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    Práctica 1. Quimioluminiscencia

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    Fabiola Torres
    La práctica tuvo como objetivo observar la quimioluminiscencia mediante sustancias químicas y materiales cotidianos. Se preparó una solución fluorescente y se creó una lámpara UV a partir de un celular con cinta adhesiva y marcador. Luego se dibujaron figuras con resaltadores de colores en una hoja y se observaron bajo la lámpura UV, logrando ver la quimioluminiscencia. Adicionalmente, se practicó el uso correcto de pipetas. La práctica concl

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    Práctica 1. Quimioluminiscencia

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    Fabiola Torres
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    La práctica tuvo como objetivo observar la quimioluminiscencia mediante sustancias químicas y materiales cotidianos. Se preparó una solución fluorescente y se creó una lámpara UV a partir de un celular con cinta adhesiva y marcador. Luego se dibujaron figuras con resaltadores de colores en una hoja y se observaron bajo la lámpura UV, logrando ver la quimioluminiscencia. Adicionalmente, se practicó el uso correcto de pipetas. La práctica concl

    Descripción original:

    Práctica de laboratorio

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    La práctica tuvo como objetivo observar la quimioluminiscencia mediante sustancias químicas y materiales cotidianos. Se preparó una solución fluorescente y se creó una lámpara UV a partir de un celular con cinta adhesiva y marcador. Luego se dibujaron figuras con resaltadores de colores en una hoja y se observaron bajo la lámpura UV, logrando ver la quimioluminiscencia. Adicionalmente, se practicó el uso correcto de pipetas. La práctica concl

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    Práctica 1. Quimioluminiscencia

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    Fabiola Torres
    La práctica tuvo como objetivo observar la quimioluminiscencia mediante sustancias químicas y materiales cotidianos. Se preparó una solución fluorescente y se creó una lámpara UV a partir de un celular con cinta adhesiva y marcador. Luego se dibujaron figuras con resaltadores de colores en una hoja y se observaron bajo la lámpura UV, logrando ver la quimioluminiscencia. Adicionalmente, se practicó el uso correcto de pipetas. La práctica concl

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    Laboratorio Integral III

    Ing. Juan Aguilar Gaspar

    Práctica 1.
    Quimioluminiscencia

    Integrantes del equipo:

    Chaparro Etchechury Aarón Adrián

    Ibarra Jurado Adrián Alberto

    Torres Arroyo Karen Fabiola

    Mesa #1

    7 ~ Febrero ~ 2020
    Contenido
    Objetivos. ................................................................................................................................................................ 3
    Objetivo general. .................................................................................................................................... 3
    Objetivos específicos. ........................................................................................................................... 3
    Marco teórico. ....................................................................................................................................................... 3
    Materiales. .............................................................................................................................................................. 5
    Procedimiento....................................................................................................................................................... 5
    Resultados. ............................................................................................................................................................. 7
    Conclusión. ............................................................................................................................................................. 7
    Reglas de seguridad. .......................................................................................................................................... 8
    Referencias bibliográficas. .............................................................................................................................. 13
    Anexos. .................................................................................................................................................................. 13
    Práctica 1.
    “Quimioluminiscencia”

    Objetivos.

     Objetivo general.
    Observar por medio de sustancias químicas, como se da la quimioluminiscencia con
    ayuda de diversos materiales cotidianos.

     Objetivos específicos.

    -Conocer los efectos de la quimioluminiscencia


    -Identificar los materiales aplicables a este método
    -Observar por medio de luz UV el efecto de la quimioluminiscencia en distintos
    materiales.

    Marco teórico.
    La fotoquímica orgánica constituye un amplio campo de la química orgánica. Los procesos
    fotoquímicos son intrínsecamente físicos y conllevan la absorción de cuantos de luz (fotones)
    por parte de una molécula y la producción de estados electrónicos excitados muy reactivos. La
    fotoquímica ofrece la posibilidad de someter a las moléculas a procesos distintos a los que nos
    encontramos en condiciones térmicas. ¿Qué le ocurre a una molécula al ser irradiada si no sufre
    una reacción química? La molécula no puede quedarse en un estado excitado indefinidamente
    ya que este representa una situación inestable comparado con el estado fundamental. El exceso
    de energía se libera de forma térmica o por radiación.

    Quimioluminiscencia.

    Quimioluminiscencia (CLIA por su nombre en inglés: ChemiLuminescent Immuno Assay) es el


    fenómeno por el que, en ciertas reacciones químicas, la energía liberada no sólo es emitida en
    forma de calor o de energía química, sino también en forma de luz. La quimioluminiscencia es
    un fenómeno que se produce cuando, en una reacción química, los electrones saltan de las capas
    más altas de los átomos a las más bajas.
    Se entiende, además, que la quimioluminiscencia es la propiedad que tienen algunas sustancias
    químicas para emitir luz. Estas sustancias son, por ejemplo, las que se emplean para los números
    de los relojes que brillan en la oscuridad, o las que de forma natural tienen algunos animales,
    como las luciérnagas. Además, tienen su aplicación en la medicina, en esta área por lo general
    se emplean para detectar la existencia de sustancias químicas en las biopsias de tejidos.
    La quimioluminiscencia, como se puede ver, es algo propio de los laboratorios. No hay ninguna
    prueba que se aplique a los enfermos que se base en la quimioluminiscencia. En el laboratorio
    clínico los sistemas que llevan a cabo esta reacción fueron especialmente diseñados para realizar
    inmunoensayos con tecnología automatizada de vanguardia como lo es la quimioluminiscencia,
    método de lectura con mayor sensibilidad que ELISA (Ensayo por Inmunoabsorción Ligado a
    Enzimas), basándose en el principio de emisión de energía luminosa a través de una reacción
    química (Enzima – Sustrato).

    ¿Cuáles son las ventajas de la Quimioluminiscencia?

    Mejor rendimiento

    La ventaja de CLIA es “aumento de la sensibilidad y rango dinámico, lo que permite la detección


    de concentraciones de analito más bajos y el diagnóstico temprano de la enfermedad.” (IVD Tecnología
    octubre 2004). El Rango dinámico de CLIA se mejora más allá de ELISA con una mejor linealidad y la
    discriminación de la señal. Mientras ELISA no puede leer por encima de 3.0 O.D. por lo que
    requiere dilución de la muestra, CLIA puede leer un rango dinámico de que aumenta 106 o 107
    veces significativamente la linealidad del ensayo y la reducción de desbordamiento. Además,
    bajo fondo (alta relación señal a ruido) permite una interpretación más clara de bajas
    concentraciones de analito.

    Larga Vida

    Los sustratos CLIA tienen una vida útil de 3 años, muy superior a la fluorescencia y RIA, mientras
    que ELISA tienen una vida de 18 meses al momento de fabricarlos.
    Resultados más rápidos

    Los tiempos de incubación son más reducidos que en los métodos de ELISA, típicamente por 30
    minutos o más, añadiendo un tiempo valioso a los horarios del usuario y por lo tanto hay un
    aumento de su productividad. (Ramos)1

    Materiales.
    REACTIVOS: MATERIAL: EQUIPO:

    -Fluoresceína (C13H14ON4) -Matraz bola fondo -Bata de laboratorio

    -Agua destilada -Marcador azul rey permanente

    -Resaltadores de diferentes colores

    -Hoja de maquina

    -Cinta adhesiva (tape)

    -Celular con flash

    -Pipeta volumétrica

    -Pipeta serológica

    - Propipeta

    Procedimiento.
    1. Se preparó una solución de sal sódica para fluorescencia al 1% para comprobar la
    eficiencia posteriormente de la lámpara UV.

    Fotografía 1. Solución en luz Fotografía 2. Solución en luz


    estándar visible UV
    2. A un celular con flash, fuimos agregándole tiras de tape (zona donde se encuentra el
    flash) una a una y pintándolas con marcador permanente azul para que al final de las 10
    capas en conjunto se obtuviera un prototipo de lámpara UV.

    Fotografía 3. Generación de luz


    UV a partir de flash de celular
    3. Posteriormente en una hoja de maquina escribimos y dibujamos diferentes cosas, con
    ayuda de resaltadores (marca textos) color rosa y amarillo, para verlo en la obscuridad
    con la lámpara.

    Fotografía 4. Empleando resaltadores


    de varios colores dibujamos en una hoja

    4. Finalmente, en un cuarto aislado totalmente de la luz probamos nuestra lámpara para


    observar los dibujos previamente realizados.
    5. Como actividad complementaria realizamos el uso correcto de las pipetas (tanto
    serológica como volumétrica), para la cual usamos la solución previamente hecha de sal
    sódica para fluorescencia
    6. Pasamos uno a uno para usarlas, asignándonos ya sea alguna de las dos pipetas, luego
    conectábamos la perilla y accionábamos para completar el volumen, en este punto
    soltábamos el líquido de igual manera con ayuda de la propipeta.
    NOTA: La pipeta volumétrica al ser más exacta, se vuelve más difícil el empleo de la misma.

    Resultados.

    Fotografías 5 y 6. Hoja del paso 3 bajo la luz UV

    Conclusión.
    Al realizar esta práctica pudimos observar experimentalmente cómo es que la
    quimioluminiscencia se efectúa, ya que durante el desarrollo de la misma fue posible describir la
    emisión de luz como resultado de una reacción química.

    Así mismo, la energía liberada de la ya mencionada reacción es la responsable de excitar ciertas


    moléculas que, tras una desactivación vibracional dentro del estado excitado, liberan su exceso
    de energía en forma de radiación con una longitud de onda que puede estar en el espectro
    visible, por lo que resultó sencillo poderlo ver e identificar.
    Por lo tanto, es permisible decir una de las ventajas más importantes que este fenómeno tiene
    es que posee aplicaciones muy específicas, pero con grandes resultados tanto en efectividad
    como en rendimiento y rapidez.

    Tras poner fin a la sesión de laboratorio se logró demostrar que se cumplió con los objetivos
    planteados al inicio de la misma, siendo exitosa.

    Finalmente es de suma importancia añadir que la realización de esta práctica más que aportarnos
    conocimiento teórico y práctico nos provee de muchas aptitudes y habilidades que enriquecen
    nuestro perfil como ingenieros químicos ya que nos permite aprender a conocer cada vez las
    distintas interacciones que tienen las sustancias y las propiedades que las mismas poseen.

    Reglas de seguridad.
    (Recomendadas para el manejo de los reactivos utilizados)

    Hoja de seguridad de la Fluoresceína.


    Referencias bibliográficas.
    1. Ramos, Alberto. QUIMIOLUMINISCENCIA – CLIA ¿SABES QUÉ ES Y CÓMO FUNCIONA? 27
    de Noviembre de 2014. 06 de Febrero de 2020.
    <http://www.cclabgroup.com/quimioluminiscencia-clia/>.

    Anexos.
    Procedimiento para el uso de la pipeta

    1. El líquido se aspira mediante un ligero vacío usando bulbo de succión o propipeta, nunca
    la boca.
    2. Asegurarse que no haya burbujas ni espuma en el líquido.
    3. Limpiar la punta de la pipeta antes de trasladar líquido
    4. Llenar la pipeta sobre la marca de graduación y trasladar el volumen deseado. El borde
    del menisco debe quedar sobre la marca de graduación.
    5. Una vez se vierte el líquido, quedará un pequeño volumen en la punta de la pipeta la
    cual ha sido calibrada para tomarlo en cuenta, así que no se debe soplar para sacar esta
    pequeña cantidad pues de lo contrario se produce una alteración. No se debe confiar en
    las pipetas con las puntas dañadas.

    Pipeta volumétrica. (EXACTA)

    La pipeta aforada o volumétrica es utilizada para la medición de líquidos en el laboratorio y su


    vertido. Está fabricada con borosilicato, un material de fácil limpieza, inerte y que sufre pocas
    deformaciones. Esta hecha para entregar un volumen bien determinado, el que esta dado por
    una o dos marcas en la pipeta. Si la marca es una sola, el líquido se debe dejar escurrir sin soplar,
    que baje por capilaridad solamente esperando 15 segundos luego que cayo la última gota.

    Pipeta serológica. (APROXIMADA)


    La pipeta serológica es un tipo de pipeta estéril que se utiliza principalmente para cultivo celular
    y/o trabajo con soluciones estériles. Es un tipo de pipeta graduada también llamada pipeta
    terminal, puesto que las graduaciones ocupan toda la superficie de la pipeta, incluyendo la punta.
    Esto la diferencia del resto.

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