Clase #1 Métodos de Investigación en Patologías

18/11/2009. CLASE N° 1 DE ANATOMIA PATOLOGICA. DRA. MIJAYRA QUERO.
METODOS DE INVESTIGACION EN PATOLOGIA.

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La patologíía es una especialidad muy amplia y el concepto viene de la palabra

logos (estudio) y pathos (sufrimiento o danñ o).
Estudia los aspectos macroscoí picos y microscoí picos de los distintos procesos
moí rbidos y patoloí gicos.
Concepto de patología según el College of American Pathologists: es la

rama de la ciencia natural que trata de las causas y naturaleza de la enfermedad, asíí
como de las alteraciones anatoí micas y funcionales acompanñ antes.
Métodos de investigación en anatomía patológica para realizar los

diagnósticos:
1- Estudio de biopsia.
2- Estudio citoloí gico.
3- Histoquíímica.
4- Inmunohistoquíímica.
5- Microscopia electroí nica.
6- Autopsias.
Biopsia: es una muestra de tejido tomada para ser analizada y asíí realizar un
diagnoí stico, es decir, es la muestra tomada del cuerpo humano y procesada para ser
evaluada al microscopio y obtener un diagnoí stico.
Condiciones que debe reunir la muestra para realizar un buen diagnostico:

1- Tamanñ o adecuado: por ejemplo, si se va a realizar una biopsia gaí strica donde la
lesioí n es maí s o menos grande, no se puede tomar una muestra muy pequenñ a.
Todo lo contrario, debe tomarse una muestra considerable, ya que fragmentos
muy pequenñ os van a ocasionar un problema a la hora de ser procesados.
2- Fijada precozmente: para preservar las estructuras celulares porque despueí s

que se extrae un tejido del organismo ocurre una muerte celular.
3- Colocada en un recipiente adecuado: porque no puede comprimir la pieza. El

recipiente debe ser: irrompible, con tapa y que sea faí cil para que el patoí logo la
extraiga.
4- Acompanñ ada de una buena informacioí n clíínica: se refiere a toda la informacioí n

relacionada con la biopsia. Datos del paciente, edad, sexo, lugar de donde se
extrajo la lesioí n, impresioí n diagnoí stica y un resumen del caso del paciente,
pero que esteí relacionado con la muestra.
Procesamiento de biopsia:
1- Fijacioí n: el fijador usado es el formaldehido al 10% (1 parte de formol y 9
partes de agua). En muchos casos se realiza al ojo por ciento pero no se
recomienda porque el material puede quedar muy concentrado. Existen otros
fijadores como el Bouin y el Glutaraldehido, el primero se usa en casos
especiales, porque es un fijador muy delicado que solo debe dejarse 4 horas en
el tejido y luego debe cambiarse a formaldehido y el segundo se utiliza en
microcopia electroí nica.
El formaldehido no requiere refrigeracioí n. Es recomendable enviar la muestra
cuanto antes al laboratorio. Puede estar hasta maí s de 1 semana en
formaldehido pero lo recomendable es que no esteí tanto tiempo porque
contiene agua y el agua con el pasar de los díías va a danñ ar el tejido.
2- Estudio macroscoí pico de la muestra en el laboratorio.
3- Procesamiento: esa muestra ya fijada se debe procesar para convertirla en algo

imperecedero para que el patoí logo lo pueda ver al microscopio. Por lo cual se
deben hacer cortes muy finos, hay que incluirlo en parafina, pero antes de eso
se debe deshidratar el tejido, esto se hace con el procesador automaí tico de
tejidos (alcohol-xilol-parafina).
4- Inclusioí n.
5- Corte y coloracioí n: los colorantes comuí nmente utilizados son hematoxilina

(colorante de nuí cleo) y eosina (colorante de estructuras citoplasmaí ticas).
6- Informe histopatoloí gico: se realiza un diagnostico.
Métodos para realizar la biopsia:

1- Biopsias con aguja o percutaí nea: se realizan con una aguja y puede ser guiada
por radiologíía. Tomografíía o por eco y se va tomando la muestra.
2- Biopsias a cielo abierto: se abre la piel, se expone el oí rgano y se toma la

muestra.
3- Biopsias cerradas: se introducen equipos oí pticos a traveí s de una pequenñ a

hendidura que puede ser por laparoscopia o endoscopia. A este tipo de biopsias
se les llama biopsias dirigidas.
Tipos de biopsias:
1- Biopsia escisional: se escinde casi completamente la lesioí n por sus maí rgenes.
Se extrae una gran parte del tejido.
2- Biopsia incisional: se incide en la lesioí n y se toma una pequenñ a muestra. Por
ejemplo: un carcinoma epidermoide en el muslo, se toma una parte para el
diagnostico y despueí s se le aplica el tratamiento.
3- Aspiracioí n biopsia o biopsia con aguja fina (PAF): es la biopsia que se toma con
aguja.
4- Biopsia dirigida: son biopsias cerradas y existen varias posibilidades. En

gastrointestinal se hace una biopsia endoscoí pica, en abdomen es una biopsia
laparoscoí pica, en endometrio es una biopsia histeroscoí pica, en articulaciones
es una biopsia artroscoí pica y del cuello uterino es una biopsia colposcoí pica.
5- Biopsia estereotaxica: este tipo de biopsia se realiza para tomar muestras de

tejido cerebral. Es de utilidad para evitar exposiciones a una intervencioí n
quiruí rgica grande como una craneotomíía. En este procedimiento a traveí s de un
agujero fino y pequenñ o en el cuero cabelludo, con anestesia local se introduce
un treí pano y se saca la muestra.
¿Cuándo está indicada la biopsia estereotáxica?
 En lesiones muí ltiples en el cerebro y se requiere llegar a un diagnoí stico

definitivo.
 En casos donde hay dudas de si la lesioí n que tiene el paciente es un tumor o un
absceso.
 Cuando existe la sospecha de que hay un tumor pero este tumor responde muy
bien a tratamientos con radioterapia o quimioterapia y no necesita cirugíía. En
este caso se recurre a la estereotaxia para evitar una craneotomíía.
¿En qué circunstancias se efectúa una biopsia estereotaxica?
La biopsia estereotaxica es especialmente uí til cuando las lesiones son muí ltiples (evita
hacer diferentes operaciones), cuando se sospeche que la lesioí n puede no necesitar cirugíía
(hay tumores que se tratan soí lo con radioterapia y no son operados); cuando haya que
descartar diferentes posibilidades (tumor, infeccioí n, inflamacioí n, infarto cerebral); cuando
haya que vaciar el contenido de un quiste o un absceso profundo (con cirugíía convencional
se expone a mayor riesgo)
Fuente: www.estereotaxia.com.ve
¿Cómo se realiza la biopsia estereotáxica?
1. Se utiliza un marco que tiene unas coordenadas.

2. Este marco se coloca con unos pines que tienen anestesia local.
3. Se realiza una tomografíía (sin quitar el marco)
4. Se observan en la tomografíía las coordenadas y la lesioí n, pudiendo llegar
directamente a la lesioí n.
¿Cómo se realiza una biopsia estereotaxica?
Para definir exactamente en queí zona se va a tomar la biopsia se emplea un Marco que tiene
marcados unos ejes de coordenadas. El Marco se coloca en el quiroí fano mediante cuatro pines
que se insertan con anestesia local. Posteriormente se realiza una TAC craneal en que se ven a la
vez los ejes de coordenadas del marco y la lesioí n cerebral a biopsiar. Asíí, se pueden obtener las
coordenadas de la lesioí n con respecto al marco. Despueí s de la TAC se acude al quiroí fano de
nuevo para tomar la biopsia de la zona que marquen las coordenadas.
La biopsia se lleva a cabo mediante un treí pano en el craí neo. Dado que ni el hueso ni el cerebro
duelen (por carecer de terminaciones nerviosas), en general, es suficiente la anestesia local de la
piel por donde se va a efectuar el procedimiento. En algunos casos puede requerirse sedacioí n o
incluso anestesia general. La biopsia se realiza con una aguja muy fina. La herida se cierra con
pocos puntos. Se envíían las muestras para estudio a Anatomíía Patoloí gica y, aproximadamente
en una semana se obtiene el diagnoí stico.
Fuente: www.estereotaxia.com.ve
Con este procedimiento prevenimos el riesgo de no tomar material suficiente o no

llegar al tumor y es difíícil para el patoí logo hacer el diagnostico, ya que no va a
encontrar ninguna anormalidad en el tejido.
Este meí todo es tambieí n utilizado en tumores de mama, ya que permite llegar
exactamente al sitio de la lesioí n, aunque es fundamentalmente utilizado para tejido
cerebral.
6- Biopsia per- operatoria: es aquella que se realiza durante la intervencioí n

quiruí rgica. Esta biopsia se hace con el objetivo de decidir la conducta
terapeí utica.
Un ejemplo en el cual es de utilidad este tipo de biopsia:
Una paciente con lesioí n de mama a quien se le han realizado estudios como:
mamografíía, biopsia estereotaí xica, y citologíía observando anormalidades, presencia
de un tumor y atipia en las ceí lulas respectivamente pero sin poder llegar a un
diagnostico definitivo. Se decide operar pero aun si un patroí n quiruí rgico concreto ya
que en la biopsia practicada habíía mucho material necroí tico y no estaba muy claro el
diagnostico de un Caí ncer de mama. En este caso antes de tomar decisiones draí sticas
como la extirpacioí n de la mama, se realiza una biopsia per- operatoria que permitiraí
decidir la conducta a seguir.
En esta biopsia a diferencia de la estereotaxica se congela el tejido y al congelarlo a
traveí s de criocongelacioí n y criofractura. La muestra se tiene que colorear y observar
raí pidamente porque sino se deshace y no se puede estudiar. El diagnostico no es tan
preciso como cuando se tiene un corte tenñ ido con hematoxilina y eosina.
El patoí logo en el reporte debe colocar:
 Positivo en caso de un tumor maligno.

 Negativo para un tumor benigno.
 Diferido. En este caso se estaí indicando que en ese momento no se puede hacer
un diagnostico y es preferible diferirlo; entonces se toma ese mismo material
para procesamiento definitivo y despueí s con calma estudiarlo.
Para saber cuando estaí indicada este tipo de biopsia debemos hacernos esta pregunta:
¿marcara una diferencia en la conducta quiruí rgica?
**La biopsia per- operatoria se utiliza generalmente para diagnoí sticos oncoloí gicos.
El patoí logo siempre les dice: negativo, positivo o diferido. Ahora se exige maí s,
no solo si es positivo, negativo o diferido, sino tambieí n el tipo histoloí gico, sobre todo
para tumores de ovarios, porque parece que la conducta quíímica podríía variar seguí n
el tipo histoloí gico. Pero en teí rminos generales es: positivo, negativo o diferido.
Tambieí n se usa mucho cuando se estaí operando un tumor, por ejemplo de

pierna, y el cirujano quiere saber si la amputacioí n, o lo que este haciendo, esta bien
hecha y si quedo el margen libre, se toman biopsias per-operatoria allíí.
Estudio Citológico: uno de los meí todos maí s importantes en pesquisa de

caí ncer de cuello uterino es la citologíía. En la citologíía estudiamos ceí lulas, ya sea por
descamacioí n espontaí neo o por procedimientos especiales. Se usa mucho a nivel
ginecoloí gico, en citologíías de cuello uterino, mamas y en general en lííquidos serosos,
conjuntivas, sinoviales, liquido cefalorraquíídeo, tiroides, etc.
Aquíí no se utiliza la coloracioí n de HE, sino la tincioí n en honor a Papanicolaou,
que ahora se utiliza es la tincioí n de Papanicolaou modificada.
Histoquímica: muchas veces, con HE no podemos ver ciertos elementos

celulares y tenemos que hacerlos destacar con una coloracioí n especial. En
histoquíímica tenemos muchas coloraciones especiales, por ejemplo, para ver hongos,
que con HE se ven pero no se detallan bien, entonces se utiliza una tincioí n que se
llama Grocott, que es fabulosa porque ella tinñ e todo de verde y donde hay un hongo
aparece marroí n. Ademaí s tenemos coloraciones para ver tuberculosis, acinos, como
Ziehl-Neelsen. Se tienen coloraciones para ver glicoí geno, mucina, reticulina, etc. En
histoquíímica tenemos muchas posibilidades que ayudan al diagnostico.
Inmunohistoquímica: se utilizan meí todos inmunoloí gicos para identificar
antíígenos tisulares con anticuerpos monoclonales. Los meí todos maí s utilizados son
peroxidasa-antiperoxidasa (PAP) y avidita-biotina (AB). A los anticuerpos
monoclonales se les llama kit.
Antígenos Tumor
Un tumor Queratinas Epiteliales bien diferenciado
es el que se Carcinoembrionario Adenocarcinomas asemeja mucho al
tejido que le dio Factor VIII Vasculares origen, un tumor
poco diferenciado Proteíína S-100 Melanomas es el que no se
parece mucho al Leucocitario Linfomas tejido que le dio
origen. Antíígenos Desmina Rabdomiosarcomas positivos y su
diagnostico Enolasa Neuronal Neuroblastomas tumoral:
Microscopia electrónica:
Tambieí n sirve como meí todo de investigacioí n y para diagnoí stico de tumores no
bien diferenciados. En la microscopia electroí nica, podemos observar: Ultra estructura
celular (complejo de Golgi, etc), ultra membrana nuclear.
Entonces en la microscopia electrónica vemos ultraestructuras.
El microscopio electroí nico en vez de utilizar un haz de luz utiliza un haz de

iones, y eso va a la ultra estructura celular.
Ultra estructura celular

- Desmosomas, tonofilamentos Tumor epitelial
- Microvellosidades, tonofilamentos, laí mina basal  Adenocarcinoma
- Largas vellosidades  Tumores mesoteliales
- Cuerpos de Weiber Palade  Tumores vasculares
- Estructuras mioí genas  tumores musculares
- Microtuí bulos, filamentos  Tumores de ceí lulas de Schwann
Autopsia
Según el ANFITEATRO DE LA UNIVERSIDAD DE BOLOGNA:

Hic locus Est Ubi Mors Gaudel Succurrere Vitae
“Este es el lugar donde la muerte se regocija para ayudar a la vida”
Hay dos métodos para realizar la autopsia:
 ZENKER- ROKITANSKY: DISECCION EN BLOQUE
Cuando escuchen en el hospital a los patoí logos decir: sacar el bloque, se refiere
a sacar el bloque de víísceras (desde la lengua, pulmones, retroperitoneo, testíículos,
todo se coloca en una mesa para su observacioí n.
 RUDOLF-VIRCHOW: DISECCION IN SITU

Todo patoí logo tiene que hacer inspeccioí n del cadaí ver por fuera, hacer la
diseccioí n de todos y cada uno de los oí rganos, tomar muestras para verlas en
microscopio.
Indicaciones para realizar la autopsia:

 Cuando existen dudas sobre la causa de la muerte, saber por queí murioí , hay
que ver por uno mismo.
 Cuando en vida no se pudo llegar al diagnoí stico, hay que ver por uno mismo.
 Cuando se sospechan malformaciones congeí nitas
 Cuando se desconoce la enfermedad del paciente.
Requisitos para realizar la autopsia

- Autorizacioí n del familiar maí s cercano, si no se tiene la autorizacioí n no se
puede realizar la autopsia, tocar un muerto es gravíísimo, hasta preso puede ir
uno.
- Tener la historia clíínica.
Solo asíí el patoí logo puede hacer la autopsia, sin estos dos requisitos NO SE
PUEDE REALIZAR LA AUTOPSIA.

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18/11/2009. CLASE N° 1 DE ANATOMIA PATOLOGICA. DRA. MIJAYRA QUERO.

METODOS DE INVESTIGACION EN PATOLOGIA.

La patologíía es una especialidad muy amplia y el concepto viene de la palabra

Concepto de patología según el College of American Pathologists: es la

Métodos de investigación en anatomía patológica para realizar los

Condiciones que debe reunir la muestra para realizar un buen diagnostico:

2- Fijada precozmente: para preservar las estructuras celulares porque despueí s

3- Colocada en un recipiente adecuado: porque no puede comprimir la pieza. El

4- Acompanñ ada de una buena informacioí n clíínica: se refiere a toda la informacioí n

2- Estudio macroscoí pico de la muestra en el laboratorio.

3- Procesamiento: esa muestra ya fijada se debe procesar para convertirla en algo

5- Corte y coloracioí n: los colorantes comuí nmente utilizados son hematoxilina

6- Informe histopatoloí gico: se realiza un diagnostico.

Métodos para realizar la biopsia:

2- Biopsias a cielo abierto: se abre la piel, se expone el oí rgano y se toma la

3- Biopsias cerradas: se introducen equipos oí pticos a traveí s de una pequenñ a

4- Biopsia dirigida: son biopsias cerradas y existen varias posibilidades. En

5- Biopsia estereotaxica: este tipo de biopsia se realiza para tomar muestras de

¿Cuándo está indicada la biopsia estereotáxica?

 En lesiones muí ltiples en el cerebro y se requiere llegar a un diagnoí stico

¿En qué circunstancias se efectúa una biopsia estereotaxica?

¿Cómo se realiza la biopsia estereotáxica?

1. Se utiliza un marco que tiene unas coordenadas.

¿Cómo se realiza una biopsia estereotaxica?

Con este procedimiento prevenimos el riesgo de no tomar material suficiente o no

6- Biopsia per- operatoria: es aquella que se realiza durante la intervencioí n

Un ejemplo en el cual es de utilidad este tipo de biopsia:

El patoí logo en el reporte debe colocar:

 Positivo en caso de un tumor maligno.

Tambieí n se usa mucho cuando se estaí operando un tumor, por ejemplo de

Estudio Citológico: uno de los meí todos maí s importantes en pesquisa de

Histoquímica: muchas veces, con HE no podemos ver ciertos elementos

El microscopio electroí nico en vez de utilizar un haz de luz utiliza un haz de

Ultra estructura celular

Según el ANFITEATRO DE LA UNIVERSIDAD DE BOLOGNA:

 RUDOLF-VIRCHOW: DISECCION IN SITU

Indicaciones para realizar la autopsia:

Requisitos para realizar la autopsia

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