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    Ensayo de Citotoxicidad PDF

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    Tiffany Alexandra Cuan Escobar
    Este documento presenta los resultados de un bioensayo de citotoxicidad realizado por 4 equipos para evaluar la actividad citotóxica del cisplatino en líneas celulares de cáncer de mama (MCF7) y próstata (PC3). Los resultados incluyen gráficas de absorbancia y viabilidad celular vs concentración de cisplatino, así como los cálculos de LC50. Los valores de LC50 obtenidos para MCF7 fueron de 3.37-3.96 μg/ml y para PC3 de 3.39-6.11 μg/ml. El

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    Este documento presenta los resultados de un bioensayo de citotoxicidad realizado por 4 equipos para evaluar la actividad citotóxica del cisplatino en líneas celulares de cáncer de mama (MCF7) y próstata (PC3). Los resultados incluyen gráficas de absorbancia y viabilidad celular vs concentración de cisplatino, así como los cálculos de LC50. Los valores de LC50 obtenidos para MCF7 fueron de 3.37-3.96 μg/ml y para PC3 de 3.39-6.11 μg/ml. El

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    Este documento presenta los resultados de un bioensayo de citotoxicidad realizado por 4 equipos para evaluar la actividad citotóxica del cisplatino en líneas celulares de cáncer de mama (MCF7) y próstata (PC3). Los resultados incluyen gráficas de absorbancia y viabilidad celular vs concentración de cisplatino, así como los cálculos de LC50. Los valores de LC50 obtenidos para MCF7 fueron de 3.37-3.96 μg/ml y para PC3 de 3.39-6.11 μg/ml. El

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    Este documento presenta los resultados de un bioensayo de citotoxicidad realizado por 4 equipos para evaluar la actividad citotóxica del cisplatino en líneas celulares de cáncer de mama (MCF7) y próstata (PC3). Los resultados incluyen gráficas de absorbancia y viabilidad celular vs concentración de cisplatino, así como los cálculos de LC50. Los valores de LC50 obtenidos para MCF7 fueron de 3.37-3.96 μg/ml y para PC3 de 3.39-6.11 μg/ml. El

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    PRÁCTICA 6: BIOENSAYO DE

    CITOTOXICIDAD
    Tiffany Alexandra Cuan Escobar (7º Semestre) A01326963
    Sheccid Daniela López Barrios (7º Semestre) A01364601
    José Antonio Torres Arenas (8º Semestre) A01327358
    Francisco Javier Sánchez Sumano (7º Semestre) A01273217
    INTRODUCCIÓN

    Figura 2. Carcinoma de mama. (Cambará, P.,2016)


    Figura 1. Línea celular MCF-7. (Altogen, s/f)
    Figura 4. Línea celular PC3. (Altogen, s/f)

    Figura 3. Cáncer de próstata. (ottho, A., 2018)


    Cisplatino

    Figura 5. Estructura química del


    Cisplatino (Velázquez,L., 2018)

    Figura 6. Tipos de cáncer. (Nutricioni., 2019)


    Figura 7. Mecanismo de acción de cisplatino. (Velázquez,L., 2018)
    OBJETIVOS E HIPÓTESIS

    GENERAL:

    *Aprender a realizar y analizar datos de bioensayos de citotoxicidad.

    ESPECÍFICOS:

    *Conocer las líneas celulares PC3 y MCF7.

    *Realizar conteo celular.

    *Saber utilizar material como la cámara de Neubauer, lector de microplacas, microscopio invertido,
    etc.

    HIPÓTESIS: El agente citotóxico cisplatino inhibe la proliferación de células cancerígenas en


    las líneas celulares PC3 y MCF7.
    ESTRATEGIA EXPERIMENTAL (DIAGRAMA)
    RESULTADOS
    EQUIPO 1

    Gráfica 1. Gráfica de Abs vs Concentración de Cis platino en Gráfica 2. Gráfica de % de viabilidad vs concentración de Cis platino
    células PC3. Factor de dilución 1:1. en células PC3. Se puede observar la ecuación de la recta resultante
    para calcular el Lc 50. Se obtuvo un Lc 50 de 6.11, esto quiere decir
    que a esa concentración a una dilución de 1:1, se inhibe el 50% de la
    población de células de PC3.
    EQUIPO 2

    Gráfica 3. Gráfica de Abs vs Concentración de Cis platino en Gráfica 4. Gráfica de % de viabilidad vs concentración de Cis platino
    células MCF7. Factor de dilución 1:3. en células MCF7. Se puede observar la ecuación de la recta resultante
    para calcular el Lc 50. Se obtuvo un Lc 50 de 3.37, esto quiere decir
    que a esa concentración a una dilución de 1:3, se inhibe el 50% de la
    población de células de MCF7.
    EQUIPO 3

    Gráfica 5. Gráfica de Abs vs Concentración de Cis platino en Gráfica 6. Gráfica de % de viabilidad vs concentración de Cis platino
    células PC3. Factor de dilución 1:5. en células PC3. Se puede observar la ecuación de la recta resultante
    para calcular el Lc 50. Se obtuvo un Lc 50 de 3.39, esto quiere decir
    que a esa concentración a una dilución de 1:5, se inhibe el 50% de la
    población de células de PC3.
    EQUIPO 4

    Gráfica 7. Gráfica de Abs vs Concentración de Cis platino en Gráfica 8. Gráfica de % de viabilidad vs concentración de Cis platino
    células MCF7. Factor de dilución 1:5. en células MCF7. Se puede observar la ecuación de la recta resultante
    para calcular el Lc 50. Se obtuvo un Lc 50 de 3.96, esto quiere decir
    que a esa concentración a una dilución de 1:5, se inhibe el 50% de la
    población de células de MCF7.
    DISCUSIÓN DE RESULTADOS

    MCF7 PC3

    LC50 3.37 Y 3.96 ug/ml LC50 6.11 Y 3.39 ug/ml

    Teórico 6.6 ug/ml Teórico 5.3 ug/ml

    Experimental 2.65 ug/ml, 2.33 ug/ml y 2.63ug/ml Experimental 3.37 ug/ml, 3.33 ug/ml y 3.80ug/ml

    Tiempo estandarizado de ensayo 96 horas. Tiempo estandarizado de ensayo 72 horas.


    ANOVA MCF7

    Equipo 2

    Equipo 4
    ANOVA PC3

    Equipo 1

    Equipo 3
    Fisher MCF7
    Fisher PC3
    Correlación %viabilidad, ug/ml MCF7
    Correlación %viabilidad, ug/ml PC3
    Factores importantes:

    -Ajuste de volumen
    -Manejo de la
    herramienta (pipeta)
    -Técnica de pipeteo
    -Mezclar
    CONCLUSIONES

    ● La variación del ensayo se puede deber a los siguientes factores: el factor de dilución, el tiempo de
    incubación, el pipeteo .
    ● El promedio de % de viabilidad para la línea celular MCF7 para las concentraciones altas fue de
    11.95 y para las concentraciones mínimas fue de 75.5.
    ● El promedio de % de viabilidad para la línea celular PC3 para las concentraciones altas fue de
    6.045 y para las concentraciones mínimas fue de 93.24.
    REFERENCIAS
    Arencibia, D., Rosario, L. & Curveco, D. (2003). Principales ensayos para determinar la citotoxicidad de una sustancia, algunas consideraciones y su utilidad. 5 de octubre del 2019, de Revista
    de Toxicología en Línea Sitio web:
    https://www.researchgate.net/profile/Daniel_Arencibia/publication/242644724_Principales_ensayos_para_determinar_la_citotoxicidad_de_una_sustancia_algunas_consideraciones_y_su_utilida
    d/links/0deec5385f44296f6b000000.pdf

    Ávalos, J., Treviño, J., Verde, M., Rivas, C., Oranday, A., Moran, J., Serrano, L. & Morales, M. (2014). Evaluación citotóxica de los extractos etanólicos de Azadirachta indica (A. Juss) sobre
    diferentes líneas celulares. 6 de octubre del 2019, de SciELO Sitio web: http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1870-01952014000300004

    Cambará, P. (2016). Cáncer de mama. 6 de octubre del 2019, de - Sitio web: https://social.shorthand.com/diarioeldeber/n24CZBJS0Y/cancer-de-mama

    Castro, S. (2006). Evaluación de la actividad citotóxica de extracto y fracciones de Isertia laevis empleando líneas celulares derivadas de tumores humanos. 5 de octubre del 2019, de Pontificia
    Universidad Javeriana Sitio web: https://javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis75.pdf

    DSMZ. (s/f). MCF-7. 5 de octubre del 2019, de Leibniz Institute Sitio web: https://www.dsmz.de/collection/catalogue/details/culture/ACC-115?tx_dsmzresources_pi5%5BreturnPid%5D=192

    Hanigan, M. & Devarajan, P. (2003). Cisplatin nephrotoxicity: molecular mechanisms. 6 de octubre del 2019, de Europe PMC Sitio web: http://europepmc.org/articles/PMC2180401

    Rodríguez, M. (s/f). Uso de cisplatino y derivados de platino en quimioterapia. 6 de octubre del 2018, de Universidad Complutense Sitio web:
    http://147.96.70.122/Web/TFG/TFG/Memoria/MARTA%20RODRIGUEZ%20GOMEZ.pdf

    Vademecum. (2018). Cisplatino. 6 de octubre del 2019. Sitio web: https://www.vademecum.es/principios-activos-cisplatino-l01xa01

    Velázquez, L. (2018). Cisplatino y análogo. Visión actual y perspectiva de futuro.. 6 de octubre del 2018, de Universidad de Sevilla Sitio web:
    https://idus.us.es/xmlui/bitstream/handle/11441/82359/TFG.pdf?sequence=1&isAllowed=y

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