Informe de Laboratorio de

INFORME DE LABORATORIO DE
MICROBIOLOGIA
ANALISIS DE SALMONELLA
PRESENTADO POR:
ESTEFANY CAVIEDES ARCiNiEGAS

FICHA:
1806843
INSTRUCTOR:
JAIRO ALFONSO PERALES LLERENA

INTRODUCCIO
Salmonella, de nombre común salmonela, es un género bacteriano perteneciente
a la familia Enterobacteriaceae constituido por bacilos gramnegativos
intracelulares anaerobios facultativos con flagelos peritricos.
OBJETIVOS
Detectar la presencia de Salmonella en los alimentos mediante método cualitativo
recomendados por organismos internacionales.
FUNDAMENTO
De acuerdo con las normas internacionales y al reglamento sanitario de los

alimentos la sola presencia de Salmonella en un alimento es considerada como
causa de rechazo.
En el laboratorio los métodos convencionales para su recuperación consideran
todos estos factores permitiendo recuperar Salmonella mediante procesos de pre
enriquecimiento y enriquecimiento en las etapas preliminares y posterior siembra
en agares selectivos, realización de pruebas bioquímicas.
MATERIALES UTILIZADOS
• Pipetas estériles de 10 mL y 1 mL.

• Gradillas.
• Tubos de ensayo de 16 x 160 mm.
• Asa de cultivo.
• Cajas de Petri de
• Baño María.
• Incubadora.
• Autoclave
• Frascos de schott de 250 ml
• Agua peptonada (bufferada)
• Mechero
• Agares
MUESTRAS A UTILIZAR
Muestra para detectar salmonella

 Rabadilla de pollo
 25gr de la muestra
MEDIOS DE CULTIVOS Y REACTIVOS
• Caldo Selenito Cistina
• Agua Peptonada (Bufferada)
• Agar MacConkey
• Agar XLD
• Agar Sulfito Bismuto
CALDO SELENITO CISTINA
Este caldo selectivo favorece el crecimiento de Salmonella spp.
En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el
adecuado desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, el
selenito de sodio inhibe la flora Gram positiva y la mayoría de la flora entérica
excepto Salmonella spp, durante las primeras 8-12 horas de incubación.
Características del medio:
Color ámbar muy claro de transparente
a ligeramente opalescente.
AGUA PEPTONADA BUFFERADA

Medio de cultivo empleado para el preenriquecimiento de microorganismos a partir
de diferentes muestras. Es ampliamente utilizado en los protocolos de control
higiénico de alimentos para búsqueda de salmonella spp.
Características del producto:
Medio de cultivo deshidratado: Color beige claro, homogéneo, libre deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: Color ámbar claro.
AGAR MACCONKEY
AGAR XILOSA, LISINA Y DESOXICOLATO
(XLD)
AGAR SULFITO BISMUTO
AGAR MACCONKEY
NEGATIVO PARA SALMONELLA POSITIVO PARA SALMONELLA
AGAR XILOSA, LISINA Y DESOXICOLATO

(XLD)
AGAR SULFITO BISMUTO

DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO DE SALMONELLA SPP.
Los métodos microbiológicos tradicionales para la detección de Salmonella, no
van encaminados al conteo de esta bacteria, se considera una técnica cuyo
resultado se expresa cualitativamente, determinando su presencia o ausencia en
diferentes matrices. La detección está basada en el empleo de medios de cultivo
selectivos y posterior caracterización de las colonias mediante pruebas
bioquímicas y serológicas.
ETAPA DE PRE-ENRIQUECIMIENTO
El objetivo de esta etapa es normalizar metabólicamente las células de Salmonella
spp. que se encuentren en determinada matriz para su perfecto desarrollo y todos
los microorganismos compiten por los nutrientes. Se realiza a partir de medios de
cultivo no selectivos como agua peptonada.
Se toma 25gr de la muestra de pollo en un frasco schott de 250 ml con 225 ml de
agua peptonada al 0,1%. Es necesario incubar la muestra durante 18 a 24 hora a
37°C.
ETAPA DE ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO EN MEDIO LIQUIDO
Esta etapa estimula y favorece el crecimiento de Salmonella spp. inhibiendo el
crecimiento de la flora acompañante; los medios de cultivo utilizados son: Caldo
Selenito Cistina, inhibe el crecimiento de gran parte de la flora intestinal
competitiva (E. coli, Enterococos), sin afectar a Salmonella, Shiguella,
Pseudomonas o Proteus, mientras que la Cistina actúa favoreciendo el
crecimiento de Salmonella.
En 2 tubos de 10 ml de caldo selenito cistina se le agrega 1 ml de la muestra del
frasco de schott a cada tubo. Es necesario incubar de 18 a 24 horas a 37°C.
ETAPA DE AISLAMIENTO EN MEDIOS SELECTIVOS.
Esta etapa permite la diferenciación de colonias de Salmonella de otras bacterias,
esta diferenciación radica en la composición de los distintos medios que permiten
el crecimiento de las colonias con aspectos característicos. Para aislar y
diferenciar las colonias de Salmonella, los medios de cultivo Para aislar y
diferenciar las colonias de Salmonella, los medios de cultivo más empleados son:
Agar XLD, Agar Sulfito Bismuto y agar MacConkey. En estos medias las colonias
las colonias típicas de Salmonella se aprecian de las siguientes maneras:
En Agar Xilosa Lisina Desoxicolato (XLD): Colonias rosadas con o sin centro
negro. Muchos cultivos de Salmonella sp pueden producir colonias con un centro
negro grande brillante o colonias casi completamente negras.
En Agar Bismuto Sulfito (BS): Colonias marrones, gris o negras, a veces con
brillo metálico. El medio es usualmente marrón al principio se torna negro
conforme se incrementa el tiempo de incubación, produciéndose el llamado efecto
“halo”.

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ESTEFANY CAVIEDES ARCiNiEGAS

JAIRO ALFONSO PERALES LLERENA

De acuerdo con las normas internacionales y al reglamento sanitario de los

• Pipetas estériles de 10 mL y 1 mL.

Muestra para detectar salmonella

AGUA PEPTONADA BUFFERADA

AGAR XILOSA, LISINA Y DESOXICOLATO

AGAR SULFITO BISMUTO

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