PRÁCTICA Catalasa

FACULTAD DE CIENCIAS
DPTO. ACAD. BIOLOGÍA, MICROBIOLOGÍA Y BIOTECNOLOGÍA
PRÁCTICA: 5
ACCIÓN DE LA CATALASA SOBRE TEJIDOS VEGETALES,

ANIMALES Y SANGRE SECA
INTRODUCCION
La catalasa es una enzima que se encuentra en las celulas de los animales y los
vegetales, su funcion en este tipo de tejidos es muy importante debido a que dureante el
metabolismo celular se forma una sustancia tóxica para la celula que es el peróxido de
hidrógeno H2O2. La existencia de la catalasa en los tejidos animales se aprovecha para
utilizar el agua oxigenada como desinfectante cuando se echa sobre una herida. Como
muchas de la bacterias patógenas son anaeróbias (mueren en presencia dce
oxigeno),mueren con el desprendimiento de oxígeno que se produce cuando la catalasa
de los tejidos actua sobre el agua oxigenada.
En la industria alimentaria se utiliza para evitar la oxidacion de los alimentos

mediante diferentes técnicas como el envasado al vacio, y tambien utilizando
antioxidantes
Hay antioxidantes naturales, presentes en el organismo, o sintéticos. Los antioxidantes

en los alimentos se definen como preservantes que retardan el deterioro, rancidez o
decolración debida a la oxidación. Despues de que el antioxidante se une al agente
oxidante, este no esta libre para reaccionar con algunos compuestos de los alimentos
y por lo tanto no puede causar su oxidación.
Los antioxidantes pueden ser enzimas que aumentan la velocidad de ruptura de los
agentes oxidantes (radicales libres). Entre ellas se encuentran las enzimas superóxido
dismutasa, glutatión peroxidasa y la catalasa.
La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su función es

convertir el agua oxigenada (H2O2 ) en agua (H20) y oxígeno (O2):
2 H2O2 → 2 H2O + O2
El uso de esta enzima permite alargar la vida útil de zumos de cítricos, cerveza y vino
ya que, al degradar el agua oxigenada (un agente oxidante) en sustancias no reactivas
(agua y oxígeno) se inhiben las reacciones oxidativas sin problemas secundarios.
OBJETIVOS
1. Demostrar la presencia de la enzima catalasa en tejidos animales, vegetales

y en sangre seca.
2. Demostrar el efecto de la temperatura sobre la actividad de la catalasa .
MATERIALES
Proporcionado por el alumno.
 Hígado de pollo
 Papas
 Tomate
 Sangre seca
Proporcionado por el laboratorio
 Baño de agua hirviente

 Mortero
 Tubos de ensayo
 Pipetas de 5ml y 1 ml
 Termómetro
 Vaso de precipitado
 Tijeras
REACTIVOS:
 Agua oxigenada
 Buffer fosfato 0:1 M pH 6.6
 NaOH 2N
 HCl 0.5N
 Agua destilada
PROCEDIMIENTO
PREPARACIÓN DE HOMOGENIZADOS
1. Para preparar el homogenizado, a partir de pedazos de papa, hígado, y tomate

por separado en una licuadora o mortero y moler con un poco de agua hasta
diluir parte de la muestra.
2. Poner cada homogenizado en un tubo de ensayo y además 5 gotas de agua

destilada en otro tubo (Blanco)
3. Con gotero ponga 5 gotas de cada homogenizado en tubos de ensayo de 10x100
mm, añada 3 gotas de peróxido de hidrogeno a cada muestra.
4. Observe y anote los resultados láminas portaobjetos
5. En una muestra seca de agua agregar 1 gota de agua oxigenada.
6. Observar los resultados
DEMOSTRACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LA CATALASA
1. En 3 tubos de ensayo, coloque, por separado.3 ml de cada homogenizado y en

otro tubo 3 ml de agua destilada
2. Haga una marca hasta donde llega cada homogenizado.
3. Ponga 3 ml de peróxido de hidrogeno en cada tubo de ensayo.
4. Observe la reacción por tubo y marque el cambio en líquido.
5. Tabule sus resultados.
EFECTO DE LA TEMPERATURA
1. Rotular 3 tubos de ensayo.

2. Añadir 5 mL de hígado homogenizado a cada uno.
3. Colocar los tubos en las siguientes condiciones:
Tubo 1 = 80°C (poner tubo por 5 minutos)

Tubo 2 = 37°C (poner tubo por 5 minutos)
Tubo 3 = Temperatura ambiental
4. añada 2 ml de peróxido de hidrogeno al tubo 1. Observe los resultados y el
tiempo que tarda en producirse las burbujas.
5. Tome el tiempo inicial al añadiré el peróxido y el tiempo cuando empiece a
producirse las burbujas
6. Repetir con los demás tubos.
7. Grafique sus resultados (tiempo de reacción vs temperatura )
Efecto del pH
1. Rotular 3 tubos de ensayo A – C.

2. Añada 1 cm de homogenado de hígado a cada tubo.
3. Añada 3 cm de HCL 0.5M al tubo A
4. Añada 3 cm de NaOH 2N al tubo B
5. Añada 3 cm de agua al tubo C agite suavemente hasta mezclar
6. Añada 3 cm de peróxido de hidrógeno a cada tubo.
7. Observe y anote las reacciones
DEMOSTRACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LA CATALASA

A tiras de papel que contienen muestras secas de sangre agregar gotas de H2O2
Lectura: si se observa efervescencia indica presencia de la enzima catalasa en los

eritrocitos
Cuestionario
1. ¿Cuál es la relación entre el pH y la actividad enzimática?

2. Las enzimas del estómago funcionan mejor con un pH de 2. ¿Cómo afectaría un
pH de 4 en el estómago a la digestión?
3. ¿De qué otras maneras se le ocurriría se podría probar el funcionamiento o no
funcionamiento de las enzimas estudiadas en el laboratorio?
4. ¿Puede mencionar ejemplos de otras enzimas que actúen en nuestro cuerpo?
5. ¿Qué efecto podría tener una fiebre alta prolongada sobre el funcionamiento de
las enzimas?
6. ¿Puede mencionar alguna condición médica que se deba al malfuncionamiento o
no funcionamiento de una enzima?
7. ¿Qué sucede cuando se pone peróxido de hidrógeno en una herida? ¿Qué
sugiere la evidencia?
8. Explique porque tantas especies producen la enzima catalasa.
9. ¿En qué otras maneras las enzimas son importantes para nosotros?
10. Mencione ejemplos de cosas en nuestro diario vivir que envuelven algún uso de
enzimas

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ACCIÓN DE LA CATALASA SOBRE TEJIDOS VEGETALES,

En la industria alimentaria se utiliza para evitar la oxidacion de los alimentos

Hay antioxidantes naturales, presentes en el organismo, o sintéticos. Los antioxidantes

La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su función es

1. Demostrar la presencia de la enzima catalasa en tejidos animales, vegetales

Proporcionado por el alumno.

Proporcionado por el laboratorio

 Baño de agua hirviente

1. Para preparar el homogenizado, a partir de pedazos de papa, hígado, y tomate

2. Poner cada homogenizado en un tubo de ensayo y además 5 gotas de agua

DEMOSTRACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LA CATALASA

1. En 3 tubos de ensayo, coloque, por separado.3 ml de cada homogenizado y en

1. Rotular 3 tubos de ensayo.

Tubo 1 = 80°C (poner tubo por 5 minutos)

1. Rotular 3 tubos de ensayo A – C.

DEMOSTRACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LA CATALASA

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