Protocolo para la recogida, conservación y

remisión de muestras entomológicas en

casos forenses.
Collecting, keeping and shipment protocol for
entomological evidences in forensic practice.

M.I. Arnaldos1, E. Romera2, M.D. García3 y A. Luna4

RESUMEN ABSTRACT
Dada la importancia y creciente utilización de las Nowadays the importance and utility of
evidencias entomológicas en la práctica forense, este entomological evidences are increasing in medicolegal
trabajo propone un protocolo para la adecuada reco- practices. This paper porpuses a protocol for suitable
gida, conservación y remisión de muestras entomoló- collect, conservation and sending of entomological
gicas para su inclusión en la rutina médico-legal. samples for its inclusion in medicolegal routine.
La utilización de este protocolo permitirá la Puting into effect this protocol will allow to get an
obtención de una base de datos homogénea y per- homogeneus data base which will be perfectly
fectamente extrapolable a otros casos en el área geo- comparable to another cases in the same geographical
gráfica. area.

Palabras clave: entomología forense, evidencias ento- Key words: forensic entomology, entomological
mológicas, protocolo, recogida de muestras, remisión evidences, protocol, collecting samples, sending
de muestras. samples.

Fecha de recepción: 07.AGO.01 Fecha de aceptación: 01.OCT.01

Correspondencia: Dra. Mª Dolores García. Departamento de Zoología. Facultad de Biología. Universidad de Murcia.
30100 Espinardo (Murcia, España). E-mail: [email protected].

1 Profesora Asociada de Zoología. Universidad de Murcia.

2 Profesora Ayudante de Zoología. Universidad de Murcia.
3 Profesora Titular de Zoología. Universidad de Murcia.
4 Catedrático de Medicina Legal. Universidad de Murcia.

Cuadernos de Medicina Forense Nº 25 - Julio 2001 65

Protocolo para la recogida, conservación y remisión de muestras entomológicas en casos forenses.

INTRODUCCIÓN:
La utilización de las evidencias entomológicas para la obtención de conclusiones en el ámbi-
to forense es cada vez más frecuente [1-9]. En el caso concreto de la entomología médico-legal, la
utilización de los insectos y otros artrópodos como elemento de la investigación está justificada por
diversas razones. Entre ellas, cabe destacar que los insectos son los primeros organismos que des-
cubren un cadáver, incluso si se ha tratado de ocultar el cuerpo [10, 11]. Por ejemplo, los dípteros
son capaces de localizar un cadáver tan solo unos minutos después de ocurrida la muerte, o inclu-
so antes, y, por otro lado, los artrópodos aparecen en un cuerpo en descomposición en una
secuencia temporal determinable y, por tanto, predecible, aunque es variable en función de la región
geográfica y la época del año.
Así, se pueden extraer conclusiones, significativas desde un punto de vista forense, a partir
de los datos relativos al estado de colonización sucesiva de un cadáver, o identificando el estado de
desarrollo de los insectos colectados en el cadáver o en relación con él.
Pero, además, de los artrópodos existentes en un cadáver podemos obtener no solo indi-
caciones de los intervalos postmortem [12] sino evidencias que colaboren en el esclarecimiento de
las circunstancias de los hechos, como la determinación del lugar de una muerte, la existencia de
manipulación y traslado del cadáver, identificación del culpable de un homicidio, determinación de
la existencia de malos tratos, e incluso, la identificación de la presencia en el cadáver de diferentes
sustancias (medicamentos, estupefacientes ...) a partir de las larvas de ciertos insectos, cuando es
imposible hacerlo a partir de los tejidos del cadáver.
Por tanto, la entomofauna sarcosaprófaga es importante en sí misma y en su aspec-
to aplicado a la práctica médico-legal. Es fundamental señalar que cualquier material ento-
mológico, aunque sea de tipo oportunista o accidental, es de gran valor por su misma pre-
sencia además de ofrecer información acerca de la procedencia geográfica y características
ambientales del lugar de los hechos. Esto, en combinación con los datos procedentes de
otras especies de mayor utilidad a la hora de datar, puede utilizarse para ponderar con mayor
precisión el cálculo de la data. Por otro lado, es conocido el altísimo valor que los estados
preimaginales de los artrópodos necrófagos tienen a la hora de estimar el intervalo post-
mortem [13-15].
A la hora de obtener conclusiones a partir de evidencias entomológicas, el entomólo-
go tiene que tener la seguridad de que la muestra recogida es representativa, cualitativa y cuan-
titativamente, de la fauna existente en el cadáver y que esa muestra ha sido mantenida, tanto
en el caso de ejemplares vivos como fijados, adecuadamente. Las evidencias entomológicas
deben ser tratadas de modo que los caracteres que permiten la identificación específica y la
etapa de desarrollo alcanzada, así como el sexo de los ejemplares, se conserven adecuada-
mente. Una muestra poco representativa o mal conservada de la entomofauna existente puede
inducir al entomólogo a un error a la hora de obtener conclusiones [16]. Por todo ello se
entiende aconsejable tratar de uniformizar, del modo más sencillo, completo y adecuado posi-
ble, el conjunto de procedimientos a seguir, en el orden más conveniente, para la adecuada
recolección, conservación y remisión de las evidencias entomológicas, de modo que se con-
vierta en el protocolo a seguir en la rutina forense.
Así, a continuación proponemos un protocolo de recogida, conservación y remisión de
muestras entomológicas para ser incluido en la rutina médico-legal.

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 Protocolo para la recogida, conservación y remisión de muestras entomológicas en casos forenses.

PROTOCOLO DE RECOGIDA, CONSERVACIÓN Y REMISIÓN DE MUESTRAS ENTOMOLÓGICAS:

De modo general, cuando la recogida del material entomológico se realiza antes del levan-
tamiento del cadáver, y para evitar que ésta produzca alguna perturbación en las primeros momen-
tos de la investigación forense, antes deben tomarse anotaciones donde se reflejen el hábitat gene-
ral, las condiciones climáticas del momento, la localización del cuerpo y todo aquello que pueda resul-
tar de interés en relación con el escenario forense. Tiene especial importancia todo lo relacionado
con la actividad de los insectos y la ubicación del cuerpo en el propio escenario forense.
Todos los datos recogidos durante la captura del material y la posterior autopsia del cadá-
ver se incluirán en el formulario presente en el Anexo 1.

MATERIAL NECESARIO:
Se recomienda el siguiente material para la recogida, manipulación y conservación del
material entomológico:
¦ guantes
¦ pinzas de punta fina
¦ pincel (número 2 o similar)
¦ 4 trampas adhesivas o, en su defecto, tiras adhesivas para insectos.
¦ recipientes tipo frasco para análisis, 15 de 60 ml. en plástico, 20 de 25 ml. en vidrio, tubos
plástico de 5 ml.
¦ bolsas herméticas de un litro de capacidad
¦ recipiente con etanol de 70º
¦ recipiente térmico con agua muy caliente (cercana a la ebullición)
¦ sustrato alimenticio
¦ sonda térmica
¦ pala o azada para recogida de muestras de suelo y hojarasca
¦ papel en trozos para etiquetas
¦ lápiz de grafito

PROCEDIMIENTO:
REGISTRO DE DATOS AMBIENTALES
Una vez hechas las anotaciones de las condiciones ambientales del escenario forense y, si es posi-
ble, fotografiado el entorno, se deben tomar los datos de temperatura. Deben registrarse los siguientes:
¦ la temperatura ambiente hacia 1 metro sobre la superficie, siempre en las proximidades
del cuerpo.
¦ temperatura de la superficie del suelo.
¦ temperatura de la superficie del cuerpo.
¦ temperatura de la zona de contacto cuerpo-superficie, deslizando la sonda entre el cuer-
po y la superficie del sustrato.
Es conveniente estimar la duración de la exposición del cadáver a la luz solar directa. Para
ello se debe observar el entorno vegetal (si lo hay) o la localización de las ventanas (si es en el inte-
rior de una construcción).
Si se trata de un lugar cerrado, como un automóvil, hay que tener en cuenta que, proba-
blemente, ha sufrido temperaturas no comparables con las exteriores; por ello también es conve-
niente el registro de temperaturas en el interior.

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Protocolo para la recogida, conservación y remisión de muestras entomológicas en casos forenses.

En la sala de autopsias, se debe tener en cuenta si el cadáver ha sido conservado en cáma-

ra frigorífica y conocer el tiempo que el cadáver ha pasado en la cámara y la temperatura a que ha
estado sometido, y si dicha temperatura ha variado en algún momento y en qué medida. Si existie-
re alguna masa de larvas establecida en el cadáver también debe registrarse su temperatura.

RECOGIDA DE MATERIAL ENTOMOLÓGICO

1.- SOBRE EL TERRENO:
Se deben recoger solo los animales que se vean con facilidad sobre el cadáver, y ser cuidadoso
en la manipulación para evitar cualquier tipo de lesión que, inadvertidamente, pueda causarse al cuerpo.
Hay que hacer especial mención a ciertas zonas del cuerpo en que los insectos tienden a
concentrarse o mostrar mayor actividad; estas son: orificios nasales, orejas, boca, ojos y las zonas
con traumatismos (heridas incisas, contusiones,...), pliegues del cuello, nacimiento del pelo y cerca
de las aberturas naturales del cuerpo.
Básicamente podemos encontrar tres tipos de evidencias entomológicas: insectos volado-
res, artrópodos no voladores y estados preimaginales, esto es, huevos, larvas y pupas. La recolec-
ción de los insectos voladores se puede realizar mediante la utilización de trampas adhesivas (o tiras
adhesivas) que deben colocarse aproximadamente a un metro del cadáver, sobre el sustrato, y antes
de que los restos sean examinados de cerca; así los insectos no habrán sido molestados y, en con-
secuencia, no habrán abandonado el cuerpo.
Los artrópodos no voladores, tanto de los alrededores del cadáver como los que se
encuentran sobre él, y los huevos, larvas y pupas existentes en el cadáver, pueden ser capturados
directamente con pinzas, con un pincel humedecido o, incluso, con los dedos.
Se procederá a la toma de muestras de suelo una vez realizado el levantamiento del cadá-
ver. Deben tomarse muestras del sustrato, tanto de debajo del cadáver como de las inmediaciones.
Las muestras deben contener la hojarasca, humus y las capas superiores del suelo. Debe ahondar-
se hasta unos 10 cm. Cada muestra puede introducirse, por ejemplo, en una bolsa de plástico; el
volumen de sustrato a recoger debe ser de aproximadamente un litro (la capacidad de la bolsa her-
mética). El número de muestras de sustrato podrán ser dos, una de debajo del cadáver y otra de
sus alrededores.

2.- INTERIOR DE UNA EDIFICACIÓN O VEHÍCULO:

Si el cadáver se encuentra en el interior de una edificación, o en un vehículo cerrado, o un
entorno similar, hay que adoptar una serie de precauciones adicionales.
En primer lugar hay que prospectar el exterior de la edificación o vehículo porque, si el olor
ha emanado fuera del lugar cerrado, los insectos, aun cuando no tengan acceso directo al cuerpo,
estarán en los alrededores. Estos insectos deben ser recogidos del modo habitual.
En una habitación cerrada la mayoría de los insectos que se van a encontrar en relación a
un cadáver son dípteros, tanto larvas como adultos e, incluso, puparios. En este caso hay que ins-
peccionar los bordes de la habitación y las esquinas y, si hay alfombras o algo similar en el suelo, hay
que mirar debajo. No hay que descuidar las tapicerías ni los registros eléctricos o enchufes. Hay que
tener cuidado de no confundir los puparios con excrementos de roedores pero, en caso de duda,
recójase todo lo que se encuentre.
En un vehículo se debe buscar, principalmente, bajo las alfombrillas, debajo de los asientos,
en sus bordes y en cualquier hendidura del interior del vehículo. No debe olvidarse el maletero ni
la zona del motor.

68 Cuadernos de Medicina Forense Nº 25 - Julio 2001

 Protocolo para la recogida, conservación y remisión de muestras entomológicas en casos forenses.

3.- AUTOPSIA:
En primer lugar se debe revisar la bolsa, o el contenedor, en que ha sido transportado el
cadáver; la superficie externa de la bolsa puede llegar a tener insectos, tanto en forma de larva como
adultos.
En segundo lugar se debe revisar cuidadosamente la ropa del cadáver, si la posee, en espe-
cial pliegues y zonas humedecidas.
En tercer lugar, ya durante el proceso de la autopsia propiamente dicha, hay que centrar la
búsqueda en: cráneo, con sus aberturas naturales, ojos, oídos, pelo y cuero cabelludo, tracto respi-
ratorio, incluyendo la región bucofaríngea, cuello, axilas, áreas genital y rectal y las lesiones y heri-
das. De cada una de la zonas mencionada en que se encuentre material entomológico, se deben
recoger muestras (fijada y en vivo), conservándolas y etiquetándolas por separado.

CONSERVACIÓN Y REMISIÓN DE LAS MUESTRAS:

ADULTOS:
Todos los artrópodos capturados deben ser introducidos en frascos con etanol de 70º
como líquido fijador. El etanol de 70º se elabora en el propio laboratorio diluyendo en la propor-
ción adecuada el etanol de uso médico (96º) considerando este como puro.

HUEVOS Y LARVAS
Los huevos y larvas de diferentes estadios se conservarán de modo diferente, la mitad del
material recogido debe fijarse introduciéndolos en agua hirviente tres minutos; tras este tiempo se
sacarán del agua y se introducirán en etanol de 70º. El resto de los ejemplares debe conservarse
vivo y remitido con sustrato alimenticio (comida para animales, hígado de pollo...) al laboratorio.
Este recipiente debe ir perfectamente aireado, se sugiere taparlo con gasas de uso habitual sujetas
con una goma elástica o cualquier otro tipo de procedimiento.

ETIQUETADO:
Cada recipiente debe ir perfectamente etiquetado. Las etiquetas se introducirán en los fras-
cos, escritas con lápiz de grafito, nunca con pluma, bolígrafo u otro útil de ese tipo porque la tinta
se puede correr y resultar entonces ilegible. Es conveniente incorporar un duplicado de la etiqueta
en el exterior del frasco con los ejemplares. En la etiqueta se señalarán todos los datos posibles en
relación al caso forense, lugar, fecha, hora y zona en que se ha recogido el material (fig. 1).
En los recipientes contenedores Localidad:
de las muestras de suelo también se intro-
Lugar de recogida:
ducirá una etiqueta, lo más completa posi-
ble e indicando, como en los casos anterio- Fecha de recolección:
res, con exactitud de dónde se ha tomado Nº muestra:
la muestra, con relación al cadáver. Caso de referencia:
Los ejemplares recogidos durante Recolector:
la autopsia serán etiquetados por separado,
en función de la zona de procedencia con p Figura 1
especial mención de ésta. En la etiqueta de los ejemplares recogidos durante el examen de la bolsa o
contenedor del cadáver se anotará cuidadosamente en qué parte del cuerpo han sido encontrados.
No debemos olvidar, una vez más, que las muestras recogidas deben reflejar la composi-
ción cualitativa y cuantitativa de la fauna existente. q

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Protocolo para la recogida, conservación y remisión de muestras entomológicas en casos forenses.

ANEXO 1:

CASO FORENSE Nº JUZGADO

AUTOPSIA: Nº referencia: Médico que la realiza:
MUESTRA REMITIDA POR: Fecha:
MUESTRA ENTREGADA POR: Fecha y Firma

CADÁVER
Identificación:
Edad: Sexo:
Otros:

LOCALIZACIÓN
Población: Provincia:
Topónimo exacto:

Ubicación del cadáver:

Interior de vivienda: _______ Ventanas: _______ nº _______ abiertas: ________ cerradas: ________
otros: _____________________________________

En vivienda semiderruida: ______ Techo: _________ completo: __________ semiderruido: _________

Paredes: _______ completo: __________ semiderruido: _________

Interior de vehículo: ______ Ventanas: _______ nº ________ abiertas: ________ cerradas: ________
Otras aberturas: ____________________________________
Motor en funcionamiento: _____________________________

Al abrigo de vegetación: ______ Tipo: árboles: _____ arbustos: _____ otros: _____________________

A resguardo por otras causas: __________ Especificar tipo: ___________________________________

Exterior: ___________________
Disposición del cadáver:
Enterramiento: NO o SÍ o Sustrato: Tierra: _________ Vegetación (ramas, hojas): __________
Otros: __________ especificar: ________________________________________________________

Características:
Enterramiento completo: ______________
Superficial:_________________________
Profundo: __________ a __________ cm.
Enterramiento parcial: ________________
Semienterrado 2/3: __________ zonas del cadáver al descubierto: ___________
Semienterrado ½: ___________ zonas del cadáver al descubierto: ___________
Semienterrado 1/3: __________ zonas del cadáver al descubierto: ___________
Solamente enterradas ciertas zonas del cuerpo: ____ especificar: ____________

Sumergido: NO o SÍ o
Agua dulce: __________
Lugar: Río: ________ Remanso: ________ Ribera: ________ Poza: ________ Estanque: ________
Otros: __________ Especificar: ________________________________________________________

Agua marina: _________

Lugar: Playa: _______ Acantilado: _________ Cueva: _________
Otros: __________ Especificar: ________________________________________________________

70 Cuadernos de Medicina Forense Nº 25 - Julio 2001

 Protocolo para la recogida, conservación y remisión de muestras entomológicas en casos forenses.

ANEXO 1(Cont.):

Características:
Sumergido completamente: ________ profundidad: __________
Sumergido parcialmente: __________
Sumergido 2/3: __________ zonas del cadáver al descubierto: _______________
Sumergido ½: ___________ zonas del cadáver al descubierto: _______________
Sumergido 1/3: __________ zonas del cadáver al descubierto: _______________
Solamente sumergidas ciertas zonas del cuerpo: ____ especificar: ____________

Vestidos: NO o SÍ o
Características:
Vestido totalmente: ________
Vestido parcialmente: ______ zonas del cadáver al descubierto: _______________
Vestiduras rotas: __________ zonas del cadáver al descubierto: _______________
Otros: ______________________________________________________________

Insolación del cadáver: NO o SÍ o Hora de la observación “in situ”: __________

Observación a lo largo de un día:

Insolación por la mañana: __________ horas: __________
Insolación por la tarde: _____________ horas: __________

Zonas del cadáver insoladas:

En el momento de la recogida:
Todo: _____ Parcialmente: _____ especificar cuáles: ________________________
Durante periodo de permanencia en el lugar de los hechos:
Todo: _____ Parcialmente: _____ especificar cuáles: ________________________

Alteraciones del cadáver y/o entorno (heridas apreciables, actividad de carroñeros,...): ________________
_____________________________________________________________________________________

DATOS AMBIENTALES
Hora de registro: __________ Tª ambiente: __________ Tª superficie suelo: __________
Tª superficie del cuerpo: __________ Tª zona de contacto cuerpo-superficie: __________

CAUSAS DE LA MUERTE (AUTOPSIA): Natural: _______ Violenta: _______

Hora de la autopsia: __________ Tiempo de permanencia en cámara frigorífica: ________
Tª cámara frigorífica: _________

Lesiones: SÍ o NO o Tipo y localización en el cadáver: ____________________________

_________________________________________________________________________________________

Masa de larvas: SÍ o NO o Número y localización en el cadáver: _________________________

_________________________________________________________________________________________

Temperatura: __________ Hora de registro: __________

Otros datos derivados de la autopsia: ___________________________________________________________

_________________________________________________________________________________________

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Protocolo para la recogida, conservación y remisión de muestras entomológicas en casos forenses.

ANEXO 1(Cont.):

DATOS RELATIVOS A LA MUESTRA:

Muestra nº: Muestra nº:

Zona de procedencia: Zona de procedencia:

VIVA Alimentada con: VIVA Alimentada con:

FIJADA Conservante: FIJADA Conservante:

Muestra nº: Muestra nº:

Zona de procedencia: Zona de procedencia:

VIVA Alimentada con: VIVA Alimentada con:

FIJADA Conservante: FIJADA Conservante:

TIPO, CONDICIÓN Y ABUNDANCIA DE LA FAUNA OBSERVADA:

· Durante la inspección in situ del cadáver

· Durante la autopsia

CROQUIS DEL LUGAR CON LA UBICACIÓN Y DISPOSICIÓN DEL CUERPO:

OTRAS OBSERVACIONES:

72 Cuadernos de Medicina Forense Nº 25 - Julio 2001

 Protocolo para la recogida, conservación y remisión de muestras entomológicas en casos forenses.

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