ABC del laboratorio

Agregación plaquetaria, ADP

(inhibidores del receptor P2Y12)
Platelet aggregation, ADP (P2Y12 receptor inhibitors)

Código SCPC (Sociedad Colombiana de Patología Clínica): 10240.

Código CUPS (Codificación Única de Procedimientos en Salud): no aplica.
Sección: Hematología.
Nivel de complejidad: alto.
Metodología: agregación plaquetaria por transmisión de luz.
Sinónimos: prueba de inhibidores P2Y12.

Definición
La agregación plaquetaria con ADP es una dicamento para bloquear apropiadamente
prueba que mide el porcentaje de agre- la reactividad plaquetaria en un individuo
gación inducida por el adenosín difosfato que lo está tomado regularmente y a la
(ADP) a una concentración de 20 µM me- dosis indicada, que se observa como un au-
diante una prueba de agregometría por mento in vitro de la agregación plaquetaria
transmisión de luz para medir la actividad a dosis de 20 µM de ADP.
como antiagregantes plaquetarios de los in-
hibidores del receptor P2Y12 y, a su vez, la La resistencia a los inhibidores del receptor
posible resistencia a estos. P2Y12 puede ser debida a múltiples factores,
entre los que se incluyen los demográficos
(edad avanzada), los genéticos (polimorfis-
Espectro mos de proteínas y enzimas para la absor-
clínico de aplicación ción y el metabolismo hepático de estos
medicamentos), celulares (estados de hipe-
Las pruebas de función plaquetaria simulan el ractividad plaquetaria), interferencias medi-
proceso fisiológico de activación y agregación camentosas, como las presentadas con los
plaquetaria, de forma que permiten la cuanti- inhibidores de la bomba de protones, las es-
ficación de la respuesta plaquetaria y la identi- tatinas lipófilas y los bloqueadores de cana-
ficación de una función anormal posterior a la les de calcio, y comorbilidades del paciente
estimulación con agentes específicos. (insuficiencia renal, diabetes mellitus, obe-
sidad y enfermedad coronaria).
La agregación plaquetaria con ADP es una
prueba empleada para el diagnóstico de la Una inhibición plaquetaria reducida, es de-
no respuesta (resistencia) al tratamiento cir, una alta reactividad plaquetaria durante
con los inhibidores del receptor P2Y12 in vi- el tratamiento, traducida como resistencia,
tro, entendida como la incapacidad del me- genera un mayor riesgo de eventos trom-

Medicina & Laboratorio Volumen 23, Números 3-4, 2017 195

ABC del laboratorio

bóticos, incluidos infartos de miocardio, es-

tenosis y trombosis de los estents y de los
Preparación
puentes coronarios, con consecuencias fa- del paciente y manejo
tales en muchos casos, por lo que debe ser de las muestras
detectado a tiempo.

Es importante aclarar que, además del con- Preparación del paciente

cepto de resistencia, relacionado con los Se recomienda evitar dietas ricas en grasa
aspectos íntimos de la farmacodinámica 8 a 12 horas previas a la toma de la mues-
del medicamento y el individuo, existe el de tra y permanecer en reposo durante 10 a 15
pseudoresistencia, que equivale a una falsa minutos antes de la venopunción. Además,
resistencia explicable por la no adherencia al que la muestra se tome antes de las 10 A.
tratamiento y por la mala calidad del medi- M. debido a que el ciclo circadiano puede
camento, la cual se debe descartar antes de afectar la función plaquetaria.
diagnosticar un paciente como resistente, aun
cuando tenga pruebas de laboratorio indicati- Para esta prueba es requisito que el paciente
vas de que esto puede estar sucediendo. tome la dosis habitual del clopidrogel, o del in-
hibidor del receptor P2Y12 que se le haya indi-
cado, al levantarse o al menos una hora antes
Fundamento de la toma de la muestra para esta prueba.

La agregación plaquetaria con ADP utiliza el

principio de agregometría por transmisión Tipo de muestra
de luz, que se basa en la medición por es- La agregación plaquetaria con ADP se reali-
pectrofotometría del cambio turbidimétrico za en sangre total anticoagulada con citrato
que se produce a medida que las plaquetas de sodio al 3,2%, tubo tapa azul.
se agregan ante el estímulo de un agonista
o sustancia proagregante, en este caso, el Para la toma de la muestra se recomienda el
ADP a una dosis de 20 µM, utilizando una uso de agujas de calibre intermedio (21G),
muestra de plasma rico en plaquetas. Este agotar por completo el vacío del tubo, to-
cambio turbidimétrico aumenta la tramitan- mar siempre el tubo citratado antes que
cia (transmisión de luz) y la señal producida los tubos con cualquier aditivo o anticoagu-
es detectada por el espectrofotómetro, que lante y mezclar adecuadamente la muestra
genera una curva bifásica de agregación, inmediatamente después de su obtención.
que permite evaluar el grado de inhibición
Debido a las bajas revoluciones empleadas
alcanzado con cada uno de los medicamen-
para centrifugar, que originan poca cantidad
tos del grupo de inhibidores del receptor
de plasma, y la posibilidad de tener mues-
plaquetario P2Y12.
tras hemoconcentradas, igualmente con
poco plasma, se recomienda recolectar has-
Control de calidad ta cinco tubos citratados de 2,7 mL para lo-
Para el control de calidad de la agregación grar obtener cantidades suficientes de este.
plaquetaria con ADP el Laboratorio Clínico
Durante la toma de la muestra se deben evi-
Hematológico cuenta con un control de ca-
tar punciones traumáticas o estasis venosa
lidad externo con el Colegio Americano de
prolongada.
Patólogos.

196 Volumen 23, Números 3-4, 2017 Medicina & Laboratorio

 Agregación plaquetaria, ADP

Manejo y conservación P2Y12, que presentan una adecuada respues-

de las muestras ta, se obtiene un valor de agregación plaque-
taria con ADP entre el 30% y el 64,5%, el cual
Las muestras se deben dejar reposar duran-
está por debajo del rango de normalidad en-
te una hora a temperatura ambiente (entre
contrado en los individuos sanos no tratados.
15 °C y 25 °C) en posición vertical, y luego
se centrifugan cuatro tubos a 1.000 rpm Los pacientes en tratamiento con inhibidores
por 8 minutos para obtener plasma rico en del receptor plaquetario P2Y12 cuyos valores
plaquetas y un tubo a 3.200 rpm durante 8 de agregación plaquetaria con ADP sean infe-
minutos para obtener plasma pobre en pla- riores al 30% presentan una sobreinhibición
quetas, el cual será empleado como blanco. de la agregación plaquetaria y, en consecuen-
cia, tienen un mayor riesgo de sangrado, en
Las muestras no se deben refrigerar y son es-
tanto que aquellos con valores superiores al
tables durante cuatro horas siempre que se
64,5% muestran una inhibición insuficiente o
conserven a temperatura ambiente. Es ideal
resistencia y, por lo tanto, tienen un mayor
que se evite el transporte de las muestras, in-
riesgo de eventos trombóticos.
cluyendo el transporte por tubo neumático;
por lo que las muestras se deben tomar en el Si el paciente suspende el medicamento
sitio de procesamiento del examen. por más de una semana se encuentra, nue-
vamente, un resultado de hiperagregación
Valores esperados plaquetaria con ADP (mayor del 80%), simi-
lar al resultado obtenido antes de iniciar el
El resultado consta de las curvas de agrega- tratamiento. La prueba, cuando se realiza en
ción con ADP y del porcentaje de agregación los dos o tres meses posteriores a un even-
máxima que se encontró a cada concentra- to trombótico, puede demostrar resistencia
ción. En nuestro medio se ha estandarizado al medicamento, con curvas de agregación
esta prueba utilizando como agonista ADP plaquetarias normales (mayor del 80%).
a 20 µM, cuyo valor de referencia para la
agregación plaquetaria es del 30% al 64,5%. Interferentes
y limitaciones
Interpretación
de resultados La exactitud del estudio depende de la co-
rrecta relación anticoagulante: sangre, por
En un individuo que no está recibiendo nin- lo cual se debe agotar completamente el va-
gún tipo de antiagregante se presenta una cío durante la toma de la muestra.
agregación plaquetaria con ADP por encima
La lipemia y la hemólisis interfieren con la
del 80%, lo que en este caso se considera-
lectura y pueden ocasionar resultados erró-
ría como un valor “normal”. No obstante,
neos, así como la inadecuada centrifugación
es importante aclarar que esta prueba no
o la recentrifugación de los tubos.
se realiza en pacientes sin tratamiento con
inhibidores del receptor plaquetario P2Y12. Cuando los pacientes presentan un recuen-
to de plaquetas menor que 50.000 por µL
En el caso de los pacientes en tratamien-
los resultados de la agregación plaquetaria
to con inhibidores del receptor plaquetario
se pueden ver afectados.

Medicina & Laboratorio Volumen 23, Números 3-4, 2017 197

ABC del laboratorio

Los medicamentos, como los inhibidores

de la bomba de protones, las estatinas li-
Bibliografía recomendada
pofílicas, los bloqueadores de los canales Adcock-Funk DM, Lippi G, Favaloro EJ. Quality stan-
de calcio, los antibióticos (eritromicina y dards for sample processing, transportation, and stor-
age in hemostasis testing. Semin Thromb Hemost 2012;
troleandomicina), el ketoconazol y la mor- 38: 576-585.
fina pueden interferir con el efecto antia-
Du X, Ginsberg MH. Integrin alpha IIb beta 3 and plate-
gregante producido por el clopidogrel, y las let function. Thromb Haemost 1997; 78: 96-100.
demás prodrogas inhibidoras del receptor
Campuzano-Maya G. Inhibidores del receptor plaque-
plaquetario P2Y12; por lo tanto, pueden es- tario P2Y12. Parte 1 de 2: escenario de acción, farmaco-
tar asociados con mayor resistencia al tra- logía, aplicación clínica y limitaciones de su uso. Medici-
tamiento. na & Laboratorio 2017; 23: 13-44.

Campuzano-Maya G. Inhibidores del receptor plaqueta-

La rifampicina, al igual que el tabaquismo rio P2Y12. Parte 2 de 2: etiología, diagnóstico y manejo de
y el consumo de ciertos medicamentos la resistencia. Medicina & Laboratorio 2017; 23: 113-148.
naturistas como el ginseng, el tanaceto, el Guevara-Arismendy NM, Escobar-Gallo GE, Campuza-
castaño de las Indias y el té verde, pueden no-Maya G. Utilidad clínica de la agregometría plaque-
taria. Medicina & Laboratorio 2012; 18: 311-332.
aumentar la antiagregación inducida por el
clopidogrel, y el resto de inhibidores del re- Hayward CP, Moffat KA, Raby A, Israels S, Plumhoff E,
Flynn G, et al. Development of North American consen-
ceptor plaquetario P2Y12, lo que aumenta el sus guidelines for medical laboratories that perform and
riesgo de sangrado. interpret platelet function testing using light transmis-
sion aggregometry. Am J Clin Pathol 2010; 134: 955-963.
La desmopresina, los antibióticos (penici- Lordkipanidze M, Pharand C, Schampaert E, Palisaitis
linas y cefalosporinas), los vasodilatadores DA, Diodati JG. Evaluation of the platelet count drop
(dipiridamol), los fibrinolíticos (tenectapla- method for assessment of platelet function in com-
parison with “gold standard” light transmission ag-
sa, altplasa, reteplasa y estreptoquina) y los gregometry. Thromb Res 2009; 124: 418-422.
anestésicos (lidocaína, dibucaína, propofol,
Lordkipanidze M, Pharand C, Palisaitis DA, Schampaert
sevoflurano, halotano), al igual que otros E, Diodati JG. Insights into the interpretation of light
medicamentos naturistas (arándanos, cúr- transmission aggregometry for evaluation of plate-
cuma, jengibre y omega 3), pueden interfe- let aggregation inhibition by clopidogrel. Thromb Res
2009; 124: 546-553.
rir con la agregación plaquetaria y alterar los
resultados de la prueba. Sibbing D, Braun S, Jawansky S, Vogt W, Mehilli J,
Schomig A, et al. Assessment of ADP-induced platelet
aggregation with light transmission aggregometry and
Observaciones multiple electrode platelet aggregometry before and
after clopidogrel treatment. Thromb Haemost 2008;
adicionales 99: 121-126.

Velik-Salchner C, Maier S, Innerhofer P, Streif W,

La agregación plaquetaria con ADP está in- Klingler A, Kolbitsch C, et al. Point-of-care whole blood
cluida en el portafolio de servicios del La- impedance aggregometry versus classical light trans-
mission aggregometry for detecting aspirin and clopi-
boratorio Clínico Hematológico, Medellín dogrel: the results of a pilot study. Anesth Analg 2008;
Colombia. 107: 1798-1806.

Fuente: Laboratorio Clínico Hematológico. Manual de Procedimientos. Sistema de Gestión

de Calidad.

198 Volumen 23, Números 3-4, 2017 Medicina & Laboratorio