Screening Farmacologico

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FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA I
INFORME DE LABORATORIO

INFORME DE LABORATORIO

Asignatura Farmacología I NOTA:


Número de Práctica 06
Fecha de Realización 27/06/2018 Fecha de Entrega 04/07/2018
Achig Diana, Guerrón Mishel, Quiroga
Integrantes Grupo N° 03
Fernanda, Rosero Belén & Suquilanda Viviana

1. TEMA: SCREENING FARMACOLÓGICO Y TEST DE IRWIN

2. OBJETIVOS:

 Observar mediante la utilización de una batería de pruebas fáciles de realizar varios


tipos de actividades de fármacos o extractos vegetales con una gran rapidez y una
cantidad mínima de producto, las cuales podrán completarse con otras técnicas más
selectivas y complejas que confirmen y amplíen los resultados obtenidos.
 Determinar las acciones de un extracto vegetal, un fármaco estimulante y un
depresor de SNC, mediante las pruebas que constituyen el screening farmacológico.
 Determinar si la cantidad utilizada de extracto vegetal funciona como estimulante o
depresor del sistema nervioso central.

3. FUNDAMENTO TEÓRICO:

En el proceso de una investigación farmacológica donde se quiere probar la acción


farmacológica de nuevos compuestos químicos o principios activos que puedan resultar
beneficiosos para la humanidad, es indispensable la realización de un determinado número
de pruebas que permitan establecer un perfil farmacológico general de la sustancia en
cuestión. Para tal fin debe disponerse de “una amplia batería de ensayo de diversas
actividades farmacológicas, a través de las cuales puede ser definido un primer perfil
farmacológico de una sustancia de actividad desconocida. Esto es lo que denominamos una
selección, tamizado, o “screening” farmacológico. Para que estas pruebas sean útiles deben
cumplirse ciertas condiciones como la sencillez de su relación, la utilización de especies de
animales de pequeño tamaño y fácilmente asequible, que no exijan el empleo de
instrumentos complicados y costosos e impliquen un gasto mínimo del compuesto o del
extracto a analizar, que su ejecución sea rápida y que sean suficientemente significativas de
la actividad que se valora (Torres, s.f). Las pruebas mencionadas anteriormente constan de:
test de la catalepsia, reflejo de postura, test de tracción, test de Haffner, fenómeno de Straub,
piloerección, ptosis palpebral, reflejo pineal, reflejo corneal, reflejo de flexión ipsolateral,
lagrimeo, midriasis, actividad motora, conducta, estado de alerta, excitación del SNC,
postura, incoordinación motora, tono muscular, entre otras, las que debidamente
interpretados mediante el test de Irwin por ejemplo se podría catalogar al producto ensayado
con acciones sobre Sistema Nervioso Central, Sistema Nervioso Vegetativo, etc. Luego
pueden completarse esos datos preliminares con ensayos y pruebas más específicos para
determinar la acción con mayor seguridad.
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El sistema nervioso es una estructura enormemente compleja que regula y coordina la


función de los órganos corporales. Se divide fundamentalmente en sistema nervioso central
(SNC) y sistema nervioso periférico. El sistema nervioso periférico está constituido por los
nervios somáticos (eferentes y aferentes) y por el sistema nervioso autónomo (SNA), el cual
produce respuestas involuntarias que pueden ser excitadoras (p. ej., vasoconstricción) o
inhibidoras (p. ej., broncodilatación). El SNA se divide anatómicamente, a su vez, en dos
grandes secciones: el sistema nervioso simpático o adrenérgico, y el sistema nervioso
parasimpático o colinérgico (Raffa, 2008).

Los estimulantes del sistema nervioso central (SNC) son fármacos que ejercen su acción
por excitación no selectiva de dicho sistema. Algunos de los fármacos de este grupo
producen una acción, fuerte, mientras que otros tienen un efecto débil. En el estímulo del
SNC intervienen dos mecanismos: el bloqueo selectivo de la inhibición neuronal y la
excitación neuronal directa. En el primer mecanismo se distinguen dos efectos: (a) el bloqueo
de la inhibición postsináptica y (b) el bloqueo de la inhibición presináptica. La estricnina actúa
por el primer mecanismo y la picrotoxina es el ejemplo de un fármaco que actúa por el
segundo mecanismo. Ambos fármacos, la estricnina y la picrotoxina, aunque se emplean
clínicamente desde hace muchos años, son anticuados; hoy se emplean casi
exclusivamente para investigaciones experimentales. Otros estimulantes del SCN no
bloquean los procesos inhibitorios; por consiguiente, los efectos estimulantes que producen,
resultan de la exaltación de la excitación sináptica. Los estimulantes del sistema nervioso
central se emplean para una gran variedad de fines: tratamiento de los estados de depresión,
mantenimiento de la vigilia o de la actividad y restablecimiento de la respiración o de la
presión sanguínea (Korolkovas, 1983).

Por el contrario la depresión es un estado mediado bioquímicamente, que se basa


probablemente en anomalías del metabolismo de la 5-HT y la noradrenalina. El síndrome
clínico se caracteriza por introversión, irritación, frustración e incapacidad de sentir
sensaciones placenteras. El estado clínico de la depresión (endógena), un trastorno
biopsicológico heterogéneo que presenta predisposición genética, puede ocurrir en cualquier
momento de la vida, sin relación con ningún factor estresante obvio. Precisa tratamiento,
aproximadamente el 15% de estos pacientes comente suicidio. Existen formas graves
(depresión mayor) y leves. Los hallazgos sobre el hecho que los estados clínicos de la
depresión pueden estar relacionados con un desequilibrio de las aminas endógenas (5-HT
o NA) en el SNC conducen a la hipótesis de las aminas como factor etiológico y las
estrategias farmacológicas se encaminan a mejorar su acción en la sinapsis (Castells, 2007).

4. PROCEDIMIENTO

 Cada mesa utilizará 4 ratones, 1 ratón para cada fármaco o planta a ensayar.
 Pesar los ratones y administrar los fármacos o extracto de planta según las dosis o
volúmenes indicados en el cuadro, por vía intraperitoneal.
 Se miden en todos ellos los parámetros indicados en el cuadro a tiempo 0, medida
que sirve de control, luego a los 5, 10, 15, 30 y 60 minutos.
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 Controlar todos los parámetros a los distintos tiempos indicados en el cuadro,


valorándolos de 0 a 4 según la intensidad del efecto observado y comparándolo con
la medida realizada a tiempo cero.

5. CÁLCULOS

RATÓN N°1
- Peso del ratón: 33g

CLORPROMAZINA

- Dosis: 10 mg/Kg
- Concentración: 2,5 mg/mL

10mg 1000g

X 33g

10𝑚𝑔
33 𝑔 𝑥 = 0,33 𝑚𝑔
1000𝑔

2,5mg 1mL

0,33mg X

1 𝑚𝑙
0,33 𝑚𝑔 𝑥 = 0,13 𝑚𝐿
2,5 𝑚𝑔

RATÓN N°2

- Peso del ratón: 35g

ANFETAMINA

- Dosis: 5 mg/Kg
- Concentración: 0,25 mg/mL

5mg 1000g

X 35g

5𝑚𝑔
35 𝑔 𝑥 = 0,18 𝑚𝑔
1mg 1000𝑔 1Ml
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0,25mg 1mL
0,18mg X

1 𝑚𝑙
0,18 𝑚𝑔 𝑥 = 0,70 𝑚𝐿
0,25 𝑚𝑔

RATÓN N°3

- Peso del ratón: 30g

EXTRACTO DE MENTA

- Dosis: 200 mg/Kg


- Concentración: 12 mg/mL

200mg 1000g

X 30g

200𝑚𝑔
30 𝑔 𝑥 = 6,0𝑚𝑔
1000𝑔

12mg 1mL

6,0mg X

1 𝑚𝑙
6,0 𝑚𝑔 𝑥 = 0,50 𝑚𝐿
12 𝑚𝑔

6. RESULTADOS
Tabla 01. Resultados de la Acción Farmacológica del Medicamento

TIEMPO (min)
PARAMETROS
Normal
5 10 15 30 60
RATÓN
12 3 1 2 3 1 23 1 23 1 23
ESTADO DE ALERTA:
3 0 0 0
Alerta 4 4 4 0 4 0 4 0 4 0 3 1
1 0 0 0
Ubicación visual 4 4 3 1 4 0 4 2 4 2 3 3
0 0 0 0
pasividad 0 3 3 0 3 0 4 0 4 1 3 1
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ESTADO DE ANIMO:
Autoacicalamiento 4 0 4 3 0 4 1 0 4 2 0 4 3 0 4 4
Vocalización 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Intranquilidad 0 0 4 0 0 4 0 0 4 0 0 4 0 0 4 0
Irritabilidad 0 0 4 0 0 4 0 0 4 0 0 4 0 0 4 0
Temor 0 0 4 0 0 4 0 0 4 0 0 4 0 0 4 0

ACTIVIDAD MOTORA:
Reactividad 4 2 4 0 0 4 2 0 4 3 0 4 3 0 4 3
Actividad espont. 4 1 4 0 0 4 2 0 4 3 0 4 3 0 4 3
Respuesta al dolor 4 0 4 0 0 4 2 0 4 2 0 4 2 0 4 2

EXCITACIÓN DEL
SNC:
0 0 4 1 0 4 0 0 4 0 0 0 0 0 3 0
Respuesta al espanto
0 3 4 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0
Sacudida de cola
0 0 2 2 0 2 2 0 0 2 2 0 1 0 2 2
Temblores
0 2 2 1 1 2 0 2 0 1 1 2 1 2 2 0
Contracciones
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Convulsiones
POSTURA:
Postura corporal
4 2 4 3 3 4 3 0 4 3 0 4 4 0 4 4
Posición
4 2 4 3 1 4 2 0 4 2 0 4 3 0 4 3
extremidades
INCORDINACION
MOTORA:
Marcha vacilante 0 4 0 2 4 0 2 4 0 2 4 0 3 4 0 3
Marcha anormal 0 4 0 2 4 0 2 4 0 3 4 0 1 4 0 1
TONO MUSCULAR
Extremidades 4 2 4 2 0 4 2 0 4 2 0 4 2 0 4 2
Fuerza prensil 4 3 4 2 0 4 2 0 4 3 0 4 3 0 4 0
Encorvamiento corp. 0 0 3 3 0 3 4 0 3 4 0 3 4 0 3 4
Tono corporal 4 3 4 0 0 4 2 0 4 2 0 4 2 0 4 3
Tono abdominal 4 2 4 2 3 4 2 3 4 2 3 4 2 3 4 3
Ratón normal 4 0 0 0 4 0 0 4 0 0 4 0 0 4 0 0
TEST DE
CATALEPSIA:
4 1 4 1 0 0 1 0 0 1 0 0 1 0 0 0
Ratón cataléptico
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Ratón normal
REFLEJO DE
POSTURA:
4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4
Ratón normal
TEST DE TRACCIÓN:
Ratón normal 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4

TEST DE HAFFNER:
Ratón normal 4 4 4 1 4 4 1 4 4 2 4 4 2 4 4 2
TEST DE STRAUB 0 0 2 1 0 2 2 0 3 0 0 3 0 0 3 0
PILOERECCIÓN 0 0 2 1 0 2 2 0 3 2 0 3 2 0 3 3
PTOSIS PALPEBRAL 0 0 0 1 3 0 2 3 0 0 2 0 0 2 0 0
REFLEJO PINEAL 4 4 4 0 4 4 0 4 4 0 4 4 0 4 4 0
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REFLEJO CORNEAL 4 4 4 2 4 4 3 4 4 3 4 4 4 4 4 3
REFLEJO DE
4 4 4 0 4 4 2 4 4 2 4 4 3 4 4 3
FLEXIÓN
LAGRIMEO 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
MIDRIASIS 0 0 3 0 0 3 0 0 4 0 0 4 0 0 4 0
Elaborado por: Grupo 03

7. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

 La suministrar al ratón 1 de 33 g con 0,13 mL de clorpromazina, el ratón presenta


temperatura del cuerpo más bajo, no hay respuesta al realizar pruebas del dolor
como en el test de Haffner, el reflejo corneal es positivo, catalepsia es positivo, reflejo
de enderezamiento es más o menos positiva, el ratón no reacciona al reflejo pineal,
no hay respuesta al espanto, el ratón no responde al test de tracción pues cae de la
cuerda de una manera rápida sin que trate de sujetarse, entre otros; esto debido a la
acción de la clorpromazina que actúa sobre el sistema nervioso central y puede
producir: somnolencia, mareos y disminución de la capacidad de reacción (Flórez, J.
1997).
 La clorpromazina es un antagonista de los receptores dopaminérgicos D2 y similares
(D3 y D5) y, a diferencia de otros fármacos del mismo tipo muestra una alta afinidad
hacia los receptores D1. El bloqueo de estos receptores induce una reducción de la
transmisión neuroléptica en el cerebro anterior. La dopamina incapaz de unirse a sus
receptores experimenta una retroalimentación cíclica que estimula a las neuronas
dopaminérgicas para que liberen más neurotransmisor, lo que se traduce en un
aumento de la actividad dopaminérgica neural en el momento en el que se administra
la clorpromazina. Posteriormente, la producción de dopamina disminuye
sustancialmente siendo aclarada de la hendidura sináptica y como consecuencia,
reduciéndose la actividad neuronal. Adicionalmente, la clorpromazina bloquea los
receptores serotoninérgicos 5-5HT1 y 5-HT2 lo que induce efectos ansiolíticos y
antiagresivos y una atenuación de los efectos extrapiramidales. (Davis J, Casper R.
2006).
 Al suministrar al ratón 2 de 35 g 0,70 mL de anfetamina se pudo observar un mayor
estado de ánimo, alerta, asustadizo, intranquilidad y muy activo, el ratón fue sometido
a varios test de los cuales responde a varias de ellas como es el caso de: test de
catalepsia donde el ratón reacciona de manera rápida ante la manipulación de su
extremidad normal al manipularlo con el esfero, test de alerta el cual el ratón muestra
un estado de alerta muy alto, no se muestra pasivo, es agresivo, intranquilo, irritable,
se auto acicala muy temeroso; el ratón presenta una fuerza prensil puesto que es
sometido al test de tracción el cual responde con una actitud muy positiva, test de
Haffner el cual con una pinza se presiona la cola y el ratón reacciona al estímulo del
dolor normal, entre otros; esto debido a que la anfetamina suministrada a dicho ratón
es un agente adrenérgico sintético, potente estimulante del Sistema Nervioso
Central, el cual causa cambios conductuales como es: aumento del estado de alerta,
comportamiento agresivo y violento, aumento de energía y actividad motora,
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aumento en la seguridad y confianza, disminuye el sueño, disminuye la fatiga,


aumenta la velocidad de pensamiento y lenguaje, aumento en la presión arterial,
aumento en la frecuencia cardiaca, aumento en la temperatura corporal, estimulación
de la corteza cerebral desincronización en el Electro Encefalograma (E.E.G.),
disminución del sueño; la anfetamina es un agonista directo de los receptores
presinápticos para noradrenalina (NA) y dopamina (DA) a nivel del sistema nervioso
central, la anfetamina se une a estos receptores y los activa, induciendo la liberación
de los neurotransmisores de reserva alojados en las vesículas de las terminales
nerviosas, convirtiendo los respectivos transportadores moleculares en canales
abiertos (Quijada J.2012).
 Al suministrar al ratón 3 0,50 mL de extracto de menta se pudo notar que el ratón al
cabo de 15 minutos se torna tranquilo relajado, no presente indicios de agresividad,
presenta poco estímulos de dolor al someterlo a las pruebas, pierde un poco su
fuerza prensil, aunque al cabo de sesenta minutos el ratón empieza a recuperarse a
diferencia del resto, esto debido a que la menta posee acciones farmacológicas que
actúan en el sistema nervioso con una acción relajante.

8. CONCLUSIONES

 Mediante la serie de pruebas se observó los tipos de actividades de los fármacos o


extractos en:

- Test de Catalepsia: El ratón con extracto de menta y con anfetamina


recuperan su posición normal inmediatamente mientras que el ratón que se
administró clorpromazina no ocurre esto.
- Reflejo de Postura: El ratón con extracto de menta y anfetamina se
restablece de inmediatamente mientras que el ratón que se administró
clorpromazina no recupera su posición rápidamente.
- Test de Haffner: Los medicamentos que estimulas el SNC hacen que el ratón
se de vuelta y chille como en el caso del ratón con anfetamina, el ratón con
clorpromazina no presenta este reflejo.
- Reflejo Pineal: La anfetamina hace que este reflejo no se pierda mientras
que este reflejo es negativo para el ratón que fue administrado con
clorpromazina y con extracto de menta.
- Reflejo de Flexión Ipsolateral: El ratón administrado clorpromazina no
flexiona rápidamente su pata, mientras que el ratón con extracto de menta
tarda en hacerlo.
- Estado de Alerta: El ratón se encuentra en alerta al percibir nuestra mano
menos en el caso de depresión del SNC.

 La anfetamina funcionó como estimulantes del sistema nervioso central pues


mediante el screening mostraron estados de hiperactividad un estado de alerta más
grande respecto mientras que la clorpromazina actúa como un depresor del sistema
nervioso central y del extracto de menta.
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 La cantidad de extracto de menta funcionó como depresor del sistema nervioso


central esto debido a que en las pruebas realizadas el ratón mostro un estado de
pasividad.

9. CUESTIONARIO

 ¿Podría especificar en base a los resultados la acción farmacológica de los


extractos utilizados?

ANFETAMINA: La anfetamina es un agonista indirecto de los receptores


presinápticos para noradrenalina (NA) y dopamina (DA) a nivel del sistema nervioso
central. La anfetamina se une a estos receptores y lo activa, induciendo la liberación
de los neurotransmisores de reserva alojados en las vesículas de las terminales
nerviosas, convirtiendo los respectivos transportadores moleculares en canales
abiertos. También tiene una acción agonista serotoninérgica, aunque relativamente
más débil. Al administrar anfetamina se pudo observar un mayor estado de ánimo,
alerta, intranquilidad y muy activo. En base a estos resultados obtenidos en esta
práctica se puede concluir que la cafeína tiene efectos estimulantes en el Sistema
Nervioso Central, efectos en el sistema cardiovascular, efectos en las funciones
renales, efectos en el sistema respiratorio, efectos en los músculos, efectos en el
sistema gastrointestinal y efectos en el metabolismo energético.

CLORPROMAZINA: Mediante los resultados obtenidos en esta práctica se logró


determinar la acción farmacológica de este medicamento en cual actúa sobre el
sistema nervioso central produciendo una somnolencia, pasividad e incapacidad para
realizar tareas de destreza puesto que no presenta reflejos de flexión ipsolateral,
corneal, postura e incoordinación motora. En base a estos resultados se puede
concluir con mucha veracidad que este fármaco tiene acción depresora del Sistema
Nervioso Central y tiene acciones farmacológicas tanto como: ansiolítico,
antiemético, sedante y antipsicótico.

EXTRACTO DE PLANTA (MENTA): La menta, la parte de esta planta que se


utilizada con fines medicinales es la hoja y de los principios activos de la menta
podemos destacar el mentol, el cineol o el limoneno y sus flavonoides, fenoles y
taninos. Todos estos componentes son los que confieren a la menta sus cualidades
terapéuticas. Debido a sus efectos energéticos, el aceite de menta es utilizado para
controlar el estrés y tratar los trastornos nerviosos y la fatiga mental. Estudios
sugieren que el aceite esencial podría tener un efecto similar a los psicoestimulantes,
según demuestra un estudio realizado con ratones. Además de estos beneficios a la
salud, el aceite de menta también puede usarse como repelente natural de insectos.
La frescura que brinda la menta también puede ayudar a aliviar la comezón
ocasionada por los insectos, al bloquear la sensación.
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En esta práctica se obtuvo acción farmacológica muy similar a la de la cafeína y no


alcanzo el estado propiamente dicho de este extracto, un factor importante para que
no se lleve al cabo dicha función alucinógena se pudo deber a la cantidad de solución
administrada. En conclusión, la menta posee acciones farmacológicas estimulantes
del Sistema Nervioso Central.

10. REFERENCIAS Y BIBLIOGRAFÍA

 Castells, S., Hernández, M. (2007). Farmacología en Enfermería. España: Elsevier.


 Davis J, Casper R. (2006). Clorpromazina. Obtenido de:
http://www.iqb.es/cbasicas/farma/farma04/c137.htm
 Flórez, J. (1997). Farmacología Humana 3ª edición. Ed. Panamericana S. A
 Korolkovas, A., Burckhalter, J. (1983). Compendio esencial de química farmacéutica.
España: Reverté.
 Quijada, J. (2012). Anfetaminas en el Sistema Nervioso. Obtenido de:
https://prezi.com/jxcurfe-lswa/anfetaminas-en-el-sistema-nervioso/
 Raffa, B., Rawls, S. y Portyansky, E. (2008).Netter Farmacología Ilustrada. España:
Elsevier Masson.
 Samaniego, E. (2014). Fundamentos de Farmacología, Editorial Universitaria.
Traynor y Elliot, (2007). Sistema Opiáceo. Obtenido de: https://www.news-
medical.net/news/2007/10/15/26/Spanish.aspx
 Torres, N., Mrad de Osorio, L. (s.f). Selección de la actividad farmacológica del
extracto etéreo purificado de las flores de Spilanthes Americana. Obtenido de:
http://www.ciencias.unal.edu.co/unciencias/data-file/farmacia/revista/V17P5-20.pdf
 Velasco, A. (1998). Compendio de Psiconeurofarmacología. España: Díaz de
Santos.

ANEXOS

Figura N°01. Administración


del fármaco Clorpromazina

Figura N°01. Administración del Figura N°02. Diferencia del efecto


fármaco Clorpromazina producido por Clorpromazina (ratón
inferior) y Anfetamina (ratón superior)
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