Control de Calidad de Extractos Vegetales (2) - 1

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GUIA DE LABORATORIO DEL CONTROL DE CALIDAD DE EXTRACTOS VEGETALES

CHRISTIAN PAREDES

UNIVERSIDAD POLITECNICA SALESIANA

JULIIO 29 DEL 2019

NOTA

FITOQUIMICA Y FARMACOGNOSIA, Nombre del Profesor: Cecilia Elizabeth Barba Guevara,


Ingeniería en Biotecnología de los Recursos Naturales, Universidad Politécnica Salesiana.

La correspondencia estará relacionada con este documento deberá ser enviada a

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CONTROL DE CALIDAD DE EXTRACTOS VEGETALES.

1. OBJETIVOS

 Obtener aceites esenciales y extractos etanólicos de 2 plantas cultivadas a las cuales


se les ha comprobado su uso etnobotánico
 Extraer en base húmeda los aceites esenciales de las especies seleccionadas.
 Obtener los extractos etanólicos del material seco.
 Diseñar un destilador por arrastre con vapor para la obtención de aceites esenciales a
nivel de planta piloto.
 Socializar sobre la importancia terapéutica de los diferentes extractos obtenidos y la
determinación de su calidad para su posterior uso en diferentes actividades
farmacéuticas.

2. METODOLOGIA

El control de calidad de las drogas vegetales y sus derivados, asi como extractos y tinturas,
garantiza su identidad, su pureza como ausencia de contaminantes, falsificaciones o
adulteraciones y contenido en principios activos o marcadores. Asi como tambien el control
de calidad de la droga se lo realiza considerando las metodologías de la OMS, y demás
organismos encargados de asegurar la calidad de los productos fitofarmacéuticos. Para el
control de calidad de la droga cruda se realizan las siguientes pruebas: −Determinación de la
humedad −Cenizas totales −Cenizas solubles en agua −Cenizas insolubles en ácido
clorhídrico −Determinación de sustancias solubles −Determinación de metales pesados
(Plomo) −Determinación de microorganismos.

Teniendo en cuenta estos antecedentes, la importancia que representa para un fitoterápico


garantizar su calidad, eficacia y seguridad y el hecho de no existir en la literatura de los
últimos años información acerca de estas plantas, es que en este trabajo se propone realizar
dicho objetivo.
MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales

* Extracto etanólico reducido * Gradilla


* Pinzas para tubos de ensayo * Pipetas
* Tubos de ensayo * Agitador de vidrio
* Papel filtro * Capilar delgado
* Embudos para filtración * Cámaras de cromatografía.

REACTIVOS

* Acido clorhídrico * Etanol 96º * Fosfato disodico


* Hidróxido de potasio * Acetato de etilo * Cloruro de hidroxilamonio
* Diclorometano * Cloroformo * Formaldehido
* Éter de petróleo * Acetona * Formol acético
* Cloruro férrico * Acido acético * Anhidro acético
* Metanol * Butanol * Limaduras de Mg
* Sulfato de quinina * Benceno * Hidróxido de amonio
* Acido sulfúrico conc. * Molibdato de amonio * Yodo sublimado
* Cloruro de mercurio * Yoduro de potasio * Acido pícrico
* Hidróxido de sodio * Acido nítrico * Acido dinitrobenzoico
* Nitrato de bismuto * Gelatina * Cloruro de sodio

PROCEDIMIENTO

I. Preparar los reactivos:

- R. de Mayer: disolver 1,36g de cloruro de mercurio en 60 ml de agua y 5g de yoduro de


potasio en 10ml de agua. Se mezclan las 2 soluciones aforándose a 100ml.

- R. de Dragendorff: disolver 8g de nitrato de bismuto en 20ml de acido nítrico y 27,2g de


yoduro de potasio en 50ml de agua.
- R. de Wagner: se disuelven0.63g de yodo sublimado y 1g de yoduro de potasio en 50ml
de agua.

- R, Sonneschain: solución de 2,2g molibdato de amonio en agua se añade lentamente una


solución de 1,4g fosfato disodico a 40ºC; se forma un precitado. Este precipitado se lava con
agua y se pasa a un vaso donde se agrega una solución de 20g carbonato de calcio.

- R. de Baljet: se prepara inmediatamente antes de usarse con la mezcla de volúmenes iguales


de dos soluciones. El reactivo de baljet A es una solución de ácido pícrico al 1% en etanol y
el reactivo B es una solución al 10% de hidróxido de sodio en etanol

- R. de Raymond: m-dinitrobenceno y solución de NaOH al 10% en etanol. - R.Kedde: 5ml


de solución etanólica de ácido 3,5-dinitrobenzoico al 3% preparado recientemente y 5ml de
NaOH 2 M. Mezclar al momento de utilizar.

- Gelatina salada: se remojan 25g de gelatina durante 1h en una solución saturada de cloruro
de sodio; se calienta hasta disolución completa y se afora a 1L.

II IDENTIFICACIONES:

Filtrar al vacio la maceracion, concentrar a la mitad del volumen inicial en presion reducida.

1.- Alcaloides. Tomar la cantidad de A correspondiente a 15g de planta, añadir HCl al 5%


(llevando a pH acido). Adicionar luego NaOH al 20%(llevando a pH básico). Transferir el
extracto alcalinizado a un embudo de separación y extraer con Diclorometano. Separar la
fase orgánica. Concentrar hasta eliminar el solvente (B), separando una porción para
cromatografía. El residuo se acidifica con HCl al 5% y se realiza la prueba de identificación
de alcaloides. Mayer Precipitado blanco Dragendorff Precipitado rojo ladrillo Wagner
Precipitado café

2.- Esteroles, flavonoides, antraquinonas, taninos y saponinas. * Esteroles: Tomar una


cantidad de A equivalente a 9g de planta y colocar en un embudo de separación. Adicionar
una cantidad igual de éter de petróleo y separar el extracto etéreo (C). Guardar una porción
para cromatografía.
3.- Aceites esenciales:

SE reconocen por su olor aromático y a la temperatura de 50°C desaparece la mancha oleosa


(la detección del aroma se puede apreciar al calentar la muestra en el baño maría).

4.- Saponinas, Taninos y Antraquinonas:

En un tubo de ensayo tomar aproximadamente 0,5 g de muestra, adicionar aproximadamente


15 ml de agua, agitar durante un minuto. Si aparece espuma abundante sospechar la presencia
de drogas que contienen saponinas, como: clavos, nuez moscada etc.; hervir suavemente y
anotar si aparece desprendimiento de aceite esencial (por su olor aromático).

Filtrar y dividir el filtrado en tres tubos de ensayo, dos para la prueba de taninos y uno para
la prueba de antraquinonas.

CONCLUSIONES

Según el control microbiológico de la droga de las plantas , se pude determinar como la de


Aerobios Mesófilos Totales, Coliformes totales, Coliformes fecales, Mohos y Levaduras se
encuentran dentro de los parámetros de referencia de la AOAC y OMS,

Según el tamizaje fitoquímico que se realiza sobre el extracto de fluido de las plantas se
observa que las especies pueden contener flavonoides, triterpenos, saponinas, resinas,
cardiotónicos, antraquinonas y otros compuestos en menor cantidad.

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