Diagnóstico de Rabia Humana

DIAGNÓSTICO DE RABIA HUMANA
CLÍNICO LABORATORIO
TOMA DE MUESTRA:
Paciente con:
Improntas de cerebro, líquido cefalorraquídeo, porciones
 Antecedente de lesión por agresión o contacto con un animal de médula o cerebelo
potencialmente transmisor de rabia PRUEBAS VIROLÓGICAS:
 Contacto con material biológico infectado con el virus rábico
 Inhalación de aire cargado con virus rábico o trasplante reciente
DETECCIÓN DE AG RÁBICO POR IFD:
de órganos, que presente cuadro neurológico agudo
caracterizado por uno o más de los siguientes síntomas: FUNDAMENTO: El anticuerpo principalmente responsable de la tinción en la prueba de
Sensación de angustia, ansiedad, hiperactividad, fiebre, cefalea, inmunofluorescencia directa (IFD) es aquel dirigido contra el antígeno de la nucleocápside
irritabilidad, miedo, depresión, delirio o alucinaciones, del virus. El anticuerpo marcado con un fluorocromo reacciona con el antígeno específico
sentimientos de violencia, ganas de atacar, períodos de cuya presencia se quiere determinar y se observa el resultado de la reacción con un
hiperexcitabilidad, alternados con períodos de tranquilidad y microscopio de fluorescencia. El fluorocromo usado para marcar los anticuerpos es el
lucidez, hidrofobia (horror al agua), paresia o parálisis, isotiocianato de fluoresceína y el anticuerpo marcado se denomina CONJUGADO.
parestesias, contracturas, espasmos de los músculos de la
deglución, convulsiones, coma, parálisis de los músculos RESULTADO: La impronta teñida con CRN + conjugado muestra un campo oscuro con
respiratorios y muerte. células nerviosas, en cuyo interior o exterior, se observan estructuras redondeadas
(corpúsculos rábicos) o pequeños puntos de color verde limón. En el lado de la impronta
teñida con CVS + conjugado, no deberá observarse fluorescencia de color verde limón.
CORRELACIÓN: Permite verificar la presencia de la partícula viral en la muestra.
ENSAYO BIOLÓGICO POR INOCULACIÓN EN RATONES:
FUNDAMENTO: Se utilizan ratones albinos suizos cepa Balb-C debida a su susceptibilidad,

pureza y facilidad de criarlos en el laboratorio. Los ratones son susceptibles a cualquier
edad. Sin embargo, se recomienda emplear ratones de 21 días y de 11 a 14 g de peso, por
su fácil manejo en el momento de la inoculación.
RESULTADO: Generalmente los ratones inoculados con muestras positivas empiezan a

manifestar los primeros síntomas a partir del décimo al décimo segundo día de inoculación.
Primero mostrarán erizamiento, seguido de parálisis progresiva, postración y muerte.
CORRELACIÓN: Esta prueba permite verificar la presencia de la partícula viral en el cerebro

de los ratones a los cuales se les inoculo, confirmando la presencia del virus en la muestra
problema.
PRUEBA DE SERONEUTRALIZACIÓN PARA LA DETERMINACIÓN DE ANTICUERPOS ANTIRRÁBICOS
FUNDAMENTO: Este método determina la cantidad de anticuerpos presentes en el suero y se basa en la

neutralización de una serie de diluciones de suero con una dosis constante de un virus de desafío previamente
titulado. Los resultados son expresados en términos de títulos serológicos definidos como la dilución más elevada
que neutraliza una cantidad estándar de virus.
RESULTADOS: Calcular el punto final del 50% con la fórmula de Reed-Meunch del suero de referencia
internacional y los sueros problema. El Comité de Expertos de la OMS sobre rabia indica la necesidad de recibir
inmunización de refuerzos cuando el título baja de 0,5 UI/mL.
CORRELACIÓN: Su determinación es de gran utilidad para conocer el estado inmune tanto del hombre como de
los animales, para establecer el diagnóstico de la enfermedad y para realizar estudios sero-epidemiológicos.
Método Rápido de inhibición de focos fluorescentes (RIFFT)
FUNDAMENTO: Consiste en incubar diluciones sucesivas de los sueros a titular y un suero de referencia cuyo
título en UI/ ml es conocido, con una dosis constante de virus. A continuación se agrega una suspensión de células
sensibles (BHK o BSR). Después de 24hs de incubación se podrá apreciar la diferencia en el número de focos de
infección entre las celdillas que recibieron el suero de referencia y aquellas que han recibido los sueros
desconocidos.
RESULTADOS: La disminución del título infeccioso permite calcular el título de los sueros desconocidos por
comparación con el suero de referencia.
CORRELACIÓN: Permite conocer el título infeccioso en el cual se encuentra la enfermedad.
MÉTODO INMUNOENZIMÁTICO (ELISA)
FUNDAMENTO: La técnica inmunoenzimática permite la detección de anticuerpos antiglicoproteína del virus rábico
en suero o plasma del hombre. Las muestras de suero son depositadas en celdillas de una fase sólida sensibilizada
con la glicoproteína y la presencia de anticuerpos se revela con el agregado de un conjugado enzimático. La
titulación en paralelo de un suero de referencia cuyo título en UI/ml es conocido permite, por comparación de
densidades ópticas, apreciar la concentración de anticuerpos de cada muestra desconocida.
RESULTADOS:
CORRELACIÓN: Permite verificar la presencia de anticuerpos contra el virus de la rabia.

MÉTODO DE CONTRAINMUNOELECTROFORESIS
FUNDAMENTO: Se basa en la unión de los anticuerpos antirrábicos presentes en diluciones variables de un suero
problema con una cantidad constante de antígeno (virus rábico inactivado). La reacción se pone en evidencia
mediante una corrida electroforética simultánea de las mezclas antígeno-anticuerpo y de un suero antirrábico
hiperinmune (suero indicador), corriendo virus rábico (con carga negativa) hacia el polo positivo. La presencia de
bandas de precipitación indica que no hay anticuerpos antirrábicos en el suero problema, por lo cual el antígeno
libre reacciona con el suero indicador.
RESULTADOS:
CORRELACIÓN:
PRUEBAS HISTOPATOLÓGICAS:
MÉTODO DE MANN
FUNDAMENTO: Este método clásico produce secciones de coloración permanente, con una excelente
diferenciación de los corpúsculos de Negri.
RESULTADOS: : Corpúsculos de Negri, color bermellón; nucléolos de las neuronas, violeta rojizo; cromatina, azul;
células, azul oscuro; estroma, azul pálido; eritrocitos, color rosa.
CORRELACIÓN:
PRUEBAS MOLECULARES:
TIPIFICACIÓN ANTIGÉNICA
SECUENCIACIÓN GENÉTICA (PCR)

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DIAGNÓSTICO DE RABIA HUMANA

CORRELACIÓN: Permite verificar la presencia de la partícula viral en la muestra.

ENSAYO BIOLÓGICO POR INOCULACIÓN EN RATONES:

FUNDAMENTO: Se utilizan ratones albinos suizos cepa Balb-C debida a su susceptibilidad,

RESULTADO: Generalmente los ratones inoculados con muestras positivas empiezan a

CORRELACIÓN: Esta prueba permite verificar la presencia de la partícula viral en el cerebro

FUNDAMENTO: Este método determina la cantidad de anticuerpos presentes en el suero y se basa en la

Método Rápido de inhibición de focos fluorescentes (RIFFT)

CORRELACIÓN: Permite conocer el título infeccioso en el cual se encuentra la enfermedad.

MÉTODO INMUNOENZIMÁTICO (ELISA)

CORRELACIÓN: Permite verificar la presencia de anticuerpos contra el virus de la rabia.

SECUENCIACIÓN GENÉTICA (PCR)

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