CODIGO: I-SA-04

FECHA
CONTROL MICROBIOLOGICO DE DE 10/11/2015
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AMBIENTES Y SUPERFICIES
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CONTROL MICROBIOLOGICO DE AMBIENTES Y SUPERFICIES

ELABORÓ REVISÓ APROBÓ

REFERENTE DE LABORATORIO SECRETARIO DE SALUD REPRESENTANTE DE LA
REPRESENTANTE DE CALIDAD DIRECCIÓN
DIRECTOR (S) TECNICO (S)
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1. OBJETIVO: Determinar la calidad microbiológica de ambientes y superficies del

laboratorio de microbiología

2. ALCANCE: Aplica para las áreas y superficies del laboratorio de microbiología.

3. RESPONSABLES: El profesional del laboratorio de microbiología debe realizar

el control microbiológico de ambientes y superficies y tomar las acciones necesarias
de acuerdo a los resultados obtenidos de los recuentos microbiológicos.

4. FUNDAMENTO Y DEFINICIONES:

La limpieza y la desinfección son procedimientos de gran importancia, ya que

permiten controlar la presencia de microorganismos sobre las superficies. La
desinfección es un proceso que implica la destrucción de microorganismos
perjudiciales (formas vegetativas), a través del uso de sustancias químicas o
agentes físicos aplicados sobre superficies inertes. La limpieza debe ser un paso
previo a la desinfección ya que con este proceso, además de eliminar muchas
sustancias que pueden servir como nutrientes para los microorganismos, se
eliminan sustancias que pueden impedir que las soluciones desinfectantes actúen
eficientemente.

En el Laboratorio de Microbiología estos procesos deben realizarse de rutina, ya

que el trabajar con microorganismos exige que se tomen medidas para evitar la
contaminación del ambiente, del material de trabajo y del personal.

Es por ello que se debe conocer y controlar la calidad microbiológica del aire y de
las superficies de trabajo posterior a estos procesos, ya que los microorganismos
podrían ser fuente de contaminación para el material con el que estamos
trabajando.

La evaluación de la calidad microbiológica del ambiente nos indica la cantidad de

microorganismos que están presentes en un área determinada. Los
microorganismos generalmente no están flotando en el aire sino que se encuentran
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sobre partículas inertes, por ejemplo polvo, gotas de agua, etc. que le sirven como
medio de transporte, las cuales pueden depositarse sobre las superficies; es por
ello que mientras más limpia es un área, menor será el número de microorganismos
presentes en el aire de la misma.

Las personas también son una fuente de contaminación, ya que liberan gran
cantidad de partículas al moverse, toser, estornudar, por exfoliación de la piel, etc.
Algunas de estas partículas llevan microorganismos que podrían contaminar el
material con el que estamos trabajando; en este sentido los antisépticos, deben ser
usados por el personal para descontaminar la piel y los tejidos expuestos antes de
entrar a las áreas.

CONTROL MICROBIOLÓGICO DEL AIRE: El método utilizado es el de

sedimentación en placas de agar, que consiste en exponer placas con un medio
nutritivo sólido al ambiente durante un periodo determinado, incubar las placas y
hacer el recuento de las colonias obtenidas.

Con este método se detectan los microorganismos que caen sobre la superficie de
la placa, lo cual simula lo que ocurre normalmente cuando estamos trabajando en
el laboratorio. Como las condiciones ambientales influyen en la sedimentación de
los microorganismos es necesario que, cuando se realiza este método, las placas
se expongan siempre en el mismo lugar y bajo las mismas condiciones para poder
comparar los resultados obtenidos.

CONTROL MICROBIOLÓGICO DE SUPERFICIES: El control microbiológico de

superficie nos proporciona información sobre la cantidad de microorganismos
presentes sobre una superficie, la cual puede ser un equipo, mesón, ropa, etc. Esta
evaluación generalmente se hace utilizando:

Método del Hisopo

Se recomienda para tomar muestras de superficies irregulares. Se debe definir el
área donde se va a tomar la muestra, se calcula el número de ufc/área.

U.F.C.: unidades formadoras de colonias

Criterio microbiológico: Es la aceptabilidad sanitaria de una superficie o ambiente,

basada en la ausencia, presencia o en un límite permisible de microorganismos del
ámbito muestreado.
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Hisopo: elemento de madera con un extremo de algodón empleado para la toma

de muestras en superficies

5. DESARROLLO:

MATERIALES:

• Agar Plate count

• Marcador para vidrio
• Incubadora temperatura de 23 y 35°C
• Agua peptonada al 0,1%
• Hisopos esteriles.
• Guantes desechables

CONTROL MICROBIOLOGICO DE AMBIENTES

NO. RESPONSABLE ACTIVIDAD FLUJOGRAMA REGISTRO

1 INICIO

Dejar atemperar por los INICIO

menos 20 minutos las cajas
Profesional del con medio de cultivo: agar
2
laboratorio Plate count y OGY
Atemperar por los
menos 20 minutos
Profesional del Identificar cada caja con las las cajas con
laboratorio iníciales del área a evaluar y medio de cultivo
en el caso de las
3
incubadoras seguido del
valor de la temperatura de
Identificar las
uso. cajas con medio
Profesional del Exponer la caja abierta de cultivo
laboratorio durante 20 minutos en cada
4
área.
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Exponer la caja
abierta durante 20
NO. RESPONSABLE ACTIVIDAD FLUJOGRAMA
minutos en cada
REGISTRO
área.

Profesional del Incubar las cajas:

laboratorio • Agar OGY de 3-5
5 días a 23°C Incubar los
• Agar Plate count 48 medios de cultivo
horas a 35°C durante 48 horas
Profesional del Realizar lectura de las cajas a 23 y 35°C
laboratorio para visualizar crecimiento
6
microbiológico.

Realizar el cálculo del F-SA-96 formato

numero de microorganismos Registrar los
de registro de
2 control
por cm Registrar los resultados
resultados microbiológico de
ambientes y
superficies
FIN
7 FIN

Frecuencia de realización del procedimiento: cada quince días

• CÁLCULO DEL NÚMERO DE MICROORGANISMOS POR CM2

Para calcular la cantidad de microorganismos que cayeron en la placa por unidad de

tiempo:
• Contar el número de colonias en la placa. Este número se expresa como ufc
(unidades formadoras de colonias).

CONTROL MICROBIOLOGICO DE SUPERFICIES

NO. RESPONSABLE ACTIVIDAD FLUJOGRAMA REGISTRO

1 INICIO
INICIO

Atemperar los
medios de cultivo
mínimo 20
minutos

Identificar los
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NO. RESPONSABLE ACTIVIDAD FLUJOGRAMA REGISTRO

Atemperar los medios de
cultivo mínimo 20 minutos
Profesional del requeridos para la
2
laboratorio realización de la prueba:
Agua peptonada al 0,1%,
agar Plate count
Profesional del Identificar los tubos con
laboratorio agua peptonada al 0,1% con
las iníciales del área a
3
evaluar.

Profesional del Tomar escobillones estériles

laboratorio y frotar el área a analizar en
diferentes direcciones en un
4 área de +/-20 cm2

Profesional del Introducir el escobillón en el

laboratorio tubo y suspender.
5

Profesional del Pasar el escobillón al medio

laboratorio de agar Plate count y agar
OGY previamente
identificado con las iniciales
del punto de muestreo.
6

Incubar las medios de

cultivo durante 48 horas a
23 y 35°C
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NO. RESPONSABLE ACTIVIDAD FLUJOGRAMA REGISTRO

Realizar lectura de las cajas
Realizar lectura
para visualizar crecimiento de las cajas
7
microbiológico.

F-SA-96
Control
Registrar los
Registrar los resultados resultados
Microbiológico de
ambientes y
superficies

FIN FIN

Frecuencia de realización del procedimiento: Mensual

• Áreas a controlar: se deben evaluar las áreas que intervienen durante los procesos
microbiológicos.

• Cabinas de flujo laminar

• Mesón de siembra.
• Mesón de repique
• Incubadoras
• Área de preparación de medios de cultivo.
• Área de equipos.
• Nevera de reactivos y de muestra.

• INFORME DE RESULTADOS:

• Para ambientes se hace el recuento y se informa el número. En caso que no

se evidencie crecimiento se informara <1 ufc/ placa/ min.
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•
Para superficies como se hace directo sin dilución se hace el recuento y se
informa el número. En caso de no evidenciar crecimiento se informara <10
UFC/20 cm2

• LIMITES PERMISIBLES:

AREA RECUENTO UFC

Cabinas de flujo laminar <1
Cuarto de siembra <1
Cuarto de repique <1
Incubadoras ≤1
Preparación de medios de cultivo ≤15
Nevera de muestras ≤1
Nevera de reactivos <1
Cuarto de incubadoras ≤1

En caso de obtener resultados por fuera de los valores aceptados proceder de la

siguiente manera:
• Realizar procedimientos de limpieza y desinfección de las áreas afectadas.
• Cambiar la solución desinfectante.
• Evaluar nuevamente el área implicada.
6. REGISTROS

Como Donde Tiempo de Disposición

Registro Responsable
conservarlo conservarlo conservación final
F-SA-96 Según F-MC-04 Según F-MC-04
Control Listado Maestro Según F-MC-04 Listado Maestro
Profesional de documentos, Listado Maestro de documentos,
Microbiológico de Según F-MC-03 de documentos, Según F-MC-03
Universitario o
ambientes y Profesional del -Listado Según F-MC-03 - -Listado
Físico
superficies Laboratorio maestro de Listado maestro maestro de
registros y/o de registros y/o registros y/o
tabla de tabla de retención tabla de
retención documental retención
documental documental

7. ANEXOS
No Aplica
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8. HISTORIAL

VERSIÓN VIGENCIA IDENTIFICACIÓN DE

LOS CAMBIOS
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