Ingenieria Genética PDF
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Tema 19
Biotecnología
Tecnología del
ADN
recombinante Alimentos
(década 70) Medicamentos
Bebidas
Ingeniería genética
No hay modificación de genes
Animales y plantas
transgenicas
LOS MICROORGANISMOS
• Plantas leguminosas
• Animales rumiantes
Un microorganismo para ser útil en procesos biotecnológicos debe
tener las siguientes características:
1. Crecer rápidamente
2. Poder ser cultivado a gran escala
3. Producir sustancias útiles
4. Hacerlo en poco tiempo
Enzimas Alcohol
Antibióticos Productos
Aditivos químicos
alimenticios
Industria alimentaria
Principales
procesos de
fermentación
La fermentación acética
Producción de vino
Saccharomyces Cerevisiae
Producción de cava y champan
Se obtiene de la fermentación de
una masa formada por harina de
cereales, agua, sal y levaduras.
Producción de mantequilla
Producción de yogur
Tipos de enzimas:
Pseudomonas
Methanosarcina
Aeromonas
Syntrophomonas
Syntrophobacter
Methanococcus
Microorganismos y minería
Sulfobacillus
Microorganismos y biocarburantes
El Biodiesel es un combustible liquido que se obtiene a
partir de materias primas renovables, como aceites y
grasas vegetales y/o aceites de fritura usados, y es
asimilable al gasóleo de automoción de origen fósil
(petróleo). Los aceites vegetales que se utilizan
suelen ser la soja, la colza, la palma y el girasol.
Fermentación, Destilación
Etanol hidratado
Deshidratación
Etanol
Biotecnología
Tecnología del
ADN
recombinante Alimentos
(década 70) Medicamentos
Bebidas
Ingeniería genética
No hay modificación de genes
Animales y plantas
transgenicas
ADN recombinante: es una molécula de ADN formada por la unión artificial de ADN proveniente de dos
organismos diferentes.
- de una molécula
- de una célula
- de un organismo
Organismo transgénico: incorporan en su genoma de forma estable ADN procedente de otras especies.
Secuenciación: técnica que permite conocer la secuencia de bases del ADN (o de aa de una proteína...)
PCR: reacción en cadena de la polimerasa. Técnica que permite aumentar el nº de copias de un fragmento de
ADN.
Vectores: elementos genéticos que sirven para introducir genes extraños en células hospedadoras.
Enzimas de restricción: enzimas endonucleasas que cortan el ADN en puntos concretos (secuencias específicas).
Célula transformada: célula que contiene y expresa ADN foráneo.
Tecnología de la clonación génica
o Liso
o Escalonado (extremos cohesivos o pegajosos)
1.Crecimiento rápido
2.No debe ser patógeno
3.Debe favorecer la entrada del transgén
4.Debe ser muy bien conocido
5.Debe ser fácilmente manipulable
Escherichia coli
• Son moléculas transportadoras que transfieren y replican fragmentos de
ADN que llevan insertados.
• Debe ser capaz de replicarse junto con el fragmento de ADN que transporta.
• Tiene que tener secuencias de reconocimiento que permitan la inserción del
fragmento de ADN a clonar.
• Plásmidos
• Virus bacteriófagos
• Cósmidos
• YAC’s (cromosomas artificiales de levadura)
• Cromosomas artificiales de bacterias (BAC’s)
• Cromosomas artificiales humanos
Plásmidos
Sondas de ADN
Una genoteca
Hay que identificar
contiene muchos
el que nos interesa
clones
marcadores
Sondas de ADN
Se suelen utilizar :
Amplificación de:
Secuenciación
Una de las razones mas comunes para el uso de la PCR es la formación de suficiente
cantidad de ADN molde para su secuenciación. Es mucho mas sencillo y rapido que la
clonación en células.
Estudios evolutivos
Mediante la PCR se pueden amplificar genes de organismos ya extinguidos, como del
mamut, o restos antiguos humanos. Se pueden comparar estos genes con los genes
semejantes de organismos actuales y poder reconstruir árboles filogenéticos.
El PCR también se ha utilizado para conseguir el mapa del genoma humano.
* Elementos necesarios:
- DNA polimerasa
- Oligonucleótido (primer o cebador), de 18-30 nucleótidos y complementario al
extremo 3’ del fragmento de DNA que queremos secuenciar
- Mezcla de los 4 desoxinucleósidos trifosfato (dATP, dCTP, dGTP y dTTP)
- Una pequeña cantidad de cada uno de los 4 didesoxinucleósidos trifosfato
(ddATP* o ddCCTP* o ddGTP* o ddTTP*) marcados (*florescencia específica para cada
uno de ellos)
Obtención de cadenas
de distinto tamaño
acabadas en un ddNTP*
Separación de
fragmentos por
tamaños e
identificación por color
Nuevas disciplinas surgidas de la ingeniería genética
El estudio de la genómica es el
Genómica objetivo conocimiento del genoma completo y
de las interacciones entre los genes que
lo forman.
Identificación de
genes
PROTEÓMICA
Proteómica
Estudios sistemáticos de las proteínas
codificadas por el genoma de un organismo.
• El Proyecto Genoma Humano comenzó en 1990 en los Estados Unidos con un presupuesto
de 375.000 millones de pesetas y un plazo de 15 años, con el objetivo de analizar
molecularmente la herencia genética humana.
• Se trata de realizar mapas de cada uno de los cromosomas humanos. Implica dividir los
cromosomas en pequeños fragmentos que puedan ser caracterizados y posteriormente
ordenados en el cromosoma.
• 1993 - inicio de la investigación genética en la especie humana, clonación de embriones, etc.= creación
de un Comité Internacional de Bioética, UNESCO.
•Problemas éticos y morales. La experimentación en la especie humana puede atentar contra la dignidad de la
misma. Poder conocer y modificar el patrimonio genético humano puede ser una puerta abierta al eugenismo.
[Terapia Génica en células somáticas para corregir enfermedades. Prohibido en la línea germinal ]
Bioética
a) Aplicaciones médicas
– Producción de sustancias con efecto terapéutico.
- Técnicas de diagnóstico clínico.
- Terapia génica.
- Transplantes de órganos.
b) Aplicaciones agropecuarias.
– Plantas transgénicas. Alimentos transgénicos.
– Animales transgénicos.
c) Otras
– Aplicaciones de la PCR y otras técnicas para clonar genes, hacer
estudios evolutivos, arqueológicos, forenses...
– Industria alimentaria:aditivos alimentarios, detección de fraudes,
elaboración de productos lácteos y vinos...
Ingeniería genética y medicina
1. Secuencia de la proteína (insulina)
2. Síntesis de los ADN
3. Obtención de plásmidos
recombinantes con los genes para
formar las dos cadenas de la insulina.
4. Expresión en E. coli
5. Purificación y procesado químico
6. Obtención de insulina activa
4. Aplicaciones de la ingeniería genética
En Medicina
rabia.
1. Los seres humanos difieren en un 0.1%
del genoma.
2. Estas diferencias están localizadas en
regiones cromosómicas concretas.
3. Estas zonas se usan como marcadores
genéticos
4. Con la identificación de los marcadores
se hace la huella genética (método de
Southern blot)
5. La comparación de huellas genéticas
permite resolver casos policiales.
MÉTODO DE SOUTHERN BLOT
Ingeniería genética y medicina
Ingeniería genética y agricultura
• Transplantes.