UNIVERSIDAD MANUELA BELTRÁN

MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADÉMICA

FORMATO PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO
Fecha: Abril de 2011 Código: GRL-006 Versión: 4.0

INFORMACIÓN BÁSICA

NOMBRE DE LA PRÁCTICA: PRÁCTICA No.

Determinación Cuantitativa de Vitamina C 12
ASIGNATURA: Bioquímica
TEMA DE LA PRÁCTICA: Vitaminas, Titulaciones Redox.
LABORATORIO A UTILIZAR: Laboratorio de Química y Bioquímica
CONTENIDO DE LA GUÍA
OBJETIVOS
 Determinar y comparar cuantitativamente el contenido de vitamina C presente una tableta comercial
mediante una titulación redox.
 Determinar cuantitativamente el contenido de vitamina C presente en una fruta cítrica mediante una
titulación redox.
 Verificar si una tableta comercial de vitamina C y una fruta cítrica aportan el requerimiento diario de
esta vitamina en los humanos.

INTRODUCCIÓN
La práctica siguiente se relaciona con la Determinación Cuantitativa de Vitamina C (Ácido Ascórbico)
presente en una tableta comercial de Vitamina C, mediante una Titulación de Oxidación-Reducción (Redox).
Las Vitaminas son Biomoléculas esenciales para que el ser humano pueda llevar a cabo sus funciones
biológicas, la carencia de ellas conocida como avitaminosis puede ocasionar diversas patologías.
Las vitaminas son biomoléculas relativamente pequeñas que pueden clasificarse en hidrosolubles y
liposolubles.
Los requerimientos diarios de cada vitamina son específicos para cada una de ellas, por esta razón, en esta
práctica determinaremos la cantidad de Vitamina C de una tableta comercial y la compararemos con las
necesidades diarias de esta Vitamina en el ser humano.
Los estudiantes desarrollarán destrezas en la aplicación de un método de análisis químico (Titulación Redox)
en la determinación cuantitativa de Vitamina C.

MARCO TEÓRICO
1. LAS VITAMINAS
Las vitaminas son compuestos orgánicos esenciales que el organismo no es capaz de sintetizar por sí mismo,
y que se requieren en pequeñas cantidades para el metabolismo. La mayoría de las vitaminas son
precursores de coenzimas, en algunos casos son precursores de hormonas o actúan como antioxidantes. Los
requerimientos diarios de las vitaminas varían de una clase a otra y se ven influenciados por la edad, sexo, y
las condiciones fisiológicas, tales como el embarazo, la lactancia materna, el ejercicio físico, y la nutrición.
Una dieta sana por lo general cubre los requerimientos diarios de vitaminas. Por el contrario, la desnutrición,
o trastornos de absorción dan lugar a un suministro inadecuado de vitaminas partir del cual se puede
presentar hipovitaminosis, o en casos extremos avitaminosis. Algunos tratamientos médicos como los
antibióticos pueden destruir la flora intestinal, lo que puede conducir a deficiencias de vitaminas(K, B12, H),
debido a la ausencia de las bacterias que las sintetizan. (Alemany. M & Font. S, 1985)
Dado que sólo una pocas vitaminas pueden ser almacenadas (A,D, E, B12), la falta de estas conduce
rápidamente a enfermedades carenciales donde se afectan la piel, las células sanguíneas y del sistema

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nervioso. La deficiencia de vitaminas puede ser tratada mediante la mejora de la nutrición y mediante la
administración de vitaminas en forma de tabletas. Una sobredosis de vitaminas sólo conduce a
hipervitaminosis, con síntomas tóxicos, en el caso de las vitaminas Ay D. Normalmente, el exceso de
vitaminas son rápidamente excretas con la orina.
1.1. CLASIFICACIÓN DE LAS VITAMINAS
Las vitaminas se pueden clasificar en Liposolubles e Hidrosolubles.
Las vitaminas Liposolubles son aquellas que son solubles en grasas y por tanto pueden ser almacenadas en
los tejidos. Este grupo incluye: Vitamina A (Retinol), Vitamina D (Calciferol), Vitamina E (Tocoferol),
Vitamina K (Filoquinona).
Las vitaminas hidrosolubles se solubilizan en agua y su exceso es eliminado fácilmente por la orina.
Este grupo incluye: Vitamina B1 (Tiamina), Vitamina B2 (Riboflavina), Vitamina B3 (Niacina), Vitamina B5
(Ácido pantoténico), Vitamina B6 (Piridoxina), Vitamina B7 (Biotina – Vitamina H), Ácido Fólico, Vitamina B12
(Cobalamina), y Vitamina C (Ácido L-ascórbico). (Plumber. D, 1981)
1.2. LA VITAMINA C (Ácido L-Ascórbico).
La vitamina C o Ácido Ascórbico, es una vitamina hidrosoluble esencial (debe ser ingerida con la dieta) para
los humanos, ya que carecen de la carecen de la enzima L-gulonolactona oxidasa (1.1.3.8) que cataliza el
paso final en la conversión de la glucosa en ascorbato.
Entre las funciones más importantes de esta vitamina se destacan:
 Hidroxilación de prolina en la síntesis de colágeno.
 En la degradación de tirosina, la oxidación de p-hidroxifenil piruvato a homogentisato.
 En la síntesis de adrenalina a partir de tirosina en el paso de dopamina beta-hidroxilasa.
 En la formación de ácido biliar.
 La corteza suprarrenal contiene grandes cantidades de vitamina C que se agota con rapidez cuando a
la glándula la estimula por la hormona suprarrenocorticotrópica.
 La absorción de hierro incrementa de manera notable en presencia de vitamina C.
 Actúa como antioxidante y puede inhibir la formación de nitrosaminas durante la digestión.
La deficiencia de esta vitamina puede provocar el escorbuto (síndrome clásico de deficiencia de vitamina C)
que se relaciona con síntesis anormal de colágeno, lo cual se aprecia por hemorragias subcutáneas y en otras
áreas, debilidad muscular, hinchazón de áreas blandas de encías y aflojamiento de dientes y se cura por
consumo de frutas y vegetales frescos. Las reservas normales de vitamina C son suficientes para 3 a 4meses
antes de que aparezcan signos de escorbuto.
La vitamina C es especialmente abundante en frutas cítricas como la naranja, el limón y la mandarina, la
guayaba y verduras como los tomates. La vitamina C presente en las frutas y verduras se destruye en su
mayoría al cocinarlas por lo que es recomendable consumir estos alimentos crudos.
2. TITULACIÓN DE UNA SOLUCIÓN
Una Titulación es un método Volumétrico que tiene como principal objetivo la determinación de la
concentración desconocida de una solución (Analito), mediante la adición de pequeños volúmenes de una
segunda solución de concentración conocida (Valorante).
2.1. TITULACIÓN REDOX
Las titulaciones REDOX, se fundamentan en una clase de reacciones Químicas en las que hay una
transferencia de electrones entre los reactivos involucrados en dos procesos simultáneos: la Oxidación y la
Reducción.

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En la Oxidación hay pérdida de electrones, lo cual hace que una especie química tienda a tener un estado de
oxidación positivo.

En la Reducción hay ganancia de electrones, lo cual hace que una especie química tienda a tener un estado
de oxidación negativo. (Devlin T.M, 2009)

En las reacciones Redox deben existir dos clases de especies químicas:

 AGENTE REDUCTOR: Pierde o dona electrones y se oxida. Su estado de oxidación tiende a ser positivo.
 AGENTE OXIDANTE: Gana o acepta electrones y se reduce. Su estado de oxidación tiende a ser negativo.

El Ácido Ascórbico es un potente reductor, pierde con facilidad átomos de hidrógeno y es oxidado por un
oxidante suave como una disolución de yodo y se transforma en Ácido deshidroascórbico (Figura 1).

HO HO
O O
O O
HO - +
HO
+ H2O + I3- + 3I + 2H

HO OH O O
Ácido Ascórbico Ácido Deshidroascórbico
Figura 1: Oxidación del Ácido Ascórbico.

Para llevar a cabo dicha reacción vamos a utilizar en esta práctica, como agente oxidante el yodo generado
por la reacción de los iones yoduro y yodato. El punto final se pone de manifiesto con almidón.
Las reacciones implicadas en el proceso son (Figura 2).

OXIDACIÓN DEL ÁCIDO ASCÓRBICO

IO3- + 8I- + 6H+ 3 I 3- + 3 H 2O
Yodato Yoduro Hidronio Yoduro Agua

3 C 6 H8 O 6 + 3I3- 3 C 6 H6 O 6 + 9I- + 6H+

Ácido Ascórbico Yoduro Ácido Deshidroascórbico Yoduro Hidronio

REACCIÓN GLOBAL
-
IO3 + 3 C 6 H8 O 6 3 C 6 H6 O 6 + I- + 3 H 2O
Yodato Ácido Ascórbico Ácido Deshidroascórbico Yoduro Agua

Figura 2: Oxidación del Ácido Ascórbico / Reacción Global.

El yodo molecular es poco soluble en agua; el ionI3-presenta una solubilidad considerablemente superior y
ésta es la especie utilizada habitualmente como agente valorante. Para prepararla, se emplea un volumen
conocido de disolución de yodato en presencia de un exceso de yoduro y medio ácido fuerte (ácido sulfúrico)
(Lehninger M, 2005).

El punto final de la valoración es determinado con una solución de almidón. La primera gota de IO3- en
exceso, después del punto de equivalencia, provoca que la disolución se vuelva de color azul oscuro por
formación de un complejo de adsorción intensamente coloreado, visible aún a concentraciones muy bajas de
yodo.

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CONSULTA PREVIA
1. Teniendo en cuenta la información suministrada en la introducción y en el marco teórico, identifique
para esta práctica las siguientes sustancias: (0,7/5,0)
EL ANALITO EL VALORANTE EL AGENTE REDUCTOR EL AGENTE OXIDANTE

2. Consulte el contenido de vitamina C presente en la siguientes frutas. (0,5/5,0)

NARANJA LIMÓN MANDARINA
VITAMINA C mg/100g
3. Completar la tabla siguiente con la información solicitada. (0,8/5,0)
FUENTE REQUERIMIENTO
VITAMINA FUNCIÓN DE LA VITAMINA PATOLOGÍAS POR CARENCIA
NATURAL DIARIO (mg)

Vitamina C

Vitamina K

4. Se tituló una muestra que contenía una cantidad desconocida de Vitamina C (ácido ascórbico). Durante
la titulación se utilizaron 10 mL de KIO3 0,01 M (Yodato de Potasio).
La reacción entre el KIO3 y el ácido ascórbico se representa mediante la siguiente ecuación química.
COMPLETE Y BALANCEE LA REACCIÓN

+ + +
Yodato de Potasio Ácido Ascórbico Ácido Deshidroascórbico Yoduro de Potasio Agua
Vitamina C

Determine los moles y posteriormente los miligramos de Vitamina C (ácido ascórbico) presentes en la
muestra.Tenga en cuenta la siguiente información y no olvide balancear la ecuación. (2,5/5,0)

n Donde: M es la Molaridad del KIO3

M= n son los Moles del KIO3
L L es el volumen de KIO3 utilizado en la titulación

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RIESGOS Y SEGURIDAD(0,5/5,0)
PELIGROS CONSEJOS DE PRECAUCIÓN
REACTIVO
Frases H Frases P

Ácido Sulfúrico

Yodato de Potasio

METODOLOGÍA
1. Ingreso de los estudiantes a la práctica (Cada uno debe tener sus elementos de bioseguridad: Guantes,
Tapabocas y Bata).
2. Entrega y revisión de la consulta previa.
3. Presentación de Quiz sobre los objetivos, introducción, el marco teórico y la consulta previa.
4. Retroalimentación de consulta previa, la cual incluye aclaración de las posibles dudas que tengan los
estudiantes.
5. Explicación del procedimiento de la práctica por parte del docente.
6. Entrega del material de laboratorio.
7. Desarrollo de la práctica.
8. Puesta en común de los resultados obtenidos, posibles causas de error y conclusiones.
9. Realización y entrega del Informe de Laboratorio.
10. Entrega y revisión del material de Laboratorio.
MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS A UTILIZAR
MATERIALES Y EQUIPOS REACTIVOS MATERIALES ESTUDIANTE
1 Bureta de 25 ml 10 ml Solución KIO30.01M Elementos de Bioseguridad
2 Beaker de 150 ml 2 ml Solución de Almidón al 10% 2 Tableta de Vitamina C
2 Erlenmeyer de 125 ml 0,5g Yoduro de potasio 1 Naranja, limón o mandarina
2 Pipeta aforada de 5 ml 5 ml Ácido sulfúrico 0.3 ml 1 Calculadora
1 Pipeta aforada de 2 ml 1 Paño Absorbente
1 Plancha de calentamiento 1 Bisturí
1 Balanza 1 Vaso desechable
1 Microespátula
2 Pipetas Pasteur
1 Mortero
1 Vidrio de reloj
1 Magneto
1 Pinza para bureta

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PRECAUCIONES Y MANEJO DE MATERIALES Y EQUIPOS. CONSULTA DE EQUIPO ESPECIALIZADO.

 Usar elementos de protección bata, tapabocas, guantes y gafas como requisitos mínimos de seguridad al
ingresar al laboratorio.
 No utilizar la misma pipeta para varios reactivos ya que los contamina.
 No coloque sustancias directamente sobre el plato de la balanza, utilice un vidrio de reloj o el material
indicado.
 Dejar el lugar de trabajo limpio, seco y organizado.
 Lavar cuidadosamente todo el material al iniciar y al finalizar la práctica.

PROCEDIMIENTO A UTILIZAR

DETERMINACIÓN DE VITAMINA C EN UNA TABLETA COMERCIAL

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA DETERMINACIÓN DE VITAMINA C
Tableta de Realizar Montaje 1
Vitamina C
Mortero 1 1 Bureta Erlenmeyer 1

Pesar Tableta 0,20 g de KI

2 Cargar Bureta 0,20 g Vit C
completa 3
KIO3 0,01M
5 ml H2SO4 0.3M
Macerar 2 ml Almidón
Registrar Volumen
inicial de KIO3
Agitar / Disolver

Iniciar Titulación 4

Registrar Volumen de KIO3 gastado

DETERMINACIÓN DE VITAMINA C EN UNA FRUTA CÍTRICA

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA DETERMINACIÓN DE VITAMINA C

Fruta Realizar Montaje 2

2 1 Bureta Erlenmeyer 1
Extraer jugo
0,20 g de KI
Cargar Bureta 10 ml jugo
3
KIO3 0,01M
1 5 ml H2SO4 0.3M
Pesar 10 mL 2 ml Almidón
Beaker Registrar Volumen
del zumo
inicial de KIO3
Agitar / Disolver

Iniciar Titulación 4

Registrar Volumen de KIO3 gastado

1 Todos los materiales deben estar limpios y secos.
2 Recuerde apuntar este dato. Es importante para realizar cálculos.
3 Llenar la bureta con KIO3 , utilice el beaker y no se suba a los mesones.
4 Deje caer el KIO3 0,01M gota a gota. La titulación termina hasta aparición de un color AZUL o MORADO INTENSO.

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BIBLIOGRAFÍA
1. ALEMANY, M.; FONT, S. Prácticas de Bioquímica. Madrid: Editorial Alambra. 1985.
2. DAVID L. NELSON, MICHAEL M. COX.Lehninger. Principios de Bioquímica, 4ª Edición. Editorial Omega, Madrid. 2005.
3. DEVLIN, T. M.Bioquímica. Libro de texto con Aplicaciones Clínicas. Editorial Reverté, S. A. 2009
4. MATHEWS, C.K & VAN HOLDE, K.E. Bioquímica, Tercera Edición. Person Adisson Wesley, 2002.
5. NELSON, D. L. & COX, M. M. “Lehninger Principles of Biochemistry” Second Edition. Worth Pubs. 1993
6. PLUMBER, D. Bioquímica Práctica. Bogotá: Editorial McGraw Hill. 1981.

ELABORÓ REVISÓ APROBÓ

Firma: Firma: Firma:

Nombre: Profesores de Laboratorio de Nombre: Lic. Alba Jihan Chaparro Nombre: Ing. Claudia Fernández
Bioquímica
Fecha: Enero de 2013 Fecha: Enero de 2013 Fecha: Enero de 2013

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INFORME DE LABORATORIO
ESTUDIANTES: GRUPO:


NOTA:



CARRERA:

Formule tres objetivos que desee cumplir con la Práctica de Laboratorio. (0,5/5,0)
1. _____________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
2. _____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
3. _____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________

Elabore un Mapa conceptual del tema a tratar en la Práctica de Laboratorio.(0,5/5,0) ) Usar de 15 a 20 cuadros
y máximo 5 palabras por cuadro

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TABLAS DE RESULTADOS(0,2/5,0)
DATOS OBTENIDOS
VITAMINA C EN TABLETA COMERCIAL VITAMINA C EN JUGO DE FRUTA
Peso Tableta de vitamina C completa (mg) Peso 10 mL de jugo
Peso Molecular Ácido Ascórbico (C6H8O6) Peso Molecular Ácido Ascórbico (C6H8O6)
Concentración Molar de KIO3 Concentración Molar de KIO3
Volumen de KIO3 utilizado en titulación (L) Volumen de KIO3 utilizado en titulación (L)
Ácido Ascórbico presente en los 0,20g de Ácido Ascórbico presente en los 10ml del
tableta titulada (mg) jugo de fruta titulado (mg)
Ácido Ascórbico presente en TODA la Ácido Ascórbico presente en 100 g de fruta
tableta (mg) (mg)
Porcentaje de Error Porcentaje de Error

CUESTIONARIO
De acuerdo con la práctica realizada y a los datos obtenidos, calcular el contenido de vitamina C (Ácido
Ascórbico, C6H8O6) presente en la tableta, teniendo en cuenta la siguiente reacción: Debe balancearla.

KIO3 + C6H8O6 C6H6O6 + KI + H2O

Yodato de Potasio Ácido Ascórbico Ácido Deshidroascórbico Yoduro de Potasio Agua
Vitamina C

1. DETERMINACIÓN DE VITAMINA C EN LA TABLETA COMERCIAL (1,0/5,0)

a. Calcular las moles de yodato de potasio (KIO3) que reaccionan:

n Donde: M es la Molaridad del KIO3 ; n son los Moles del KIO3

M= L es el volumen de KIO3 utilizado en la titulación
L

b. Calcular moles de Ácido ascórbico (C6H8O6) que reaccionan con las moles de KIO3.

c. Calcular gramos de Ácido ascórbico (C6H8O6) que reaccionan (Vitamina C presente en 0,20g de
muestra):

d. Calcular los gramos de Ácido ascórbico presentes en la tableta completa:

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2. DETERMINACIÓN DE VITAMINA C EN UN JUGO DE FRUTA (1,0/5,0)

a. Calcular las moles de yodato de potasio (KIO3) que reaccionan:

n Donde: M es la Molaridad del KIO3 ; n son los Moles del KIO3

M= L es el volumen de KIO3 utilizado en la titulación
L

b. Calcular moles de Ácido ascórbico (C6H8O6) que reaccionan con las moles de KIO3.

c. Calcular gramos de Ácido ascórbico (C6H8O6) que reaccionan (Vitamina C presente en 10ml del jugo):

d. Calcular los gramos de Ácido ascórbico presentes en 100 g de fruta

3. Comparar los resultados obtenidos en la práctica con el reportado por el fabricante (Tableta) y el
reportado en la literatura (Fruta). Si existe diferencia, calcular el porcentaje de error.(0,2/5,0)

mg Teóricos mg Experimentales
% de error = 100
mg Teóricos

Porcentaje de error Porcentaje de error

(Vitamina C en tableta comercial) (Vitamina C en Jugo de Fruta)

4. ¿La cantidad de vitamina C encontrada en la tableta y en la fruta es suficiente para cubrir los
requerimientos diarios del cuerpo? Justifique su respuesta. (0,2/5,0)
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

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CAUSAS DE ERROR Y ACCIONES PARA OBTENER MEJORES RESULTADOS: (0,4/5,0)

De qué manera afecta los resultados la concentración del KIO3, explique:
._________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________

CONCLUSIONES(0,5/5,0)
1._______________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________
2._______________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________
3._______________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________

APLICACIÓN PROFESIONAL DE LA PRÁCTICA REALIZADA(0,25/5,0)

_________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________
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_________________________________________________________________________________________

BIBLIOGRAFÍA UTILIZADA(0,25/5,0)
__________________________________________________________________________________________________
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__________________________________________________________________________________________________
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