GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

BIOQUÍMICA

Ana María Zuleta Salazar

Jovanna Arteaga Restrepo

Paola Andrea Trujillo Tróchez

Grupo: 151030_19

Tutor.

José Luis Cuellar Quiñones

Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD

Administración en Salud.

ECISALUD

Bioquímica

Popayán - Cauca

1
 Septiembre/2018

Contenido

1. INTRODUCCION.............................................................................................................6

2. Objetivos…………………………………………………………………………………7

2.1 Objetivo general……………………………………………………………………….. 7

2.2 Objetivos específicos………………………………………………………………….. 8

3. Practica 1. SEGURIDAD Y NORMAS DE LABORATORIO

3.1 NORMAS PERSONALES............................................................................................ 9

3.2 NORMAS PARA LA UTILIZACION DE PRODUCTOS QUIMICOS...................... 9

3.3 NORMAS PARA LA UTILIZACION DE INSTRUMENTACION........................... 10

3.4 NORMAS DE EMERGENCIA.................................................................................... 10

3.5 MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS..................................................................... 11

4. Práctica 2: PROPIEDADES BIOQUIMICAS DE LOS AMINOACIDOS.................. 12

4.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO................................ ...................................... 13

4.2 REACCION CON LA NINHIDRINA......................................................................... 14

4.3 REACCION DE BIURET............................................................................................ 14

4.4 REACCION XANTOPROTEICA. ............................................................................. 15

4.5 REACCION DE MILLON........................................................................................... 16

4.6 REACCION DE SAKAGUCHI................................................................................... 16

4.7 PREGUNTAS: ............................................................................................................. 17

5. Practica 3. BIOQUIMICAS DE LAS .PROTEINAS.................................................... 18

5.1 PROCEDIMIENTO Y MATERIALES........................................................................ 19

2
5.2 REACCION DE BIURET............................................................................................. 19

5.3 REACCION DE AMINOACIDOS AZUFRADOS...................................................... 20

5.4 DETERMINACION DE LA CONCENTRACION DE PROTEINAS: METODO DE

BRADFORD...................................................................................................................... 21

5.5 PREGUNTAS: ............................................................................................................ 23

6. Práctica 4: IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS.......................................... 24

6.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO. ...................................................................... 27

6.2 PRUEBA DE BENEDICT............................................................................................ 27

6.3 REACCION DE FEHLING.......................................................................................... 28

6.4 REACCION DE MOLISCH......................................................................................... 28

6.5 PRUEBA DE TOLLENS............................................................................................. 29

6.6 REACCION DE LUGOL (YODO)............................................................................. 29

6.7 PREGUNTAS.............................................................................................................. 30

7 Practica 5. CARACTERISTICAS DE LOS ACIDOS GRASOS................................. 31

7.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO. .................................................................... 31

7.2 SOLUBILIDAD EN LIPIDOS................................................................................... 32

SAPONIFICACION......................................................................................................... 32

7.3 REACCION CON EL SUDAN III............................................................................. 33

7.4 PREGUNTAS: .......................................................................................................... 33

8. Referencias Bibliográficas…………………………………………………………... 35

Tablas

Tabla 1 Clasificación de los aminoacidos.......................................................................... 12

3
Tabla 2 Aminoácidos proteicos con nomenclatura clásica sistema de tres letras y sistema de
una sola letra, impuesto en genética molecular................................................................. 12

Tabla 3 Pruebas bioquímicas para identificar aminoácidos............................................... 13

Tabla 4 Materiales y reactivos. ......................................................................................... 13

Tabla 5 Procedimiento a realizar para la reacción de ninhidrina. ....................................... 14

Tabla 6 Procedimiento a realizar para la reacción de Reacción de Biuret. ......................... 15

Tabla 7 Procedimiento a realizar para la reacción Xantoproteica........................................ 15

Tabla 8 Procedimiento a realizar para la reacción de millón. ............................................. 16

Tabla 9 Procedimiento a realizar para la reacción de Sakaguchi. ...................................... 16

Tabla 10 Resumen de las reacciones de aminoácidos en las diferentes técnicas. .............. 17

Tabla 11 Descripción de reactivos y métodos. ................................................................... 18

Tabla 12 Materiales y Materiales y reactivos...................................................................... 19

Tabla 13 Procedimiento a realizar para la reacción de Biuret. ........................................... 20

Tabla 14 Reacción De Aminoácidos Azufrados, Grupos SH. ............................................ 20

Tabla 15 Preparar la curva patrón de albumina bovina en un rango desde 0 hasta............. 22

Tabla 16 Preparar la curva patrón de albumina bovina en un rango desde 0 hasta............. 22

Tabla 17 Diferentes ensayos para reconocimiento en carbohidratos. ................................. 25

Tabla 18 Materiales y reactivos. ......................................................................................... 27

Tabla 19 Prueba de Benedict (detecta la presencia de azucares reductores)....................... 27

Tabla 20 Reacción de Fehling (detecta la presencia de azucares reductores).................... 28

Tabla 21 Reacción de Molisch............................................................................................ 29

Tabla 22 Prueba De Tollens. .............................................................................................. 29

Tabla 23 Reacción de almidones con lugol (yoduro potásico)............................................ 30

4
Tabla 24 Clasificación de lípidos. ....................................................................................... 31

Tabla 25 Materiales y Materiales y reactivos...................................................................... 31

Tabla 26 Determinación de solubilidad en lípidos. ............................................................ 32

Tabla 27 Ensayo de Saponificación. .................................................................................. 32

Tabla 28 Tinción: Reacción con el Sudan III. ..................................................................... 33

Ilustraciones

Ilustración 1 Clasificación de carbohidratos....................................................................... 24

Ilustración 2 Molécula de glucosa....................................................................................... 26

5
 1. INTRODUCCIÓN

La bioquímica es la ciencia que estudia los componentes químicos de los seres vivos,
especialmente las proteínas, carbohidratos, lípidos y ácidos nucleicos, además de otras
pequeñas moléculas presentes en las células. La bioquímica se basa en el concepto de que
todo ser vivo contiene carbono y en general las moléculas biológicas están compuestas
principalmente de carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno, fósforo y azufre. Es la ciencia
que estudia la mismísima base de la vida: las moléculas que componen las células y los
tejidos, que catalizan las reacciones químicas de la digestión, la fotosíntesis y la inmunidad,
entre otras.

En los contenidos de las guías para la realización de los laboratorios se revisan conceptos y
procedimientos de importancia para el trabajo en el laboratorio. Se deberá previamente
haber leído, entendido, comprendido todas las guías y los procedimientos a realizar.

Las actividades de laboratorio constituyen una parte importante del aprendizaje de la

bioquímica y complementan las actividades de la materia impartidas en el aula.

Es de importancia la asistencia puntual, así como la participación activa, la recolección de

resultados de los experimentos y la entrega de reportes de los mismos.

Es de la mayor importancia cumplir meticulosamente con las medidas de seguridad tanto en

comportamiento, accesorios como guantes, anteojos de protección o tapa bocas, bata larga.

2. OBJETIVOS

6
2.1 Objetivo general.

 Comprender e integrar los conceptos teóricos con la actividad práctica incluyendo

una adecuada manipulación de las técnicas de laboratorio, desde la actividad
procedimental hasta la entrega de resultados o informe final.

2.2 Objetivos específicos.

 Describir el progreso de una técnica a través de mediciones, cálculos, observaciones

cualitativas y cuantitativas de los procedimientos planteados en la guía.
 Lograr la habilidad de trabajar en el laboratorio, utilizando las técnicas más
habituales de un laboratorio bioquímico y aprendiendo a interpretar los resultados
experimentales.

3. Práctica 4: IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS

7
 Los hidratos de carbono constituyen el grupo de biomoléculas más abundante sobre
la superficie terrestre, representando aproximadamente el 75 % de la materia
orgánica existente.
En ocasiones, se denominan también carbohidratos, azúcares, sacáridos o glúcidos.
Todos son términos que hacen referencia a su sabor dulce, o a que poseen la
composición Cn (H2O) n. Estas moléculas usualmente contienen carbono,
hidrógeno y oxígeno en una proporción de 1:2:1. Los carbohidratos se clasifican
como monosacáridos, disacáridos o polisacáridos, dependiendo del tamaño y la
complejidad de la molécula. Los monosacáridos se componen de una sola molécula
de azúcar. Cuando dos monosacáridos se unen se produce un disacárido, y cuando
dos o más se unen se produce un polisacárido.
En los animales los carbohidratos son esenciales desde el punto de vista energético,
ya que muchos órganos y células del cuerpo humano, como el cerebro y los
glóbulos rojos, obtienen su energía principalmente de la glucosa. Pero sus funciones
no se restringen a ser únicamente fuente de energía, sino que también pueden
desarrollar funciones estructurales, de reconocimiento celular y adhesión.
Estructuralmente, un hidrato de carbono típico es una cadena hidrocarbonada con
varios grupos alcohol y un carbono más oxidado, en forma de grupo carbonilo. Este
grupo oxidado puede situarse en el extremo de la cadena (aldehído), o adyacente, en
posición 2 (cetonas)

Todos los monosacáridos y los disacáridos con enlace mono-carbonilo, cuando se

encuentran en solución a pH alcalino, tienen la capacidad de reducir otros compuestos. Esta
capacidad reside en las características del grupo carbonilo (C anomerico en formas

8
cicladas) libre. Esta propiedad, y por tanto, la presencia de un azúcar reductor, se ponen de
manifiesto mediante las reacciones de:

Rotación óptica

9
Es una propiedad importante que permite identificar los carbohidratos, y determinar el
grado de pureza de los mismos, particularmente monosacáridos, ocasionada por la
presencia de centros asimétricos o quirales en la estructura molecular, los cuales desvían el
plano de luz polarizada. Esta propiedad no es exclusiva de los carbohidratos pues la
presentan todas aquellas sustancias denominadas óptimamente activas, por tener en su
estructura centros quiérales.

Para la medición de la rotación óptica los factores importantes a tener en cuenta son: La
longitud de onda de luz polarizada, la cantidad de material óptimamente activo, y la
naturaleza del solvente cuando se usa. Los cambios en la temperatura ocasionan solo
pequeñas variaciones en las medidas de la rotación.

Los datos de rotación óptica se representan como |α] = rotación específica o | M] =

Rotación molecular, donde:

|α| = α/LC

α: Rotación observada en grados angulares

L: Longitud en decímetros del paso de luz polarizada a través de la muestra

C: Concentración en gramos por mililitro.

M: Peso molecular

| M | = M x | α |/100 cuando el plano de luz polarizada se desvía en el sentido de las

manecillas del reloj se antepone un signo positivo al número de grados que fue rotado el
plano de luz.

El plano de luz polarizada hacia la derecha se llaman dextrogiros o dextro rotatorios, y esa
característica se indica anteponiendo el signo (+) al nombre del compuesto. Los
compuestos que desvían el plano de luz polarizada hacia la izquierda se llaman levogiros o
levo rotatorios, y esa característica se indica anteponiendo el signo (-) al nombre del
compuesto.

10
 3.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO.

6.2 PRUEBA DE BENEDICT

Es similar a la reacción de Fehling, el medio básico débil y el estabilizante (citrato sódico)

utilizados hacen que este test sea más sensible y estable.

11
La prueba de Benedict es otra de las reacciones de oxidación, que como conocemos, nos
ayuda al reconocimiento de azúcares reductores, es decir, aquellos compuestos que
presentan su OH anomérico libre, como por ejemplo la glucosa, lactosa o maltosa o
celobiosa, en la reacción de Benedict, se puede reducir el Cu2+ que presenta un color azul,
en un medio alcalino, el ión cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse
por efecto del grupo aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se
observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O), que
precipita de la solución alcalina con un color rojo-naranja, a este precipitado se lo considera
como la evidencia de que existe un azúcar reductor.

El reactivo de Benedict está compuesto por:

-Sulfato cúprico.

-Citrato de sodio.

-Carbonato anhidro de sodio

ANALISIS DE RESULTADOS

En base a las imágenes podemos deducir que:

•La glucosa y la lactosa presentan un precipitado de color anaranjado denominado óxido

cuproso (Cu20) es decir que se trata de azúcares reductores.

•La sacarosa no presenta evidencia de precipitado color rojo ladrillo con la reacción de
oxidación de Benedict, por lo que se confirma, que no es un azúcar no reductor.

12
CONCLUSIONES

La sacarosa al someterse a la reacción de Benedict nos proporciona un resultado negativo

como se observa en las imágenes, ya que no presentó el precipitado rojo ladrillo
característico de un azúcar reductor, debido a que es un disacárido formado por glucosa y
fructosa, que se une por medio de sus carbonos anoméricos, es decir nos poseen sus
carbonos anoméricos libres.

Se comprueba de una forma práctica, que la sacarosa, es un disacárido que en reacciones de

oxidación como la reacción de Benedict, no presenta evidencia de un precipitado con
coloración rojo ladrillo, y no es un azúcar reductor.

Los monosacaridos tienen un grupo reductor libre. Los disacáridos como la lactosa tienen
grupos reductores libres, pero la sacarosa no lo tiene, ya que se pierden los grupos
reductores de sus componentes cuando esta es formada.

6.3 REACCIÓN DE FEHLING

Los azúcares reductores, en medio alcalino, son capaces de reducir el ión Cu2+ de color
azul a Cu+ de color rojo. Para ello el grupo carbonilo del azúcar se oxida a grupo carboxilo.

 Reactivo Fehling A: disolver 7 g CuSO4 · 5 H2O en 100 ml de agua destilada.

 Reactivo Fehling B: 35 g de tartrato de sodio y potasio + 12 g NaOH en 100 ml de
agua destilada.

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Está formado por dos soluciones acuosas que son: sulfato de cobre cristalizado y sal
seignette o tartrato mixto de potasio y sodio; es importante tener en cuenta que ambas se
guardan separadas hasta el momento en el que vayan a ser utilizadas para de esa manera
evitar la precipitación del hidróxido de cobre.

Su acción se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de los aldehídos el cual
se oxida a ácido y se reduce la sal de cobre en medio alcalino a óxido de cobre, formando
un precipitado de color rojo.

El reactivo de Fehling se fundamenta principalmente, en su reacción, la oxidación de cobre,

el poder reductor de los azúcares, sea este en monosacáridos, polisacáridos, aldehídos, y en
ciertas cetonas.

ANALISIS DE RESULTADOS:

El resultado de la práctica para la lactosa y glucosa es positivo, la practica con el reactivo

de Fehling se fundamental en el poder reductor del grupo carbonilo en las aldosas, pues
tienen la estructura química abierta necesaria para actuar como agentes reductores, y en
algunas cetosas (generalmente positiva en fructosa), lo que se evidencia con la formación
de un precipitado rojo ladrillo (óxido cuproso).

El resultado de la sacarosa fue negativo, esto se da porque es un azúcar constituido por una
molécula de glucosa y de fructosa, tiene un enlace entre el primer carbono de la glucosa y
el segundo carbono de la fructosa, y no queda grupos reductores disponibles. Al no ser
reductor, la prueba de Fehling es negativa, y por lo que se intuye, no posee el grupo
carbonilo apto y libre, necesario como para reaccionar con el reactivo Fehling, y a
ebullición, no se observó ningún cambio.

CONCLUSIONES:

 La prueba de Fehling nos permite identificar a un azúcar reductor.

 La mayoría de los monosacáridos y algunos disacáridos poseen poder reductor.
 La sacarosa es un disacárido que no posee carbonos anoméricos libres por lo que
carece de poder reductor y la reacción con el licor de Fehling es negativa.

14
6.4 REACCION DE MOLISCH

La presencia de carbohidratos en una muestra se pone de manifiesto por la reacción de

Molisch, que a cierto punto es la reacción universal para cualquier carbohidrato. Se basa en
la acción hidrolizante y deshidratante del ácido sulfúrico sobre los hidratos de carbono. En
dicha reacción el ácido sulfúrico cataliza la hidrolisis de los enlaces glucosidicos de la
muestra y la deshidratación a furfural (en las pentosas) o hidroximetilfurfural (en las
hexosas). Estos furfurales se condensan con el alfa naftol del reactivo de Molisch (reacción
de Molisch) dando un producto coloreado.

La prueba de Molish permite detectar la presencia de hidratos de carbono en una muestra;

está basada en la formación de furfural o derivados de éste (originado por los ácidos
concentrados que provocan una deshidratación de los azúcares) a partir de los carbohidratos
para obtener el furfural que se combina con el -naftol sulfonato originando un complejo
púrpura. Es una reacción muy sensible puesto que soluciones de glucosa al 0.001% y
sacarosa al 0.0001% dan positiva la prueba. También sirve para el reconocimiento general
de carbohidratos donde polisacáridos y disacáridos se hidrolizan formando monosacáridos
formando un color púrpura violeta.

Todos los glúcidos por acción del ácido sulfúrico concentrado se deshidratan formando
compuestos furfúricos (las pentosas dan furfural y las hexosas dan hidroximetilfurfural).
Estos furfurales se condensan con el reactivo de Molish (solución alcohólica de alfa-naftol),
dando un producto violeta.

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ANALISIS DE RESULTADOS:

En la reacción de la glucosa con el reactivo de Molisch se observó un anillo violeta lo cual

quiere decir que el resultado es positivo, esto se debe a que: el agregado de ácido sulfúrico
concentrado de una solución de glucosa provoca su deshidratación para dar un anillo
furfural o 5 hidroximetil furfuralm que al reaccionar con el α –naftanol forma un color
purpura violeta.

En la reacción con Molisch y la lactosa, la lactosa se hidroliza con el ácido sulfúrico hasta
convertirse en monosacárido y se convierten en derivados del furfural o 5- hidroximetil
furfural los cuales reaccionan con α- naftanol formando un color purpura violeta.

CONCLUSIONES:

 Se identificó mediante la reacción de Molisch los carbohidratos, dándonos una

reacción positiva la glucosa y lactosa.
 Comparamos las características obtenidas con la teoría establecida, ya que si se
obtuvo el anillo violeta en la interfase en la muestra como se indica, lo que nos
quiere decir que la muestra si es un carbohidrato.

6.5 PRUEBA DE TOLLENS

Esta prueba es análoga a la de Selivanoff, pero para el reconocimiento de galactosa y sus

derivados. La galactosa, algunas pentosas y el ácido glucuronico dan un color rojo con el
HCl y floroglucina. La glucosa da también un color rojo con la floroglucina, pero muy
opaco, en contraste con el color rojo transparente de la galactosa.

16
6.6 REACCION DE LUGOL (YODO)

La prueba de yodo se da como consecuencia de la formación de cadenas de poliyoduro a

partir de la reacción entre el almidón y el yodo presente en el reactivo de lugol. La amilosa
y la amilopectina son componentes del almidón pero la amilosa es de estructura lineal, con
enlaces α (1-4), que forma helices en donde se juntan las moléculas de yodo formando un
color azul oscuro; mientras que la amilopectina es de estructura ramificada, con enlaces α
(1-4) (1-6), que forma helices mucho más cortas y las moléculas de yodo son incapaces de
juntarse presentando un color intermedio entre anaranjado o amarillo.

El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro, permite reconocer
polisacáridos, particularmente el almidón por la formación de una coloración azul-violeta
intensa y el glicógeno y las dextrinas por formación de coloración roja

CONCLUSIONES

1. Monosacáridos como la glucosa y disacáridos como la maltosa a excepción de la

sacarosa son azucares reductores.

2. La maltosa presenta en su estructura el OH hemiacetálico por lo que es un azúcar

reductor, es decir tienen su OH anomérico libre, y éstos son los que dan positivo en la
prueba de Benedict.

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3. La sacarosa no es un azúcar reductor, pero en presencia de HCl (medio ácido caliente)
esta puede hidrolizarse a sus monosacáridos que la componen (Glucosa- Fructosa) lo queda
positivo en la prueba de Benedict.

4. En la reacción con el ácido sulfúrico los disacáridos y polisacáridos se hidrolizan

logrando la identificación de los monosacáridos que los componen.

18
6.7 PREGUNTAS.

 Explique por qué el monosacárido gliceraldehido da negativa la prueba Molish.

Rta/ La Prueba de Molish es una reacción general para carbohidratos que contienen
más de 5 átomos de carbono, y el gliceraldehido tiene un carbono. Para identificar
monosacáridos se utiliza la Prueba de Barfoed.

 ¿Cuáles son las aplicaciones prácticas de las pruebas estudiadas?

Rta/
Ayudan a la determinación específica de carbohidratos en general sin importar si
son monosacáridos, disacáridos o polisacáridos (Molish). Las demás pruebas son
usadas para la determinación especifica de azucares según sus grupos funcionales y
el número determinado de sus carbonos

 Defina los siguientes términos: carbono anomérico, centro quiral, levorrotatorio.

Rta/
 Carbono anomerico: Un carbono anomérico es aquel átomo de carbono que
en la estructura lineal no es asimétrico, pero cuando se cicla la molécula,
pasa a ser asimétrico, dando origen a dos isómeros ópticos (α y ß). Se
identifica porque algunos de sus 4 sustituyentes en sus enlaces son iguales
(dos o más elementos enlazados con el átomo de carbono son los mismos).

 Centro quiral: Un centro quiral es un átomo de carbono con cuatro

sustituyentes distintos. La estereoquímica es una parte de la química que
toma como base el estudio de la distribución espacial de los átomos que
componen las moléculas y el cómo afecta esto a las propiedades y
reactividad de dichas moléculas.

 Levorrotatorio: Formas dextro y levo: Enantiómeros.

Un enantiómero que rota el plano de la luz polarizada hacia la derecha (en

el sentido de las agujas del reloj), se dice que es dextrorrotatorio, dextrógiro

19
 o una forma dextro, y suele colocársele al nombre de éste una letra "de"
minúscula (d), o un signo positivo (+). Si lo hace hacia la izquierda, es
levorrotatorio, levógiro o una forma levo, y suele colocársele como prefijo
al nombre una letra "ele" minúscula (l), o un signo negativo (–5).

 Dibuje los monosacáridos glucosa, galactosa, ribosa y fructosa, clasifíquelos según

el número de átomos de carbono y la función principal.
Rta/

GLUCOSA: Hexosa, presenta 6 átomos de Carbono. Su función principal es la

producir energía.
GALACTOSA: Hexosa, presenta 6 átomos de Carbono. Su función principal
formar disacáridos, producir energía.

20
 RIBOSA: Pentosa, presenta 5 átomos de Carbono. Constituye uno de los
principales componentes del ARN. Su función principal es la de formación de
estructura del ácido nucleico.
FRUCTOSA: Hexosa, presenta 6 átomos de Carbono. Su función es la de aporte
energético.

 Efectué un enlace hemiacetálico y uno hemicetálico, escriba las diferencias entre

ambos enlaces.
Rta/

Enlace hemiacetálico:

Enlace hemicetalico:

La estructura ciclada se consigue en aldopentosas y hexosas. El enlace de ciclación

se genera entre el carbono que posee el grupo funcional y el carbono asimétrico
más alejado del grupo funcional. Cuando el carbono tiene un grupo aldehído, como

21
 grupo funcional, el enlace recibe el nombre de hemiacetálico. Cuando el carbono
tiene un grupo cetona, como grupo funcional, el enlace recibe el nombre de
hemicetálico.

 Escriba las funciones: aldehídica, cetónica, alcohólica, ácida, colóquelas en orden

de reactividad y explique el porqué de ese orden.
Rta/
 Función alcohólica: Los alcoholes son una serie de compuestos que poseen
un grupo hidroxilo, -OH, unido a una cadena carbonada; este grupo OH está
unido en forma covalente a un carbono con hibridación. Cuando un grupo
se encuentra unido directamente a un anillo aromático, los compuestos
formados se llaman fenoles y sus propiedades químicas son muy diferentes.
 Función cetónica: Una cetona es un compuesto orgánico caracterizado por
poseer un grupo funcional carbonilo unido a dos átomos de carbono, a
diferencia de un aldehído, en donde el grupo carbonilo se encuentra unido al
menos a un átomo de hidrógeno.
 Función aldehído: Grupo funcional formilo. Los aldehídos poseen un grupo
carbonilo (=C=O) unido a una cadena carbonada y a un átomo de
hidrógeno. Los aldehídos son compuestos orgánicos caracterizados por
poseer el grupo funcional -CHO (formilo). Un grupo formilo es el que se
obtiene separando un átomo de hidrógeno del formaldehído.
 Función acida: es considerado tradicionalmente como cualquier compuesto
químico que, cuando se disuelve en agua, produce una solución con una
actividad de catión hidronio mayor que el agua pura, esto es, un pH menor
que 7.

 Explique en qué consiste la hidrólisis ácida de disacáridos.

22
 Rta/ La hidrólisis de un enlace glucosídico se lleva a cabo mediante la disociación
de una molécula de agua del medio. El hidrógeno del agua se une al oxigeno del
extremo de una de las moléculas de azúcar; el OH se une al carbono libre del otro
residuo de azúcar. El resultado de esta reacción, es la liberación de un
monosacárido y el resto de la molécula que puede ser un monosacárido si se trataba
de un disacárido o bien del polisacárido restante si se trataba de un polisacárido
más complejo.
Los disacáridos y los polisacáridos deben ser hidrolizados hasta monosacáridos
para poder pasar la pared intestinal para llegar al torrente sanguíneo y poder
ingresar al interior de las células para su utilización.

 Defina los siguientes términos: azúcar reductor y azúcar no reductor, cite ejemplos.
Efectué un enlace glucosídico.
Rta/
 Azúcar reductor: Un azúcar reductor es un término químico para un azúcar
que actúa como un agente reductor y puede donar electrones a otra
molécula. Específicamente, un azúcar reductor es un tipo de carbohidrato o
azúcar natural que contiene un grupo aldehído o cetona libre. Azùcares
reductores: Los monosacáridos y muchos disacáridos, (excepto Sacarosa y
Trehalosa).
- Monosacáridos: Ej Glucosa, Fructosa
- Disacáridos reductores Ej: Lactosa, Maltosa, Isomaltosa, Celobiosa, etc.
 Azúcar no reductor: Los azúcares No Reductores son aquellos que se unen
por enlaces glucosídicos de tipo Alfa o Beta, cuando 2 monosacáridos
iguales o diferentes se unen forman un Disacàrido, los Disacàridos por
condensación liberan una molécula de agua y son azúcares no reductores ya
que el grupo Oxidrilo ( OH ) de una hexosa se combina con el grupo
Aldehído ( CHO ) de otra hexosa liberando 1 molécula de H20, el licor de
Feeling no tiene efecto sobre ellos lo cual los determina como azúcares no
reductores, por ej.
La Sacarosa (glucosa + fructosa)

23
Maltosa (2 unidades de alfa glucosa), Trehalosa, etc.

24
 4. Practica 5. CARACTERÍSTICAS DE LOS ÁCIDOS GRASOS

Los lípidos (del griego lypos, grasa) son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por
C, H y O, aunque este último elemento se encuentra en proporciones mucho más bajas que
los dos primeros. Además, pueden contener P, N y S. Constituyen un grupo de sustancias
muy heterogéneas con características químicas diversas, pero con algunas propiedades
físicas comunes, que podrían resumirse en estas dos: _ Son mayoritariamente insolubles en
agua. _ Son solubles en disolventes orgánicos, tales como éter, cloroformo, alcanos (ej:
hexano), benceno, acetona y alcoholes. De acuerdo a la estructura química los lípidos se
clasifican en dos grupos, de acuerdo al contenido en su composición ácidos grasos (Lípidos
saponificables) o no lo posean (Lípidos insaponificables). La saponificación consiste en una
hidrólisis alcalina de la preparación lipídica (con KOH o NaOH). Los lípidos derivados de
ácidos grasos (ácidos monocarboxílicos de cadena larga) dan lugar a sales alcalinas
(jabones) y alcohol, que son fácilmente extraíbles en medio acuoso.

25
7.2 SOLUBILIDAD EN LÍPIDOS

Las grasas son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en
pequeñísimas gotitas formando una emulsión de aspecto lechoso, que es transitoria, puede
sepárese en reposo, por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que por su menor
densidad se sitúa sobre la de agua. Por el contrario, las grasas con solubles en los llamados
disolventes orgánicos como el éter, benceno, xilol, cloroformo, etc.

26
SAPONIFICACIÓN

Muchos lípidos, como por ejemplo: los ácidos grasos, reaccionan con bases fuertes, NaOH
o KOH, dando sales sódicas o potásicas que reciben el nombre de jabones. Esta reacción se
denomina de saponificación. Son saponificables los ácidos grasos o los lípidos que poseen
ácidos grasos en su estructura.

27
ANALISIS DE RESULTADOS

Con la realización de esta práctica podemos observar una de sus principales propiedades, la
saponificación, comprobamos que las grasas se descomponen al reaccionar con el hidróxido
de sodio y potasio descomponiéndose en los dos elementos que la forman la glicerina y
ácidos grasos, los mismos que sé que se combinan con iones sodio y potasio, para dar
jabones, que son ni más ni menos que las sales sódicas o potásicas de los ácidos grasos.

7.3 REACCIÓN CON EL SUDÁN III

El Sudán III es un colorante que se utiliza para detectar específicamente las grasas, porque
es insoluble en agua y en cambio es soluble en las grasas. Al ser de color rojo, cuando se
disuelve tiñe las grasas de color rojo anaranjado.

ANALISIS DE RESULTADOS.

Los lípidos se colorean de rojo-anaranjado con el colorante de Sudan II, debido a que es un
colorante lipófilo (Soluble en grasas). Por esa afinidad a los ácidos grasos hace que la
mezcla con estos colorantes, tome un color rojo, mezclándose totalmente y convirtiéndose
en un colorante especifico utilizado para revelar la presencia de grasas.

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7.4 PREGUNTAS:

 ¿Qué son los jabones? ¿Cómo se pueden obtener los jabones?

Rta/
Los jabones son sales sódicas o potásicas de los ácidos grasos, y estos son solubles
en el agua. El jabón es el resultado de una reacción química llamada saponificación.
En esta reacción la grasa u aceite reacciona con la soda caustica (NaOH), para
producir jabón y glicerina. Para esta reacción se han usado aceites animales o
vegetales.

Tipos de Jabón
• Jabones Comunes
• Jabones Humectantes
• Jabones Suaves
• Jabones Liquidos
• Jabones Dermatológicos
• Jabones de Glicerina
• Jabones Terapéuticos

Los jabones se pueden obtener así:

Medir el aceite, y lo ponemos en un cuenco. Para que se quede más limpio podemos
usar harina como blanqueante. Lo ideal sería dejarla uno o dos días hasta que la
harina se vaya al fondo del recipiente.
Ahora ponte los guantes, hay que tener cuidado con el uso de la soda caústica. La
soda caústica es hidróxido de sodio (NaOH), y es dañino por ingestión, inhalación,
contacto con piel y ojos. Así que hay que usarlo con precaución, y mejor en un
espacio abierto. Añade la soda al agua y agita, preferentemente con un utensilio de
acero inoxidable o de madera. Observarás que la mezcla se calienta, por eso se dice
que la disolución de soda en agua es exotérmica (desprende calor). La disolución a
veces lleva un rato.
Ahora vertemos con cuidado la disolución de soda sobre el aceite, mejor si lo
hacemos cuando aún está caliente.

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 A agitar, Puede llevar tres cuartos de hora fácilmente conseguir que la mezcla
espese. Cuando notes que la cuchara de madera deja un surco tras de sí, será un
buen momento para parar.
Ahora añade la esencia de tu elección y la sal y agita un poco más.
Échalo en un molde y deja que se endurezca durante dos o tres días. Cuando esté
duro, sácalo del molde y déjalo al aire libre un par de semanas. Dale la vuelta y
déjalo un par de semanas más.

 ¿Por qué en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa?

Rta/
Por qué en la saponificación se utilizan grasas y estas están compuestas por ácidos
grasos y glicerina. Como resultado se obtiene una fase semisólida que es la sal de
los ácidos grasos (Jabón), por lo tanto en la fase acuosa quedara el alcohol
(glicerina) como subproducto de la elaboración del jabón puesto que es
parcialmente soluble en agua. Pero la tinta roja no es soluble en grasa, por esta
razón, el aceite no se tiñe de rojo.

 ¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrólisis de las grasas?

Rta/
 Boca: Lipasa Bucal es una enzima ubicua que se usa en el organismo para
disgregar las grasas de los alimentos de manera que se puedan absorber.
Su función principal es catalizar la hidrólisis de triacilglicerol a glicerol.
 Estomago: Lipasa Gástrica.
 Intestino Delgado: Lipasa Pancreática – Colipasa esterasa de colesterol.
Lipasa pancreática dependiente de sales biliares.

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 Indica lo que ocurre con las mezcla aceite – sudan III y aceite-tinta y explica a qué
se debe la diferencia entre ambos resultados.
Rta/
El sudan III es un colorante lipófilo (Soluble en grasa). Por esa afinidad a los
ácidos grasos, hace que la mezcla de estos con el colorante se ponga de color rojo,
mezclándose totalmente y convirtiéndose en un colorante específico utilizado para
revelar la presencia de las grasas, mientras que la tinta roja se termina yendo al
fondo y con el tempo se separa.

 ¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos minutos de

reposo? ¿Y con la de los otros compuestos empleados? ¿A qué se deben las
diferencias observadas entre ambas emulsiones? ¿Qué ocurre con la emulsión
cuando se le añade detergente?
Rta/
 Es transitoria pues desaparece en reposo por la reagrupación delas gotas de
grasa en una capa que por su poca densidad se sitúa sobre el agua.
 La del benceno con el aceite forma una mezcla, la cual no se separa al igual
que con el agua.
 Las diferencias observadas entre ambas es que el aceite se mezcla con
sustancias apolares como el, este sería el caso del benceno, pero no se
mezclan con el agua ya que es apolar.

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 5. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICA

 HERNÁNDEZ-BERMÚDEZ, C.GLORIA GUTIÉRREZ-VENEGAS.

Quiñones, Z. (2004). “Identificación de carbohidratos y proteínas”. Retrieved
from http://lls.ulat.ac.pa/archivos/vrodrig_8-352-
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_2011-1/BQMA-SIB2.PDF
 Universidad Complutense de Madrid. (Marzo de 2007). UCM- Manual de
Gestión de Residuos Peligroso. Recuperado el 15 de Enero de 2012, de
http://www.ucm.es/info/ucmp/cont/descargas/documento28113.pdf
 Lineamientos para el desecho de productos químicos (s.f.). Disponible 17 de
enero de 2013, en
http://xml.cie.unam.mx/xml/dir/seguridad/Lineamientos_para_el_Desechos.p
df Stoscheck+, C.M. (1990): Quantitation of protein. Methods in
Enzymology, 182: 50-69 http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-
mol/practicasgenerales.htm
http://www.bioquimica.dogsleep.net/Laboratorio/Plummer/
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%C3%ADmica.pdf
 CHANG WILLIAMS, Raymond. QUIMICA SEPTIMA EDICION.Colombia;
McGraw-Hill MAYO 2005 Recuperado de
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raymond-chang.pdf

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