Separación de Una Solución de Violeta de Cristal

SEPARACIÓN DE UNA SOLUCIÓN
DE VIOLETA DE CRISTAL/NARANJA DE
METILO MEDIANTE CROMATOGRAFÍA
FLASH
PRESENTADO POR:
STEVEN OSPINA GARCÍA
FITOQUIMICA II
PRESENTADO A:
FERNANDO AGUDELO AGUIRRE
UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO

FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
ARMENIA – QUINDÍO
2019
RESUMEN
En toda separación cromatogràfica hay dos fases (sólida, líquida o gas) una móvil y otra
estacionaria, que se mueven una con respecto de la otra manteniendo un contacto íntimo.
En esta Práctica se ha realizó la separación de una solución de dos compuestos orgánicos
(cristal violeta y naranja de metilo), mediante la cromatografía flash. Para la separación
de los componentes de la solución se utilizó una mezcla de etanol/dietilamina en relación
60:40. La primera extracción que se obtuvo fue la de naranja de metilo ya que la fase de
violeta de cristal era retenida por la fase estacionaria y pudo ser extraída después del
naranja de metilo.
Palabras claves: Cromatografía, fase móvil, fase estacionaria, naranja de metilo y

violeta de cristal.
INTRODUCCIÓN
La cromatografía es una técnica de separación extraordinariamente versátil que presenta

distintas variantes. En toda separación cromatogràfica hay dos fases (sólida, líquida o
gas) una móvil y otra estacionaria, que se mueven una con respecto de la otra
manteniendo un contacto íntimo. La muestra se introduce en la fase móvil y los
componentes de la muestra se distribuyen entre la fase estacionaria y la móvil. Los
componentes de la mezcla a separar invierten un tiempo diferente en recorrer cada una de
las fases, con lo que se produce la separación. Si un componente está la mayor parte del
tiempo en la fase móvil el producto se mueve rápidamente, mientras que si se encuentra
la mayor parte en la fase estacionaria, el producto queda retenido y su salida es mucho
más lenta. [1]
CROMATOGRAFÍA FLASH
Es un método cromatogràfico, el cual nos permite separar de una manera rápida, fiable y
económica; principalmente utilizada para la separación y purificación de proteínas. La
Cromatografía Flash consiste en una bomba y una columna que permita resistir alta
presión para la separación puede llevarse a cabo con relativa rapidez. El sistema incluye
dos bombas de flujo continuo en la depuración de las columnas (variables por el usuario),
una bomba peristáltica puede utilizarse para deposito en la columna, seguido de la
radiación ultravioleta para detectar las biomoléculas en la columna, un mezclador para
producir un gradiente de elusión, las válvulas de motor puede ser utilizados para ayudar
en la inyección de la muestra, la selección de la columna o corriente de inversión, y un
controlador con una función de integración computadorizada, en el cual se muestran los
resultados del análisis. [2]
El naranja de metilo es un colorante azoico (los azo-derivados contienen el agrupamiento
– N=N-, son compuestos intensamente coloreados y muchos se emplean como
colorantes) que se utiliza como indicador ácido-base y es amarillo en medio básico y rojo
en medio ácido. El cristal violeta es un colorante derivado del trifenilmetano. [3]
Figura 1. Molécula de naranja de metilo y violeta de cristal.
OBETIVO
Separar mediante cromatografía de columna una muestra solución de violeta de cristal y

naranja de metilo.
METODOLOGÍA
RESULTADOS
Se obtuvieron 2 muestras con las eluciones extraídas por la cromatografía de columna.
Las cuales se separaron quedando en un tubo el cristal violeta y el naranja de metilo.
ANALSISIS DE RESULTADOS
Las moléculas de soluto son adsorbidos en la fase estacionaria y a medida que se produce
la elución, van siendo desplazadas por las moléculas de disolventes que constituyen la
fase móvil. La retención de un soluto se puede justificar por la competencia que se
establece entre el soluto y la fase móvil por adsorberse a los centros polares X, es decir,
depende de los valores de las constantes de los equilibrios:
La separación de la muestra problema se realizó con una solución de etanol/Dietilamina

relación 1:1 y se observó como la fase de naranja de metilo fue la primera en ser extraída
de la columna debido a su polaridad la cual es diferente de la del violeta de cristal, esto
hace que se retenga mediante la polaridad de los compuestos orgánicos.
Figura 4. Retención de los compuestos orgánicos mediante polaridad.
CONCLUSIONES
 Se realizó la separación por columna de una mezcla de Naranja de metilo con

Cristal Violeta, mediante cromatografía de columna, utilizando como fase móvil
una solución de etanol/dietilamina.
 La cromatografía por columna se emplea para la separación de mezclas o

purificación de sustancias, reteniendo en su fase estacionaria a algunos
compuestos por su propiedad de adsorción, por la que a través de ella se hará
pasar una corriente de disolventes o mezcla de disolventes (fase móvil: eluyente)
que arrastrará a los compuestos constituyentes de la mezcla, haciéndoles avanzar
a través de la columna.
 Si los compuestos separados en una cromatografía en columna son coloreados, el
progreso de la separación se puede monitorizar visualmente. No obstante, a
menudo los compuestos que deben ser aislados suelen ser incoloros. En este caso,
se recogen secuencialmente pequeñas fracciones de eluatos en tubos rotulados y
la composición de cada fracción se analiza por cromatografía en capa fina. Una
vez identificadas las diferentes fracciones que contienen el mismo producto, se
reúnen, se elimina el disolvente y se analiza la identidad de los componentes por
métodos espectroscópicos.
CONSULTA
1. ¿Por qué los derivados halogenados suben más que los alcoholesen una
cromatografía en capa fina?
R/ Los derivados de los halógenos suben más en una cromatografía debido a que su
densidad es mayor que la de los alcoholes, al igual que su punto de ebullición.
2. Al cambiar un eluyente menos polar por otro más polar ¿cómo se afecta la
velocidad de elución de un alcohol? ¿y la de una cetona?
R/ Sí, pues al hacer el eluyente menos polar va a reaccionar de una forma más ágil, por
ende el alcohol se va a tardar más en recibir al compuesto para poder reaccionar.
3. El valor del Rf ¿depende del adsorbente utilizado? ¿Y del eluyente?
R/ El valor Rf es usado para identificar los diferentes compuestos que forman la mezcla y
este se basa en el eluyente y no depende del adsorbente utilizado.
4. Sugerir un ensayo para determinar la pureza de un compuesto por CCF

R/ Hipólito Yrigoyen, Cromatografía de adsorción en línea
BIBLIOGRAFÍA
[1] Química, F. d. (2007). Técnicas cromatográficas. México: Universidad Nacional

Autonoma de México.
[2] Sánchez Ma. Dolores. Venezuela. 2004. Estudio sobre los ácidos grasos libres en
queso blanco, Universidad de Los Andes. 46:2
[3] Serie Académicos CBS. Cromatografía de gases y de líquidos de alta resolución

México 2000. pag. 215-231 255-305.

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SEPARACIÓN DE UNA SOLUCIÓN

UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO

Palabras claves: Cromatografía, fase móvil, fase estacionaria, naranja de metilo y

La cromatografía es una técnica de separación extraordinariamente versátil que presenta

Figura 1. Molécula de naranja de metilo y violeta de cristal.

Separar mediante cromatografía de columna una muestra solución de violeta de cristal y

La separación de la muestra problema se realizó con una solución de etanol/Dietilamina

Figura 4. Retención de los compuestos orgánicos mediante polaridad.

 Se realizó la separación por columna de una mezcla de Naranja de metilo con

 La cromatografía por columna se emplea para la separación de mezclas o

3. El valor del Rf ¿depende del adsorbente utilizado? ¿Y del eluyente?

4. Sugerir un ensayo para determinar la pureza de un compuesto por CCF

[1] Química, F. d. (2007). Técnicas cromatográficas. México: Universidad Nacional

[3] Serie Académicos CBS. Cromatografía de gases y de líquidos de alta resolución

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