actualmente se determina por separado la glutámico oxalacético transaminasa o GOT, llamada también
aspartatoaminotransferasa o AST, y la glutámico pirúvico transaminasa o GPT o alanín aminotransferasa o
ALT. En el suero normal abunda más la primera que la segunda. En el hepatocito, la GPT es una enzima
citoplasmática, mientras que la GOT es bilocular: se encuentra tanto el citoplasma como en las
mitocondrias.
El suero contiene normalmente de 8 a 40 U, con un promedio de 20 de estas transaminasas. Por encima de
40 U debe considerarse patológica e indica la existencia de un proceso de necrosis hística generalmente
miocárdica o hepática, con paso a la sangre circulante de transaminasa, Hoy se sabe que no es necesaria
la necrosis para la liberación de estas enzimas y que basta un trastorno reversible de la permeabilidad
celular, por los menos en los aumentos de GPT, más “superficial” en el hepatocito.
En unidades internacionales se considera actualmente como límite superior de la normalidad hasta 12
mU/ml, tanto para la GOT como para la GPT.
Aumentos patológicos de las transaminasas séricas ocurren en los siguientes casos:

 Infarto de miocardio, a partir de las primeras 6 horas y por un lapso de 4 a 6 días, alcanzándose
los valores máximos a las 36 horas.

 Hepatitis aguda, con ictericia parenquimatosa. La GPT suele elevarse muy por encima de la GOT,
alcanzándose cifras en la primera de más de 100 U y aun 3000 U o superiores. Esto estaría en
relación con una lesión superficial o difusa de los hepatocitos. Las transaminasas se elevan no solo
en las hepatitis víricas (A, B, C o D) sino también en las tóxicas o medicamentosas, y en las
isquemias y/o estasis hepática.

 En la hepatitis alcohólica aguda hay una mayor elevación de la GOT con respecto a la GPT. La
cirrosis hepática ocasiona también ligeros aumentos.
 Es típica en la hepatitis la relación GPT  GOT LDH, mientras que normalmente, así como en la
cirrosis y obstrucción de vías, existe la fórmula LDHGOTGPT. El aumento preferente de la GOT E
indica lesión profunda, que afecta las mitocondrias. nz
im
 En la pancreatitis aguda discretos aumentos, por la hepatopatía precedente acompañante. Es as
progresivo el aumento de la GOT con elevación de la fosfatasa alcalina o FAL en las pancreatitis de pa
ra
origen biliar. el
Di
o Embolia o trombosis con infarto y necrosis hística de cualquier localización, excepto, por lo
ag
general, en el cerebro. Las elevaciones son discretas, inconstantes y de corta duración en nó
sti
co
Cl
ín
 estos caso.
o Afecciones musculares: polimiositis, dermatomiositis, distrofia muscular, traumatismos
musculares extensos, mioglobinurias y ejercicio muscular violento o sostenido.
 Fosfatasa Acida o Fac
Normalmente con valores inferiores a 1,5 U Bodansky. En unidades internacionales, la fosfatasa ácida total
no debe sobrepasar las 11 mU/ml y la “prostática”, 4 mU/ml.
El hecho de que las cifras sean sensiblemente iguales en la mujer y el hombre nos habla a favor de que,
fisiológicamente, el origen de esta fosfatasa no es la de próstata, sino del hígado y bazo probablemente.
Patológicamente:
 El hallazgo de cifras elevadas de fosfatasa ácida suele darse como sinónimo de carcinoma de
próstata metastatizado (ya que la fosfatasa ácida originada en la próstata es vertida en el sano
directamente al semen y orina, y no a la sangre), pero también los nódulos prostáticos malignos,
incluso algunos casos de hipertrofia prostática benigna o de prostatitis, pueden hacerlo aunque con
valores más discretos.
 En enfermedades óseas de otro origen pueden registrarse elevaciones de la fosfatasa ácida:
hiperparatiroidismo primario y metástasis carcinomatosas de diversas procedencias o linfomatosas
(enfermedad de Hodgkin); excepcionalmente en el mieloma. También en la enfermedad de Paget.

 En la enfermedad de Gaucher y en la de Niemann-Pick, igualmente, se comprueban valores altos.

 En la embolia pulmonar y en otras lisis plaquetarias (trombosis, trombocitopenia por destrucción, no

por aplasia).
 En las hemopatías malignas: leucemias mieloides o linfoides o crónicas, de células peludas,
mielomonocíticas. También en la anemia megaloblástica, anemia hemolítica, policitemia vera, etc.

Fosfatasa Alcalina o Fal

En el suero humano existen varios tipos de fosfatasa alcalina, una enzima derivada de la membrana celular
cuya función fisiológica no es conocida y que hidroliza ésteres fosfóricos sintéticos a pH 9. Esta actividad
enzimática está ubicada en hueso, intestino delgado, hígado y placenta.
Aumenta generalmente la fosfatemia en los períodos de crecimiento y reparación ósea.
La cifra media normal de la FAL es de 1,5 a 5 U Bodansky. Durante el embarazo aumenta la fosfatasemia
hasta valores 3 veces superiores a lo normal al final del primer trimestre, normalizándose luego de las 6
semanas del parto, aunque puede persistir un ligero aumento durante todo el período de lactancia.
Se registran aumentos de la FAL, patológicos, en los siguientes casos:

 Ictericia obstructiva, que determinan elevaciones notables de forma característica por su

constancia, dato de valor diferencial frente a la parenquimatosa. En neoplasias de las vías biliares,
especialmente en el ampuloma, puede faltar ictericia o ser intermitente, mientras que sube la FAL
de modo constante y marcado. Igualmente aumenta en la obstrucción intrahepática por cirrosis
biliar primaria.
Enzimas para el Diagnóstico Clínico

 En el hiperparatiroidismo primario (enfermedad de Reckling-Hausen), donde los valores

alcanzados son superiores, a veces, a 50 o 60 U Bodansky.

 En la enfermedad de Paget u osteítis deformante, donde la fosfatasemia alcanza valores

máximos, hasta 200 U Bodansky.

 En distintas neoplasias óseas: en el carcinoma osteolítico metastásico y sobre todo en los casos
con metástasis hepáticas.

 En el cáncer de próstata con metástasis óseas, aunque aquí predomina especialmente la

elevación de la fosfatasa ácida.

 En el mieloma múltiple, sólo en algunos casos.

 En el raquitismo, con ligeros aumentos en los casos leves y mucho mayores (60 U Bodansky o

5
más) en las formas graves. Su descenso con el tratamiento sirve de índice objetivo para valorar su
eficacia.

5
  En otros procesos óseos tales como fracturas en cicatrización o en la
sífilis ósea suelen haber aumentos discretos.
La disminución de la fosfatemia suele ocurrir en los siguientes casos:

 En la hipofosfatasia.

 En el hipotiroidismo infantil, con o sin cretinismo.

 En el escorbuto, excepto en la calcificación de hemorragias.

 En la enfermedad celíaca.

 En la acondroplasia.

Amilasa
Existen dos isoenzimas de la amilasa: la “P” o pancreática, que pasa más
fácilmente a la orina y la “S” o salival, más rápida en la electroforesis. Su distinta
proporción tiene interés diagnóstico, especialmente en las parotiditis para confirmar
o descartar la complicación pancreática. Normalmente existe una proporción de las
isoenzimas P (40%) y S (60%).
Aumentos de la amilasemia se observan:
 En las pancreatitis agudas como hallazgo característico, excepto en los
casos de necrosis fulminante, que no permiten la elevación de la
amilasemia. También en las pancreatitis secundarias a hepatitis agudas
por virus, lo cual tiene valor para diagnosticar esta complicación.

 En la úlcera gástrica penetrante en páncreas. En estos casos, los

aumentos son mucho menores que en la pancreatitis aguda. En distintos
procesos abdominales parapancreáticos: gastritis, úlcera duodenal
perforada, peritonitis, etc., hay discretas elevaciones de la amilasemia.

 En los traumatismos pancreáticos y en la obstrucción del conducto

pancreático o del esfínter de Oddi por litiasis o carcinoma.

 En la parotiditis, sobre todo si es bilateral, generalmente entre el 5º y 7º

día de enfermedad. A veces, el aumento se exagera por participación
pancreática. La litiasis salival con obstrucción determina también
hiperamilasemia.

E
nz
im
as
pa
ra
el
Di
ag
nó
sti
co
Cl
ín