Control del crecimiento

microbiano
Microbiología General – FB3702
Docente: Mg. Leonardo Humberto Mendoza Carbajal
e-mail: [email protected]
Facultad de Farmacia y Bioquímica
Palabras clave Sanitización
Reducción de la población microbiana
Esterilización a niveles considerados seguros por las
Tratamiento que mata o remueve a normas de salud pública
todas las formas vivientes, virus,
esporas, de una sustancia u objeto Antiséptico
Agente desinfectante moderado ideal
Desinfección para su uso en la superficie de la piel
Tratamiento que reduce el número
total de microorganismos de un -cida -stático
objeto o superficie. Sufijo que indica Sufijo que indica
capacidad de la capacidad de
matar. inhibir el
crecimiento
Ejemplo: Bactericida
Ejemplo: Fungistático

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 Incineración E
Seco
Horno E
Calor
Vapor a presión E
Húmedo
Agua hirviendo, agua
D
Agentes Físicos Filtración E caliente, pasteurización

Ionizante Rayos X, Gamma E

Radiación
Métodos de No ionizante UV D
Control de
Microorganismos Gases D E
Animado A
Agentes Químicos
Líquidos
Inanimado D E
A Antisepsis
Aire D
D Desinfección Métodos de remoción mecánica Filtración

E Esterilización Líquidos E
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 Blancos primarios para el control
 Microorganismos capaces de causar infección o deterioro

Células bacterianas Endosporas Hifas y esporas Trofozoitos y quistes Gusanos

vegetativas fúngicas de protozoarios
Levaduras Priones Virus

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Resistencia relativa de los microbios
o Gran resistencia
o Endosporas bacterianas
o Resistencia moderada
o Pseudomonas sp.
o Mycobacterium tuberculosis
o Staphylococcus aureus
o Quistes de protozoarios
o Menor resistencia
o Mayoría de células vegetativas
o Endosporas de hongos
o Virus con envolturas
o Levaduras
o Trofozoitos de protozoarios
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• Calor
• Esterilización por calor húmedo
• Pasteurización
• Esterilización por calor seco
• Filtración
• Bajas temperaturas
• Alta presión
• Desecación
• Presión osmótica
• Radiación

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 El calor es muy efectivo (rápido y barato).
 Punto de muerte térmica (TDP):
temperatura más baja a la cual las células
en un cultivo mueren en 10 minutos.
 Tiempo de muerte térmica (TDT): Tiempo
para matara a todas las células en un
cultivo.
 Tiempo de reducción decimal (DRT):
Minutos para matar al 90% de la población
a una temperatura dada.

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 Esterilización por calor húmedo
Autoclave
 Desnaturaliza proteínas
 Autoclave: Vapor bajo presión
 Método de esterilización más confiable
 El vapor debe contactar directamente al material a
ser esterilizado
 El vapor presurizado alcanza temperaturas más
altas
 Condiciones normales de autoclavado: 121.5C por
15 min.
 Destrucción de priones: 132C por 4.5 horas
 Limitaciones del autoclave

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 Pasteurización

 Reducción significativa (esp. organismos del deterioro y patógenos)

 no esteriliza
 Objetivo Histórico: destrucción de M. tuberculosis
 Método clásico: 63C por 30 minutos
 Pasteurización Flash (HTST): 72C por 15 segundos. Es la más
común en EEUU.
 Sobreviven los m.o. termodúricos
 Temperatura Ultra Alta - Ultra High Temperature (UHT): 140C por <
1 segundo. Técnicamente no es pasteurización pero esteriliza

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 Filtración

 Filtración de aire usando filtros de

aire articulado de alta eficiencia
(high efficiency particulate air
[HEPA] filters). Efectivo hasta 0.3
m
 Filtros de membrana para fluidos.
 Tamaño de poro para
bacterias: 0.2 – 0.4 m
 Tamaño de poro para virus:
0.01 m

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Filtros HEPA

Polvo E. coli Polvo Olores Hongos

Estafilococos Alergenos Amoniaco Bacterias
Pseudomonas Pulgas Polen
Mohos Polen Actinobacilus

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Filtros de
membrana

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Filtros de membrana

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 Temperaturas bajas

 Retarda reacciones enzimáticas  inhibe

el crecimiento microbiano
 El congelamiento crea cristales de hielo
que dañan a las células microbianas
 Refrigeración

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 Otros métodos físicos

Altas presiones en líquidos desnaturaliza las proteínas bacterianas

y preserva el sabor
La desecación previene el metabolismo
La presión osmótica causa plasmólisis

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Radiación

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 Radiación con energía suficiente para
Radiación ionizante ionizar la materia extrayendo electrones
de sus estados ligados al átomo
 Rayos alfa, beta, Rayos , baños de
electrones 
separa e- de los átomos  produce
radicales libres y otras moléculas
altamente reactivas
 Su usa mucho el radioisótopo
Cobalto-60
 Salmonella y Pseudomonas son muy
sensibles
 La esterilización de materiales
sensibles al calor: medicamentos,
vitaminas, hierbas, material de sutura

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 Radiación no ionizante: luz UV

 Más efectiva a ~ 260 nm

 Efecto: dímeros de timina
 Los m.o. en división activa son los
más sensibles
 Usada para limitar la contaminación
de superficies y del aire
 Usada a corta distancia para atacar
directamente a los m.o.

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Formación de Dímeros de timina

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Radiación no ionizante: microondas

•Longitud de onda: 1 mm – 1m
•El H2O absorbe rápidamente energía se libera como calor al ambiente
•Muerte indirecta de bacteras por el calor

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Desinfectantes y Antisépticos

Quimioterápicos

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 Pocos agentes químicos logran esterilidad
 Por presencia de materia orgánica, el grado de contacto con m.o. y la
temperatura
 Desinfectantes son regulados por la Oficina de Control Ambiental (EPA) de los
EEUU
 Los antisépticos son regulados por la Oficina de Alimentos y Drogas (FDA) de los
EEUU
 Prueba de la dilución
1. Se secan anillos metálicos sumergidos en bacterias de prueba.
2. Los cultivos secos Salmonella choleraesuis, Staphylococcus aureus, y Pseudomonas
aeruginosa se colocan en el desinfectante por 10 min a 20C.
3. Los anillos se transfieren a un medio de cultivo para determinar si hay bacterias
sobrevivientes

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 Método de difusión de discos
 Discos de papel filtro se embeben en químicos y se colocan en una placa con
agara inoculado; si hay zona de inhibición significa efectividad del químico.

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Desinfectantes Factores que afectan la potencia de un desinfectante

Concentración del pH Temperatura

agente y tiempo de
actuación Afecta a la carga Aumentar la T aumenta la
bacteriana directamente, y potencia de
al grado de ionización del desinfectantes. Muchos
Naturaleza de detergente: pasan mejor detergentes matan el
microorganismo y las membranas biológicas doble cuando suben 10°C
población microbiana

Materia orgánica o Presencia de materiales

inorgánica afecta extraños
negativamente la potencia
de detergentes. Ejemplo: Ejemplo: M. tuberculosum
sangre, suero, pus, etc. resiste hipocloritos. ¿Fase
de cultivo? ¿Esporas,
capsulas? ¿organismos
iniciales?
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 Desinfectantes Tipos de desinfectantes

 Fenol = ácido carbolico

 Fenólicos: Cresoles (Lysol) -
desinfectante
 Bisfenoles
 Hexaclorofeno, hospitales, cirugía,
enfermería
 Triclosan (pasta dental, jabones
antibacerianos, etc.)

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 Halógenos

Cloro
 Cloro gaseoso (Cl2) o líquidos.
 Cloro reacciona con el agua: ácido
hpocloroso (ClOH), a ph ácido o
neutron es oxidante muy fuerte.
 Muy usado como desinfectante
 Cloro gaseoso (Cl2) o líquido:
 Gaseoso
 1-3 ppm para cloración de aguas para
bebida y piscina.
 Líquido
 Hipoclorito de sodio, de calcio, de litio.
 Lejías, líquidos, en polvo, industrias
alimentarias, lácteas, etc.

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 Halógenos

Iodo
Mas reactivo, más germicida. Altera la síntesis
proteica y a las membranas.
Tintura de Iodo (en solución con alcohol) 
antiséptico en heridas
Iodoforos combinados con una molécula
orgánica  complejo iodo detergente (p.e.
Betadine®). Sensibilidad ocasional en la piel,
parcialmente inactivado por restos en la piel,
pobre actividad esporicida.

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 Alcoholes
 Alcohol Etílico (soluciones al 60 – 80%) e
isopropílico
 Desnaturaliza proteínas, disuelve lípidos
 No tiene actividad contra esporas y pobremente
efectivo contra virus y hongos
 Fácilmente inactivado por restos orgánicos
 También se usa en sanitizadores de manos y
cosméticos.

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 Ingredientes que actúan en superficie / surfactantes

 Jabones y Detergentes
 Principal propóstio del jabón : remoción
mecánica y uso como agente humedecedor
 Definición de detergentes
Detergentes acídicos-aniónicos  Los aniones
reaccionan con membrana plasmática. No
tóxicos, no corrosivos, y rápidos. Jabón de
lavandería, industria láctea.
Detergentes catiónicos  compuestos
amónicos cuaternarios (Quats). Fuertemente
bactericida contra muchas bacterias,
especialmente grampositivias.

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 Efectividad de
antimicrobianos
químicos

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 Metales pesados

Acción oligodinámica: el efecto tóxico se debe a los iones metálicos que

se combinan con el sulfhidrilo (—SH) y otros grupos  se
desnaturalizan proteínas .
 Mercurio (HgCl2, griegos y romanos lo usaban para lesiones de la piel);
Thimerosal
 Cobre contra organismos que contiene clorofila  Algicidas
 Plata (AgNO3): Antiséptico para ojos de recién nacidos
 Zinc (ZnCl2) en lavados bucales, ZnO en antifúngicos en pintura

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Plasma

• Gas luminoso con radicales libres que destruye microorganismos

• Uso: instrumentos tubulares, manos, superficies.

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 Sustancias con actividad antimicrobiana
Quimioterápicos (microbicida o microbiostática) con toxicidad
suficientemente baja como para poder ser
administrados a un organismo.

Quimioterápicos de síntesis

Antibióticos

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 Quimioterápicos de síntesis

Sulfamidas

Sulfonas Bacteriostáticos sintéticos

que inhiben la conversión
de p-aminobenzoico en
Isoniazida
dihidropteroato, que las
bacterias necesitan para
Quinolonas sintetizar folato, y en ultima
instancia purinas y ADN.
Contra la lepra (producido por
Mycobacterium leprae)

Bactericida contra
Mycobacterium.
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 ADN-girasa: reduce tensión causada por
Quimioterápicos de síntesis superenrollamiento de ADN. Produce cortes de
doble cadena. Es una topoisomerasa.

Quinolonas

Bloquean la ADN-girasa
bacteriana: ruptura de doble
cadenas, muerte bacteriana.
Ejemplo: Ciprofloxacino

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 Antibióticos

• Inhibidores de la biosíntesis de la pared celular bacteriana

• Vancomicina
• Antibióticos b-lactámicos: Penicilinas: bactericidas.
• Antibióticos que interfieren en la biosíntesis de proteínas
• Interfieren con el funcionamiento del ribosoma.
• Tetraciclinas (amplio espectro)
• Aminoglucósidos: Estreptomicina
• Macrólidos: Eritromicina
• Inhibidores de la transcripción de eubacterias: Rifamicinas
• Contra M. tuberculosis
• Inhiben inicio de transcripción.

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