LINEA TURBITEST AA

Microalbúmina
C Método inmunoturbidimétrico para la determinación
cuantitativa de microalbuminuria

SIGNIFICACION CLINICA MUESTRA

Se denomina microalbuminuria al aumento de excreción urinaria Orina
de albúmina por encima de niveles normales pero en ausencia a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
de nefropatía clínica manifiesta. Se define como la excreción Pueden utilizarse tanto la primera orina de la mañana, como
de 30 a 300 mg de albúmina en 24 horas (20-200 ug/min) en orinas de 3, 8, 12 ó 24 horas de recolección. Las muestras no
2 de 3 recolecciones urinarias realizadas en un período de deberán ser recolectadas después de realizar ejercicio, en pre-
pocas semanas. sencia de infecciones del tracto urinario, durante enfermedad
La determinación de microalbúmina (MAlb) es importante aguda, después de una cirugía o sobrecarga líquida aguda.
en el seguimiento de pacientes diabéticos, ya que permite b) Aditivos: no se requieren.
detectar precozmente a aquellos individuos en riesgo de c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
desarrollar enfermedad renal progresiva permitiendo la interferencias por creatinina hasta 440 mg/dl, urea hasta
aplicación de medidas terapéuticas adecuadas. 4500 mg/dl, bilirrubina hasta 25 mg/dl (250 mg/l), ácido
Actualmente, se ha reconocido a la microalbuminuria como ascórbico hasta 500 mg/dl e IgG hasta 2300 mg/dl.
un factor de riesgo independiente de enfermedad cardio- No deben emplearse muestras de orina que contengan
vascular en pacientes con y sin diabetes. hemoglobina y/o sangre.
Muestras que evidencian turbidez deberán ser centrifugadas
FUNDAMENTOS DEL METODO y usar sólo el sobrenadante para realizar el ensayo.
La albúmina reacciona con el anticuerpo específico forman- Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
do inmunocomplejos insolubles. La turbidez causada por drogas en el presente método.
estos inmunocomplejos es proporcional a la concentración d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las
de albúmina en la muestra y puede ser medida espectro- muestras pueden conservarse durante 7 días refrigeradas
fotométricamente. (2-10oC) o 2 meses congelada (a -20oC).

REACTIVOS PROVISTOS MATERIAL REQUERIDO (no provisto)

A. Reactivo A: solución fisiológica tamponada, pH 7,6. - Espectrofotómetro
B. Reactivo B: anticuerpos monoespecíficos (cabra) anti- - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas
albúmina humana. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
- Tubos de Kahn o hemólisis
REACTIVOS NO PROVISTOS - Baño de agua a 37oC
- Solución fisiológica. - Cronómetro
- Microalbúmina Calibrador Turbitest AA de Wiener lab.
CONDICIONES DE REACCION
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Longitud de onda: 340 nm
Reactivos Provistos: listos para usar. - Temperatura de reacción: 37oC
- Tiempo de reacción: 10 minutos
PRECAUCIONES - Volumen de muestra: 70 ul
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. - Volumen final de reacción: 1,27 ml
Todas las muestras de pacientes deben manipularse como Los volúmenes de muestra y reactivos pueden variarse
si fueran capaces de transmitir infección. proporcionalmente, sin que se alteren los factores de cálculo.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de PROCEDIMIENTO
acuerdo a la normativa local vigente.
CURVA DE CALIBRACION
En tubos de Kahn, realizar las siguientes diluciones en
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
solución fisiológica de Microalbúmina Calibrador Tur-
ALMACENAMIENTO
bitest AA: 1/1; 1/2; 1/4; 1/8 y 1/16, empleando solución
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has-
fisiológica como punto cero.
ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.

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 VALORES DE REFERENCIA
Microalbúmina Calibrador diluido 70 ul
Reactivo A 1000 ul Excreción urinaria de Albúmina

ug/min
Homogeneizar e incubar 5 minutos a 37 C. Leer la ab-
o mg/g de
mg/24 hs
sorbancia de cada dilución a 340 nm (DO1) llevando el Creatinina
aparato a cero con agua destilada. Luego agregar: Normal < 30 < 20 < 30
Reactivo B 200 ul Microalbuminuria 30-300 20-200 30-300
Albuminuria clínica > 300 > 200 > 300
Homogeneizar. Incubar 5 minutos exactos a 37oC e inme-
diatamente leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando En general se recomienda que cada laboratorio establezca
el aparato a cero con agua destilada. sus propios intervalos de referencia, dentro de su población
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) de pacientes. Los resultados de microalbuminuria deberán
para cada dilución del Calibrador, incluyendo el punto ser evaluados en conjunto con la historia clínica del paciente,
cero. el examen médico y otros hallazgos de laboratorio.
Representar en papel milimetrado las diferencias de
absorbancia (∆A) en función de la concentración en mg/l LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
de Microalbúmina Calibrador. Ver Sustancias Interferentes conocidas en MUESTRA.
Se recomienda realizar una recalibración completa, cuando
PROCEDIMIENTO PARA MUESTRAS
se cambia de lote de reactivo o cuando el control de calidad
En tubos de Kahn debidamente marcados, colocar:
así lo determina.
Muestra 70 ul Para evitar problemas de prozona en muestras con exceso
Reactivo A 1000 ul de antígeno es recomendable que todas las muestras sean
ensayadas con tiras reactivas previo al ensayo. Las mues-
Homogeneizar e incubar 5 minutos a 37oC. Leer la ab- tras con un nivel de proteínas superior a 250 mg/l deberán
sorbancia a 340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con ser diluidas en solución fisiológica para que el nivel medido
agua destilada. Luego agregar: quede comprendido por el rango de medición.
Reactivo B 200 ul Para preservar la integridad de los reactivos debe evitarse
todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición
Homogeneizar. Incubar 5 minutos exactos a 37oC e inme-
únicamente micropipetas perfectamente limpias y secas.
diatamente leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando
el aparato a cero con agua destilada.
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: se evaluó a través de una modificación
del protocolo EP5-A del CLSI. Para ello se procesaron, una
CALCULO DE LOS RESULTADOS
muestra control y muestras con distinto nivel de microalbu-
1) Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1)
minuria. Con los datos obtenidos, se calculó la precisión
correspondiente a cada muestra analizada. Interpolar esta
intraensayo y total.
∆A en la curva de calibración para determinar la concentra-
ción de MAlb (mg/l) correspondiente a la muestra estudiada. Precisión intraensayo
Las muestras con absorbancias superiores al último punto Nivel D.S. C.V.
de calibración deben ser diluidas (1:2 ó 1:4) con solución Normal 6,0 mg/l ± 0,17 mg/l 2,8 %
fisiológica y procesadas nuevamente. Multiplicar el resultado Patológico 1 30,8 mg/l ± 0,54 mg/l 1,8 %
obtenido por la dilución efectuada. Patológico 2 165,0 mg/l ± 0,70 mg/l 0,4 %
MAlb Control 50,2 mg/l ± 0,42 mg/l 0,8 %
2) MAlb en orina (mg/24 hs) = MAlb (mg/l) x V
siendo: Precisión total
V = volumen de la diuresis expresado en litros/24 hs Nivel D.S. C.V.
Normal 6,0 mg/l ± 0,44 mg/l 7,4 %
3) Para evitar la necesidad de cronometrar la recolección de Patológico 1 30,8 mg/l ± 1,00 mg/l 3,2 %
orina se emplea la Relación MAlb/Creatinina: Patológico 2 165,0 mg/l ± 2,61 mg/l 1,6 %
Microalbúmina (mg/l) MAlb Control 50,2 mg/l ± 0,82 mg/l 1,6 %
MAlb/Creatinina (mg/g) = 1000 x
Creatinina (mg/l) b) Límite de detección: es la mínima cantidad del analito
capaz de ser detectada como una muestra distinta de cero
Siendo 1000 el factor de conversión de mg a g de Creatinina. y corresponde a la concentración 0,7 mg/l de MAlb.
c) Rango de medición: corresponde al intervalo de valores
METODO DE CONTROL DE CALIDAD exactamente cuantificables y se extiende de 4 mg/l al último
Microalbúmina Control 2 niveles Turbitest AA. punto de calibración (aproximadamente 250 mg/l).
Los Controles son procesados de la misma manera que d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
las muestras. 2700 mg/l de MAlb.

864117024 / 00 p. 2/12
Estos datos de performance fueron obtenidos empleando SIMBOLOS
analizador automático Konelab 60i, por lo tanto dichos Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
valores pueden variar cuando se emplea otro analizador o reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
técnica manual. Este producto cumple con los requerimientos previstos

PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
para el diagnóstico "in vitro"
Referirse a las adaptaciones específicas de cada analizador.
P Representante autorizado en la Comunidad Europea
PRESENTACION
60 ml: 1 x 50 ml Reactivo A V Uso diagnóstico "in vitro"
1 x 10 ml Reactivo B
X Contenido suficiente para <n> ensayos
(Cód. 1513266)
60 ml: 1 x 50 ml Reactivo A H Fecha de caducidad
1 x 10 ml Reactivo B
(Cód. 1009338) l Límite de temperatura (conservar a)

60 ml: 1 x 50 ml Reactivo A  No congelar

1 x 10 ml Reactivo B
(Cód. 1009276) F Riesgo biológico

60 ml: 1 x 50 ml Reactivo A Volumen después de la reconstitución

1 x 10 ml Reactivo B
(Cód. 1009656) Cont. Contenido

60 ml: 1 x 50 ml Reactivo A g Número de lote

1 x 10 ml Reactivo B
(Cód. 1009966)* M Elaborado por:

Nocivo
BIBLIOGRAFIA
- Collins, AC. et al. - Diabetología 36/10: 993 (1993).
Corrosivo / Cáustico
- Sacks et al. - Clin. Chem. 48: 436 (2002).
- Mogensen, CE - J. Intern. Med. 254: 45 (2003).
- American Diabetes Association: Diabetic Nephropathy. Irritante
Diabetes Care (Suppl 1) 26: S94 (2003).
- Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Burtis, C.; Ashwood, i Consultar instrucciones de uso
E. (5º Edition) WB Saunders, 2001.
Calibr. Calibrador
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 5th ed., 2000.
- CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex-
b Control

NCCLS) - Protocol EP5-A, 1999. b Control Positivo

c Control Negativo

h Número de catálogo

*
Marcado CE pendiente 864117024 / 00 p. 3/12
 LINHA TURBITEST AA

Microalbúmina
C Método imunoturbidimétrico para a determinação
quantitativa de microalbuminúria

SIGNIFICADO CLÍNICO AMOSTRA

A microalbuminúria é o aumento de excreção urinária de Urina
albumina acima dos níveis normais mas em ausência de a) Coleta: obter a amostra da maneira habitual.
nefropatia clínica manifestada. Define-se como a excreção Pode-se utilizar tanto a primeira urina da manhã, como urinas
de 30 a 300 mg de albumina em 24 horas (20-200 ug/min) de 3, 8, 12 ou 24 horas de coleta.
em 2 de 3 coletas urinárias realizadas num período de As amostras não se podem coletar após de realizar exercício
poucas semanas. físico, em caso de infecção do trato urinário, durante doença
A determinação de microalbumina (MAlb) é importante no aguda, após duma cirurgia ou sobrecarga líquida aguda.
seguimento de pacientes diabéticos posto que permite b) Aditivos: não são necessários.
detectar antecipadamente àquelas pessoas com risco de c) Substâncias interferentes conhecidas: não se ob-
desenvolver doença renal progressiva, permitindo assim a servam interferências por creatinina até 440 mg/dl, uréia
aplicação de medidas terapêuticas apropriadas. até 4500 mg/dl, bilirrubina até 25 mg/dl (250 mg/l), ácido
Na atualidade, a microalbuminúria é reconhecida como um abscórbico até 500 mg/dl, nem IgG até 2300 mg/dl.
fator de risco independente de doença cardiovascular em Não se devem utilizar amostras de urina contendo hemo-
pacientes com e sem diabetes. globina e/ou sangue.
Amostras com turbidez deveram-se centrifugar e só usar o
FUNDAMENTOS DO MÉTODO sobrenadante para realizar a prova.
A albumina reage com o anticorpo específico formando Referência bibliográfica de Young para efeitos de drogas
imunocomplexos insolúveis. A turbidez produzida pelos neste método.
imunocomplexos é proporcional à concentração de albumina d) Estabilidade e instruções de armazenamento: as
na amostra e pode ser lida com espectrofotômetro. amostras podem ser conservadas durante 7 dias sob refri-
geração (2-10oC) ou 2 mêses congeladas (a -20oC).
REAGENTES FORNECIDOS
A. Reagente A: solução fisiológica tamponada, pH 7,6. MATERIAL NECESSÁRIO (não fornecido)
B. Reagente B: anticorpos monoespecíficos (cabra) anti- - Espectrofotômetro.
albumina humana. - Cubetas espectrofotométricas de faces paralelas.
- Micropipetas e pipetas para medir os volumes indicados.
REAGENTES NÃO FORNECIDOS - Tubos de Kahn ou hemólise.
- Solução fisiológica. - Banho-maria a 37oC.
- Microalbúmina Calibrador Turbitest AA da Wiener lab. - Relógio ou timer.

INSTRUÇÕES DE USO CONDIÇÕES DE REAÇÃO

Reagentes Fornecidos: prontos para uso. - Comprimento de onda: 340 nm
- Temperatura de reação: 37oC
PRECAUÇÕES - Tempo de reação: 10 minutos
Os reagentes são para uso diagnóstico “in vitro”. - Volume de amostra: 70 ul
Todas as amostras de pacientes devem ser manipuladas - Volume final de reação: 1,27 ml
como se tratando de material infectante. Os volumes de amostra e reagentes podem variar-se propor-
Utilizar os reagentes observando as precauções habituais cionalmente, sem que sejam alterados os fatores de cálculo.
de trabalho no laboratório de análises clínicas.
Todos os reagentes e as amostras devem ser descartadas
conforme à regulação local vigente. PROCEDIMENTO
CURVA DE CALIBRAÇÃO
ESTABILIDADE E INSTRUÇÕES DE Em tubos de Kahn, realizar as seguintes diluições em so-
ARMAZENAMENTO lução fisiológica do Microalbúmina Calibrador Turbitest
Reagentes Fornecidos: estáveis sob refrigeração (2-10oC) AA: 1/1; 1/2; 1/4; 1/8 e 1/16 utilizando solução fisiológica
até a data do vencimento indicada na embalagem. Não como ponto zero.
congelar.

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 VALORES DE REFERÊNCIA
Microalbúmina Calibrador diluído 70 ul
Excreção urinária de Albumina
Reagente A 1000 ul
ug/min
mg/g de
Homogeneizar e incubar 5 minutos a 37oC. Ler a ab- mg/24 hs
Creatinina
sorbância de cada diluição a 340 nm (DO1) zerando o
aparelho com água destilada. Após adicionar: Normal < 30 < 20 < 30
Microalbuminúria 30-300 20-200 30-300
Reagente B 200 ul Albuminúria clínica > 300 > 200 > 300
Homogeneizar. Incubar 5 minutos exatos a 37oC e logo
após ler a absorbância a 340 nm (DO2) zerando o apa- Recomenda-se que cada laboratório estabeleça seus pró-
relho com água destilada. prios intervalos de referência, dentro de sua população de
Calcular a diferença de absorbância (∆A = DO2 - DO1) pacientes. Os resultados de microalbuminúria devem ser
para cada diluição do Calibrador, incluindo o ponto zero. avaliados em conjunto com a história clínica do paciente, o
Representar numa folha de papel marcada com milí- exame médico e outras características de laboratório.
metros as diferenças de absorbância (∆A) em função
da concentração em mg/l de Microalbúmina Calibrador. LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO
Vide Substâncias interferentes conhecidas em AMOSTRA.
PROCEDIMENTO PARA AMOSTRAS Recomenda-se realizar uma re-calibração completa, quando
Em tubos de Kahn corretamente marcados, colocar: é utilizado outro lote de reagente ou quando seja necessário
Amostra 70 ul segundo o controle de qualidade.
Para evitar problemas de prozona em amostras com excesso
Reagente A 1000 ul de antígeno, é recomendável que todas as amostras sejam
Homogeneizar e incubar 5 minutos a 37oC. Ler a absor- provadas com tiras reativas prévio ao ensaio. As amostras
bância a 340 nm (DO1) zerando o aparelho com água com níveis de proteínas superiores a 250 mg/l deverão ser
destilada. Após adicionar: diluídas em solução fisiológica a fim de que o nível medido
fique dentro da faixa de medição.
Reagente B 200 ul
A fim de presevar a integridade dos reagentes devem-se evi-
Homogeneizar. Incubar 5 minutos exatos a 37 C e logo
o
tar as contaminações, utilizando para a medição unicamente
após ler a absorbância a 340 nm (DO2) zerando o apa- micropipetas preferivelmente limpas e secas.
relho com água destilada.
DESEMPENHO
a) Reprodutibilidade: determinou-se através de uma
CÁLCULO DOS RESULTADOS modificação do protocolo EP5-A do CLSI. Processou-se
1) Calcular a diferença de absorbância (∆A = DO2 - DO1) que uma amostra controle e amostras com diferentes níveis de
corresponde a cada amostra analisada. Interpolar os dados microalbuminúria. Com os dados obtidos, calcularam-se as
(∆A) na curva de calibração para determinar a concentração precisões intra-ensaio e total.
em mg/dl (g/l) que corresponde à amostra estudada.
Precisão intra-ensaio
As amostras com absorbância superior à do último ponto
de calibração, devem ser diluídas (1:2 ou 1:4) com solução Nível D.P. C.V.
fisiológica e processadas novamente. Multiplicar o resultado Normal 6,0 mg/l ± 0,17 mg/l 2,8 %
obtido pela diluição realizada. Patológico 1 30,8 mg/l ± 0,54 mg/l 1,8 %
Patológico 2 165,0 mg/l ± 0,70 mg/l 0,4 %
2) MAlb em urina (mg/24 hs) = MAlb (mg/l) x V MAlb Control 50,2 mg/l ± 0,42 mg/l 0,8 %

sendo: Precisão total

V = volume da diurese expresso em litros/24 hs Nível D.P. C.V.
Normal 6,0 mg/l ± 0,44 mg/l 7,4 %
3) Para evitar a necessidade de cronometrar a coleta de
Patológico 1 30,8 mg/l ± 1,00 mg/l 3,2 %
urina, utiliza-se a Relação MAlb/Creatinina:
Patológico 2 165,0 mg/l ± 2,61 mg/l 1,6 %
Microalbumina (mg/l) MAlb Control 50,2 mg/l ± 0,82 mg/l 1,6 %
MAlb/Creatinina (mg/g) = 1000 x
Creatinina (mg/l) b) Limite de detecção: é a mínima quantidade do analito
capaz de ser detectada como uma amostra distinta de zero.
Sendo 1000 o fator de conversão de mg a g de Creatinina. Corresponde à concentração 0,7 mg/l de MAlb.
c) Faixa de medição: corresponde ao intervalo de valores
MÉTODO DE CONTROLE DE QUALIDADE exatamente quantificáveis e compreende desde 4 mg/l até
Microalbúmina Control 2 niveles Turbitest AA. o último ponto de calibração (aproximadamente 250 mg/l).
Os controles são processados da mesma maneira que as d) Fenômeno prozona: não é evidente o efeito até 2700 mg/l
amostras. de MAlb.

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Os dados de desempenho obtiveram-se empregando SÍMBOLOS
analisador automático Konelab 60i, portanto estes valores Os seguintes símbolos são utilizados nos kits de reagentes
podem variar cada vez que seja utilizado outro analisador para diagnóstico da Wiener lab.
ou técnica manual. Este produto preenche os requisitos da Diretiva Europeia

PARÂMETROS PARA ANALISADORES AUTOMÁTICOS

Vide as adaptações específicas para cada tipo de analisador.
C 98/79 CE para dispositivos médicos de diagnóstico "in
vitro"

P Representante autorizado na Comunidade Europeia

APRESENTAÇÃO
60 ml: 1 x 50 ml Reagente A V Uso médico-diagnóstico "in vitro"
1 x 10 ml Reagente B
X Conteúdo suficiente para <n> testes
(Cód. 1513266)
60 ml: 1 x 50 ml Reagente A H Data de validade
1 x 10 ml Reagente B
(Cód. 1009338) l Limite de temperatura (conservar a)

60 ml: 1 x 50 ml Reagente A  Não congelar

1 x 10 ml Reagente B
(Cód. 1009276) F Risco biológico

60 ml: 1 x 50 ml Reagente A Volume após a reconstituição

1 x 10 ml Reagente B
(Cód. 1009656) Cont. Conteúdo

60 ml: 1 x 50 ml Reagente A g Número de lote

1 x 10 ml Reagente B
(Cód. 1009966)* M Elaborado por:

REFERÊNCIAS Nocivo
- Collins, AC. et al. - Diabetología 36/10: 993 (1993).
- Sacks et al. - Clin. Chem. 48: 436 (2002). Corrosivo / Caústico
- Mogensen, CE - J. Intern. Med. 254: 45 (2003).
- American Diabetes Association: Diabetic Nephropathy. Irritante
Diabetes Care (Suppl 1) 26: S94 (2003).
- Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Burtis, C.; Ashwood, i Consultar as instruções de uso
E. (5º Edition) WB Saunders, 2001.
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Calibr. Calibrador
AACC Press, 5th ed., 2000.
- CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex- b Controle

NCCLS) - Protocol EP5-A, 1999.

b Controle Positivo

c Controle Negativo

h Número de catálogo

* Marcação CE pendente 864117024 / 00 p. 6/12

 TURBITEST AA LINE

Microalbúmina
C Immunoturbidimetric method for quantitative determination
of microalbuminuria

SUMMARY morning urine sample may be used as well as urines 3, 8,

Microalbuminuria is the urinary albumin excretion increase 12 or 24 hours after collection. The samples should not be
above normal levels but in the absence of visible clinical collected after exercise, during urinary tract infections, acute
nephropathy. It is defined as the excretion from 30 to 300 mg stage diseases, after surgery or acute liquid accumulation.
albumin in 24 hours (20-200 ug/min) in 2 out of 3 urinary col- b) Additives: not required.
lections performed in a few weeks period. c) Known interfering substances: no interferences
Microalbumin determination (MAlb) is an important compo- are observed by creatinine up to 440 mg/dl, urea up to
nent in the screening of diabetic patients, since it allows the 4500 mg/dl, bilirubin up to 25 mg/dl (250 mg/l), ascorbic
early detection of those individuals at risk of developing pro- acid up to 500 mg/dl nor IgG up to 2300 mg/dl.
gressive renal disease and the implementation of adequate Urine samples containing hemoglobin and/or blood should
therapeutic measures. not be used. Samples with visible turbidity should be centri-
Currently, microalbumin has been acknowledged as an in- fuged. Use only the supernatant to perform the assay.
dependent risk factor for cardiovascular disease in patients See Young, S.D. in references for effect of drugs on the
with and without diabetes. present method.
d) Stability and storage instructions: samples may be
PRINCIPLE stored for 7 days refrigerated (2-10oC) or for 2 months frozen
The albumin reacts to the specific antibody forming insoluble (at -20oC).
immune complexes. The turbidity caused by these immune
complexes is proportional to the albumin concentration in REQUIRED MATERIAL (non-provided)
the sample and may be spectrophotometrically measured. - Spectrophotometer
- Spectrophotometric square cuvettes
PROVIDED REAGENTS - Micropipettes and pipettes for measuring the stated volumes
A. Reagent A: buffered saline solution, pH 7.6. - Kahn or hemolysis tubes
B. Reagent B: anti-human albumin monospecific antibodies. - Water bath at 37oC
- Stopwatch
NON-PROVIDED REAGENTS
- Saline solution. ASSAY CONDITIONS
- Wiener lab.'s Microalbúmina Calibrador Turbitest AA. - Wavelength: 340 nm
- Reaction temperature: 37oC
INSTRUCTIONS FOR USE - Reaction time: 10 minutes
Provided Reagents: ready to use. - Sample volume: 70 ul
- Final reaction volume: 1.27 ml
WARNINGS Sample and reagent volumes may be proportionally changed
The reagents are for “in vitro” diagnostic use. without altering the calculation factors
All patient samples should be handled as though capable of
transmitting infectious diseases.
Use the reagents according to the working procedures for PROCEDURE
clinical laboratories.
CALIBRATION CURVE
The reagents and samples should be discarded according
In Kahn tubes, perform the following dilutions in saline
to the local regulations in force.
solution of Microalbúmina Calibrador Turbitest AA:
1/1; 1/2; 1/4; 1/8 and 1/16, using saline solution as zero.
STABILITY AND STORAGE INSTRUCTIONS
Provided Reagents: stable in refrigerator (2-10oC) until the Diluted Microalbúmina Calibrador 70 ul
expiration date shown on the box. Do not freeze. Reagent A 1000 ul
Homogenize and incubate for 5 minutes at 37oC. Read
SAMPLE
each dilution absorbance at 340 nm (OD1) taking the
Urine
instrument to zero with distilled water. Then add:
a) Collection: obtain the sample in the usual way. An early

864117024 / 00 p. 7/12
 It is recommended that each laboratory establish its own
Reagent B 200 ul
reference intervals, within its patient population. Microalbu-
Homogenize and incubate for exactly 5 minutes at 37oC minuria should always be reviewed with the patient’s medical
and immediately read the absorbance at 340 nm (OD2) examinations, history and further laboratory results.
taking the instrument to zero with distilled water.
Calculate the difference in absorbance (∆A = OD2 - OD1) PROCEDURE LIMITATIONS
for each Calibrator dilution, including zero. Plot the differ- See Known interfering substances under SAMPLE.
ence in absorbance (∆A) in graph paper against Micro- It is recommended to perform a complete recalibration when chang-
albúmina Calibrador concentration in mg/l. ing Reagent lot number or when suggested by Quality Control.
To avoid prozone problems in samples with antigen excess
PROCEDURE FOR SAMPLES
it is recommended that all samples be tested with test strips
In duly marked Kahn tubes, place:
before the assay. The samples with protein levels higher
Sample 70 ul than 250 mg/l should be diluted in saline solution so as to
Reagent A 1000 ul lie in the assay range. Avoid contamination to preserve the
integrity of the reagents. Only use thoroughly clean and dry
Homogenize and incubate for 5 minutes at 37oC. Read micropipettes for measurements.
the absorbance at 340 nm (OD1) taking the instrument to
zero with distilled water. Then add: PERFORMANCE
Reagent B 200 ul a) Reproducibility: evaluated by a modification of protocol
EP5-A from CLSI. Thus, a control sample and samples with
Homogenize and incubate for exactly 5 minutes at 37oC
different microalbuminuria levels were tested. The intra-assay
and immediately read the absorbance at 340 nm (OD2)
and total precision were calculated with the obtained data.
taking the instrument to zero with distilled water.
Intra-assay Precision
Level S.D. C.V.
CALCULATIONS Normal 6.0 mg/l ± 0.17 mg/l 2.8 %
1) Calculate the absorbance difference (∆A = OD2 - OD1) Pathological 1 30.8 mg/l ± 0.54 mg/l 1.8 %
corresponding to each sample assayed. Interpolate this ∆A Pathological 2 165.0 mg/l ± 0.70 mg/l 0.4 %
into the calibration curve to determine the MAlb concentration MAlb Control 50.2 mg/l ± 0.42 mg/l 0.8 %
(mg/l) of the sample under study.
The samples with absorbances that are higher than the last Total Precision
calibration point should be diluted (1:2 ó 1:4) with saline Level S.D. C.V.
solution and processed one more time. Multiply the obtained Normal 6.0 mg/l ± 0.44 mg/l 7.4 %
result by the dilution performed. Pathological 1 30.8 mg/l ± 1.00 mg/l 3.2 %
Pathological 2 165.0 mg/l ± 2.61 mg/l 1.6 %
2) MAlb in urine (mg/24 hrs) = MAlb (mg/l) x V MAlb Control 50.2 mg/l ± 0.82 mg/l 1.6 %
where:
b) Detection limit: is the minimum analyte amount capable
V = diuresis volume expressed in liters/24 hrs
of being detected as a sample, different than zero, and cor-
3) To avoid the necessity to time urine collection the MAlb/ responds to the concentration of 0.7 mg/l MAlb.
Creatinine Ratio is used: c) Assay range: corresponds to the exactly quantifiable
Microalbumin (mg/l) interval of values and ranges from 4 mg/l to the last calibra-
MAlb/Creatinine (mg/g) = 1000 x tion point (250 mg/l approximately).
Creatinine (mg/l) d) Prozone effect: not noted until 2700 mg/l MAlb.
Being 1000 the Creatinine conversion factor from mg to g. The performance results were obtained using Konelab 60i
autoanalyzer. Therefore, such values may differ whenever
QUALITY CONTROL METHOD another autoanalyzer or manual technique is used.
Microalbúmina Control 2 niveles Turbitest AA.
The Controls are processed in the same way as the PARAMETERS FOR AUTOANALYZERS
samples. Refer to the applications that are specific for each auto-
analyzer.
REFERENCE VALUES
Albumin urinary excretion WIENER LAB PROVIDES
60 ml: 1 x 50 ml Reagent A
ug/min
mg/g 1 x 10 ml Reagent B
mg/24 hrs
Creatinine (Cat. Nº 1513266)
Normal < 30 < 20 < 30 60 ml: 1 x 50 ml Reagent A
Microalbuminuria 30-300 20-200 30-300 1 x 10 ml Reagent B
Clinical Albuminuria > 300 > 200 > 300 (Cat. Nº 1009338)

864117024 / 00 p. 8/12
60 ml: 1 x 50 ml Reagent A SYMBOLS
1 x 10 ml Reagent B The following symbols are used in the packaging for Wiener
(Cat. Nº 1009276) lab. diagnostic reagents kits.
60 ml: 1 x 50 ml Reagent A This product fulfills the requirements of the European
1 x 10 ml Reagent B
(Cat. Nº 1009656) C Directive 98/79 EC for "in vitro" diagnostic medical devices

60 ml: 1 x 50 ml Reagent A
P Authorized representative in the European Community
1 x 10 ml Reagent B V "In vitro" diagnostic medical device
(Cat. Nº 1009966)*
X Contains sufficient for <n> tests
REFERENCES
H Use by
- Collins, AC. et al. - Diabetología 36/10: 993 (1993).
- Sacks et al. - Clin. Chem. 48: 436 (2002).
- Mogensen, CE - J. Intern. Med. 254: 45 (2003). l Temperature limitation (store at)

- American Diabetes Association: Diabetic Nephropathy.  Do not freeze

Diabetes Care (Suppl 1) 26: S94 (2003).
- Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Burtis, C.; Ashwood, Biological risks
F
E. (5º Edition) WB Saunders, 2001.
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", Volume after reconstitution
AACC Press, 5th ed., 2000.
- CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex- Cont. Contents
NCCLS) - Protocol EP5-A, 1999.
g Batch code

M Manufactured by:

Harmful

Corrosive / Caustic

Irritant

i Consult instructions for use

Calibr. Calibrator

b Control

b Positive Control

c Negative Control

h Catalog number

* CE mark pending 864117024 / 00 p. 9/12

 LINIA TURBITEST AA

Microalbúmina
Nr kat. 1513266 Nr kat. 1009656
C Immunoturbidymetryczna metoda ilościowego oznaczania
Nr kat. 1009338 Nr kat. 1009966
mikroalbuminurii
Nr kat. 1009276

WSTĘP MATERIAŁ BADANY

Mikroalbuminuria to wydzielanie albuminy z moczem Mocz
powyżej prawidłowego poziomu ale bez obecności klinicznej a) Pobranie: pobrać materiał badany w klasyczny sposób.
nefropatii. Do badania można wykorzystać zarówno mocz wczesnopo-
Z definicji jest to wydzielanie od 30 do 300 mg albuminy w ranny jak i zbiórkę 3, 8, 12 lub 24 godzinną. Próbka moczu
ciągu 24 godzin (20-200 ug/min) w co najmniej 2 z 3 zbiórek nie powinna być pobrana po wysiłku, w trakcie infekcji dróg
moczu wykonanych w ciągu kilku tygodni. moczowych, ostrej fazie chorób, po zabiegach chirurgicznych
Oznaczenie mikroalbuminurii (Microalbumin determination i w przewodnieniu organizmu.
- MAlb) jest ważnym badaniem przesiewowym pacjentów z b) Substancje dodatkowe: nie wymagane.
cukrzycą i pozwala na wczesne wykrycie pacjentów z ryzy- c) Znane interakcje: nie obserwowano żadnych interakcji
kiem rozwoju postępującej przewlekłej choroby nerek oraz z kreatyniną do 440 mg/dl, mocznikiem do 4500 mg/dl,
zastosowanie właściwego postępowania terapeutycznego. bilirubiną do 25 mg/dl (250 mg/l), kwasem askorbinowym
Obecnie mikroalbuminy uznaje się za niezależny czyn- do 500 mg/dl oraz z IgG do 2300 mg/dl.
nik ryzyka chorób sercowo-naczyniowych u pacjentów z Próbki moczu zawierające hemoglobinę i/lub krew nie
cukrzycą i bez cukrzycy. powinny być użyte; próbki ze zmętnieniem należy odwirować,
używać tylko nadsącz do badania.
ZASADA DZIAŁANIA Zobacz źródło: Young, D.S. w sprawie wpływu leków w tej
Albumina reaguje ze specyficznym przeciwciałem tworzącym metodzie.
nierozpuszczalny kompleks immunologiczny. Zmętnienie d) Trwałość i instrukcja przechowywania: materiał badany
spowodowane obecnością immunokompleksów jest propor- może być przechowywany przez 7 dni w lodówce (2-10oC)
cjonalne do stężenia albuminy w materiale badanym i może lub przez 2 miesiące zamrożony (-20oC).
zostać mierzone spektrofotometrycznie.
WYMAGANE MATERIAŁY I SPRZĘT (niedostarczane)
DOSTARCZANE ODCZYNNIKI - Spektrofotometr.
A. Odczynnik A: buforowany roztwór soli fizjologicznej, - Kwadratowe kuwety spektrofotometryczne.
pH 7,6. - Mikropipety i pipety do pomiaru określonej objętości.
B. Odczynnik B: monospecyficzne przeciwciała przeciwko - Probówki Kahna lub do hemolizy.
ludzkiej albuminie. - Łaźnia wodna o temp. 37oC.
- Stoper.
NIEDOSTARCZANE ODCZYNNIKI
- Roztwór soli fizjologicznej. WARUNKI DLA PRZEPROWADZENIA TESTU
- Microalbúmina Calibrador Turbitest AA Wiener lab. - Długość fali: 340 nm.
- Temperatura reakcji: 37oC.
INSTRUKCJA UŻYCIA - Czas reakcji: 10 minut.
Dostarczane odczynniki: gotowe do użycia. - Objętość materiału badanego: 70 ul
- Objętość reakcji końcowej: 1,27 ml
OSTRZEŻENIA Objętości próbki i odczynnika mogą być zmieniane propor-
Odczynniki diagnostyczne do zastosowania "in vitro". cjonalnie bez zmiany współczynnika do obliczeń.
Każdy materiał badany pobrany od pacjentów powinien być
traktowany jako potencjalnie zakaźny.
Stosować odczynniki zgodnie z procedurami dla laboratoriów
PROCEDURA
klinicznych.
Odczynniki i materiał badany odrzucać zgodnie z lokalnymi KRZYWA KALIBRACJI
przepisami. W probówkach Kahna wykonać następujące rozcieńczenia
Microalbúmina Calibrador Turbitest AA: 1/1; 1/2; 1/4; 1/8 i
TRWAŁOŚĆ I WARUNKI PRZECHOWYWANIA 1/16 solą fizjologiczną, używając roztworu soli jako zero.
Dostarczane odczynniki: trwałe w lodówce (2-10oC) do końca Rozcieńczony Microalbúmina Calibrador 70 ul
daty ważności umieszczonej na opakowaniu. Nie zamrażać.

864117024 / 00 p. 10/12
 Próby kontrolne poddać tej samej procedurze jak materiał
Odczynnik A 1000 ul
badany.
Homogenizować i inkubować przez 5 minut w temp.
37oC. Odczytać absorbancję dla każdego rozcieńczenia WARTOŚCI REFERENCYJNE
przy 340 nm (OD1) ustawiając aparat na zero na wodzie
destylowanej. Następnie dodać: Wydzielanie albuminy z moczem
mg/24 godz. ug/min
Odczynnik B 200 ul mg/g
kreatynina
Homogenizować i inkubować dokładnie przez 5 minut
w temp. 37oC i natychmiast odczytać absorbancję przy Normal < 30 < 20 < 30
340 nm (OD2) ustawiając aparat na zero na wodzie Mikroalbuminuria 30-300 20-200 30-300
destylowanej. Kliniczna albuminuria > 300 > 200 > 300
Obliczyć różnicę absorbancji (∆A = OD 2 - OD 1) dla Zaleca się dla każdego laboratorium wykonanie własnych
każdego rozcieńczenia Kalibratora, włącznie z zerowym. zakresów referencyjnych dla własnej populacji pacjentów.
Narysować wykres różnicy absorbancji (∆A) na papierze Mikroalbuminuria zawsze stanowi wskazanie do badania
milimetrowym względem stężenia Microalbúmina Cali- lekarskiego i dalszych badań laboratoryjnych.
brador w mg/l.
PROCEDURA DLA MATERIAŁU BADANEGO OGRANICZENIA PROCEDURY
W prawidłowo oznaczony probówkach Kahna umieścić: Zobacz znane interakcje w rozdziale MATERIAŁ BADANY.
Zaleca się wykonanie pełnej kalibracji przy zmianie serii
Materiał badany 70 ul odczynnika lub ze wskazań działu kontroli jakości.
Odczynnik A 1000 ul Celem uniknięcia prozona, zahamowania reakcji serolo-
gicznej wskutek nadmiaru w próbce antygenu zaleca się
Homogenizować i inkubować przez 5 minut w temp. 37oC.
aby wszystkie próbki przed badaniem zostały sprawdzone
Odczytać absorbancję przy 340 nm (OD1) ustawiając
paskiem testowym. Materiał badany z białkiem powyżej 250
aparat na zero na wodzie destylowanej. Następnie dodać:
mg/l należy rozcieńczyć solą fizjologiczną aby nie fałszować
Odczynnik B 200 ul zakresu badania. Unikać zanieczyszczenia aby zachować
Homogenizować i inkubować dokładnie przez 5 minut czystość odczynników. Stosować wyłącznie zupełnie czyste
w temp. 37oC i natychmiast odczytać absorbancję przy i suche mikropipety.
odczytać absorbancję przy 340 nm (OD2) ustawiając
aparat na zero na wodzie destylowanej. CHARAKTERYSTYKA TESTU
a) Powtarzalność: dokonano oceny wg zmodyfikowanego
protokołu EP5-A z CLSI. Zostały przebadane próby kontrolne
OBLICZENIA i materiał od pacjentów z różnym poziomem mikroalbumi-
nurii. Obliczono precyzję w trakcie badania i całkowitą na
1) Obliczyć różnicę absorbancji (∆A = OD 2 - OD 1 )
podstawie otrzymanych danych.
odpowiadającą każdej badanej próbce. Interpolować
wyliczoną ∆A na krzywą kalibracji i oznaczyć stężenie MAlb
Precyzja w trakcie badania
(mg/l) w badanej próbce.
Materiał badany, którego absorbancja wynosi powyżej Poziom S.D. C.V.
najwyższego punktu krzywej kalibracji powinien być Prawidłowy 6,0 mg/l ± 0,17 mg/l 2,8 %
rozcieńczony (1:2 lub 1:4) solą fizjologiczną i przebadany Patologiczny 1 30,8 mg/l ± 0,54 mg/l 1,8 %
ponownie. Pomnożyć otrzymane wyniki przez współczynnik Patologiczny 2 165,0 mg/l ± 0,70 mg/l 0,4 %
wykonanego rozcieńczenia. Próba kontrolna MAlb 50,2 mg/l ± 0,42 mg/l 0,8 %

2) MAlb w moczu (mg/24 godz.) = MAlb (mg/l) x V Precyzja całkowita

gdzie: Poziom S.D. C.V.
V = objętość diurezy wyrażona w litrach/24 godz. Prawidłowy 6,0 mg/l ± 0,44 mg/l 7,4 %
Patologiczny 1 30,8 mg/l ± 1,00 mg/l 3,2 %
3) Celem uniknięcia oczekiwania na zbiórkę moczu używa Patologiczny 2 165,0 mg/l ± 2,61 mg/l 1,6 %
się stosunku MAlb/Kreatynina: Próba kontrolna MAlb 50,2 mg/l ± 0,82 mg/l 1,6 %
Mikroalbumina (mg/l) b) Granica wykrywalności: najmniejsza wykrywalna ilość
MAlb/Kreatynina (mg/g) = 1000 x substratu w badanej próbce różna od zero odpowiada
Kreatynina (mg/l)
stężeniu 0,7 mg/l MAlb.
gdzie 1000 to współczynnik konwersji kreatyniny mg na g. c) Zakres badania: odpowiada dokładnie ilościowemu
przedziałowi wartości i zakresowi od 4 mg/l do ostatniego
METODA KONTROLI JAKOŚCI punktu kalibracji (250 mg/l około).
Microalbúmina Control 2 niveles Turbitest AA Wiener lab. d) Efekt prozona: nie obserwowano do 2700 mg/l MAlb.

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Wyniki wydajności testu otrzymano przy użyciu analizatora Oznaczenia
automatycznego Konelab 60i. Przy zastosowaniu innych Następujące symbole są zastosowane na opakowaniach
analizatorów automatycznych lub metody manualnej. zestawów odczynników diagnostycznych.
Ten produkt spełnia wymagania Dyrektywy Europej-
PARAMETRY DLA ANALIZATORÓW AUTOMATYCZNYCH
Należy zapoznać się z instrukcją oprogramowania danego C skiej 98/79 EC dla wyrobów medycznych używanych
do diagnozy "in vitro"
analizatora automatycznego.
PAutoryzowany przedstawiciel we Wspólnocie Europejskiej
WIENER LAB. DOSTARCZA V Wyrób do diagnostyki "in vitro"
60 ml: 1 x 50 ml Odczynnik A
1 x 10 ml Odczynnik B X Zawartość wystarczająca dla <n> badań
(Nr kat. 1513266) Użyć przed
H
60 ml: 1 x 50 ml Odczynnik A
1 x 10 ml Odczynnik B l Ograniczenie dopuszczalnych temperatur

(Nr kat. 1009338)  Nie zamrażać

60 ml: 1 x 50 ml Odczynnik A Ryzyko biologiczne
1 x 10 ml Odczynnik B F
(Nr kat. 1009276) Objętość po rozpuszczeniu

60 ml: 1 x 50 ml Odczynnik A Cont. Zawartość

1 x 10 ml Odczynnik B
(Nr kat. 1009656) g numer serii

60 ml: 1 x 50 ml Odczynnik A Wytwórca

1 x 10 ml Odczynnik B M
(Nr kat. 1009966) Substancja szkodliwa

ŹRÓDŁA Substancja żrące

- Collins, AC. et al. - Diabetología 36/10: 993 (1993).
- Sacks et al. - Clin. Chem. 48: 436 (2002). Substancja drażniąca
- Mogensen, CE - J. Intern. Med. 254: 45 (2003).
- American Diabetes Association: Diabetic Nephropathy. Przed użyciem zapoznać się z instrukcją
i
Diabetes Care (Suppl 1) 26: S94 (2003).
- Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Burtis, C.; Ashwood, Calibr. Kalibrator
E. (5ş Edition) WB Saunders, 2001.
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", b Próba kontrolna
AACC Press, 5th ed., 2000.
- CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex- b Próba kontrolna dodatnia
NCCLS) - Protocol EP5-A, 1999.
c Próba kontrolna ujemna

h Numer katalogowy

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Wiener lab.
PM-1102-16 2000 Rosario - Argentina
864117024 / 00 p. 12/12 UR190524