Informe de Laboratorio de Bioquímica General Grupo 7

Pruebas Generales Para Lípidos

Sebastián Guerrero Coral, Andrés Osejo Báez
[email protected]
[email protected]

*Laboratorio de Bioquímica General, Facultad de Ciencias Naturales, Exactas y de la Educación, Universidad del
Cauca, Popayán-Colombia.

RESUMEN: En esta practica llamada Pruebas generales para lípidos se realizo una serie
de pruebas con el fin de determinar la solubilidad de diferentes tipos de lípidos frente a
varios solventes de distinta polaridad , como también comprobar la solubilidad de varios
productos grasos los cuales se utilizaron en la practica .Para la prueba de solubilidad de
lípidos se trabajo con aceite vegetal donde se observó la relación hidrófoba que tiene con
el agua y la lecitina , ya que esta sustancia es apolar . Se pudo observar la relación
soluble e insoluble que tienes esta sustancia (aceite de oliva) con cada uno de los
solventes que se trabajó y así comprender que sustancias son polares y apolares (agua,
acetona) y (aceite, glicerina , éter) correspondientemente. También se procedió a realizar
prueba de hidrolisis de un aceite vegetal(aceite de oliva) ,con la finalidad de conocer el
numero de equivalentes de KOH que se consumió en la reacción donde al momento de
realizar la titulación se necesito de 14.5 ml de HCl para que hubiese un cambio de color
de fucsia a transparente/blanco, y finalmente por medio de una prueba de instauración
de grasas utilizando 3 muestras y finalmente para comparar se realizo con un muestra
de agua de la cual dio un color naranja muy fuerte y en ninguna de las 3 muestras
anteriores se presentó la misma coloración por ende las tres sustancias son solubles.

1. INTRODUCCIÓN
Los lípidos son moléculas insolubles en todos los carbonos de su cadena se unen
agua y solubles en solventes orgánicos por enlaces simples. La fórmula básica
(como el éter). Tienen tres funciones de una molécula completamente
biológicas esenciales: saturada es CH3–(CH2)n–COOH.(Alberto
Moran, 2015).
– Almacenamiento de energía.
A demás es importante conocer que los
– Función estructural: forman parte de las lípidos como un conjunto muy
membranas celulares, de las vainas que heterogéneo de biomoléculas cuya
recubren los nervios, de la envuelta de característica distintiva aunque no
los órganos interno (Alberto Morán, exclusiva ni general es la insolubilidad en
2015) 1 agua, siendo por el contrario, solubles en
Es importante conocer el ácido graso, la disolventes orgánicos (benceno,
cual se trata de una molécula de cloroformo, éter, hexano, etc.). A demás
naturaleza lipídica formada por una larga de una de su característica básica de los
cadena de carbonos e hidrógenos unida lípidos, y de la que derivan sus
por un extremo a un grupo ácido principales propiedades biológicas es la
(carboxilo, -COOH). Se dice que hidrofobicidad. La baja solubilidad de los
un ácido graso es saturado cuando lípidos se debe a que su estructura

1
Práctica 1 – Pruebas gerenales para lipidos
Informe de Laboratorio de Bioquímica General Grupo 7

química es fundamentalmente
hidrocarbonada (alifática, alicíclica o Luego utilizando dos tubos de ensayo
aromática), con gran cantidad de enlaces con 3ml de agua cada uno, se les
C-H y C-C. (Juan Gonzales, 2000)2 . adicionó 3 gotas de aceite a cada tubo y
Además de realizar una prueba de luego a uno de ellos se agrego dos gotas
hidrolisis de un aceite vegetal de lecitina y así se realizaron las
(saponificación) y la reacción consiste en correspondientes observaciones.
la hidrólisis en medio básico de las
grasas o lípidos, que se descomponen en 2.2 HIDROLISIS DE UN ACEITE
sales de potasio o sodio (jabones) y VEGETAL
glicerina, como se muestra a Para esta prueba se comenzó pesando
continuación: 0.5 gramos de grasa y luego se llevó a un
balón de 100ml.Luego se procedió a
añadir 10 ml de solución de KOH y luego
calentar sumergiendo el balón en un
vaso de precipitado previamente puesto
sobre la plancha de calentamiento.

Luego de dejar que se reduzca la grasa

se espera uno minutos y se observa la
También se tiene en cuenta el índice de turbidez de la solución. Luego se enfría y
saponificación lo que relaciona la se titula exceso de KOH con HCL y en
cantidad de KOH expresado en presencia de Fenolftaleína.
miligramos necesarios para saponificar
un gramo de aceite o grasa, donde Para la prueba en blanco no se tuvo la
utilizamos la ecuación: oportunidad de realizar uno para poder
comparar los datos que se obtuvieron.
𝑒𝑞𝑢𝑖𝑣 𝐾𝑂𝐻 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑜𝑠∗56
Is= 2.3 PRUEBA DE INSATURACION DE
𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑒𝑛 𝑔𝑟𝑎𝑚𝑠 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
GRASAS
Teniendo en cuenta las características
Como primer paso se toma dos gotas de
de estos se realiza pruebas con el fin de
(Aceite vegetal, ácido oleico y colesterol)
determinar la solubilidad de diferentes
y se las lleva a un tubo de ensayo.
tipos de lípidos frente a varios solventes.

2. METODOLOGÍA Luego se agrega 1ml de cloroformo a

cada uno de los tubos con la muestra y
luego adicionar 4 gotas de agua de
2.1 PARA LA PRUEBA DE
bromuro y se observa y se anota los
SOLUBILIDAD DE LÍPIDOS.
resultados.
Se utilizó 2 ml de aceite vegetal en tres
Luego se toma un tubo y se agrega agua
tubos de ensayo para cada prueba y se
mas azul de bromuro y se observa la
le adiciono 2m de éter etílico, acetona y
coloración que toma y se realiza
glicerol a cada uno de los tubos de
observaciones para poder compararlos.
ensayo y se procedió a realizar
observaciones.

2
Práctica 1 – Pruebas gerenales para lipidos
Informe de Laboratorio de Bioquímica General Grupo 7

3. RESULTADO DE DATOS Y ANALISIS glicerina y esto se da porque en la

1.PRUEBA molécula de colesterol podemos hacer
referencia a una cabeza polar, formada
por un grupo hidroxilo y una cola de tipo
apolar que se encuentra formada por un
ciclo de carbono con núcleos
condensados y sustituyentes de tipos
alifáticos. De esta manera, podemos
decir que el colesterol es una molécula
hidrofóbica, y bastante soluble en
disolventes de tipo apolar.
LECITINA: Este es un lipido de los
grupos de los saponificables y se
observo que con éter y glicerina son
solubles , pero con la acetona es
insoluble y la razón es que para que dos
. sustancias sean miscibles, es necesario
ACEITE: Para el aceite podemos que ambas sean polares o apolares, ,
observar que fue soluble con dos esto se debe a que ambas son apolares,
soluciones, pero sabemos que no es , en el caso de la lecitina (apolar) y la
soluble con el agua ya que el aceite es acetona (polar) es difícil que se mezclen
una sustancia no polar y tiene una porque son diferentes y darán una
densidad más pequeña. El agua y el mezcla heterogénea (dos fases), para
aceite son dos líquidos inmiscibles entre poder mezclarlas y que den una sola
sí, es decir que no pueden mezclarse . fase, es necesario el uso de una tercera
sustancia, que sea anfipática (polar y al
La polaridad determina si una sustancia mismo tiempo apolar).
es soluble en agua. Una sustancia polar
es una substancia que tiene dos clases ACIDO OLEOICO: Esta sustancia es un
de polos, como un imán. Cuando otra ácido graso monoinsaturado, es decir,
sustancia es también polar los dos polos que tiene sólo un doble enlace en su
de las sustancias se atraen y estructura química y en la tabla se puede
consecuentemente las sustancias se observar que con un éter y acetona se
mezclan. Una sustancia que se disuelve pudo solubilizar, pero con glicerina no se
en agua. Las sustancias que no da ya que es insoluble en agua, pero
contienen ningún polo se llaman soluble en benceno, alcohol, éter y otros
substancias no polares. El aceite por disolventes orgánicos.
ejemplo es una sustancia no polar, por
eso el aceite no se disuelve en agua (y ACIDO PALMICO: Este compuesto
por eso no se mezclan), pero para los orgánico presenta solubilidad en agua y
caso de éter y acetona se pudo observar en la acetona por lo tanto se puede decir
claramente que hubo solubilidad. que es una sustancia que es polar.
COLESTEROL: Este alcohol que se Del procedimiento de agua + aceite, y del
caracteriza como esteroide y este es una procedimiento para agua´+ aceite +
molécula de lípido se observa poca lecitina se pudo observar.
solubilidad con el éter, e insoluble con la

3
Práctica 1 – Pruebas gerenales para lipidos
Informe de Laboratorio de Bioquímica General Grupo 7

Se necesito 14.5 ml de HCL para que haya

un cambio de color asi:

El tubo de ensayo de la derecha muestra

una coloración blanca que se presenta
muy insoluble ya que hay una gran
diferencia de las densidades entre el
agua>lecitina > aceite. Esta sustancia
heterogénea en la que se observa dos
sustancias no polares y una sustancia
polar. Estas sustancias apolares donde
sus moléculas que se producen por la
unión entre átomos que poseen igual
electronegatividad, por lo que las fuerzas V=14.5 ml HCL 5 N=5 M
con las que los átomos que conforman la
molécula atraen los electrones del enlace
que son iguales y una molécula polar
cuando uno de sus extremos está
cargado positivamente, y el otro de
manera negativa.

2. PARA LA SEGUNDA PRUEBA

KOH+HCL KCL+H2O

Muestra grasa=0.5 g Ahora restamos lo que nos dio en la

10ml KOH 1M saponificación menos lo que esta sin
Para calcular KOH inicial reaccionar.

4060mgKOH-56mg KOH=4004mg KOH

AHORA IMPLEMENTANDO LA ECUACION

DE INDICE DE SAPONIFICACION

Luego al hacer la titulación del exceso de 𝑒𝑞𝑢𝑖𝑣 𝐾𝑂𝐻 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑜𝑠∗56

Is=
KOH con KCL 5N=5M 𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑒𝑛 𝑔𝑟𝑎𝑚𝑠 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎

4
Práctica 1 – Pruebas gerenales para lipidos
Informe de Laboratorio de Bioquímica General Grupo 7

4004𝑚𝑔 𝐾𝑂𝐻 8008𝑚𝑔

IS= = 𝐾𝑂𝐻
0.5𝑔 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑔

El índice de saponificación de 8000mg/g

KOH que se han necesitado para saponificar
cada gramo de grasa.

Podemos observar que es un valor muy

grande ya que se necesita 80000 mg por
cada gramo de grasa que haya presente en
la muestra.

4. PRUEBA
En la prueba de insaturación de grasas
los datos obtenidos fueron. PRUEBA DE AGUA
MAS CUATRO GOTAS DE AZUL DE
BROMO

La prueba da positivo para todos ya que

ninguna de las otras muestras dio el mismo
color que la muestra que se realizo con la de
agua.

A=ACIDO OLEICO
B=ACEITE
C=COLESTEROL 5. CONCLUSIONES

 La naturaleza apolar de los lípidos se

debe a la presencia de residuos de
A B C ácidos grasos que contienen largas
cadenas hidrocarbonadas alifáticas
que se disolverán solo con solventes
de la misma naturaleza.
 Gracias a esta práctica entendimos
las características principales de un
lípido y como consecuencia, la forma
en que reaccionan.
 La baja solubilidad de los lípidos se
debe a que su estructura química es
fundamentalmente hidrocarbonada
(alifática, alicíclica o aromática), con
gran cantidad de enlaces C-H y C-,

6. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

5
Práctica 1 – Pruebas gerenales para lipidos
Informe de Laboratorio de Bioquímica General Grupo 7

A. ¿Escribir las reacciones de hidrolisis D. ¿Qué alternativas producen el

de triglicéridos en medio a) acido b) enranciamiento de un alimento?
alcalino c) enzimático R/: Las grasas y los aceites son
susceptibles a diferentes
reacciones de deterioro que
generan compuestos volátiles que
producen olores y sabores
característicos, a veces algo
desagradables, y que también
pueden reducir el valor nutritivo de
esos alimentos. Las reacciones
pueden ser de dos tipos: por un
R/:
lado, el enlace de los
triacilgliceroles puede sufrir
hidrólisis química o enzimática y,
Enzimática acido graso. por otro, los ácidos grasos
insaturados pueden sufrir
procesos oxidativos.

7. REFERENCIAS

[1](Alberto Morán, 2015). Nutrición lípidos,

recuperado de
B. ¿En qué consiste el proceso de http://www.dciencia.es/nutricion-lipidos/
saponificación? ¿cuáles son los 17 septiembre de 2018
productos de este proceso?
R/: Hidrolizar supone provocar una hidrólisis: [2] (Juan Gonzales, 2000). Biomoléculas,
es decir, desdoblar una molécula por recuperado de
intermedio del agua. Un éster, por su parte, es http://www.ehu.eus/biomoleculas/lipidos/lipi
el compuesto resultante del reemplazo, en un d1.htm
ácido, de un átomo de hidrógeno por un radical
17 de septiembre de 2018
alcohólico.
En los casos en los que para la obtención del
jabón se utiliza un glicérido o grasa neutra, se
obtiene como subproducto el alcohol llamado
glicerina, que puede dar mayor beneficio
económico que el producto principal.

C. ¿Qué factores influencian el

índice de saponificación de una
grasa?
R/: Los factores que influencian el
índice de saponificación de una grasa
es el contacto que se tiene entre la
solución y el aire ya que la solución
alcalina absorbe CO2 .

6
Práctica 1 – Pruebas gerenales para lipidos