UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO DEL PERÚ

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

E.A.P. INGENIERIA QUIMICA

PERFIL DE PROYECTO DE TESIS

CAPACIDAD DE AUTO-REGENERACIÓN DEL BIOCONCRETO SEGÚN

REACCIONES QUÍMICAS POR ENCAPSULAMIENTO BACTERIANO DE LA
BACTERIA (BACILLUS PSEUDOFIRMUS) EN LAS CONDICIONES DE LA
CIUDAD DE HUANCAYO.

PRESENTADO A: Ing. Manuel NESTARES GUERRA

PRESENTADO POR:

 BOZA ESTEBAN, Kathlin

 ROJAS ESCOBAR, Elvis

HUANCAYO-PERÚ
2019
 I. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.1. CARACTERIZACIÓN DE LA PROBLEMÁTICA

El hormigón es el material de construcción más utilizado a nivel mundial por
tratarse de un material resistente, durable y de un costo relativamente bajo, llegando
a tener una producción de 10 𝑘𝑚3 por año (Gartner & Macphee, 2011)
Pese a tener una alta resistencia a la compresión, el hormigón tiene una baja
resistencia a la tracción, por lo que comúnmente se suele reforzar con acero, esto se
conoce como hormigón armado. El hormigón armado se diseña permitiendo cierto
grado de agrietamiento frente a estados de carga y retracción. Las grietas favorecen
el acceso de agentes agresivos tales como cloruros, sulfatos y carbonatos que
pueden producir corrosión, no sólo en el acero, sino también del propio hormigón,
disminuyendo con esto sus propiedades mecánicas y su durabilidad.
La reparación tradicional del hormigón implica costos elevados. Por ejemplo, en
Europa, el recurso destinado a las tareas de reparación se eleva hasta la mitad del
presupuesto anual de construcción (Cailleux & Pollet, 2009). Para el caso de
Estados Unidos, se estima un costo anual destinado a la reparación, protección y
restauración de hormigón entre 18 a 21 mil millones de dólares.

Ilustración 1. Porcentaje de reparación por segmento del mercado (Adhesives Technology

Corporation, 2016).
 Desde un punto medioambiental, la producción de cemento contribuye al 7% de las
emisiones mundiales de CO2, esto debido a la síntesis de caliza y arcilla a temperaturas
de aproximadamente 1500°C necesarias para su fabricación(Jonkers, Thijssen, Muyzer,
Copuroglu, & Schlangen, 2010); Por otro lado, la producción de los otros componentes
del hormigón significa el consumo de grandes cantidades de recursos naturales, agua y
energía, lo que sugiere una disminución en su producción.

Una forma de consumir menos hormigón, es extendiendo la vida útil de las estructuras.
Es por esto que se ha buscado reparar las grietas formadas en la fase inicial después de
la construcción, y así evitar el acceso de agentes agresivos que dañan el acero en el
hormigón armado. El mecanismo que entregaría estos resultados es la auto-reparación
del hormigón, la cual consiste en diferentes técnicas o procesos que le permiten
regenerarse mediante reacciones con el medio ambiente, o de manera medianamente
asistida por el ser humano.

El mecanismo de auto-reparación del hormigón por medio de bacterias, ha sido

desarrollado en los últimos años, y consiste en la precipitación de carbonato de calcio
inducida por algunos tipos de bacterias resistentes a medios alcalinos (Jonkers,
Thijssen, Muyzer, Copuroglu, & Schlangen, 2010). Esta habilidad surge como
consecuencia del pequeño tamaño de las bacterias y de sus diversas capacidades
metabólicas. Las bacterias, más que cualquier otro tipo de organismo vivo, pueden
interactuar íntimamente con los iones metálicos presentes en su entorno. (Douglas &
Beveridge, 1998)

Si bien se ha comprobado la efectividad de ciertas bacterias en el sellado de fisuras en

el hormigón; aún no es un método aplicable en la ciudad de Huancayo debido, a la falta
de datos de investigación, y a las variables ambientales a las que podría estar expuesta
la bacteria, como la temperatura y materiales utilizados como el tipo de cemento, que
podrían alterar su eficacia.

1.2. FORMULACIÓN DEL PROBLEMA

PROBLEMA GENERAL

¿Cuál es la capacidad de auto-regeneración del Bioconcreto según reacciones químicas por

encapsulamiento bacteriano de la bacteria (Bacillus Pseudofirmus) en las condiciones de la
ciudad de Huancayo?

PROBLEMA ESPECÍFICO

¿Cuáles son los efectos de la temperatura en la actividad bacteriana durante la precipitación

del carbonato de calcio en las construcciones de Bioconcreto en la ciudad de Huancayo?
¿Cuál es el rendimiento en la auto-reparación por bacterias según el tipo de cemento Portland
en las construcciones de Bioconcreto en la ciudad de Huancayo?

¿Cómo es la influencia de la bacteria y de su fuente de carbono (lactato de calcio) en la

resistencia a la compresión del hormigón en las construcciones de Bioconcreto en la ciudad
de Huancayo?

1.3. JUSTIFICACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN

La fisuración es uno de los problemas más comunes y perjudiciales para el concreto. Debido
a la aparición de pequeñas grietas, agentes agresivos del tipo químico ingresan a la estructura;
esto ocasiona principalmente efectos negativos en ciertas propiedades, tales como la
durabilidad, la sustentabilidad, la reducción del tiempo de vida útil y los altos costos de
mantenimiento y/o reparación. Solo en Estados Unidos, se estima que el costo de
mantenimiento de estructuras de concreto alcanza los 20 millones de dólares al año. Por ello
se quiere desarrollar un bioconcreto capaz de autorrepararse.

Las bacterias calcificadoras están demostrando un enorme potencial biotecnológico. Además

de ser económicamente más rentables, presentan un menor impacto porque reducen el gasto
energético y minimizan la utilización de sustancias contaminantes, con lo que pueden
aplicarse en campos de la ingeniería civil, ingeniería química e industrial y de la
biorrestauración.

1.4. OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

 Determinar la capacidad de auto-regeneración del Bioconcreto según reacciones

químicas por encapsulamiento bacteriano de la bacteria (Bacillus Pseudofirmus) en
las condiciones de la ciudad de Huancayo
 OBJETIVOS ESPECÍFICOS
 Estudiar los efectos de la temperatura en la actividad bacteriana
durante la precipitación del carbonato de calcio en las
construcciones de Bioconcreto en la ciudad de Huancayo
 Determinar el rendimiento en la auto-reparación por bacterias
según el tipo de cemento Portland en las construcciones de
Bioconcreto en la ciudad de Huancayo.
 Analizar la influencia de la bacteria y de su fuente de carbono
(lactato de calcio) en la resistencia a la compresión del
hormigón en las construcciones de Bioconcreto en la ciudad de
Huancayo.

II. MARCO TEÓRICO

2.1 ANTECEDENTES DEL PROBLEMA

(KUNAMINENI, MEENA , & SHIRISH V., 2017), Publicaron un artículo titulado Las
bacterias de auto curación basado en hormigón, en el Instituto Nacional de Tecnología,
Ralpur, India. Donde se efectuó el estudio de varias bacterias que tienen la capacidad para
precipitar carbonato de calcio por medio de urealysis como las bacterias Sporoscarcina
pasteurii utilizados en concreto cenizas que ha mostrado una mejora en la fuerza y la
durabilidad del hormigón ceniza a través del efecto de auto curación.
Basándose en la literatura este artículo también manifestó acerca del método de
encapsulamiento y mostró buenos resultados en el auto curación y eficiencia con respecto
agrietarse y a la cantidad de precipitación de carbonato de calcio. Así mismo nos representan
un cuadro resumido de las técnicas de auto curación, la profundidad y anchura de curación
como son: micro encapsulación con una profundidad de curación de 35 mm, aplicación
directa con una profundidad de 27.2mm y encapsulación con una curación de anchura
máxima de 0.970 mm.

Se llegó a las siguientes conclusiones:

Se identificó que las bacterias tienen un efecto positivo en la resistencia a la compresión de

Portland cubos de mortero de cemento y hormigón

El estudio ha examinado diferentes tipos de bacterias que pueden ser utilizados para la
curación de las grietas

La ventaja de utilizar bacterias disminuye la penetración del agua y permeabilidad a los iones
cloruro.

Los resultados del estudio recomienda que el uso de la ''concreta microbiana” puede ser una
alternativa y sellador de hormigón de alta calidad que es rentable, respetuoso del medio
ambiente, y, finalmente, conduce a una mejora en la durabilidad de los materiales de
construcción.

(PONCE DE LEON ECHEGARAY, HUMANI ROJAS, & SÁNCHEZ ACAPANA,

2015) Publicaron un artículo sobre Los beneficios del uso de bacterias en el concreto
autorregenerante, en la revista Civilízate de la Pontificia Universidad Católica del Perú, en
donde explica la utilización de concreto autorregenerante para evitar la fisuración del
concreto, enfocado en el concreto autorregenerante por encapsulado bacteriano. El método
fue descubierto por el microbiólogo Henk Jonkers y funciona mediante la integración de
cápsulas de bacterias que producen piedra caliza, Bacillus pseudofirmus o Sporosarcina
pasteurii, con lactato de calcio.
La utilización de este tipo de concreto genera muchos beneficios en sus propiedades, como:
Mayor resistencia a la compresión, en comparación con el concreto convencional, reducción
de la permeabilidad ocasionando mejores propiedades en estado endurecido con respecto al
convencional.

Las reacciones químicas del concreto autorregenerante como la úrea, al entrar en contacto
con el aire húmedo del ambiente, se hidrolizan y forma amoniaco. El carbonato del concreto
se hidroliza y pasa a formar dos productos, amoníaco y ácido carbónico. A partir de los
productos obtenidos, se presentan dos reacciones, de las cuales se forman bicarbonato,
amonio e iones de hidróxido; estas reacciones generan un aumento en el pH, este aumento
hace que se desplaza el equilibrio del bicarbonato para formar iones de carbonato.
Finalmente, las bacterias utilizadas accionan en dos reacciones. En la primera reacción, la
pared celular, por tener carga negativa, atrae del entorno al que está sometido el concreto
Ca2+. Luego, el ion de carbonato se precipita y da como producto piedra caliza.

Con respecto a la comparación del concreto autorregenerante y el concreto tradicional fue

mejorada en un 14.92% mediante la adición de Bacillus subtilis, mientras que el B. sphaericus
mejora la resistencia a la compresión del concreto en un 30,76 % a 3 días, 46,15 % a 7 días
y 32.21 % a 28 días, en comparación con el concreto convencional.

Las conclusiones presentadas en el artículo son las siguientes:

El mecanismo de autorregeneración en ECC (Engineered Cementitious Composites) consiste

en el crecimiento de calcitas en la parte interna de las grietas; esto quiere decir que debe
tener una alta proporción de calcio en la composición de esta.

La tecnología de mejora del concreto de autor regeneración tiene una mejor eficacia cuando
los anchos de fisura son menos pronunciados (menores a 50µm).

La frecuencia de resonancia se ha establecido como un método de ensayo no destructivo

para determinar unívocamente el nivel de daño o la deformación de las muestras, indicando
así el grado y velocidad de autor regeneración. A través de las pruebas de laboratorio, basadas
en la frecuencia de resonancia, el concreto puede recuperarse en un 100% después de pasar
10 ciclos húmedo-secos.
HORMIGÓN DE CEMENTO PORTLAND

Es uno de los materiales de construcción más utilizado en el mundo, y actualmente se está

utilizando cada vez más en la construcción moderna. Es barato, diversa, toma cualquier forma
imaginable y tiene propiedades de material altamente deseables. En la producción de
hormigón, principalmente la producción de cemento Portland, grandes cantidades de dióxido
de carbono se liberan a la atmósfera, esto se está convirtiendo cada vez más un motivo de
preocupación y alternativos sustitutos se están investigando en la precipitación de carbonato
de calcio (CaCO 3) por organismos ha demostrado ser toda una alternativa interesante.
Debido al hecho de que estos procesos existen en la naturaleza y el uso de componentes
existentes de forma natural durante el proceso de precipitación de carbonato, nos lleva a
pensar que el impacto ambiental de este material no será tan fuerte como el cemento Portland.

REACCIONES QUÍMICAS

La composición del concreto autorreparante, o en su denominación en el idioma inglés “Self-

healing concrete”, consiste en los mismos materiales que se conocen para el concreto
convencional (cemento, agua, agregados finos y gruesos, aditivos, etc.) adicionados a las
bacterias, las cuales le dan la cualidad de autorregenerante. Cuando el concreto agrietado está
expuesto al aire, la humedad o la penetración de agua, por sus grietas, se genera una reacción
química que produce calcita para sellarlas. Las bacterias utilizadas por Dr. Jonkers son del
tipo “Bacillus”, ya que son capaces de sobrevivir en un ambiente alcalino (pH mayor a 10).
 COMPOSICION QUIMICA DE LOS
PRODUCTOS DE AUTO-CURADO.
LA MAYOR COMPOSICION ES DE
CALCIO, LO CUAL ESTA LIGADO
AL CRECIMIENTO CALCITAS
PARA LA GENERACION DE
CONCRETO AUTOGENERATIVO

La úrea, al entrar en contacto con el aire húmedo del ambiente, se hidroliza y forma
amoniaco.

En segundo lugar, el carbonato del concreto se hidroliza y pasa a formar dos productos,
amoníaco y ácido carbónico.

En tercer lugar, a partir de los productos obtenidos, se presentados reacciones, de las cuales
se forman bicarbonato, amonio e iones de hidróxido; estas reacciones generan un aumento
en el pH.

En cuarto lugar, por el aumento del pH, se desplaza el equilibrio del bicarbonato para
formar iones de carbonato.
Finalmente, las bacterias utilizadas accionan en dos reacciones.
En la primera reacción, la pared celular, por tener carga negativa, atrae del entorno al que
está sometido el concreto Ca2+. Luego, el ion de carbonato se precipita y da como producto
piedra caliza.

El concreto, al estar sometido a la intemperie, tiende a producir reacciones químicas

naturales. Sin embargo, al tener como componente las bacterias, presenta reacciones que le
permiten generar materia que repare las grietas, lo cual aumenta su tiempo de vida.

2.2 BASES TEÓRICAS

2.2.1 BIOCONCRETO

Es la mezcla igual que el concreto regular, pero con un ingrediente extra, el "agente de
curación." Este “agente de curación”, permanece intacto durante la mezcla, sólo se
disuelve y activa, si se producen grietas en el concreto y el agua entra a éste. ( Ponce de
León Echegaray, Huamani Rojas, & Sánchez Acapana , 2015, pág. 1).

2.2.2 HORMIGÓN DE CEMENTO PORTLAND

Es uno de los materiales de construcción más utilizado en el mundo, y actualmente se está

utilizando cada vez más en la construcción moderna. Es barato, diversa, toma cualquier
forma imaginable y tiene propiedades de material altamente deseables. En la producción
de hormigón, principalmente la producción de cemento Portland, grandes cantidades de
dióxido de carbono se liberan a la atmósfera, esto se está convirtiendo cada vez más un
motivo de preocupación y alternativos sustitutos se están investigando en la precipitación
de carbonato de calcio (CaCO 3) por organismos ha demostrado ser toda una alternativa
interesante. Debido al hecho de que estos procesos existen en la naturaleza y el uso de
componentes existentes de forma natural durante el proceso de precipitación de carbonato,
nos lleva a pensar que el impacto ambiental de este material no será tan fuerte como el
cemento Portland.

2.2.3 REACCIONES QUÍMICAS

La composición del concreto autorreparante, o en su denominación en el idioma inglés

“Self-healing concrete”, consiste en los mismos materiales que se conocen para el
concreto convencional (cemento, agua, agregados finos y gruesos, aditivos, etc.)
adicionados a las bacterias, las cuales le dan la cualidad de autorregenerante. Cuando el
concreto agrietado está expuesto al aire, la humedad o la penetración de agua, por sus
grietas, se genera una reacción química que produce calcita para sellarlas. Las bacterias
utilizadas por Dr. Jonkers son del tipo “Bacillus”, ya que son capaces de sobrevivir en un
ambiente alcalino (pH mayor a 10).
 COMPOSICION QUIMICA DE LOS
PRODUCTOS DE AUTO-CURADO.
LA MAYOR COMPOSICION ES DE
CALCIO, LO CUAL ESTA LIGADO
AL CRECIMIENTO CALCITAS
PARA LA GENERACION DE
CONCRETO AUTOGENERATIVO

La urea, al entrar en contacto con el aire húmedo del ambiente, se hidroliza y forma
amoniaco.

En segundo lugar, el carbonato del concreto se hidroliza y pasa a formar dos

productos, amoníaco y ácido carbónico.

En tercer lugar, a partir de los productos obtenidos, se presentados reacciones, de las

cuales se forman bicarbonato, amonio e iones de hidróxido; estas reacciones
generan un aumento en el pH.

En cuarto lugar, por el aumento del pH, se desplaza el equilibrio del bicarbonato
para formar iones de carbonato.
 Finalmente, las bacterias utilizadas accionan en dos reacciones.
En la primera reacción, la pared celular, por tener carga negativa, atrae del entorno al
que está sometido el concreto Ca2+. Luego, el ion de carbonato se precipita y da como
producto piedra caliza.

El concreto, al estar sometido a la intemperie, tiende a producir reacciones químicas

naturales. Sin embargo, al tener como componente las bacterias, presenta reacciones
que le permiten generar materia que repare las grietas, lo cual aumenta su tiempo de
vida.

2.2.4 BIORREACTOR

Un biorreactor es un recipiente o sistema que mantiene un ambiente biológicamente

activo. En algunos casos, un biorreactor es un recipiente en el que se lleva a cabo un
proceso químico que involucra organismos o sustancias bioquímicamente activas
derivadas de dichos organismos. Este proceso puede ser aeróbico o anaeróbico. Estos
biorreactores son comúnmente cilíndricos, variando en tamaño desde algunos
milímetros hasta metros cúbicos y son usualmente fabricados de acero inoxidable.
En términos generales, un biorreactor busca mantener ciertas condiciones ambientales
propicias (pH, temperatura, concentración de oxígeno, etc) al elemento que se cultiva.
(Rivera Castillo & Suárez Rea, 2010, pág. 28)

2.2.5 BIORREACTORES Y TIPOS DE CULTIVO

El diseño de reactores biológicos es que contrario a los químicos, su cinética no está
determinada exclusivamente por la velocidad de reacción y las variables que determinan.
Aunque se puede describir de manera similar a la química, la cinética biológica también
depende de características intrínsecas del organismo o cultivo tales como crecimiento y
taza de división celular, así como, del tipo de operación que se lleve a cabo. Por eso, lo
primero que se define en el diseño de un biorreactor es el propósito de utilización; es
decir, que tipo de cultivo se va a utilizar, el modo de operar y/o el proceso de cultivo.
(Rivera Castillo & Suárez Rea, 2010, pág. 29)

2.2.6 CULTIVO DE BACTERIAS

Cuando hablamos del cultivo de bacterias, nos referimos a uno de los sistemas más
importantes para la identificación de microorganismos observando su crecimiento en
sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio químico.

Si hablamos de cómo se cultivan las bacterias, tenemos que hacerlos inevitablemente

del medio de cultivo, material alimenticio en el que crecen los microorganismos
generando un cultivo.

En el cultivo de bacterias, la mayoría de las patógenas requieren nutrientes

complejos similares en composición a los líquidos orgánicos del cuerpo humano, es por
eso por lo que la base de muchos medios de cultivo es una infusión de extractos de carne
y Peptona a la que se añadirán otros ingredientes.

Si hablamos de cómo se cultivan las bacterias tenemos que hacerlo también de unas
condiciones generales que deben darse:

A. Nutrientes adecuados disponibles. Un cultivo de bacterias adecuado para

investigar ha de contener como mínimo carbono, nitrógeno, azufre, fósforos y
sales inorgánicas. Actualmente, la forma más extendida de aportar estas sustancias
a los medios es utilizar peptona que, además, representa una fuente fácilmente
asequible de nitrógeno y carbón. A menudo se añaden al medio de cultivo ciertos
colorantes.
 B. Consistencia del medio. Partiendo de un medio líquido podemos modificar su
consistencia añadiendo productos como la albúmina, gelatina o agar.

C. Luz ambiental. La mayoría de los microorganismos de un cultivo de bacterias

crecen mucho mejor en la oscuridad que en presencia de luz solar.

D. Temperatura. En líneas generales los patógenos humanos crecen en rangos de

temperatura mucho más cortos, alrededor de 37ºC.

E. Humedad y pH. Un mínimo de humedad en medio y atmosfera es necesario para

el desarrollo, así como un pH neutro.

F. Esterilidad. Fundamental recordar que todos los medios de cultivo han de estar
perfectamente estériles para evitar la aparición de formas de vida que puedan
alterar, enmascara o impedir el crecimiento.

Ejemplo.-

Sporosarcina pasteurii se cultiva en condiciones de lote aeróbico en un medio que contiene

20 gL-1 YE, 10gL-1 NH4Cl y 10 μM de NiCl2. Inicialmente, el medio de cultivo se
esteriliza a 121 °C y pH del medio se ajusta a 8,5 añadiendo lentamente NaOH 4M. Los
organismos se cultivan a 35 ° C hasta fase exponencial tardía o fase estacionaria temprana.
Entonces las bacterias se almacenan suspendidas en su crecimiento medio a 4 ° C antes
de su uso. (Van Paassen 2009)

2.2.7 MICROENCAPSULACION

La microencapsulación protege a los materiales encapsulados de factores como el calor

y la humedad, permitiendo mantener su estabilidad y viabilidad, también se ha utilizado
 para mejorar el sabor y la estabilidad de medicamentos y como barrera contra malos
olores y sabores. Ayuda, además, a que los materiales frágiles resistan las condiciones
de procesamiento y empacado mejorando sabor, aroma, estabilidad, valor nutritivo y
apariencia. En el caso de fármacos cuya liberación se lleve a cabo en el estómago o en
el intestino, permite una máxima absorción de los compuestos con un mínimo de
reacciones adversas. Además la microencapsulación protege a los probióticos de los
bacteriófagos y de los ambientes adversos, como la congelación y las soluciones
gástricas, y facilita la manufacturación de productos fermentados, ya que, proporciona
unas condiciones más constantes. La selección del método de encapsulación estará en
función del tamaño medio de la partícula requerida, de las propiedades físicas del agente
encapsulante, de la sustancia a encapsular, de las aplicaciones del material encapsulado
propuesto, del mecanismo de liberación deseado y del coste. ( Villena MJ, Hernández
ME, Lara V, & Martínez MA, 2009, pág. 2)

2.2.8 UREA

Para el proceso de biocementación, se necesitan iones de carbonato. Esto se proporciona

a través de hidrólisis de urea por la enzima ureasa presente en el citoplasma de la
bacteria. El subproducto de este proceso es amonio, que constituirá dos moléculas de
amonio por cada molécula de urea hidrolizada

2.2.9 CALCIO

Para la precipitación del carbonato de calcio, se necesitan iones de calcio para estar
presentes. Puede ser suministrado en forma de cloruro de calcio, lactato de calcio,
acetato de calcio o nitrato de calcio. La degradación de estos compuestos para producir
carbonato de calcio depende de la energía libre de Gibbs y la disponibilidad de iones de
carbonato libres. Otro factor para seleccionar la fuente de calcio es su efecto sobre la
actividad de la ureasa.

2.5. FACTORES QUE INFLUYEN EN EL MATERIAL PROPIEDADES DEL

BIOCONCRETO
La retención bacteriana dentro del material de la matriz tiene muchas implicaciones. El
porcentaje del total la retención de la bacteria indica la eficiencia del proceso y la distribución
de la bacteria influye en la homogeneidad del proceso de cementación y los flujos de ruta
preferenciales.
La retención bacteriana ocurre debido a las adherencias de las células a la superficie de la
partícula y la filtración en los poros.
La adhesión de las células depende de la presencia de apéndices (S. pasteurii tiene flagelos),
superficie celular hidrofobicidad, carga electrostática, fuerza iónica del medio, concentración
de bacterias, tamaño de la celda para volumen de poro y disponibilidad de nutrientes.
Se ha demostrado que las soluciones débiles de fuerza iónica harán que las células se
desprendan de la arena las partículas y las altas fuerzas iónicas obligarán a las células a unirse
a las partículas de arena. También premezcla de células bacterianas con 18 mM de cloruro
de calcio mejora la unión celular, como lo indicaAl-Thawadi (2008).
2.5.1. EL TIEMPO DE INCUBACIÓN BACTERIANA

Es muy importante ya que mejora enormemente la célula retención, idealmente entre 24 y 48

horas. Roger Arun D'Achino Henriques Universitat Politècnica de Catalunya (UPC) Pag (39)
Idealmente hablando, la matriz de poros agregados utilizada en la biocementación debe
mantenerse de tal manera quelos microorganismos pasan fácilmente, mientras que al mismo
tiempo tiene suficiente retención bacteriana capacidad. La distribución preferencial indica
que el carbonato de calcio se precipita principalmente en el punto contactos puntuales, lo
cual es deseable ya que contribuye directamente a la formación de la fuerza.

Mediante el tratamiento de la biocementación, se ha demostrado la porosidad del material de

la matriz (arena) para reducir de 15 a 22%, sin embargo, este valor puede incluso subir hasta
75% si hay obstrucción en cualquier punto especialmente el punto de inyección. Para
mantener una alta permeabilidad, es importante garantizar distribución homogénea de las
bacterias y la cementación. La pérdida de permeabilidad puede ser la resultado de la
precipitación de carbonato de calcio o materia orgánica. La ganancia de fuerza durante el
proceso de biocementación se debe a la densificación y cementación de el material de la
matriz. Se ha demostrado que el aumento de la fuerza es proporcional a la cantidad de
precipitación de carbonato de calcio, que en consecuencia se deposita principalmente en los
contactos punto a punto. Sin embargo, la ganancia de fuerza es mucho mayor en arena con
mayor densidad seca que menor densidad, para la misma cantidad de carbonato de calcio
Según los gráficos de Al-Thawadi (2008), la concentración ideal de solución de cementación
para la precipitación máxima de carbonato de calcio es 0,5 M de solución de cementación.
La biomasa la concentración es muy importante en el tipo y número de cristales producidos,
ya que esto efectivamente aumentan o disminuyen la actividad de la ureasa, por lo tanto, la
sobresaturación y el pH. Ha sido observó en Al-Thawadi (2008) que la biomasa ideal por
peso seco debería ser de 216 g.L-1. La resistencia máxima lograda hasta ahora es de 30MPa
de resistencia a la compresión no confinada, mediante el uso de los criterios anteriores y la
cepa de bacterias MCP11, que constituye principalmente S. Pasteurii. Demostrando que es
es posible utilizar bacterias localmente encontradas con el propósito de la biocementación y
aun alcanzar altas fortalezas en la biocementación. También como se mencionó
anteriormente, la cantidad de carbonato de calcio precipitado es proporcional a la fuerza
ganada, y la actividad ureasa. La actividad de ureasa puede aumentarse complementando el
solución de cementación con medio de crecimiento, aumentando así la resistencia a la
compresión. La presencia de urea adicional en la solución de cementación aumentará la
resistencia a la compresión sin aumentar el contenido de carbonato de calcio; esto podría ser
el resultado de la formación de más y / o más grande calcita cristales, a través de sus efectos
sobre el pH y las concentraciones iónicas. La falla en el bioconcreto puede ocurrir idealmente
a través de la fractura de calcita o la dislocación de la enlace calcita-agregado. Sin embargo,
la falla real será una combinación de los dos.

2.6. MECANISMO DE FALLA DE LA CALCITA DEBIDO A LA CARGA DE

CORTE

La calcita en la biocementación se concentra principalmente en contactos de partículas y

partículas, como los enlaces formados en estos puntos son fuertes y son los principales
contribuyentes a la formación de la fuerza. Por lo tanto, para que no ocurra, solo existen dos
alternativas simplificadas a la forma en que las partículas de calcita y sílice pueden fallar.
Estos se ilustran esquemáticamente en la figura 4.11 a continuación, bajo cizalla, tensión y
carga de compresión. La primera situación ideal es que la fractura ocurre dentro de la calcita,
dependiendo de las propiedades de la calcita. Y el segundo es que la fractura ocurre en el
punto de adherencias de calcita y arena, cuya fuerza depende de las propiedades de la
partícula de arena y del vínculo físico entre la calcita y la arena. En realidad, la fractura real
será una composición de los dos

2.7. FACTORES GENERALES QUE AFECTAN LA RETENCIÓN

BACTERIANA

Las células bacterianas se unirán a una superficie para los nutrientes que se encuentran
en la superficie, como simple fuente de carbono soluble o moléculas orgánicas que
pueden hacer que la superficie sea rica en nutrientes medio ambiente o protección contra
los depredadores formando biopelículas. La unión de bacterias a un la superficie se rige
por:
Factores biológicos como la presencia de proteína de superficie específica, formación
de polímeros extracelulares, la presencia de apéndices que son responsables de la
adhesión reversible, el grado de célula hidrofobicidad superficial, el grado de carga
electrostática de la célula, fase de crecimiento en la que bacteriana las células se unen,
la concentración celular y el tamaño bacteriano (Al-Thawadi 2008). ·
Factores químicos como la disponibilidad de nutrientes (la disponibilidad de glucosa
aumenta la unión de las células) y alta fuerza iónica (Al-Thawadi 2008).

2.8. ADSORCIÓN BACTERIANA CON TIEMPO DE INCUBACIÓN

Al-Thawadi (2008) descubrió que la incubación de la célula in situ durante 24 a 48

horas antes de exposición a la solución de cementación, aumento de la unión celular
durante ese tiempo y aumento de la célula retención (40 a 64%). Sin incubación in situ,
la retención celular fue solo del 7 al 9%. (Los experimentos conducido por Al-Thawadi
(2008) estuvieron en presencia y ausencia de iones de calcio).
2.9. FACTORES QUE INFLUYEN EN LA PERMEABILIDAD DEL
MATERIAL

La formación de precipitación de carbonato de calcio cerca de contactos de partícula-

partícula reduce el poro gargantas y restringe el flujo de agua. Experimentalmente, S.
Ferris et al. (1996) observó una reducción en la permeabilidad del 15% al 20% de la
permeabilidad inicial y Whiffin et al. (2007) de manera similar observó una reducción
en la permeabilidad del 22% al 75% de la permeabilidad inicial. Sin embargo lo és, es
concebible que la permeabilidad se pueda reducir aún más con un tratamiento adicional.
En la experimentación debe reconocerse que la permeabilidad puede no ser uniforme
en todas las especímenes, con una tendencia general a una mayor reducción de la
permeabilidad que ocurre más cerca de la fuente de inyección (DeJong et al., 2008).
También ha sido observado por DeJong et al. (2008) que la reducción en la
permeabilidad no es solo atribuido a la precipitación de carbonato de calcio, sino
también a la presencia de materia orgánica, como las células bacterianas y / o el
crecimiento fúngico forman esporas nacidas del aire. Esta condición depende del grado
de esterilizaciones del proceso de producción y los materiales utilizados

2.10. RECONOCIMIENTO DE LAS BACTERIAS GRAM POSITIVAS

La coloración Gram debe su nombre al bacteriólogo danés Chistian Gram en 1884. La

tinción de Gram aporta dos ideas básicas para la definición de las bacterias: el color que
adquieren tras la tinción y la forma que presentan las células bacterianas. En lo relativo
a la coloración tenemos:
- Gram positivos color azul-violeta
- Gram negativos color rojo-rosado
Coloración Gram Las bacterias se clasifican en Gram positivas y en Gram negativas de
acuerdo a los componentes químicos de su pared celular. Las Gram positivas poseen
una pared celular poco permeable y resisten la decoloración. Las Gram negativas poseen
una pared celular más permeable, se decoloran y luego adquieren la coloración de la
safranina. La coloración Gram consiste en una técnica de tinción que utiliza 4
 componentes: un colorante básico (cristal violeta), un mordiente (lugol), un decolorante
(alcohol cetona) y un colorante de contraste (safranina).

2.11. INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA EN EL FRAGUADO DEL

HORMIGÓN
Es bien conocido que la temperatura es uno de los parámetros que más influencia tienen
en el desarrollo de resistencias del hormigón: un incremento de la temperatura hará que
la mezcla madure más rápidamente que cuando 13 ésta permanece constante. Esto se
debe a una aceleración de la reacción de hidratación, que es térmicamente activada.
Además, la temperatura puede provocar efectos adversos en el hormigón:

• Una temperatura del hormigón demasiado elevada al inicio de la hidratación puede

conducir a una pérdida permanente de resistencia.
• Grandes variaciones de temperatura pueden generar la fisuración del hormigón.
• Las heladas antes de que el hormigón haya alcanzado suficientes resistencias pueden
causar pérdidas de resistencia permanentes.

Para prevenir estos daños y asegurar un funcionamiento adecuado del hormigón será
necesario un conocimiento previo de los efectos de la temperatura en el fraguado de la
masa.

2.3 MARCOS CONCEPTUALES O GLOSARIO

 Bio-mineralización.-Es la ciencia de la precipitación de minerales por organismos

vivos. Ambos minerales de depósito organismos eucariotas y procariotas (Stocks-
Fisher et al. 1999)
 Alkaliphilic.- Los microbios que se desarrollan en ambientes alcalinos con pH de 9
a 11.

 Cystolith.- Un depósito knoblike de carbonato de calcio en las células epidérmicas

de tales plantas como la ortiga
  Eucariota.- Un organismo unicelular o multicelular cuyas células contienen un
núcleo membranebound distinta
 Procariota.- Organismos que se caracterizan por la ausencia de un núcleo distinto,
unido a la membrana
 La ureasa.- Una enzima que cataliza la hidrólisis de urea para formar carbonato de
amonio
 Mezclado. La mejora del mezclado influencia la hidratación mejorando la
homogeneidad y la dispersión de los reactivos y, así, también acelera el fraguado.
 Relación agua - materiales cementicios (a/mc). Una relación a/c más baja reduce
el tiempo de fraguado.
 Contenido de cemento/adiciones. El aumento del contenido de cemento reduce el
tiempo de fraguado.
 Tipo de cemento. La química del cemento afectará fuertemente el tiempo de
fraguado
 Aditivos químicos. Los aditivos aceleradores y retardadores se utilizan
deliberadamente para controlar el tiempo de fraguado. La sobredosis de algunos
reductores de agua puede dar lugar al retraso del fraguado
 Tiempo de adición de los aditivos. La adición retrasada de algunos reductores de
agua puede evitar la rigidización temprana o el retraso.

III. FORMULACIÓN DE HIPÓTESIS Y VARIABLES

3.1 Hipótesis

3.1.1 Hipótesis General

 La capacidad de auto regeneración del Bioconcreto por encapsulamiento bacteriano

de la bacteria ( bacillus Pseudofirmus) es eficienciente porque va cerrando las
grietas mediante la precipitación de carbonato de calcio en las construcciones de la
ciudad de Huancayo
 3.1.2 Hipótesis Específicas

 Los límites de la bacteria ( bacillus Pseudofirmus) en las construcciones de

Bioconcreto son muy amplias según la durabilidad de ella en la ciudad de Huancayo
 Los beneficios del Bioconcreto por encapsulamiento bacteriano genera costos muy
bajos en la reconstrucción de un Bioconcreto que uno concreto ordinario.

3.2 Identificación de Variables

Variables dependientes

 Resistencia
 Tiempo del fraguado del concreto

Variables independientes
 Bacterias
 Temperatura

3.3 Operacionalización de Variables

VARIABLES TIPO OPERACIONALIZACION INDICADORES DEFINICION

V.DEPENDIENTE El concreto es una mezcla Se calcula un La resistencia.-

Del cemento(generalmente promedio la capacidad de
Cualitativo Cemento de Portland) y ponderado de la una estructura o
piedra resistencia de alguno de sus
 Resistencia agregado Cuando está vendida, miembros, para
mezclado con una cantidad asignando un soportar sin
pequeña de agua, el cemento valor de romperse, bajo
hidratos para formar un ponderación en la acción de
 Tiempo del enrejado cristalino opaco función de la cualquier carga
fraguado del microscópico estructure el resistencia, el a la que pueda
concreto encapsulado y la fijación del consumo de ser sometida.
agregado en su estructura cemento por
rígida metro cúbico y laTIEMPO DE
. fluidez delFRAGUADO.-
concreto. Es el tiempo en
el que el
Tipo de cemento va
cemento. La alcanando su
 química del máximo
cemento afectará endurecimiento
fuertemente el dentro de la
tiempo de mezcla del
fraguado concreto.

Tiempo de
adición de los
aditivos. La
adición retrasada
de algunos
reductores de
agua puede evitar
la rigidización
temprana o el
retraso.

Mezclado. La
mejora del
mezclado
influencia la
hidratación
mejorando la
homogeneidad y
la dispersión de
los reactivos y,
así, también
acelera el
fraguado.
V.INDEPENDIENTES Las mezclas de hormigón La temperatura Temperatura
 Bacterias Cuantitatico típicas tienen del concretodel concreto.-
 Temperatura Alta resistencia a depende delno solo
compresivo tensiones aporte caloríficoen estado
(cerca de 4.000 de cada uno de fresco sino
PSI(27.5MPa)); sus componentes, también
Por esta razón, el concreto además del calor en estado
no-reforzado típico se debe liberado por la endurecido, se
apoyar bien para prevenir hidratación del conoce medidas
el desarrollo de cemento, la
que controlen la
la tensión energía degeneración de
mezclado y el calor y su
medio ambiente cambio
de volumen para
pH.- Se trata de evitar el
una unidad de agrietamiento y
medida de la aparición de
 alcalinidad fisuras a causa
o acidez de una de este efecto.
solución, más
específicamente Bacterias
el pH mide la Gram
cantidad de iones Positivas.-Al
de hidrógeno que grupo de
contiene una bacterias que no
solución posee una
determinada membrana
externa capaz de
proteger
el citoplasma
bacteriano, que
tienen una
gruesa capa de
peptidoglicano
y que presentan
ácidos teicoicos
en su
superficie.

CAPÍTULO III
METODOLOGÍA

3.4 TIPO DE LA INVESTIGACIÓN

 Investigación Experimental

Es proceso que consiste en someter a un objeto o grupo de individuos a determinadas

condiciones o estímulos (variable independiente), para observar los efectos que se
producen (variable dependiente). Se diferencia de la investigación de campo por la
manipulación y control de variables.
2.1 NIVEL DE LA INVESTIGACIÓN

 Investigación Descriptiva

“La investigación de tipo descriptiva trabaja sobre realidades de hechos, y su característica

fundamental es la de presentar una interpretación correcta. Para la investigación descriptiva,
su preocupación primordial radica en descubrir algunas características fundamentales de
conjuntos homogéneos de fenómenos, utilizando criterios sistemáticos que permitan poner
de manifiesto su estructura o comportamiento. De esta forma se pueden obtener las notas que
caracterizan a la realidad estudiada”. Segun Sabino(1986) (Pág. 51)

2.2 MÉTODOS DE INVESTIGACIÓN

 Inductivo

Es el razonamiento que, partiendo de casos particulares, se eleva a conocimientos generales.

Este método permite la formación de hipótesis, investigación de leyes científicas, y las
demostraciones. La inducción puede ser completa o incompleta” Ander-Egg, E. (1997, p. 97)

2.3 DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN

RESISTENCIA A TIEMPO DE
LA FRAGUADO
COMPRESIÓN

BACTERIAS

TEMPERATURAS

2.4 POBLACIÓN Y MUESTRA

Población:
 Las construcciones en Huancayo

Muestra:
 9 muestras
2.5 TÉCNICAS E INSTRUMENTOS DE RECOLECCIÓN DE DATOS

Se trabajó mediante la norma NTP 339.034 (2008) y en la cual se utilizaron los

siguientes equipos:

FIGURA N 1

ESCLEROMETRO

El esclerómetro es un instrumento de medición empleado, generalmente, para la

determinación de la resistencia a compresión en hormigones ya sea en pilares,
muros, pavimentos.

FIGURA N 2
 PENETRÓMETRO

Penetrómetros para medir la firmeza o dureza en todo tipo de frutas. Los

penetrometros son ideales para determinar el momento óptimo de recolección o para
controlar la evolución de la maduración de gran cantidad de frutas.

FIGURA N° 3

TERMOMETRO

En un recipiente no absorbente, que debe permitir un recubrimiento de al menos 3 pulgadas

(75 mm) en todas direcciones
Y el termómetro se pone a 5 o 10 cm por debajo de la superficie; sobre un recipiente pero q
este a temperatura ambiente normalmente en los laboratorios de concreto se hacen sobre
carretillas de capacidad de 0.250m^3

2.6 PROCEDIMIENTOS DE RECOLECCIÓN DE DATOS:

 PARA RECOLECTAR DATOS DE RESISTENCIA A LA
COMPRESIÓN:

Este método de ensayo consiste en aplicar una carga axial en compresión a los moldes
cilíndricos o corazones en una velocidad tal que esté dentro del rango especificado antes que
la falla ocurra.
El esfuerzo a la compresión de la muestra está calculado por el cociente de la máxima carga
obtenida durante el ensayo entre el área de la sección transversal de la muestra.

 PARA RECOLECTAR DATOS DE TIEMPO DE FRAGUADO:

En este método se utiliza el aparato de Vicat que se utilizó en la determinación de la

consistencia normal, con la diferencia de que en el extremo inferior, en lugar del émbolo, se
coloca una aguja de 1 mm de diámetro. El procedimiento resumido es que primero se elabora
una pasta con el contenido de humedad determinado en la prueba de consistencia normal,
que se introduce en un molde tronco cónico de dimensiones estándar, en cuya parte superior
se coloca la aguja de 1 mm de diámetro, el cual soporta un émbolo con una masa de 300 g y
se deja que penetre en la pasta de cemento por su propio peso durante un lapso de 30 s. La
primera lectura se realiza en 30 minutos luego que se moldea sin ser alterada en un cuarto de
curado y luego se realizan lecturas a intervalos de 15 minutos hasta que se obtenga una
penetración de 25 mm o menor. Con esta serie de datos se determina por interpolación el
tiempo correspondiente a una penetración de 25 mm y éste será el tiempo de fraguado inicial
del cemento. Posteriormente se realizan penetraciones hasta determinar el primer instante en
el cual la aguja no deja huella visible en la pasta endurecida de cemento, y se registra como
el tiempo de fraguado final.

2.7 TÉCNICAS DE PROCESAMIENTO Y ANÁLISIS DE DATOS

 El sowtare que se utiliza es XLSTAT

 CAPÍTULO IV
ADMINISTRACIÓN DEL PROYECTO

IV. PRESUPUESTO

ITEM COSTO

A. Personal
 Honorarios del 00.00
Investigador
 Asistente de Investigación 00.00

B. Equipos

 Computador 5.00

 Internet 3.00

 Impresora 7.00

C. Viajes

 Transporte 50.00

D. Materiales

 Fotocopias 10.00

E. Uso de Equipos 400.00

F. Compra de materiales 600.00

 1075.00
TOTAL

V. CRONOGRAMA

Nombre de la Actividad Fecha de Inicio Duración de días Fecha de fin

Actividad: 1
15/11/2017 7 22/11/2017
Actividad: 2 23/11/2017 7 29/11/2017
Actividad: 3 30/11/2017 5 4/12/2017
Actividad: 4 4/12/2017 7 12/12/2017
Actividad:5 13/12/2017 7 19/12/2017
Actividad:6 20/12/2017 7 27/12/2017
Actividad:7 3/01/2018 15 18/01/2018
Activdad.8 19/01/2018 13 1/02/2018
Activdad.9 2/02/2018 28 2/03/2018
Activdad.10 3/03/2018 28 31/03/2018
Activdad.11 1/04/2018 28 29/04/2018
Activdad.12 30/05/2018 15 14/06/2018
Activdad.13 15/06/2018 15 30/06/2018
Activdad.14 1/07/2018 15 16/07/2018
Activdad.15 17/07/2018 15 1/08/2018
Activdad.16 15/08/2018 15 30/08/2018
Activdad.17 31/08/2018 28 28/09/2018
Activdad.18 29/09/2018 15 14/10/2018
Activdad.19 15/10/2018 10 25/10/2018

ACTIVIDADES:
1 .- Se buscó el tema para poder estudiar el grupo
2.- Se eligió un tema y se buscó más información respecto al tema y se realizó parte del plan de
trabajo
 Bibliografía
Ponce de León Echegaray, C. F., Huamani Rojas, S. K., & Sánchez Acapana , E. (2015).
Los beneficios del uso de bacterias. Lima: CIVILIZATE N°7.
Villena MJ, M., Hernández ME, M., Lara V, G., & Martínez MA, R. (2009). Técnicas de
microencapsulación: una propuesta para microencapsular. España: Ars Pharm.
Rivera Castillo, M. F., & Suárez Rea, D. P. (2010). Diseño y Construccion de un
biorreactor Bacth aerobio para cultivo de bacterias biodegradadoras de pétroleo.
Riobamba.
Gartner, & Macphee. (2011). A physico-chemical basis for novel cementitious binders.
Elsevier, 736–749
Cailleux, & Pollet. (2009). Investigation on development of self-healing properties in
protective coatings for concrete and repair mortars. Chicago.
Jonkers, Thijssen, Muyzer, Copuroglu, & Schlangen. (2010). Application of bacteria as
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Douglas, & Beveridge. (1998). Mineral formation by bacteria in natural microbial
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Laboratory of Microbial Ecology and Technology, Ghent University, Ghent, Belgiuma;

Magnel Laboratory of Concrete Research, Ghent University, Ghent, Belgiumb;

Department of Microbial Ecology, Netherlands Institute of Ecology (NIOO-KNAW),

Wageningen, The Netherlandsc; Research Group Physical Chemistry and Polymer

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H.M. Jonkers. (2011). Bacteria Based Self Healing Concrete. Delft University of
Tecnology. The Nederlands.
Potential application of bacteria to improve the strength of cement concrete. International
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Journal of Advanced Biotechnology and Research,
ANEXOS