INFORME PRÁCTICA DE LABORATORIO DETERMINACIÓN DE HIERRO POR COLORIMETRÍA

Juan David Aldana, Alan Estévez, Paula Guarnizo, Vladimir Pito, Jhon Suarez.
Estudiantes Facultad de Ingeniería Civil / Universidad La Gran Colombia, Bogotá, Colombia. 2019-2S
e-mail: [email protected]

RESUMEN: Este trabajo propone un método por espectrofotometría derivada para la micro determinación
de hierro a diferentes longitudes de onda y determinar el valor de absorbancia. El complejo Fe(II)- 1,10-
Fenantrolina u Ortofenantrolina fue usado como reactivo cromóforo para formar un complejo naranja, el
cual es retenido y concentrado en unos balones volumétricos de 10 ml. Se incluye una discusión de las
variables experimentales que influyen sobre la retención del complejo sobre los balones volumétricos de
10 ml. Las señales en unidades derivativas fueron medidas directamente en una cubeta para análisis con luz
visible, empaquetada en una celda espectrofotométrica donde determinamos la absorción y amplitudes de
onda. Y por medio de los datos arrojados hallaremos la amplitud de la señal a 508 nm en el complejo Fe(II)-
1,10-Fenantrolina u Ortofenantrolina, y el cual es útil para la determinación cuantitativa de hierro. El
método fue aplicado en la determinación de hierro en el agua subterránea de Samacá - Boyacá y análisis
de hierro (Fe) en el cuerpo humano.

PALABRAS CLAVES:
Hierro Fe(II),fenantrolina, ortofenantrolina, absorción, espectrofotometría, colorimetría.

ABSTRACT: This work proposes a derived spectrophotometry method for small determination of iron at
different wavelengths and determine the absorbance value. The Fe(II)-1,10-Phenanthroline or
Orthophenanthroline complex was used as a chromophoric reagent to form an orange complex, which is
retained and concentrated in 10 ml volumetric balls. It includes a discussion of experimental variables that
influence the retention of the complex on 10 ml volumetric balls. Signals in derivative units were measured
directly in a visible light analysis bucket, packaged in a spectrophotometric cell where we determined
absorption and wave amplitudes. And by means of the data yielded we will find the amplitude of the signal
at 508 nm in the fe(II)- complex 1,10-Phenanthroline or Orthophenanthroline, and which is useful for the
quantitative determination of iron. The method was applied in the determination of iron in the groundwater
of Samacá - Boyacá and analysis of iron (Fe) in the human body.

KEYWORDS:
Iron Fe (II), phenanthroline, orthophenanthroline, absorption, spectrophotometry, colorimetry.
hecho es el principio de los métodos colorimétricos
1. INTRODUCCIÓN donde es posible conocer la cantidad de soluto en una
Existen soluciones que deben su color a la presencia de solución por comparación de su color con el de una serie
iones metálicos. Estas soluciones coloreadas absorben de soluciones que contienen el mismo soluto en
luz en la región visible del espectro electromagnético, cantidades variables y conocidas. Toda esta
lo cual genera que nosotros observemos la luz que no es información es Arrojada por medio de un
absorbida por la solución, ¿Cómo podemos determinar espectrofotómetro y nos daremos cuenta por medio de
esto?. Si nos fijamos el color que vemos es el este informe.
complemento del color absorbido por la solución. Un
ejemplo claro es lo que vamos ha ver en este informe
con el complejo Hierro (II) y el reactivo 1,10-
fenantrolina u ortofenantrolina que absorbe verde y 2. MATERIALES Y METODOLOGÍA
azul, se presenta como una solución color naranja.
Teniendo en cuenta el volumen de estudiantes el grupo fue
dividido en dos grandes grupos. Los cuales efectuaron los
siguientes pasos:
La intensidad del color es una propiedad de las
soluciones, proporcional a la cantidad de soluto. Este
2,1 preparación de patrones de 0,5, 1,2 y 4 ppm de Fe cuarzo con un tamaño promedio de 1cm una los patrones
iniciando con el blanco de reactivo que permita mediante la
Se disponen 4 balones aforados con volumen de 10 ml realización de curvas de calibración de los patrones
debidamente rotulados; a los cuales serán adicionados uno a coloreados se requiere el uso de blancos de reactivos en la
uno alícuotas de 0,5; 1; 2 y 4 respectivamente con medición de absorbancia en la misma longitud de onda de
concentración en Fe correspondiente a 10 ppm. lectura de los patrones realizados anteriormente.
Seguidamente adicionar uno a uno a los patrones 0,1 ml de
hidroxilamina al 10%, 1 ml de acetato de sodio 1M y 1 ml de En cuanto a la muestra problema tras la realización de la
1,10- curva de calibración con el blanco y los patrones se procede
a su lectura en el espectrofotómetro junto al blanco, hay que
Fenantrolina al 0,1% tras dicha adición; continuar poco a tener en cuenta si esta requiere que diluciones posteriores que
poco con agua desionizada hasta el aforo del balón. permita la inclusión en los valores obtenidos de curva de
calibración patrón; así como el ajuste de la misma a través del
método de mínimos cuadrados. Esto con el fin de hallar
mediante la absorbancia obtenida en la lectura
espectrofotométrica, la ley de Lambert Beer (E= A* B*C),
así como el despeje de la Ec. De la recta, la concentración de
Fe en dicha muestra problema y en los patrones realizados;
para su posterior análisis estadístico.

Imagen 1. Ejemplo de Curva de calibración del Fe incluido el blanco,

tomado de: https://es.calameo.com/read/000279659a3e6c7d28e06

2.2Tratamiento de muestra problema

En ocasiones la muestra problema debe ser filtrada si esta

presenta un alto grado de turbidez, en especial cuando se trata
de aguas subterráneas, en este caso el realizar la dilución
directa se adiciona a un balón aforado de 10 ml debidamente
rotulado con ayuda de una pipeta 5ml de dicha muestra; Imagen 2. Ejemplo de Curva de calibración del CuSO4 incluido el blanco
y muestra problema, tomado de:
seguido a esto se procede en la adición de: 0,1 ml de https://www.academia.edu/18330143/Informe_Practica_Colorimetria
hidroxilamina al 10%, 1 ml de acetato de sodio 1M y 1 ml de
1,10-Fenantrolina al 0,1% completando con agua desionizada
hasta el aforo.

2.3 Blanco de reactivos

3.RESULTADOS:
En un balón aforado de 10 ml adicionar, Adicionar 0,1 ml de
hidroxilamina al 10%, 1 ml de acetato de sodio 1M y 1 ml de Los datos que se encuentran a continuación fueron
1,10- Fenantrolina al 0,1% y completar con agua desionizada tomados a partir del análisis de una solución patrón con
hasta el aforo. diferentes ppm de hierro y una longitud de onda de 508
nm, determinando el valor de absorbancia.
Con el fin de obtener una lectura espectrofotométrica veraz
se procede en primera instancia a calibrar el 3.1 Datos recolectados por el Grupo A
espectrofotómetro en la longitud de onda del visible en la cual
que requiere su lectura para el Fe dicha longitud de onda se
encuentra entre los 508-510 nm aproximadamente ,seguido
se dispone a colocar en una celda de plástico, boro-silicato o
 PATRONES

ppm Fe A

0,0 0,102

0,5 0,056

1,0 0,108

2,0 0,218
Tabla 3. Datos de concentración en la muestra
problema A
4,0 0,392

Tabla 1. Registro de absorbancia 1

Pendiente 0,0826 x

Intercepto 0,0513
Gráfica 1

Tabla 2. Determinación de pendiente e intercepto

gráfica 1.

Muestra A ppm

A 0,163 1,455

B 0,180 1,607

C 0,145 1,295

D 0,167 1,491

E 0,182 1,625
 3.2 Datos recolectados por el Grupo B
Gráfica 2
PATRONES

ppm Fe A

0,0 0,091

0,5 0,149

Desviación Estándar: 1,0 0,200

2,0 0,304

4,0 0,480

Tabla 5. Registro de absorbancia 2

Gráfica 3

Pendiente 0,0967 x

Intercepto 0,0998
Tabla 4. Registro de resultados muestra problema A
Tabla 6. Determinación de pendiente e intercepto
gráfica 3.
 C 0,188 1,679

D 0,181 1,616

Promedio:
Tabla 7. Datos de concentración en la muestra
problema B

Desviación Estándar:

Gráfica 4
Tabla 8. Registro de resultados muestra problema
B

4. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

De acuerdo a los datos obtenidos mediante el método de

colorimetría de las muestras de agua con presencia de
hierro, los resultados se analizaron mediante tablas y
gráficas que serán analizadas a continuación.

Muestra A ppm 4.1 Determinación de la concentración de las

réplicas de muestras problema.

A 0,145 1,295 Utilizando la ecuación A = mC+b, se despejó C para

calcular la concentración de hierro en cada muestra
problema A y B, obteniendo los datos de ppm como se
B 0,185 1,652 muestra en las tablas 3 y 7.

C = (A-b) / m
Donde: Se observa gráficamente que la linealidad obtenida es
casi continua, ya que los valores de absorbancia
A = Absorbancia en nm muestran un patrón de crecimiento proporcional con
m = Pendiente respecto a las partes por millón analizadas.
b = Intercepto
4.3.2 Al analizar los datos de la muestra problema del
4.2 Análisis de las gráficas de absorbancia y ppm, grupo B (Tabla 7 – Gráfica 4) presenta linealidad
evaluación de linealidad, determinación de continua con pendiente de 0,112x e intercepto de recta
pendiente e intercepto de recta obtenidos de las de -8E-05. El desfase en la linealidad es casi
muestras del grupo A. imperceptible, a pesar del valor A de absorbancia
mostrado en la tabla 7, donde la muestra sobrepasó el
4.2.1 Al graficar los datos de absorbancia de los porcentaje de agua ionizada requerido, dando al valor
patrones de hierro obtenidos en la primera preparación A, un valor atípico con respecto a los otros resultados
del grupo A (Tabla 1 - Gráfica 1) se genera la linealidad de absorbancia obtenidos.
de pendiente con un valor de 0,0826x y el intercepto de
recta un valor de 0,0513. 4.3.3 La curva de calibración de la muestra problema
del grupo B (Gráfica 4) ayudó a determinar los valores
Se observa que la linealidad presenta un desfase en la de partes por millón (ppm) de cada uno de los valores
absorbancia de la primera alícuota de 0,0 ppm donde el de absorbancia, dados por el espectrofotómetro que se
valor de absorbancia es de 0,102 nm y no genera una ven reflejados en la tabla 7.
continuidad en la gráfica obtenida. Tal vez por un error
en la calibración del espectrofotómetro o exceso de 4.4 Análisis de los resultados obtenidos con base en
agua desionizada que pudo generar un valor desfasado criterios estadísticos.
con la linealidad de los demás patrones.
Se agruparon todos los resultados obtenidos de las
4.2.2 Analizando los datos obtenidos en la muestra muestras de absorbancia y ppm, analizandolos
problema del grupo A (Tabla 3 – Gráfica 2) la linealidad generalmente con base en criterios estadísticos como:
es casi continua donde el valor de pendiente es de
0,1121x y el valor de intercepto es de -0,0002. - Tamaño de la muestra (n)
Observando que el desfase en la linealidad es mínimo - Alcance (A)
con relación a las diferentes muestras problema - Rango (R)
obtenidas. - Intervalo (K)

4.2.3. Con base en la curva de calibración de la muestra

problema del grupo A (Gráfica 2) se obtuvieron los
valores de partes por millón (ppm) de cada absorbancia
obtenida con el espectrofotómetro, datos que se muestra
en la tabla 3.

4.3 Análisis de las gráficas de absorbancia y ppm,

evaluación de linealidad, determinación de
pendiente e intercepto de recta obtenidos de las
muestras del grupo B.

4.3.1 La gráfica de absorbancia de los patrones de hierro

que se obtuvieron en la primera preparación del grupo
B (Tabla 5 – Gráfica 3) presenta una linealidad con
pendiente de 0,0967x y un intercepto de recta de 0,0988.
 - Medidas de tendencia central (Media, mediana, El rango (R) de ppm es R= 4 - 0 = 4
moda) El rango (R) de absorbancia es R=0,48 - 0,056 = 0,424

4.4.1 El tamaño de la 4.4.4 El intervalo (K) está dado por la fórmula

muestra (n) está dado por K=1+3,3*log(n), donde “n” visto anteriormente es el
la cantidad de datos tamaño de la muestra.
obtenidos de cada
análisis. El intervalo (K) de ppm es K=1+3,3*log(14) = 4,78
redondeando el valor a 5

En el tamaño de muestra El intervalo (K) de absorbancia es

(n) de ppm es de 14 K=1+3,3*log(19) = 5,21 redondeando el valor a 5

4.4.5 Diagrama de barras

En el tamaño de muestra (n) de absorbancia es de 19

4.4.6 Medidas de tendencia central
4.4.2 El alcance (A) es el intervalo cerrado cuyos límites
son el menor y mayor de los datos. - La media es el promedio aritmético de los datos.

El alcance (A) de ppm es A=[0;4] La media de ppm es 1,515

El alcance (A) de absorbancia es A=[0,056;0,48] La media de absorbancia es 0,191
4.4.3 El rango (R) se refiere a la longitud del alcance, se
- La mediana es el dato que ocupa la posición central de
calcula restando el menor dato al mayor dato.
todos los datos obtenidos.
 de concentración, trastornos del sueño, dificultad
La mediana de ppm es 1,549 respiratoria y deterioro general.
La mediana de absorbancia es 0,18
4.6 Contraste de resultados con la norma de calidad
- La moda es el intervalo que más se repite. del agua subterránea de Samacá - Boyacá

La moda de ppm es 1,295 En contraste con el análisis realizado en el laboratorio

La moda de absorbancia es de 0,145 de nivel de hierro en el agua, cabe mencionar que
actualmente en el departamento de Boyacá se ha
4.5 Análisis de hierro (Fe) en el cuerpo humano intentado establecer la calidad del agua potable con la
evaluación estática de unos parámetros de control
El hierro en cantidades elevadas en el cuerpo se como; pH, color, olor, hierro total, sustancias flotantes,
denomina hemocromatosis, puede originarse por un turbiedad, nitritos, cloruros, sulfatos,, cloro residual,
desorden genético que lleva a absorber demasiado residual del desinfectante, fluoruros y coliformes
hierro. El exceso de hierro en el organismo se acumula totales. Estas características estáticas no son suficientes
en diferentes órganos del cuerpo que causan daño. Estas para determinar si la calidad del agua para consumo
cantidades elevadas incrementan la producción de humano afecta o no la salud.
radicales libres del oxígeno y favorece el desarrollo de
consecuencias negativas sobre diferentes órganos a Dicho lo anterior y mencionando en el marco legal,
causa del estrés oxidativo que ocasiona síntomas como existen varias normativas que protegen la calidad del
malestar abdominal, náuseas, vómitos, fatiga, debilidad, agua, tanto en Boyacá como en el municipio de Samacá,
pérdida de apetito y vello corporal. que serán citadas a continuación:

Existe una cantidad recomendad de hierro para el - Decreto 1575 de 2007: Por el cual se establece el
cuerpo humano según el rango de edad, que se mide en sistema de protección y control del agua para consumo
mg. Humano.

- Resolución 2115 de 2007: por medio de la cual se

señalan características, instrumentos básicos y
frecuencias del sistema de control y vigilancia para la
calidad del agua para consumo humano.

En cuanto al tratamiento del agua, el municipio cuenta

con una planta de tratamiento tipo compactada que
realiza procesos como aireación, coagulación,
floculación, sedimentación, filtración y desinfección.
Estos procesos relacionados a la determinación de
hierro por colorimetría en el agua realizada en
laboratorio, son realmente complejos, pero en contraste
Por otro lado la falta de hierro en el organismo genera tienen algo en común, que es determinar presencia de
síntomas que reflejan cansancio, astenia, taquicardia, elementos químicos contenidos en el agua, que pueden
sensación de falta de aire, palidez, dolor precordial, perjudicar el consumo humano.
calambres e hipotensión.
El proceso que se asemeja más a la práctica de
La enfermedad más frecuente por falta de hierro es la laboratorio es la aireación, que por medio de un sistema
anemia, que al ser grave puede presentar caída de pelo, de bandejas que contienen carbón activado, logran
fragilidad de las uñas, sudoración, inflamación de la remover de hierro contenido en el agua.
lengua, lesiones en los labios, irritabilidad, disminución
4.7 ¿Cómo determinar la calidad de una muestra de - Strengthening Knowledge and Understanding of
agua según el contenido de hierro presente? Dietary Supplements. (2016). Hierro. 14-10-2019,
de National institutes of Health Sitio web:
Cuando el contenido de hierro en el agua es moderado, https://ods.od.nih.gov/factsheets/Iron-
entre 0,3 - 1,5 ppm, el vertimiento en aguas residuales DatosEnEspanol/
no excede los límites de concentración de hierro - G, Gottau.. (2013). ¿Qué sucede si hay exceso de
permitidos. Por lo tanto la calidad del agua se puede hierro en el organismo?. 14-10-2019, de Vitónica
mejorar con una membrana hermética, que gracias a la Sitio web: https://www.vitonica.com/minerales/que-
presión permite que el aire esté por encima y elimine la sucede-si-hay-exceso-de-hierro-en-el-organismo
posibilidad de oxidación. Este método evita que los - Gobernación de Boyacá. (2009). Mapa de Riesgo de
iones de hierro se oxiden, retardando la mezcla entre el calidad de agua para consumo humano. 14-10-2019,
oxígeno y los iones. de Dirección Técniaca de Salud Pública Sitio web:
https://www.boyaca.gov.co/SecSalud/images/Docu
Si el contenido de hierro en el agua es superior a mentos/Salud_Publica/Ano_2014/AGUA_CONSU
1,5ppm, debe ser tratada mediante aireación y filtración MO_HUMANO/MAPA_RIESGO/MAPA%20DE
que corresponde a: %20RIESGO%20DE%20SAMACA%20.pdf
- Oxidar los iones de hierro. - M. I. Toral, N, Lara, J. Gomez, P. Richter. (2001).
- Dejar que los iones oxidados floculen. Determincación de hierro en fase sólida por
- Eliminar mediante filtración el material floculado del espectrofotometría derivada de segundo orden. 14-
agua potable. 10-2019, de Sociedad Chilena de Química Sitio web:
https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?pid=S0366-
Por otro lado, cuando existen bacterias de hierro en el 16442001000100009&script=sci_arttext
agua, probablemente será ácida. Al ser ácida, se produce
corrosión en las tuberías cuyo resultado son las manchas
de óxido. El agua no puede ser liberada de iones si
contiene bacterias de hierro, estas bacterias deben ser
eliminadas mediante cloración, para evitar la
producción de bacterias y corrosión en las tuberías.

5. CONCLUSIONES:

En relación a lo antes expuesto, el

espectrofotómetro fue la herramienta principal para
realizar la práctica de laboratorio donde se
determinaba la cantidad de hierro de una muestra
por medio de las longitudes honda, se pudo deducir
que cantidad de hierro que se encontraba en las
muestras tomadas del agua subterránea de Samacá-
Boyacá dentro de esta práctica se adquieren los
conocimientos básicos para el manejo del
espectrofotómetro y así mismo se logra construir
una curva de calibración.

6. BIBLIOGRAFÍA: